笋瓜植物的白粉病抗性标记物、白粉病抗性笋瓜植物、使用了其的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法和对笋瓜植物赋予白粉病抗性的方法与流程

文档序号:17485607发布日期:2019-04-20 06:47阅读:290来源:国知局
笋瓜植物的白粉病抗性标记物、白粉病抗性笋瓜植物、使用了其的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法和对笋瓜植物赋予白粉病抗性的方法与流程

本发明涉及笋瓜植物的白粉病抗性标记物、白粉病抗性笋瓜植物、使用了其的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法和对笋瓜植物赋予白粉病抗性的方法。



背景技术:

对于南瓜植物的栽培,由白粉病所致的病害是在世界范围内的南瓜栽培中频发的病害,成为全球性的严重问题。在感染了白粉病的病原菌的植物体的叶、茎上会出现白色的粉状病斑。之后,由于叶的枯死等而出现生长的减退,其结果导致果实的减产。另外,已知南瓜属植物会被多种白粉病菌感染(非专利文献1)。

进而,前述南瓜属植物中的笋瓜植物一直以来未培育出具有足够白粉病抗性的品种,要求白粉病抗性品种的育种。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1:evakristkovaet.al.,“speciesspectra,distributionandhostrangeofcucurbitpowderymildewsintheczechrepublic,andinsomeothereuropeanandmiddleeasterncountries”,2009,phytoparasitica,vol.37,pages337-350



技术实现要素:

发明要解决的问题

因此,本发明的目的在于提供新型的笋瓜植物的白粉病抗性标记物、白粉病抗性笋瓜植物、使用了其的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法和对笋瓜植物赋予白粉病抗性的方法。

用于解决问题的方案

为了实现前述目的,本发明的笋瓜植物的白粉病抗性标记物(以下也称为“抗性标记物”)的特征在于,包含第3染色体上的白粉病抗性基因座(以下也称为“抗性基因座”)。

本发明的白粉病抗性笋瓜植物(以下也称为“抗性南瓜植物”)的特征在于包含第3染色体上的白粉病抗性基因座。

本发明的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法(以下也称为“制造方法”)的特征在于包括下述(a)和(b)工序。

(a)杂交工序,使前述本发明的白粉病抗性笋瓜植物与其它笋瓜植物杂交;

(b)选择工序,从通过前述(a)工序得到的笋瓜植物或其后代系统中选择白粉病抗性笋瓜植物。

对本发明的笋瓜植物赋予白粉病抗性的方法(以下也称为“赋予方法”)的特征在于,包括将第3染色体上的白粉病抗性基因座导入笋瓜植物中的导入工序。

发明的效果

本发明人等进行了深入研究,结果对于笋瓜植物,作为显示出白粉病抗性的白粉病抗性标记物发现了新型的白粉病抗性基因座。另外,包含前述抗性标记物的笋瓜植物显示出白粉病抗性。因此,根据本发明的笋瓜植物的白粉病抗性标记物,例如能够简便地筛选白粉病抗性笋瓜植物。另外,本发明的白粉病抗性笋瓜植物例如由于包含前述抗性基因座,因此例如能够显示出白粉病抗性。因此,本发明的白粉病抗性笋瓜植物无需像以往那样通过农药进行防治,因此例如还能够避免前述农药散布的劳力和费用的问题。

附图说明

图1是示出第3染色体上的单核苷酸多态性(snp:singlenucleotidepolymorphism)等的相对的排列位置的示意图。

图2是示出实施例1中的笋瓜植物的致病指数的评价基准的照片。

具体实施方式

1.笋瓜植物的白粉病抗性标记物

如前所述,本发明的笋瓜植物的白粉病抗性标记物的特征在于包含第3染色体上的白粉病抗性基因座。本发明的抗性标记物的特征在于包含前述第3染色体上的白粉病抗性基因座,其它构成和条件没有特别限制。

本发明中“笋瓜植物”是归类为南瓜属(cucurbita)的笋瓜(cucurbitamaxima)的植物。前述笋瓜植物例如还可以是与近缘种的杂交种。前述近缘种例如可列举出西葫芦(cucurbitapepo)、南瓜(cucurbitamoschata)等。

本发明中,前述白粉病的病原菌(以下也称为“白粉病菌”)可列举出长春瓜类白粉菌(podosphaeraxanthii)(也称为“黄瓜白粉病菌(sphaerothecafuliginea)”)、二孢白粉菌(golovinomycescichoracearum)(也称为“二孢白粉菌(erysiphecichoracearum)”)等,优选为长春瓜类白粉菌(podosphaeraxanthii)。

本发明中,“白粉病抗性”例如也称为“白粉病耐性”。前述抗性例如是指针对由感染白粉病菌导致的病害的发生和进行的阻碍能力或抑制能力,具体而言,例如可以是不发生病害、停止已发生的病害的进行和抑制已发生的病害的进行(“阻碍”)等中的任意者。

前述笋瓜植物具有第1~20染色体。前述笋瓜植物中的各染色体例如可以通过基于笋瓜(cucurbitamaxima)(品种名:rimu)的基因组的碱基序列信息对对象的笋瓜植物的基因组的碱基序列信息与rimu的基因组的碱基序列信息进行比较来加以确定。前述比较可以使用例如blast、fasta等解析软件并用默认的参数来实施。rimu的基因组的碱基序列信息例如可以由葫芦科基因组数据库(cucurbitgenomicsdatabase)的web网页(http://www.icugi.org/或http://cucurbitgenomics.org/)获得。

本发明的抗性标记物包含前述第3染色体上的抗性基因座,但具有前述抗性基因座的笋瓜植物例如还可以代替第3染色体、在除了第3染色体以外的某个染色体上具有前述第3染色体上的前述抗性基因座。即,具有前述抗性基因座的笋瓜植物还可以在第1染色体、第2染色体、第4染色体、第5染色体、第6染色体、第7染色体、第8染色体、第9染色体、第10染色体、第11染色体、第12染色体、第13染色体、第14染色体、第15染色体、第16染色体、第17染色体、第18染色体、第19染色体和第20染色体中任意的染色体上具有前述第3染色体上的前述抗性基因座。

