一种中药单体牡荆素的纯化脱色方法与流程

本发明涉及一种中药单体植物药的处理方法，特别是涉及一种植物药的纯化脱色方法，更为具体地说是一种中药单体牡荆素的纯化脱色方法。

背景技术：

牡荆素是从蔷薇科植物山楂叶中提取的单一化合物，其纯度大于98％。公开号cn103509002a的专利申请中公开了牡荆素的提取方法，加入适宜的辅料制成的粉针剂应用于临床。本品在国内外均没有上市与销售，属国家中药一类新药。其药理作用显示有抗实验性心肌缺血、对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用、对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用等等。牡荆素在临床上适用于治疗冠心病、心肌梗死、心绞痛等心血管疾病。中药注射剂是中药现代化最高水平的体现，其研究注册审批门槛逐渐提高，淘汰落后、成分不明、机制不清的注射液品种是大势所趋。因此对牡荆素质量控制必须高标准，严要求，为临床的使用提供安全保障。

牡荆素的临床剂型为注射剂，对其颜色及纯度等都有具体严格标准要求；且本品是从中药山楂叶中提取分离纯化而得，因此牡荆素原料生产过程中，纯化脱色步骤及其重要。

现有的中药单体提取纯化工艺的方法基本有树脂吸附法、活性炭吸附法、沉淀法、过滤法等等，而往往这些脱色工艺单独应用时很难把色素彻底去除；因此本方法考虑采用联合运用，并结合牡荆素临床应用剂型是注射剂，生产过程中尽量避免引入各种新物质，从而制定牡荆素特有的纯化脱色工艺。

技术实现要素：

本发明针对中药单体产品在脱色纯化中存在的问题，提供了一种中药单体牡荆素的纯化脱色方法。本发明采用活性炭脱色结合薄膜过滤法，最后采用乙醇结晶，能够获得高纯度色泽好的牡荆素原料。在中药注射剂生产过程中加入活性炭利于吸附色素并除去热原；脱炭后采用微孔滤过有效截留大分子色素，不引入新的物质；最后低温冷藏结晶得到高纯度的牡荆素。本工艺生产成本低，操作方便，且不会引入新的有害物质。

本发明中药单体牡荆素的纯化脱色方法，包括如下步骤：

步骤1：通过牡荆素粗品配制1～5％的牡荆素的乙醇溶液；本发明中使用的牡荆素粗品的制备方法参见cn103509002a。

步骤2：向步骤1获得的牡荆素的乙醇溶液中加入针用活性炭，60℃下搅拌0.5小时；

步骤3：将步骤2的混合溶液脱炭过滤，并通过0.45um的微孔滤膜过滤；

步骤4：将步骤3过滤后的牡荆素乙醇溶液低温冷藏析晶，得牡荆素脱色纯化品。

步骤1中，配制牡荆素的乙醇溶液时所采用的溶剂为60vt％乙醇。

步骤2中，针用活性炭的添加比例为1.0～3.0g/l。

步骤3中，脱炭过滤的方法为钛棒过滤器滤过。

步骤4中，低温冷藏析晶的温度控制在2～8℃。

本发明通过乙醇溶液溶解牡荆素去除醇不溶性杂质；采用活性炭吸附脱色去除色素杂质，配合薄膜过滤操作去除大分子杂质；最后采用乙醇液低温析晶去除醇溶性杂质；将各种色素及杂质与牡荆素产品实现分离，达到除色纯化目的，得到高纯度牡荆素产品，为其制剂提供安全保障基础。

