一种猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体及其制备方法和应用与流程

文档序号:20028840发布日期:2020-02-28 10:08阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体,其特征在于,包括猪瘟病毒囊膜蛋白分子和外源寡聚化结构片段;所述猪瘟病毒囊膜蛋白分子选自猪瘟病毒囊膜蛋白e2分子、猪瘟病毒囊膜蛋白e0分子中的任一种;所述猪瘟病毒囊膜蛋白e2分子与外源寡聚化结构片段形成e2寡聚蛋白体,所述猪瘟病毒囊膜蛋白e0分子与外源寡聚化结构片段形成e0寡聚蛋白体。

2.根据权利要求1所述的一种猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体,其特征在于,所述e2寡聚蛋白体是由2个、3个或4个外源寡聚化结构片段分别对应地将2个、3个或4个e2蛋白分子链接成e2二聚蛋白体、e2三聚蛋白体或e2四聚蛋白体。

3.根据权利要求1所述的一种猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体,其特征在于,所述e0寡聚蛋白体是由2个、3个或4个外源寡聚化结构片段分别对应地将2个、3个或4个e0蛋白分子链接成e0二聚蛋白体、e0三聚蛋白体或e0四聚蛋白体。

4.根据权利要求1-3任一项所述的猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体,其特征在于,所述外源寡聚化结构片段选自西尼罗病毒c蛋白寡聚化结构片段wnv-alpha4、酵母转录因子gcn4中的任一种。

5.根据权利要求1所述的猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体,其特征在于,所述猪瘟病毒囊膜蛋白e0和猪瘟病毒囊膜蛋白e2均来源于猪瘟病毒所有基因亚型毒株。

6.根据权利要求5所述的猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体,其特征在于,所述猪瘟病毒囊膜蛋白e0和猪瘟病毒囊膜蛋白e2均来源于猪瘟病毒2.1基因亚型株。

7.权利要求1-6任一项所述的猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)人工合成寡聚蛋白体的单个融合亚基多肽基因,并将该基因克隆至质粒载体,获得猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体的重组表达质粒载体;所述单个融合亚基多肽基因包括亚基多肽、g6s9短肽链接、外源寡聚化结构片段及组氨酸标签短肽;

(2)将所述猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体的重组表达质粒载体转染宿主细胞,回收宿主细胞培养上清液,提取纯化猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体。

8.根据权利要求7所述的猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体的制备方法,其特征在于,所述质粒载体选自昆虫杆状病毒质粒、哺乳细胞表达系统质粒、细菌表达系统质粒、酵母表达系统质粒中的任一种。

9.根据权利要求7所述的猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体的制备方法,其特征在于,所述宿主细胞选自昆虫细胞、哺乳细胞、大肠杆菌细胞,酵母细胞中的任一种。

10.一种疫苗,其特征在于,所述疫苗包括如权利要求1-6任一项所述的猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体,所述寡聚蛋白体选自e2寡聚蛋白体、e0寡聚蛋白体中的一种或两种。

11.根据权利要求10所述的一种疫苗,其特征在于,所述疫苗还包括佐剂,所述佐剂选自水包油包水型佐剂、水包白油型佐剂、角鲨烯佐剂、植物油佐剂、纳米佐剂或弗氏佐剂中的至少一种。

12.权利要求1-6任一项所述的猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体在制备猪瘟病毒抗体检测制剂或猪瘟病毒疫病监测制剂中的应用,其特征在于,所述制剂包含elisa检测试剂盒、胶体金试纸条、化学发光检测盒或荧光发光检测盒中的任一种。

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