本发明的抗性标记物例如可以以杂合型包含前述第3染色体上的抗性基因座,还可以以纯合型包含前述第3染色体上的抗性基因座。后者的情况,前述抗性笋瓜植物可以在除了第3染色体以外的染色体上包含至少一者的抗性标记物,例如,可以在第3染色体以外的染色体上包含1个抗性基因座,还可以在除了第3染色体以外的染色体上包含2个抗性基因座。在除了第3染色体以外的染色体上包含2个抗性基因座时,前述抗性笋瓜植物例如可以在相同染色体上包含前述2个抗性基因座,还可以在不同的染色体上包含前述2个抗性基因座。

白粉病抗性基因座是指赋予白粉病抗性的数量性状基因座或基因区域。前述数量性状基因座(quantitativetraitsloci;qtl)通常是指参与数量性状的表达的染色体区域。可以使用表示染色体上的特定基因座的分子标记物来规定qtl。使用前述分子标记物来规定qtl的技术在该技术领域中是公知的。

本发明中,用于规定前述抗性基因座的分子标记物没有特别限制。前述分子标记物例如可列举出:snp标记物、aflp(分子扩增片段长度多态性、amplifiedfragmentlengthpolymorphism)标记物、限制性片段长度多态性(rflp:restrictionfragmentlengthpolymorphism)标记物、微卫星标记物、特异序列扩增区域(scar:sequence-characterizedamplifiedregion)标记物和酶切扩增多态性序列(caps:cleavedamplifiedpolymorphicsequence)标记物等。本发明中,前述snp标记物例如可以将1个snp作为前述snp标记物,还可以将2个以上的snp的组合作为前述snp标记物。

本发明中,前述白粉病抗性基因座例如可以通过(1)前述snp标记物来规定(以下也称为“确定”),可以通过(2)包含前述snp标记物的碱基序列来规定,可以通过(3)2个前述snp标记物的位点之间的区域的碱基序列来规定,还可以通过它们的组合来规定。通过前述组合进行规定时,前述组合没有特别限制,例如可以示例出以下的组合。

前述(1)和前述(2)的组合

前述(1)和前述(3)的组合

前述(2)和前述(3)的组合

前述(1)、前述(2)和前述(3)的组合

(1)基于snp标记物的确定

如前述(1)所示,前述抗性基因座例如可以通过前述snp标记物来规定。前述snp标记物没有特别限制,例如可列举出:msp_17500、msp_8和msp_41353等。需要说明的是,这些snp解析例如可以参考下述参考文献1。另外,msp_17500、msp_8和msp_41353是本发明人等新鉴定出的snp标记物,只要是该技术领域中的技术人员就能够基于后述的包含这些snp标记物的碱基序列来确定前述snp标记物的排列位置。

参考文献1:guoyuzhanget.al.(2012)“ahigh-densitygeneticmapforanchoringgenomesequencesandidentifyingqtlsassociatedwithdwarfvineinpumpkin(duch.)”,2005,bmcgenomics,16:1101

前述msp_17500(以下也称为“snp(a)”)表示下述序列号1的碱基序列中的、由括号包围的下划线部分的碱基(序列号1的第37位的碱基)为c的多态性。即,例如,前述snp(a)为c的情况,笋瓜植物为白粉病抗性,前述snp(a)为除了c以外的碱基的情况(例如,t的情况),笋瓜植物表示为白粉病易感性。另外,前述序列号1的碱基序列例如可以由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物得到。前述snp(a)例如还可以基于前述的web网页等数据库上的公知的信息来确定。

序列号1

5’-cttcatattgttttgtggtacaccataagccaagta[c]gcctttcagaaaacaaagtagatattatagcctgactgtctatgaagaactaaaaag-3’

前述msp_8(以下也称为“snp(b)”)表示下述序列号2的碱基序列中的、由括号包围的下划线部分的碱基(序列号2的第59位的碱基)为t的多态性。即,例如,前述snp(b)为t的情况,笋瓜植物为白粉病抗性,前述snp(b)为除了t以外的碱基的情况(例如,g的情况),笋瓜植物表示为白粉病易感性。另外,前述序列号2的碱基序列例如可以由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物得到。前述snp(b)例如还可以基于前述的web网页等数据库上的公知的信息来确定。

序列号2

5’-acatctgaaaaagttgaagctgttatgtgatggagagattgcagagtggttgaaaacg[t]ttgctccccaccttgccaaacaggtcaaa-3’

前述msp_41353(以下也称为“snp(c)”)表示下述序列号3的碱基序列中的、由括号包围的下划线部分的碱基(序列号3的第34位的碱基)为c的多态性。即,例如,前述snp(c)为c的情况,笋瓜植物为白粉病抗性,前述snp(c)为除了c以外的碱基的情况(例如,t的情况),笋瓜植物表示为白粉病易感性。另外,前述序列号3的碱基序列例如可以由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物得到。前述snp(c)例如还可以基于前述的web网页等数据库上的公知的信息来确定。

序列号3

5’-gagagtgggcaacaatttccccttgaagaagag[c]tcgtcggcggcggtcattgtgtgattactggga-3’

前述染色体上的前述snp标记物的排列位置没有特别限制。如图1所示,前述snp标记物例如在笋瓜植物的第3染色体上、从上游侧(msp_14侧)至下游侧(msp_16侧)依次排列有msp_41353、msp_8和msp_17500。需要说明的是,图1中,msp_16和msp_14用于显示出笋瓜植物的第3染色体上的msp_17500、msp_8和msp_41353的排列位置,但还可以使用任意一个或两个作为snp标记物。在该情况下,在后述的msp_16和msp_14的说明中,以保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物为多态性的情况,笋瓜植物为白粉病抗性,以保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物为除了多态性以外的碱基的情况,笋瓜植物表示为白粉病易感性。使用msp_16和msp_14中的至少一者作为snp标记物时,还可以与选自由msp_17500、msp_8和msp_41353组成的组中的至少一个组合使用。

前述抗性基因座所具有的前述snp标记物的个数没有特别限制,例如还可以是前述snp标记物中的任意1个或2个以上、即为2个或3个全部。需要说明的是,这3种多态性(snp标记物)与白粉病抗性的相关性一直以来尚未报道,其是由本发明人等首次发现的、与白粉病抗性相关的新型的多态性。

前述snp标记物的组合没有特别限制,例如可以示例出以下的组合。

snp(a)和snp(b)的组合

snp(a)和snp(c)的组合

snp(b)和snp(c)的组合

snp(a)、snp(b)和snp(c)的组合

在前述组合中,由于与白粉病抗性的相关性更高,因此例如优选为以下的组合。

snp(a)、snp(b)和snp(c)的组合

(2)基于包含snp标记物的碱基序列的确定

如前述(2)所示,前述抗性基因座例如还可以通过包含前述snp标记物的碱基序列来规定。前述抗性基因座例如可以是由前述碱基序列组成的基因座,还可以是包含前述碱基序列的基因座。