附图说明

图1是牡荆素粗品的hplc色谱图。

图2是本发明获得的牡荆素纯品的hplc色谱图。

具体实施方式

实施例1：

本实施例中牡荆素的纯化脱色方法，包括以下步骤：

1、取牡荆素粗品10g(纯度为84.7％)，加入1l60％乙醇溶液，加热搅拌使溶解，得牡荆素的乙醇溶液；

2、向步骤1乙醇溶液中加入针用活性炭，浓度为1.0g/l；

3、保持步骤2乙醇溶液温度为60℃，搅拌0.5小时；

4、将步骤3的混合溶液脱炭过滤，并通过0.45um的微孔滤膜过滤；

5、将过滤后的牡荆素乙醇溶液，低温2℃冷藏析晶，得黄色牡荆素粉末7.6g，纯度为99.1％。

实施例2：

本实施例中牡荆素的纯化脱色方法，包括以下步骤：

1、取牡荆素粗品25g(纯度为84.7％)，加入1l60％乙醇溶液，加热搅拌使溶解，得牡荆素的乙醇溶液；

2、向步骤1乙醇溶液中加入针用活性炭，浓度为2.0g/l；

3、保持步骤2乙醇溶液温度为60℃，搅拌0.5小时；

4、将步骤3的混合溶液脱炭过滤，并通过0.45um的微孔滤膜过滤；

5、将过滤后的牡荆素乙醇溶液，低温5℃冷藏析晶，得得黄色牡荆素粉末18.9g，纯度为99.3％。

实施例3：

本实施例中牡荆素的纯化脱色方法，包括以下步骤：

1、取牡荆素粗品50g(纯度为84.7％)，加入1l60％乙醇溶液，加热搅拌使溶解，得牡荆素的乙醇溶液；

2、向步骤1乙醇溶液中加入针用活性炭，浓度为3.0g/l；

3、保持步骤2乙醇溶液温度为60℃，搅拌0.5小时；

4、将步骤3的混合溶液脱炭过滤，并通过0.45um的微孔滤膜过滤；

5、将过滤后的牡荆素乙醇溶液，低温8℃冷藏析晶，得得黄色牡荆素粉末37.4g，纯度为99.6％。

实施例4：

本实施例中牡荆素的纯化脱色方法中溶媒的选择依据：

根据牡荆素的理化性质及常用重结晶安全溶剂，进行结晶溶媒的筛选研究。取牡荆素粗品五份(每份1.0g)，分别加1l的丙酮、无水乙醇、90％乙醇、60％乙醇和30％乙醇，加热使溶解，加入2.0g/l针用活性炭，60℃搅拌0.5小时，脱碳，微孔滤膜滤过，低温5℃冷藏析晶，考察本品在不同介质中的纯化结晶情况，从而确定结晶所用溶媒。试验结果见表1。

表1不同溶媒结晶选择试验结果

试验结果表明，60％乙醇用做结晶溶媒收率、外观色泽及纯度控制均较好，故选择60％的乙醇作为结晶溶媒。

实施例5：

本实施例中牡荆素的纯化脱色方法活性炭用法用量选择依据：

1、活性炭用法试验

取牡荆素60％乙醇溶液1l两份，分别加2.0g活性炭，以不同温度条件下(25℃、60℃、90℃)搅拌30分钟，脱炭滤过，观察比较溶液脱色前后颜色变化情况(脱色前后效果以溶液透光率进行评价)；结果见表2。

表2活性炭用法试验结果

试验结果表明，牡荆素乙醇溶液加入2.0g/l的活性炭，水浴恒温60℃搅拌30分钟后，脱色效果较好。

2、活性炭用量试验

取牡荆素60％乙醇溶液5份，每份1l，分别加入0.5g、1.0g、2.0g、3.0g和4.0g的针用活性炭，水浴恒温60℃搅拌30分钟，脱炭滤过，观察比较溶液脱色前后颜色变化情况(脱色效果以溶液透光率进行评价)；并比较吸附后牡荆素成分被吸附后损失变化情况，结果见表3。

表3活性炭用量试验结果

试验结果表明，当牡荆素乙醇溶液加入不同浓度的活性炭，水浴恒温60℃搅拌30分钟后脱色，随着活性炭用量的增加脱色效果也随之增加，但是牡荆素含量的损失率也随之增加。综合考虑，我们选择活性炭的用量为1.0～3.0g/l，既达到所需的脱色效果又使得牡荆素的损失率降到最低。最佳活性炭用法用量为加入2.0g/l的活性炭，水浴恒温60℃搅拌30分钟。

实施例6：

本实施例中牡荆素的纯化脱色方法中析晶条件选择依据：

取牡荆素粗品两份(每份1.0g)，分别加1l的60％乙醇，加热使溶解，加入2.0g/l针用活性炭，60℃搅拌0.5小时，脱碳，微孔滤膜滤过，采用室温25～30℃与低温2～8℃冷藏析晶，考察本品在不同温度条件下结晶情况。并观察析出牡荆素的颜色，并测定牡荆素的得率及含量，结果见表4。

表4重晶条件试验结果

试验结果表明，低温2～8℃冷藏放置牡荆素结晶得率较高，含量与有关物质均符合要求，故选择低温2～8℃冷藏放置析晶。

实施例7：

牡荆素的纯化脱色步骤：

1、向反应釜中，加60％的乙醇溶液，加热升温至60℃，加入牡荆素粗品，搅拌使牡荆素全部溶解，溶液颜色为棕红色。牡荆素粗品为棕褐色粉末，hplc含量为85.6％，见图1。

2、牡荆素乙醇溶液中加入针用活性炭吸附脱色，脱碳，薄膜滤过，低温冷藏，析出晶体，过滤，滤饼为黄色固体，得牡荆素纯品。牡荆素纯品为黄色粉末，hplc含量为99.6％，总杂质0.37％，见图2。

不仅获取产品的成本较低，颜色完全合格、含量更高，操作简单，适合生产。

本发明方案所公开的技术手段不仅限于上述技术手段所公开的技术手段，还包括由以上技术特征任意组合所组成的技术方案。

以上所述是本发明的具体实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。