用于制作多凹面凝胶片的印章及使用方法与流程

本发明涉及一种用于多凹面凝胶片的印章及使用方法。

背景技术：

常规细胞培养为贴壁二维培养方式，但由于细胞间通讯很少，使得细胞群无法具备类似于体内的结构及生理生化特征。举例说明，肝脏细胞在进行贴壁培养下，数天后即丢失了肝脏胆小管结构以及分泌白蛋白/尿素的功能，或者癌细胞在二维培养下缺乏体内的生物标志物。相比之下，细胞的三维培养能够有效的提高并模拟体内环境，比如肝细胞三维培养具有天然肝脏的三维结构与肝功能，获得更为准确的肝毒性数据；癌细胞在三维培养下，可重现一些生物标志物以及一定的转移与浸润功能。因此，细胞三维培养的重要性不言而喻。

然而，目前的三维培养的方法过于复杂昂贵(比如支架法)，使得三维培养无法让普通科研人员广泛接受。或者缺乏高通量特点，比如在96孔板中使用琼脂糖法或者超低吸附板的方法，一个孔内只能形成一个细胞三维球；由于每个细胞球仅有1000个左右的细胞量，无法满足蛋白检测、mrna的qpcr定量、细胞球染色、以及大部分试剂盒的最低细胞数量的标准。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种用于制作多凹面凝胶片的印章及使用方法，其用于细胞培养用具内，以使得细胞培养用具具有高通量的优点，且成本低，结构简单。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于制作多凹面凝胶片的印章，包括印模及与所述印模可拆卸连接的手柄，所述印模具有相对设置的上表面及下表面，所述下表面上设置有若干个凸起；所述印模上还设置有浇道，所述浇道与所述下表面连通设置。

进一步地，所述凸起包括第一凸块，所述第一凸块的横截面的形状为半圆形或锥形或矩形。

进一步地，所述凸起还包括用以连接所述第一凸块和印模的第二凸块，所述第二凸块的横截面的形状为矩形。

进一步地，所述印模上还设置有自所述上表面向内凹陷形成的凹槽，所述浇道与所述凹槽连通设置。

进一步地，所述手柄具有与所述凹槽卡合的卡块。

进一步地，所述浇道的横截面的形状为锥形。

进一步地，所述凸起的直径范围为0.4-5mm，所述凸起的深度为0.2-2.5mm。

本发明还提供了一种多凹面凝胶片的制作方法，采用如上所述的用于制作多凹面凝胶片的印章，所述方法包括：

配置凝胶溶液；

将所述印模放置到细胞培养用具内；

将热凝胶溶液通过所述浇道流向至所述印模的下表面与所述细胞培养用具的空隙中，直至热凝胶溶液充满空隙；

将热凝胶溶液冷却直至完全凝固；

插入手柄使得所述手柄与印模卡合，使得所述印模与凝固后的多凹面凝胶片分离，并将所述印模移出至所述细胞培养用具外。

进一步地，所述方法还包括：

将所述印模放置到所述细胞培养用具前，预热所述印模。

进一步地，所述细胞培养用具为24孔板、12孔板、6孔板、35mm细胞培养皿及60mm细胞培养皿中的任一种。

本发明的有益效果在于：通过在下表面上设置有若干个均匀分布的凸起，且印模上设置有与下表面连通的浇道，将印模放置于细胞培养用具内时，凝胶溶液通过该浇道注入并流向至下表面与细胞培养用具的空隙之间以形成凝胶片，成型的凝胶片具有若干个凹面以获得多个细胞球，其结构简单且成本较低，同时还具有高通量的优点。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。

附图说明

图1为本发明的用于制作多凹面凝胶片的印章的结构示意图。

图2为印模的结构示意图。

图3为印模的另一结构示意图。

图4为印模的剖面示意图。

图5为凸起的结构示意图。

图6为手柄的结构示意图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

请参见图1至图6，本发明的一较佳实施例中的一种用于制作多凹面凝胶片的印章，用于细胞培养用具中，在本实施例中，该细胞培养用具可为24孔板、12孔板、6孔板、35mm细胞培养皿及60mm细胞培养皿中的任一种。诚然，在其他实施例中，该细胞培养用具也可以为其他，在此不做具体限定，根据实际情况而定。若所述用于制作多凹面凝胶片的印章应用于不同型号的细胞培养用具中，所述印章的大小随之相应改变，本实施例不对所述用于制作多凹面凝胶片的印章的大小做具体限定，根据实际情况而定。