包含前述snp标记物的碱基序列没有特别限制,例如可列举出后述的(a)、(b)和(c)的多核苷酸等。前述(a)、(b)和(c)的多核苷酸分别相当于包含前述snp(a)、snp(b)和snp(c)的snp标记物的碱基序列。

前述(a)的多核苷酸为前述snp(a)、即为包含msp_17500的碱基序列,例如为下述(a1)、(a2)或(a3)的多核苷酸。前述(a2)和(a3)的多核苷酸分别是在前述抗性基因座中、关于前述白粉病抗性具有与前述(a1)的多核苷酸同等功能的多核苷酸。前述同等功能例如是指:具有由前述(a2)或(a3)的多核苷酸确定的白粉病抗性基因座的笋瓜植物显示出白粉病抗性。

(a)下述(a1)、(a2)或(a3)的多核苷酸

(a1)由序列号1的碱基序列组成的多核苷酸

(a2)由保存前述(a1)的第37位的碱基(c)、且前述(a1)的碱基序列中缺失、置换、插入和/或添加了1个或多个碱基的碱基序列组成的多核苷酸

(a3)由保存前述(a1)的第37位的碱基(c)、且相对于前述(a1)的碱基序列具有80%以上的同一性的碱基序列组成的多核苷酸

前述(a1)的多核苷酸中,序列号1中的由括号包围的下划线部分的碱基(c)为对应于前述snp(a)的多态性的碱基。另外,前述(a1)的多核苷酸例如可以由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物得到。

前述(a2)的多核苷酸中,前述1个或多个例如为1~18个、1~12个、1~8个、1~4个、1~3个、1个或2个。本发明中,碱基数等的个数的数值范围例如是属于该范围的正整数中的所有值。即,例如记为“1~5个”是指“1个、2个、3个、4个、5个”所有的值(以下同样)。

前述(a3)的多核苷酸中,前述同一性例如为80%以上、85%以上、89%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上、99%以上。前述同一性可以通过比对2个碱基序列而求出(以下同样)。具体而言,前述同一性可以使用例如blast、fasta等解析软件并通过默认的参数计算出(以下同样)。

前述(b)的多核苷酸为前述snp(b)、即为包含msp_8的碱基序列,例如为下述(b1)、(b2)或(b3)的多核苷酸。前述(b2)和(b3)的多核苷酸分别是在前述抗性基因座中、关于前述白粉病抗性具有与前述(b1)的多核苷酸同等功能的多核苷酸。前述同等功能例如是指:具有由前述(b2)或(b3)的多核苷酸确定的白粉病抗性基因座的笋瓜植物显示出白粉病抗性。

(b)下述(b1)、(b2)或(b3)的多核苷酸

(b1)由序列号2的碱基序列组成的多核苷酸

(b2)由保存前述(b1)的第59位的碱基(t)、且在前述(b1)的碱基序列中缺失、置换、插入和/或添加了1个或多个碱基的碱基序列组成的多核苷酸

(b3)由保存前述(b1)的第59位的碱基(t)、且相对于前述(b1)的碱基序列具有80%以上的同一性的碱基序列组成的多核苷酸

在前述(b1)的多核苷酸中,序列号2中的由括号包围的下划线部分的碱基(t)为对应于前述snp(b)的多态性的碱基。另外,前述(b1)的多核苷酸例如可以由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物得到。

在前述(b2)的多核苷酸中,前述1个或多个例如为1~17个、1~13个、1~8个、1~4个、1~3个、1个或2个。

在前述(b3)的多核苷酸中,前述同一性例如为80%以上、85%以上、89%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上、99%以上。

在前述(b2)和(b3)的多核苷酸中,优选保存了由前述(b1)的下划线表示的第60位的碱基(t)和第62位的碱基(g)中的至少一者。在该情况下,前述1个或多个和同一性可以分别援用前述(b2)和(b3)的多核苷酸的说明。

前述(c)的多核苷酸为前述snp(c)、即为包含msp_41353的碱基序列,例如为下述(c1)、(c2)或(c3)的多核苷酸。前述(c2)和(c3)的多核苷酸分别是在前述抗性基因座中、关于前述白粉病抗性具有与前述(c1)的多核苷酸同等功能的多核苷酸。前述同等功能例如是指:具有由前述(c2)或(c3)的多核苷酸确定的白粉病抗性基因座的笋瓜植物显示出白粉病抗性。

(c)下述(c1)、(c2)或(c3)的多核苷酸

(c1)由序列号3的碱基序列组成的多核苷酸

(c2)由保存前述(c1)的第34位的碱基(c)、且在前述(c1)的碱基序列中缺失、置换、插入和/或添加了1个或多个碱基的碱基序列组成的多核苷酸

(c3)由保存前述(c1)的第34位的碱基(c)、且相对于前述(c1)的碱基序列具有80%以上的同一性的碱基序列组成的多核苷酸

在前述(c1)的多核苷酸中,序列号3中的由括号包围的下划线部分的碱基(c)为对应于前述snp(c)的多态性的碱基。另外,前述(c1)的多核苷酸例如可以由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物得到。

前述(c2)的多核苷酸中,前述1个或多个例如为1~13个、1~6个、1~3个、1个或2个。

在前述(c3)的多核苷酸中,前述同一性例如为80%以上、85%以上、89%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上、99%以上。

前述抗性基因座所具有的、包含前述snp标记物的碱基序列的个数没有特别限制,例如可以是前述(a)、(b)和(c)的多核苷酸中的任意1个或2个以上、即为2个或3个全部。

