本技术：
涉及植物活性成分提取技术领域，具体而言，涉及一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法。
背景技术：
巴戟天(学名：morindaeofficinalisradix)，为茜草科(rubiaceae)植物巴戟天morindaofficinalishow的干燥根。花期5～7月，果熟期10～11月。巴戟天主要分布于广东、广西、福建、海南、江西等地。广东德庆、高要、郁南是药材生产最适宜区。
巴戟天主要含蒽醌化合物、环烯醚萜苷类、有机酸类、低聚糖类、氨基酸、微量元素及其他成分。其中环烯醚萜化合物、多糖类、水晶兰苷表现出一定生理活性。传统中医理论认为巴戟天具有补肾阳，强筋骨，祛风湿等功效，现代研究证明巴戟天具有对骨生长的影响、对机体免疫功能的影响、对神经系统的影响、对内分泌系统的影响、抗衰老及抗疲劳作用、对造血系统的影响、对心血管系统的影响和抗肿瘤作用等，被广泛应用于中药组方及中成药中。
水晶兰苷均是环烯醚萜苷类成分，现代研究证明环烯醚萜苷类成分与巴戟天药理作用密切相关，目前的水晶兰苷提取物主要通过加热提取、树脂纯化、有机溶剂萃取等方法处理，例如cn101812098a公开了一种从巴戟天药材中提取分离水晶兰苷单体的方法，包括乙醇溶液提取、乙酸乙酯萃取、正丁醇萃取、过滤进一步除杂、通过制备型高效液相色谱分离水晶兰苷单体、大孔树脂富集、干燥制得水晶兰苷单体产品等步骤。上述方法虽然能获得高纯度的水晶兰苷单体，但是仍解决不了工艺复杂、操作不方便、周期长等缺点。
技术实现要素：
本发明提供了一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，其方便直接、工艺简单、生产成本低、易推广、水晶兰苷纯度高。
一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，包括如下步骤：
(1)提取：取巴戟天药材粉碎，加10～15倍量的乙醇，70℃～80℃下加热回流提取2～3次，每次1～2小时，粗滤后得巴戟天粗提液；
(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥，温度55-65℃；
(3)制备纯化：取干燥后的提取物加入10-20倍量流动相超声溶解，过0.22μm微孔滤膜后上制备液相；
(4)馏分收集：收集水晶兰苷馏分；
(5)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度55-65℃。
作为一种优选的实施方式，步骤(1)中乙醇的浓度为65％-75％。
作为一种优选的实施方式，步骤(3)中色谱柱为：c18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为甲醇：乙酸按(3-7)：(97-93)的比例洗脱，流速30-40ml/min，检测波长230-235nm，柱温25-35℃。
作为一种优选的实施方式，乙酸的浓度为0.15％-0.25％。
本发明的有益效果：
一、工艺简单，生产周期短：水晶兰苷常规工艺，提取后需要先进行大孔树脂进行吸附除杂或者有机溶剂萃取再进行后续处理。而本发明将巴戟天提取液直接浓缩干燥后上制备液相进行分离纯化，从而得到高纯度的水晶兰苷，同时达到了简化工艺、缩短周期的目的。
二、高转移率：水晶兰苷常规工艺，需要将巴戟天提取液浓缩后经过大孔树脂纯化、有机溶剂萃取等操作，水晶兰苷损耗较大，而本发明将巴戟天提取液浓缩干燥后直接上高效制备液相进行分离纯化，提高了水晶兰苷的转移率。
三、产物纯度高：巴戟天提取物经过高效制备液相分离纯化，得到高纯度的水晶兰苷单体(纯度均大于96％)。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1
一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，由如下步骤组成：
(1)提取：取100g巴戟天药材，加65％乙醇提取3次，每次加1000ml，70℃下提取2小时，滤网粗滤，收集并合并滤液。
(2)浓缩干燥：将上述提取液55℃减压浓缩干燥，得到提取物12.1g。
(3)制备纯化：取干燥后的提取物适量加入10倍量流动相超声溶解，过微孔滤膜后上制备液相，色谱柱为：c18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为甲醇：0.15％乙酸按照3：97的比例洗脱，流速30ml/min，检测波长230nm,柱温25℃。
(4)馏分收集：收集水晶兰苷馏分；
(5)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度55℃，水晶兰苷得率分别为0.47％，含量分别为96.98％。
实施例2
一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，由如下步骤组成：
(1)提取：取100g巴戟天药材，加70％乙醇提取2次，每次加1200ml，75℃下提取2小时，滤网粗滤，收集并合并滤液。
(2)浓缩干燥：将上述提取液55℃减压浓缩干燥，得到提取物11.9g。
(3)制备纯化：取干燥后的提取物适量加入15倍量流动相超声溶解，过微孔滤膜后上制备液相，色谱柱为：c18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为甲醇：0.20％乙酸按照5：95的比例洗脱，流速35ml/min，检测波长233nm,柱温30℃。
(4)馏分收集：收集水晶兰苷馏分；
(5)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度60℃，水晶兰苷得率为0.47％，含量分别为97.71％。
实施例3
一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，由如下步骤组成：
(1)提取：取100g巴戟天药材，加75％乙醇提取3次，每次加1500ml，80℃下提取1小时，滤网粗滤，收集并合并滤液。
(2)浓缩干燥：将上述提取液55℃减压浓缩干燥，得到提取物12.5g。
(3)制备纯化：取干燥后的提取物适量加入20倍量流动相超声溶解，过微孔滤膜后上制备液相，色谱柱为：c18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为甲醇：0.25％乙酸按照7：93的比例洗脱，流速40ml/min，检测波长235nm,柱温35℃。
(3)馏分收集：收集水晶兰苷馏分；
(4)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度65℃，水晶兰苷得率为0.49％，含量分别为96.74％。
以上所述仅为本申请的实施例而已，并不用于限制本申请的保护范围，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
1.一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)提取：取巴戟天药材粉碎，加10～15倍量的乙醇，70℃～80℃下加热回流提取2～3次，每次1～2小时，粗滤后得巴戟天粗提液。
(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥，温度55-65℃。
(3)制备纯化：取干燥后的提取物加入10-20倍量流动相超声溶解，过0.22μm微孔滤膜后上制备液相。
(4)馏分收集：收集水晶兰苷馏分。
(5)浓缩干燥：将上述收集的馏分减压真空浓缩干燥,温度55-65℃。
2.根据权利要求1所述的一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，其特征在于，步骤(1)中乙醇的浓度为65％-75％。
3.根据权利要求1所述的一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，其特征在于，步骤(3)中色谱柱为：c18反相色谱柱，具体色谱条件为：流动相为甲醇：乙酸按(3-7)：(97-93)的比例洗脱，流速30-40ml/min，检测波长230-235nm，柱温25-35℃。
4.根据权利要求3所述的一种巴戟天中水晶兰苷的制备方法，其特征在于，乙酸的浓度为0.15％-0.25％。