本发明属于药物和植物化学技术领域，具体的说，涉及一种巴斯玛辛素及其制备方法和应用。
背景技术：
香料烟(orientaltobacco)为茄科烟草属一年生或有限多年生草本植物，我国是世界上烟草种植面积和总产量最大的国家，在我国南北均有种植，植物资源丰富。香料烟主要作用是在混合型卷烟配方中调香调味，它除了能制成卷烟等供人吸食外，还具有如抗癌、抗肿瘤、抗氧化、抗紫外线辐射、护肝等药用价值。
目前，对香料烟化学成分研究的文献并不多，国外学者对香料烟烟叶的精油提取物进行体外抗菌活性研究，结果表明有很强的抗菌活性；国内学者在香料烟中分离到黄酮类、苯并呋喃类等化合物，且这些化合物具有明显的体外细胞毒抑制活性和抗病毒活性。云香巴斯玛1号(ynotbs1)是选育出来的香料烟新品种，主要分布在云娜保山、临沧、德宏等产区，目前对该香料烟的化学成分研究较少。因此，有必要对其化学成分和生物学活性进行研究，进而从中获取有开发利用价值的化合物。
技术实现要素：
为了克服背景技术中存在的问题，本发明提供了一种巴斯玛辛素及其制备方法，从香料烟云香巴斯玛1号中分离到巴斯玛辛素，该化合物具有多种生物学活性，尤其具有较好的抗烟草花叶病毒活性。
为实现上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：
本发明提供的巴斯玛辛素从香料烟云香巴斯玛1号中分离的得到，其具有如下结构：
该化合物的命名为8-hydroxy-14,15-dinor-11-labden-13-one，其分子式为c18h30o2。
所述巴斯玛辛素的制备方法，具体包括以下步骤：
1)采集香料烟云香巴斯玛1号下部烟叶，阴干后粉碎，过40目筛作为原料；
2)将步骤1)所得原料用甲醇溶液浸泡10-24h，反复提取3次，减压蒸馏，浓缩得到浸膏；
3)将步骤2)所得浸膏溶于蒸馏水中，用乙酸乙酯进行萃取，回收溶剂，采用石油醚-丙酮溶液对乙酸乙酯部分进行硅胶柱色谱分离，梯度洗脱，再经mci柱进行脱色处理，收集其中用体积比为15:1石油醚-丙酮溶液洗脱得到的洗脱液ⅰ；
4)洗脱液ⅰ经硅胶柱色谱用氯仿-乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱，收集其中用体积比为9:1氯仿-乙酸乙酯溶液洗脱得到的洗脱液ⅱ；
5)洗脱液ⅱ经薄层层析硅胶板制备，用体积比为9:1的石油醚-丙酮溶液进行洗脱，得到洗脱液ⅲ；
6)洗脱液ⅲ经高效液相色谱仪纯化得到化合物，流动相为体积比7:3的ch3oh-h2o。
作为优选，步骤2)中，原料与甲醇溶液的质量比为1：10。
作为优选，步骤3)中，浸膏与蒸馏水的质量比为1:1。
作为优选，步骤3)中，浸膏溶液与乙酸乙酯的质量比为1:4。
作为优选，柱层析硅胶为100-200目。
所述巴斯玛辛素在制备抗烟草花叶病药物方面的应用。
本发明的有益效果：
本发明首次从香料烟云香巴斯玛1号中分离的得到巴斯玛辛素，该化合物结构新颖，具有多种生物学活性，尤其是有较好的抗烟草花叶病毒活性，为进一步研究香料烟植物作为抗烟草花叶病药物植物资源提供了重要的启示，可用于抗烟草花叶病毒药物的研发制备。
本发明原料易得，制备方法简单，制备成本较低，将增加香料烟的经济和社会效益，应用前景广阔。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将对本发明的优选实施例进行详细的说明，以方便技术人员理解。
实施例
本实施例样品采于云南省德宏市烟区。
制备巴斯玛辛素的具体包括以下步骤：
1)晾干的香料烟云香巴斯玛1号下部烟叶10kg，粉碎，过40目筛作为原料。
2)将步骤1)所得原料用10倍量(质量比)分析纯的甲醇溶液浸泡10h，反复提取3次，减压蒸馏至无醇味，浓缩得到浸膏830g；