包含前述snp标记物的碱基序列的组合没有特别限制,例如可以示例出以下的组合。

前述(a)和(b)的多核苷酸的组合

前述(a)和(c)的多核苷酸的组合

前述(b)和(c)的多核苷酸的组合

前述(a)、(b)和(c)的多核苷酸的组合

前述组合中,由于与白粉病抗性的相关性更高,因此例如优选为以下的组合。

前述(a)、(b)和(c)的多核苷酸的组合

作为包含前述snp标记物的碱基序列,例如还可以使用后述的包含msp_16的碱基序列(由序列号4的碱基序列组成的多核苷酸)和包含msp_14的碱基序列(由序列号5的碱基序列组成的多核苷酸)中的至少一者。在该情况下,各多核苷酸例如可以是:由保存各多核苷酸的多态性或由下划线表示的碱基、且在前述各多核苷酸的碱基序列中缺失、置换、插入和/或添加了1个或多个碱基的碱基序列组成的多核苷酸;或者可以是:由保存前述各多核苷酸的多态性或由下划线表示的碱基、且相对于前述各多核苷酸的碱基序列具有80%以上的同一性的碱基序列组成的多核苷酸。前述1个或多个和同一性例如可以援用前述(a2)和(a3)的说明。前述各多核苷酸例如还可以与选自由前述(a)、(b)和(c)的多核苷酸组成的组中的至少一个组合使用。

(3)基于2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列的确定

如前述(3)所示,前述抗性基因座例如还可以通过前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列来规定。前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列没有特别限制,例如可列举出:前述染色体上的、选自由msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14组成的组中的2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列等。前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列例如可以参照由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物(以下也称为“保藏系统”)中的所对应的2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列。参照前述保藏系统的碱基序列时,前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列例如与前述保藏系统的碱基序列完全一致或部分一致。部分一致的情况,对于前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列,例如,只要具有由前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列确定的抗性基因座的笋瓜植物显示出白粉病抗性即可。前述部分一致例如可以通过与前述保藏系统的碱基序列的同一性来规定。前述同一性例如为80%以上、85%以上、89%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上、99%以上。前述抗性基因座由前述(3)确定时,前述抗性基因座例如还可以排列在前述2个snp标记物的位点之间的区域。

前述msp_16(以下也称为“snp(d)”)例如表示序列号4中的由括号包围的下划线部分的碱基的多态性。以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物中,前述snp(d)表示为g的多态性,但前述snp(d)例如还可以是除了g以外的碱基、即a、t或c。另外,前述序列号4的碱基序列例如可以由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物得到。前述snp(d)例如还可以基于前述的web网页等数据库上的公知的信息来确定。

序列号4

5’-atgaggaatgattacgtttggaaactttgcaggttgtgggagt[g]ctggttggcaagcccctgaacaacttctt-3’

前述msp_14(以下也称为“snp(e)”)例如表示序列号5中的由括号包围的下划线部分的碱基的多态性。以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物中,前述snp(e)表示为c的多态性,但前述snp(e)例如还可以是除了c以外的碱基、即a、t或g。另外,前述序列号5的碱基序列例如可以由以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物得到。前述snp(e)例如还可以基于前述的web网页等数据库上的公知的信息来确定。

序列号5

5’-attgtcactagaatttggccaaacactaagtacctggatgtgattgtgac[c]ggagccatggctcagtacatacccaccttggaactttacagtggagggttacccatggcttgcactatg-3’

如前所述,前述区域例如可以通过前述2个snp标记物的位点来确定上游侧端部和下游侧端部。前述区域例如只要在前述2个snp标记物的位点之间即可,例如,可以包含前述2个snp标记物的位点这两者或一者,还可以不包含。另外,前述区域包含前述snp标记物的位点时,前述区域的前述上游侧端部和前述下游侧端部为前述snp标记物的位点,但前述上游侧端部与前述下游侧端部的碱基例如可以是前述的碱基序列中的下划线部分的碱基,还可以是除此以外的碱基。

规定前述区域的前述2个snp标记物没有特别限制,例如可以示例出以下的组合。

snp(a)和(c)的组合

snp(a)和(e)的组合

snp(c)和(d)的组合

snp(d)和(e)的组合

通过前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列规定前述抗性基因座的情况,前述抗性基因座优选在前述区域的碱基序列中进一步具有排列在前述区域的前述snp标记物。具体而言,前述抗性基因座优选在前述区域的碱基序列中、具有例如选自由msp_17500、msp_8和msp_41353组成的组中的至少1个snp标记物。

排列在前述区域的前述snp标记物例如可以是在前述染色体上、规定前述区域的前述2个snp标记物的位点中的一者或两者的位点,还可以是排列在规定前述区域的前述2个snp标记物的位点之间的snp标记物。还将前者称为前述区域的末端的snp标记物,还将后者称为前述区域的内部的snp标记物。排列在前述区域的前述snp标记物例如还可以是前述区域的末端的snp标记物和前述区域的内部的snp标记物这两者。

前述区域的内部的snp标记物例如可列举出排列在规定前述区域的上游侧的前述snp标记物的位点与下游侧的前述snp标记物的位点之间的snp标记物,例如,可以基于图1所示的前述snp标记物的排列位置进行适宜确定。前述2个snp标记物的位点之间的前述snp标记物的个数例如为1个以上即可,作为具体例,为排列在规定前述区域的snp标记物的位点之间的所有snp标记物。

前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列与前述区域的碱基序列中的前述snp标记物的组合没有特别限制,例如可列举出下述条件(i)或(ii)。

条件(i)

包含前述染色体上的、snp(a)与snp(c)的位点之间的区域的碱基序列,且

前述区域的碱基序列中,具有选自由snp(a)、snp(b)和snp(c)组成的组中的至少一个snp标记物或snp(b)

条件(ii)

包含前述染色体上的、snp(d)和snp(e)的位点之间的区域的碱基序列,且

在前述区域的碱基序列中,具有选自由snp(a)、snp(b)和snp(c)组成的组中的至少一个snp标记物或snp(b)

前述抗性基因座例如可以是以后述的保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物的第3染色体上的白粉病抗性基因座。

根据本发明的白粉病抗性标记物,例如能对笋瓜植物赋予白粉病抗性。本发明中,笋瓜植物的前述白粉病抗性的程度可以依据后述的实施例1的方法来评价笋瓜植物的致病指数,通过基于前述致病指数计算出的病害度来表示。基于该方法的前述病害度计算可以援用后述的实施例1的说明,例如,可以将病害度低于2设定为耐病性,将病害度为2以上设定为易感性。利用前述病害度来判断前述白粉病抗性时,前述病害度例如可以是1株笋瓜植物的病害度,还可以是2株以上的笋瓜植物的平均病害度,但优选后者。后者的情况,用于判断前述白粉病抗性的笋瓜植物的数量没有特别限制,例如是能与白粉病易感性笋瓜植物进行统计学检验的数量,作为具体例,为5~20株、5株。