所述用于制作多凹面凝胶片的印章包括印模1及与所述印模1可拆卸连接的手柄2，印模1与手柄2皆采用不锈钢材质，其硬度高、耐磨且耐高温可灭菌。其中，为了提高成型的凝胶片的光滑度，印模1的光滑度达到纳米级别。诚然，在其他实施例中，所述印模1及手柄2的材质也可为其他，根据实际情况而定，在此不做具体限定，根据实际情况而定。

所述印模1具有相对设置的上表面11及下表面12，所述印模1上还设置有自所述上表面11向内凹陷形成的凹槽13，相应的，所述手柄2上设置有与所述凹槽13卡合的卡块21。通过将卡块21与所述凹槽13卡合或拆卸，以实现印模1与手柄2的连接与拆卸。

所述下表面12上设置有若干个的凸起15，若干个凸起15均匀分布在下表面12上。诚然，在其他实施例中，若干个凸起15也可不均匀分布，在此不做具体限定，根据实际情况而定。在本实施例中，所述凸起15的个数为566个。诚然，在其他实施例中，所述凸起15的数量也可为其他，在此不做具体限定，根据实际情况而定。

所述凸起15的直径范围为0.4-5mm，所述凸起15的深度为0.2-2.5mm，诚然，在其他实施例中，所述凸起15的直径范围及深度范围也可为其他，根据实际情况而定，在此不做具体限定。所述凸起15包括第一凸块151，所述第一凸块151的横截面的形状为半圆形或锥形或矩形等，在此不做具体限定，根据实际情况而定，所述第一凸块151的横截面的形状优选为半圆形，该半圆形可更好的形成细胞球。所述凸起15还包括用以连接所述第一凸块151和印模1的第二凸块152，所述第二凸块152的横截面的形状为矩形等形状，在此不做具体限定，根据实际情况而定。该第二凸块152的设置根据实际需求而定，即，第二凸块152可设置也可不设置。

所述印模1上还设置有浇道14，所述浇道14与所述下表面12连通设置。为了方便将凝胶溶液更好地注入及降低印模1的制造工艺的难度，在本实施例中，所述浇道14与所述凹槽13连通设置。将凝胶溶液注入凹槽13，再通过所述浇道14流向至印模1的下表面12，直至铺满下表面12与孔板之间的空隙，方便快捷。诚然，在其他实施例中，所述浇道14也可与印模1的侧壁连通，但是较为不便。

在细胞培养用具中形成凝胶片后，该凝胶片具有若干个与凸起15相匹配的凹面，将细胞悬液加入细胞培养用具后，细胞会在多凹面凝胶片的每个凹面中慢慢聚集，三天后即可成球。

本发明还提供了一种多凹面凝胶片的制作方法，采用如上所述的用于制作多凹面凝胶片的印章，所述方法包括：

配置凝胶溶液；其中，所述凝胶溶液为水凝胶溶液或其他，在此不做具体限定，根据实际情况而定。

将所述印模1放置到细胞培养用具内；

将热凝胶溶液通过所述浇道14流向至所述印模1的下表面12与所述细胞培养用具的空隙中，直至热凝胶溶液充满空隙；

将热凝胶溶液冷却直至完全凝固；

插入手柄2使得所述手柄2与印模1卡合，使得所述印模1与凝固后的多凹面凝胶片分离，并将所述印模1移出至所述细胞培养用具外。

其中，本发明的所述方法还包括：

将所述印模1放置到所述细胞培养用具前，预热所述印模1。预热的目的在于，使得加入的凝胶溶液不会过快冷却定型，从而对最后成型的产品产生影响。

综上所述：通过在下表面12上设置有若干个均匀分布的凸起，且印模1上设置有与下表面12连通的浇道14，将印模1放置于细胞培养用具内时，凝胶溶液通过该浇道14注入并流向至下表面与细胞培养用具的空隙之间以形成凝胶片，成型的凝胶片具有若干个凹面以获得多个细胞球，其结构简单且成本较低，同时还具有高通量的优点。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。