3)将步骤2)所得浸膏按质量比1:1溶于蒸馏水中，用乙酸乙酯进行萃取，浸膏溶液与乙酸乙酯的质量比为1:4，回收溶剂至无乙酸乙酯味，得到乙酸乙酯部分381g。乙酸乙酯部分按质量比1:1与硅胶拌样(柱层析硅胶为100-200目)，用体积比为20:1-1:2的石油醚-丙酮溶液对乙酸乙酯部分进行硅胶柱色谱分离(柱层析硅胶为100-200目)，梯度洗脱，再经mci柱进行脱色处理，收集其中用体积比为15:1石油醚-丙酮溶液洗脱得到的洗脱液ⅰ；
4)洗脱液ⅰ经硅胶柱色谱用体积比为20:1-4:1的氯仿-乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱，收集其中用体积比为9:1氯仿-乙酸乙酯溶液洗脱得到的洗脱液ⅱ；
5)洗脱液ⅱ经薄层层析硅胶板制备，用体积比为9:1的石油醚-丙酮溶液进行洗脱，得到洗脱液ⅲ；
6)洗脱液ⅲ经高效液相色谱仪纯化得到化合物，流动相为体积比7:3的ch3oh-h2o。
1、本发明化合物的结构鉴定
取实施例1制备的化合物，对其结构进行测定。
本发明化合物为无色油状物，esi-msm/z:301[m+na]+，分子式为c18h30o2。1h-nmr(cdod3,600mhz):δ0.84(3h,s,me-18),0.90(3h,s,me-17),0.97(1h,dd,j＝11.9,2.1hz,h-5),1.03(3h,s,me-16),1.25(3h,s,me-15),2.27(3h,s,me-14),1.87(1h,dt,j＝12.3,3.3hz,h-6),1.98(1h,d,j＝10.5hz,h-9),6.13(1h,d,j＝15.6hz,h-12),6.92(1h,dd,j＝15.6,10.5hz,h-11)；13c-nmr(cdod3,150mhz):δ16.6(q,c-18),19.4(t,c-2),21.3(t,c-6),22.0(q,c-17),24.3(q,c-15),27.0(q,c-14),33.8(s,c-4),34.3(q,c-16),39.2(s,c-10),42.2(t,c-1),43.0(t,c-3),44.8(t,c-7),56.9(d,c-5),67.1(d,c-9),73.5(s,c-8),136.5(d,c-12),147.7(d,c-11),200.9(s,c-13)。根据其波普数据，确定该化合物为8-hydroxy-14,15-dinor-11-labden-13-one。
2、本发明化合物抗烟草花叶病毒活性检测试验(elisa)：
酶联免疫吸附实验(elisa)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。检测样品(本发明化合物)及对照(宁南霉素)的吸光度值，计算其对烟草花叶病毒增殖抑制率；标准品梯度浓度为62.5pg/ml、125pg/ml、250pg/ml、500pg/ml、1000pg/ml，标准品各梯度浓度的od值依次为0.1557、0.2455、0.3566、0.6085、1.0761。样品、对照及水的吸光度各测量三次，取平均值，样品的平均吸光度值(od值)为0.1797，对照的平均吸光度值(od值)为0.4529，水的平均吸光度值(od值)为0.484033。
相对抑制率％＝(ck组od值-t组od值)/ck组od值×100％
ck组即为空白组(水)；t组即为实验组(样品或对照)。
经计算得出，本发明化合物对烟草花叶病毒的相对增殖抑制率为62.87％，宁南霉素对烟草花叶病毒的相对增殖抑制率为6.43％。
本发明首次从香料烟云香巴斯玛1号中分离得到化合物(+)-sclareolide，该化合物具有多种生物学活性，尤其是有较好的抗烟草花叶病毒活性，为进一步研究香料烟植物作为抗烟草花叶病药物植物资源提供了重要的启示，可用于抗烟草花叶病毒药物的研发制备。
最后说明的是，以上优选实施例仅用于说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。