2.白粉病抗性笋瓜植物

如前所述,本发明的白粉病抗性笋瓜植物的特征在于在第3染色体上具有白粉病抗性基因座。本发明的白粉病抗性笋瓜植物的特征在于在第3染色体上具有白粉病抗性基因座,其它构成和条件没有特别限制。本发明的白粉病抗性笋瓜植物由于具有包含前述白粉病抗性基因座的前述本发明的白粉病抗性标记物,因此例如可以援用前述本发明的笋瓜植物的白粉病抗性标记物的说明。本发明中,前述第3染色体上的前述白粉病抗性基因座例如可以换言之为本发明的白粉病抗性标记物。

本发明的白粉病抗性笋瓜植物对白粉病显示出抗性。

本发明的白粉病抗性笋瓜植物中,前述白粉病抗性如前所述是由第3染色体上的白粉病抗性基因座而带来的。本发明的白粉病抗性笋瓜植物在第3染色体上具有前述抗性基因座,例如,还可以代替第3染色体,在除了第3染色体以外的某个染色体上具有前述第3染色体上的白粉病抗性基因座。即,具有前述抗性基因座的笋瓜植物还可以在第1染色体、第2染色体、第4染色体、第5染色体、第6染色体、第7染色体、第8染色体、第9染色体、第10染色体、第11染色体、第12染色体、第13染色体、第14染色体、第15染色体、第16染色体、第17染色体、第18染色体、第19染色体和第20染色体的任意染色体上具有前述第3染色体上的前述抗性基因座。

本发明的抗性笋瓜植物例如可以包含1个前述抗性基因座,还可以包含2个以上,作为具体例,在1对染色体上,可以一个染色体包含前述抗性基因座(杂合型),还可以两个染色体包含前述抗性基因座(纯合型),从使白粉病抗性进一步提高方面考虑,优选后者。

本发明的抗性笋瓜植物中,前述抗性基因座例如可以援用前述本发明的笋瓜植物的白粉病抗性标记物中的白粉病抗性基因座的说明。

本发明的抗性笋瓜植物可列举出以保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物(cucurbitamaxima)或其后代系统作为一个例子。前述后代系统例如具有前述抗性基因座。以下示出保藏的信息。

保藏的种类:国际保藏

保藏机构名:国家高级工业科学技术学院,国际专利生物保藏中心

地址:日本〒292-0818千叶县木更津市上总镰足2-5-8120号室

保藏号:fermbp-22336

用于识别的显示:takii10

接收日:2017年6月1日

本发明的抗性笋瓜植物例如还可以通过在笋瓜植物中导入前述抗性基因座来制造。向前述笋瓜植物中导入前述抗性基因座的方法没有特别限制,例如可列举出与前述抗性笋瓜植物进行杂交或胚培养、现有公知的基因工学方法。导入的前述抗性基因座可以示例出前述的抗性基因座。通过与前述抗性笋瓜植物进行杂交来导入的情况,前述抗性笋瓜植物例如优选以纯合型包含前述抗性基因座。

对于本发明的抗性笋瓜植物,除了白粉病抗性以外的特征、例如性状、生态特征等没有特别限定。

本发明的抗性笋瓜植物还可以进一步具有其它抗性。

本发明中,“植物体”可以是表示整个植物的植物个体和前述植物个体的一部分的任意含义。前述植物个体的一部分例如可列举出器官、组织、细胞或营养繁殖体等,可以是任意者。前述器官例如可列举出花瓣、花冠、花、叶、种子、果实、茎、根等。前述组织例如为前述器官的一部分。前述植物体的一部分例如可以是一种器官、组织和/或细胞,还可以是二种以上的器官、组织和/或细胞。

3.白粉病抗性笋瓜植物的制造方法

接着,对本发明的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法进行说明。需要说明的是,以下的方法为示例,且本发明不限制于这些方法。本发明中,制造方法例如还可以称为培育方法。另外,本发明中,前述白粉病抗性基因座可以换言为前述本发明的抗性标记物,可以援用其说明。

如前所述,本发明的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法的特征在于包括下述(a)和(b)工序。

(a)杂交工序,使本发明的白粉病抗性笋瓜植物与其它笋瓜植物杂交

(b)选择工序,从通过前述(a)工序得到的笋瓜植物或其后代系统中选择具备白粉病抗性的笋瓜植物

本发明的制造方法的特征在于使用前述本发明的白粉病抗性笋瓜植物作为亲本,其它工序和条件没有任何限制。本发明的制造方法例如可以援用前述本发明的抗性标记物、抗性笋瓜植物等的说明。

在前述(a)工序中,作为第一亲本使用的白粉病抗性笋瓜植物只要为前述本发明的抗性笋瓜植物即可。前述抗性笋瓜植物例如优选如前述那样以保藏号fermbp-22336保藏的笋瓜植物或其后代系统。在前述(a)工序中,作为第一亲本使用的白粉病抗性笋瓜植物例如还可以利用后述的本发明的筛选方法得到。因此,前述白粉病抗性笋瓜植物例如还可以在前述(a)工序之前,例如通过下述(x)工序从被检笋瓜植物(也称为“候补笋瓜植物”)中选择来准备。

(x)从被检笋瓜植物中选择前述本发明的白粉病抗性笋瓜植物的工序

在前述(x)工序中,前述白粉病抗性笋瓜植物的选择可以选择具有前述白粉病抗性基因座的笋瓜植物。因此,前述(x)工序例如可以通过下述(x1)工序和(x2)工序来进行。

(x1)检测工序,检测前述被检笋瓜植物的染色体上的、前述白粉病抗性基因座的有无

(x2)选择工序,根据前述白粉病抗性基因座的存在,选择前述被检笋瓜植物作为白粉病抗性笋瓜植物

如前所述,前述(x)工序中的前述选择例如是具有前述抗性基因座的笋瓜植物的选择,具体而言,对于前述被检笋瓜植物,可以通过检测前述抗性基因座来选择前述抗性笋瓜植物。在前述(x2)工序中,例如,在一对染色体中的一个染色体上存在前述抗性基因座时,可以选择前述被检笋瓜植物作为前述抗性笋瓜植物,在一对染色体中的两个染色体上存在前述抗性基因座时,可以选择前述被检笋瓜植物作为前述抗性笋瓜植物,但优选后者。前述(x1)工序中的前述抗性基因座的检测例如如前述本发明的白粉病抗性标记物中说明所述,可以使用规定前述白粉病抗性基因座的、(1)前述snp标记物、(2)包含前述snp标记物的碱基序列、(3)前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列、及它们的组合来进行检测。

对于前述(x)工序中的前述选择,可列举出以下的具体例子,但本发明不限定于这些。另外,关于前述白粉病抗性基因座可以援用前述本发明的白粉病抗性标记物中的说明。

(1)基于snp标记物的确定

前述(x)工序中的前述选择例如是具有由选自由msp_17500、msp_8和msp_41353组成的组中的至少一个snp标记物确定的白粉病抗性基因座的笋瓜植物的选择。前述选择的snp标记物没有特别限制,例如可以援用前述本发明的白粉病抗性标记物中的“(1)基于snp标记物的确定”的说明。

(2)基于包含snp标记物的碱基序列的确定

前述(x)工序中的前述选择例如是具有由选自由前述(a)、(b)和(c)组成的组中的至少一个多核苷酸确定的白粉病抗性基因座的笋瓜植物的选择。前述(a)、(b)和(c)的多核苷酸例如可以援用前述本发明的抗性标记物中的“(2)基于包含snp标记物的碱基序列的确定”的说明。

(3)基于2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列的确定

前述(x)工序中的前述选择例如是具有包含前述染色体上的、选自由msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14组成的组中的2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列的白粉病抗性基因座的笋瓜植物的选择。前述2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列例如可以援用前述本发明的白粉病抗性标记物中的“(3)基于2个snp标记物的位点之间的区域的碱基序列的确定”的说明。

作为具体例,前述(x)工序中的前述选择例如可列举出具有在前述区域的碱基序列中具有选自由msp_17500、msp_8和msp_41353组成的组中的至少一个snp标记物的白粉病抗性基因座的笋瓜植物的选择。

另外,前述(x)工序中的前述选择例如还可以是具有满足前述条件(i)或(ii)的白粉病抗性基因座的笋瓜植物的选择。

检测前述白粉病抗性基因座的有无的染色体优选为第3染色体。

另外,在前述(a)工序中,作为另一个亲本使用的笋瓜植物没有特别限制,例如可以是具有或不具有已知的白粉病抗性的笋瓜植物,可以是具有或不具有其它抗性的笋瓜植物,还可以是前述本发明的白粉病抗性笋瓜植物。

在前述(a)工序中,前述白粉病抗性笋瓜植物与前述其它笋瓜植物的杂交方法没有特别限制,可以采用公知的方法。

在前述(b)工序中,选择白粉病抗性笋瓜植物的对象例如可以是通过前述(a)工序得到的笋瓜植物,进而还可以是由该笋瓜植物得到的后代系统。具体而言,前述对象例如可以是通过前述(a)工序的杂交而得到的f1的笋瓜植物,还可以是其后代系统。前述后代系统例如可以是通过前述(a)工序的杂交而得到的f1的笋瓜植物的近交杂交后代或回交后代,还可以是通过使前述f1的笋瓜植物与其它笋瓜植物杂交而得到的笋瓜植物。

在前述(b)工序中,例如可以通过直接地或间接地确认白粉病抗性来进行白粉病抗性笋瓜植物的选择。

在前述(b)工序中,可以通过对得到的前述f1的笋瓜植物或其后代系统例如利用前述那样的病害度评价白粉病抗性来进行前述直接性确认。具体而言,例如,对于前述f1的笋瓜植物或其后代系统,例如可以通过接种白粉病菌并利用前述病害度评价白粉病抗性来进行确认。在该情况下,例如,可以选择显示出病害度低于2的前述f1的笋瓜植物或其后代系统作为白粉病抗性笋瓜植物。

另外,在前述(b)工序中,例如可以通过下述(b1)和(b2)工序来进行基于前述间接性确认的选择。

(b1)检测工序,对于通过前述(a)工序而得到的笋瓜植物或其后代系统,检测染色体上的白粉病抗性基因座的有无

(b2)选择工序,根据前述白粉病抗性基因座的存在,选择通过前述(a)工序得到的笋瓜植物或其后代系统作为白粉病抗性笋瓜植物

基于前述(b)工序中的白粉病抗性笋瓜植物的间接性确认的选择例如与前述(x)工序中说明的方法相同,可以通过检测前述白粉病抗性基因座的有无来进行,更具体而言,可以通过检测使用了前述分子标记物的前述白粉病抗性基因座的有无来进行。

本发明的制造方法优选对在前述(b)工序中选择的白粉病抗性笋瓜植物进行进一步培育。

由此,可以选择前述白粉病抗性经确认的前述笋瓜植物或其后代系统作为白粉病抗性笋瓜植物。

本发明的制造方法还可以进一步包括从通过杂交得到的前述后代系统中采集种子的采种工序。

本发明的制造方法例如还可以仅包括前述(a)工序。

4.白粉病抗性笋瓜植物的筛选方法

本发明的白粉病抗性笋瓜植物的筛选方法(以下也称为“筛选方法”。)的特征在于包括如下工序:作为通过杂交来产生白粉病抗性笋瓜植物的亲本,从被检笋瓜植物中选择在第3染色体上包含白粉病抗性基因座作为笋瓜植物的白粉病抗性标记物的笋瓜植物。

本发明的筛选方法的特征在于包括如下工序:从被检笋瓜植物中选择在第3染色体上具有白粉病抗性基因座作为白粉病抗性标记物的笋瓜植物,其它工序和条件没有任何限制。根据本发明的筛选方法,通过前述本发明的白粉病抗性标记物而可以得到白粉病抗性的亲本。本发明的筛选方法例如可以援用前述本发明的抗性标记物、抗性笋瓜植物和制造方法等的说明。

前述亲本的选择例如可以援用前述本发明的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法中的前述(x)工序的说明。

5.对笋瓜植物赋予白粉病抗性的方法

对本发明的笋瓜植物赋予白粉病抗性的方法的特征在于包括将第3染色体上的白粉病抗性基因座导入笋瓜植物中的导入工序。本发明的赋予方法的特征在于包括将第3染色体上的白粉病抗性基因座导入笋瓜植物中的导入工序,其它工序和条件没有特别限制。根据本发明的赋予方法,通过导入前述第3染色体上的白粉病抗性基因座、即前述本发明的白粉病抗性标记物,从而能够对笋瓜植物赋予白粉病抗性。本发明的赋予方法例如可以援用前述本发明的抗性标记物、抗性笋瓜植物、制造方法和筛选方法等的说明。

在前述导入工序中,前述第3染色体上的白粉病抗性基因座的导入方法没有特别限制。前述导入方法例如可列举出与前述抗性笋瓜植物进行杂交或胚培养、现有公知的基因工程方法。所导入的前述抗性基因座可以示例出前述的抗性基因座。通过与前述抗性笋瓜植物进行杂交来导入的情况,前述抗性笋瓜植物例如优选以纯合型包含前述抗性基因座。

实施例

以下使用实施例对本发明进行详细地说明,但本发明不限定于实施例所记载的方式。

[实施例1]

对于新型的白粉病抗性笋瓜植物,确认对白粉病菌显示出抗性,另外,进行白粉病抗性基因座的遗传方式的解析和新型的白粉病抗性基因座的确定。

为了开发出显示出白粉病抗性的新型笋瓜植物,对在泰科种苗株式会社(takii&co.,ltd.)通过传代育种而采集的大量笋瓜系统的种子进行育种,进行白粉病抗性的试验。其结果,得到显示出白粉病抗性的新型的白粉病抗性笋瓜系统(cucurbitamaxima)。以下将该白粉病抗性笋瓜植物称为亲本系统。

另外,另行制作通过使白粉病抗性系统与白粉病易感性系统杂交而得到的f2群体,提取其dna。然后,对于前述dna,进行sequence-basedgenotyping(keygene公司),进行使用了软件(carteblanche、keygene公司)的连锁图谱的制作和使用了软件(qtlcartographer、ncstateuniversity制)的连锁分析。其结果,在第3染色体上检测出1个由cim(compositeintervalmapping)计算出的lod值的峰值为25.8的qtl。

接着,将作为在前述峰值附近的多态性的msp_14和msp_16设计为snp标记物。

通过使前述亲本系统与泰科种苗株式会社所持有的白粉病易感性笋瓜植物的固定系统(以下也称为“易感性系统”)杂交而产生93个体的f2隔离群体(以下也称为“93系统”。)。

使用白粉病菌对前述93系统进行接种试验。白粉病菌的接种试验如下所述来进行。

白粉病菌(podosphaeraxanthii)使用在滋贺县湖南市的南瓜种植田中的、自然发病的白粉病患病笋瓜植物来源的病菌。通过下述的接种试验确认了前述白粉病菌是能使前述易感性笋瓜植物感染的病原菌。

首先,在经隔离的温室内生长的笋瓜植物(ebisu、泰科种苗株式会社)上培养前述白粉病菌。通过刮取前述笋瓜植物叶上的前述白粉病菌的菌群来回收分生孢子,然后用灭菌水调整回收的分生孢子为1.0×104个/ml来制备孢子悬浮液,将其供试于接种。另外,供试于前述接种的笋瓜植物使用展开了2张真叶的幼苗。使用手动喷雾器,将前述分生孢子悬浮液2ml均匀地喷雾在前述笋瓜植物1个体的整株上。前述喷雾后,使前述笋瓜植物在15-25℃、湿度60-80%、自然光下的温室内生长14天。然后,对生长的笋瓜植物如下所述进行发病调查。

发病调查通过依据以下的基准评价致病指数来实施。另外,作为致病指数的评价基准、在图2的照片中示出致病指数0~4的个体的代表例。需要说明的是,图2中,白色为观察到孢子形成的部位。

致病指数0:无症状

致病指数1:在接种叶上观察到几处不清楚的孢子形成(接种叶正面的面积的5%以下)

致病指数2:虽然观察到明确的孢子形成,但为限定性的(超过接种叶正面的面积的5%且25%以下)

致病指数3:观察到明确的孢子形成,且在接种叶的各处观察到(超过接种叶正面的面积的25%且50%以下)

致病指数4:观察到明确的孢子形成,覆盖了接种叶的几乎全部(超过接种叶正面的面积的50%)

此外,对于各个体,分别依据前述基准调查致病指数,根据下述式子求出各系统的病害度。

病害度(n)=[(0×n0)+(1×n1)+(2×n2)+(3×n3)+(4×n4)]/调查个体数量

前述式中,“0、1、2、3、4”分别表示致病指数,“n0、n1、n2、n3、n4”分别表示致病指数0、致病指数1、致病指数2、致病指数3、致病指数4的个体数量。

另外,对于前述93系统,提取其dna,解析了msp_16的多态性。

将这些结果示于下述表1。如下述表1所示,对于msp_16,抗性的纯合型(a)或杂合型(h)中,病害度低于2,而易感性的纯合型(b)中,病害度为2以上。由这些结果可知,本发明的抗性笋瓜植物针对白粉病菌是有效的。另外,由前述93系统的致病指数与该个体的出现频率的关系可知,前述亲本系统的白粉病抗性的遗传方式为1因子的不完全显性。进而可知msp_16可以作为前述第3染色体上的白粉病抗性基因座的标记物来使用。

[表1]

[实施例2]

对于新型的白粉病抗性笋瓜植物,进行新型的白粉病抗性基因座的确定。

通过使前述亲本系统与前述易感性系统杂交而得到回交后代bc1系统。对于前述bc1系统,进而通过与前述易感性笋瓜植物进行3次回交而得到bc4系统。需要说明的是,对于各回交后代,选择以杂合型包含msp_16和msp_14的笋瓜植物。

作为snp标记物新设计了前述实施例1的qtl的前述峰值附近的作为多态性的msp_17500、msp_8和msp_41353。然后,对于前述93系统和bc4系统,确定了对应于msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14的多态性的碱基。其结果,由于前述93系统和bc4系统中的snp标记物的多态性的不同,可知在前述第3染色体中,msp_16与msp_14的距离为1.6cm。

接着,在前述93系统和bc4系统中,选择前述snp标记物的基因型彼此不同的6个体(以下也称为“6系统”)。然后,使前述6系统近交而得到近交后代。此外,对于前述近交后代,与前述实施例1同样地实施了接种试验。将该结果示于下述表2。下述表2中,a表示以抗性的纯合子持有前述snp标记物,h表示以杂合子持有前述snp标记物,b表示以易感性的纯合子持有前述snp标记物。另外,下述表2中,用阴影表示a和h。如下述表2所示,对于msp_17500、msp_8和msp_41353为抗性的纯合子(a)或杂合子(h)的个体,可以得到在近交后代中显示出抗性的个体。由这些结果可知,即使在前述snp标记物中,也能够确认msp_17500、msp_8和msp_41353为显示出与白粉病抗性的相关性高的snp标记物。另外,由于显示出与msp_17500、msp_8和msp_41353的高相关性,因此可知作为包含前述snp标记物的区域的msp_16和msp_14的位点之间的区域显示出与白粉病抗性的高相关性。

[表2]

抗性:仅抗性的笋瓜植物

抗性/易感性:抗性的笋瓜植物与易感性的笋瓜植物混合存在

易感性:仅易感性的笋瓜植物

[实施例3]

对于新型的白粉病抗性笋瓜植物所具有的抗性基因座,确认了其它笋瓜植物并不具有。

对于前述bc4系统,进而通过与前述易感性系统进行2次回交而得到bc6系统。需要说明的是,对于各回交后代,选择以杂合型包含msp_41353的笋瓜植物。接着,通过使前述bc6系统近交而得到近交后代bc6f1系统。对于前述bc6f1系统,进而使其同样地进行2次近交而得到近交后代bc6f3系统。对于前述bc6f3系统,选择以抗性的纯合型包含msp_41353的笋瓜植物(选择bc6f3系统)。前述选择bc6f3系统以保藏号fermbp-22336保藏。以下也将选择bc6f3系统称为保藏系统。

接着,对于包含前述保藏系统的下述表3的各笋瓜植物(n=5),与前述实施例1同样地计算出病害度。另外,对于包含前述保藏系统的各笋瓜植物,确认了对应于msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14的多态性的碱基。将这些结果示于下述表3。下述表3中,a表示以抗性的纯合型持有前述snp标记物,b表示以易感性的纯合型持有前述snp标记物。另外,下述表3中,用阴影表示a。如下述表3所示,保藏系统显示出白粉病抗性,且以抗性的纯合型持有msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14中的所有snp标记物。与此相对,前述保藏系统除外的笋瓜植物显示出白粉病易感性,且以易感性的纯合型持有msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14中的所有snp标记物。另外,前述保藏系统与作为白粉病抗性笋瓜植物已知的pi135370、pi137866、pi165027、pi166046、pi458673和pi458675相比,病害度得以大幅降低,因此可知前述保藏系统具有与这些品种所具有的白粉病抗性基因座不同的、新型的抗性基因座。由这些结果可知,本发明的白粉病抗性笋瓜植物所持有的抗性基因座为新型的抗性基因座、以及前述抗性基因座可以通过msp_17500、msp_8和msp_41353来确定。

[表3]

takii:takii&co.,ltd.

nanto:nantoseedco.,ltd.

mikado:mikadokyowaseedco.ltd.

watanabe:watanabeseedco.,ltd.

tokita:tokitaseedco.,ltd.

kaneko:kanekoseedsco.,ltd.

enken:instituteforhorticulturalplantbreeding

infrc:internationalnaturefarmingresearchcenter

usda:unitedstatedepartmentofagriculture

接着,对于包含前述保藏系统的下述表4的各笋瓜植物,确定了对应于msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14的多态性的碱基。需要说明的是,已知前述保藏系统除外的各笋瓜植物对于白粉病为易感性。下述表4中,a表示以抗性的纯合型持有前述snp标记物,b表示以易感性的纯合型持有前述snp标记物。另外,下述表4中,用阴影表示a。如下述表4所示,保藏系统以抗性的纯合型持有msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14中的所有snp标记物。与此相对,前述保藏系统除外的笋瓜植物以易感性的纯合型持有msp_16、msp_17500、msp_8、msp_41353和msp_14中的所有snp标记物。由这些结果可知,可以通过msp_17500、msp_8、msp_41353确定前述抗性基因座。

[表4a]

sakata:sakataseedcorporation

[表4b]

kanda:kandaseedco.,ltd.

asahi:asahiindustriesco.,ltd.

以上参照实施方式和实施例对本发明进行了说明,但本发明不限定于上述实施方式和实施例。本发明的构成、详细内容可以在本申请发明的范围内进行本领域技术人员能够理解的各种变更。

该申请主张以2017年7月31日提出的日本申请特愿2017-147647为基础的优先权,其内容全部引入其中。

产业上的可利用性

如上所述,根据本发明的笋瓜植物的白粉病抗性标记物,例如能够简便地筛选白粉病抗性笋瓜植物。另外,本发明的白粉病抗性笋瓜植物例如由于包含前述抗性基因座,因此例如能够显示出白粉病抗性。因此,本发明的白粉病抗性笋瓜植物无需像以往那样进行通过农药的防治,因此还能够避免例如前述农药散布的劳力和费用的问题。因此,本发明例如在育种等农业领域中是极其有用的。

序列表

<110>泷井种苗株式会社(takii&co.,ltd.)

<120>笋瓜植物的白粉病抗性标记物、白粉病抗性笋瓜植物、使用了其的白粉病抗性笋瓜植物的制造方法和对笋瓜植物赋予白粉病抗性的方法

<130>tf17063wo

<150>jp2017-147647

<151>2017-07-31

<160>5

<170>patentinversion3.5

<210>1

<211>94

<212>dna

<213>笋瓜(cucurbitamaxima)

<400>1

cttcatattgttttgtggtacaccataagccaagtacgcctttcagaaaacaaagtagat60

attatagcctgactgtctatgaagaactaaaaag94

<210>2

<211>88

<212>dna

<213>笋瓜(cucurbitamaxima)

<400>2

acatctgaaaaagttgaagctgttatgtgatggagagattgcagagtggttgaaaacgtt60

tgctccccaccttgccaaacaggtcaaa88

<210>3

<211>67

<212>dna

<213>笋瓜(cucurbitamaxima)

<400>3

gagagtgggcaacaatttccccttgaagaagagctcgtcggcggcggtcattgtgtgatt60

actggga67

<210>4

<211>73

<212>dna

<213>笋瓜(cucurbitamaxima)

<400>4

atgaggaatgattacgtttggaaactttgcaggttgtgggagtgctggttggcaagcccc60

tgaacaacttctt73

<210>5

<211>120

<212>dna

<213>笋瓜(cucurbitamaxima)

<400>5

attgtcactagaatttggccaaacactaagtacctggatgtgattgtgaccggagccatg60

gctcagtacatacccaccttggaactttacagtggagggttacccatggcttgcactatg120

pct/ro/134表

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