水稻粒型基因GS10及其应用的制作方法

本发明涉及基因工程和植物遗传育种领域，具体地说，涉及水稻粒型基因gs10及其应用。

背景技术：

水稻(oryzasatival.)是世界上播种面积较大的粮食作物之一，全球超过一半以上的人口以稻米为主要的食物来源。水稻耕种在中国有着悠久历史，我国年稻米生产量和消费量均是全球最大。一直以来，为了解决最基本的温饱问题及保障粮食安全，尽可能选育高产品种已成为水稻育种家们的首要目标。自20世纪50年代以来，我国水稻育种家在优异种质资源的创新下，使水稻的单产水平实现了两次质的飞跃。人口激增、气候不稳、自然灾害频发、可耕地面积持续萎缩等不利因素使全球面临着日益严峻的粮食危机，因此探寻能够使水稻产能大幅提高的新种质资源是当今水稻研究面临的新挑战。

水稻单株产量是由单株有效穗数、每穗实粒数和粒重三要素决定的。水稻粒重是由粒型和灌浆充实度二者所决定。粒型性状包括粒长、粒宽和粒厚，不仅会影响谷粒的重量和产量，同时也会影响稻米的外观品质、碾磨加工品质及市场竞争力。水稻粒型是个受多基因控制的数量性状，因此，鉴定水稻中的控制粒型的基因可为解析粒型形成的分子机制，进而为利用分子育种技术开展高效、精准的高产优质水稻新品种培育提供理论支持。

技术实现要素：

本发明的目的是提供水稻粒型基因gs10及其应用。

为了实现本发明目的，本发明人基于一个水稻粒型突变体材料，经图位克隆，成功鉴定了一个新的粒型调控基因gs10；该基因功能缺失后会导致籽粒的粒长变短、粒宽变宽、粒重减轻及外观品质降低，而过表达gs10可使粒长变长、粒宽变窄、粒重增加且外观品质提高；深入研究发现，gs10调控细胞大小。这些结果表明gs10具有重要的育种应用潜力，同时可用于解析水稻粒型调控的分子机制。

第一方面，本发明提供水稻粒型基因gs10，其为编码如下蛋白质(a)或(b)的基因：

(a)由seqidno：3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)seqidno：3所示序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等功能的由(a)衍生的蛋白质。

水稻粒型基因gs10的核苷酸序列为：

i)seqidno：1所示的核苷酸序列；

ii)seqidno：1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

iii)在严格条件下与seqidno：1所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％sds的0.1×sspe或含0.1％sds的0.1×ssc溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或

iv)与i)、ii)或iii)的核苷酸序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。

其cdna序列为：

i)seqidno：2所示的核苷酸序列；

ii)seqidno：2所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

iii)在严格条件下与seqidno：2所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％sds的0.1×sspe或含0.1％sds的0.1×ssc溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或

iv)与i)、ii)或iii)的核苷酸序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。

第二方面，本发明提供含有所述基因gs10的生物材料，所述生物材料包括但不限于重组dna、表达盒、转座子、质粒载体、噬菌体载体、病毒载体、工程菌或非可再生的植物部分。

第三方面，本发明提供所述基因gs10或含有所述基因的生物材料的以下任一应用：

(1)调控水稻粒型(包括粒长、粒宽和粒重)、穗型、叶型及株高；

(2)用于植物品种改良；

(3)用于制备转基因植物。

本发明中，所述植物优选为禾本科植物，更优选水稻。

第四方面，本发明提供一种使水稻粒长变短、粒宽变宽、粒重减轻、穗长变短、叶型变短变宽、株高降低的方法，包括：利用基因工程手段，弱化或敲除水稻中的基因gs10。

进一步地，以基因gs10为靶标，设计基于crispr/cas9的sgrna序列，将含有编码所述sgrna序列的dna片段连接到携带crispr/cas的载体中，转化水稻，进而获得该基因功能缺失的转基因水稻。

优选地，sgrna作用位点的核苷酸序列为5’-gtgccgaagtatcctcgctaagg-3’。

第五方面，本发明提供一种使植物粒长变长、粒宽变窄、增加粒重、穗长变长、叶型变长变窄、株高增加的方法，包括：利用基因工程手段，在植物中过表达基因gs10。

所述过表达的方式选自以下1)～5)，或任选的组合：

1)通过导入具有所述基因的质粒；

2)通过增加植物染色体上所述基因的拷贝数；

3)通过改变植物染色体上所述基因的启动子序列；

4)通过将强启动子与所述基因可操作地连接；

5)通过导入增强子。

第六方面，本发明提供按照上述方法获得的转基因植物(水稻)在植物育种中的应用。

其中，所述育种方法包括但不限于转基因、杂交、回交、自交或无性繁殖。

第七方面，本发明提供一种培育粒型、株型生长发育正常的转基因植物的方法，包括：将所述基因gs10导入粒型、株型发育异常的植物中，得到粒型、株型发育正常的转基因植物；所述粒型、株型发育异常的植物为粒长变短、粒宽变宽、粒重减轻、穗长变短、叶型变短变宽、株高降低的植物；所述粒型、株型正常的转基因植物为粒长、粒宽、粒重、穗长、叶长、叶宽和株高恢复正常的转基因植物。

第八方面，本发明提供用于扩增所述基因gs10的特异性pcr引物，由于gs10基因较大，本发明采用分段式pcr扩增，然后利用同源重组的方法连接成全长序列，所用引物为hb42-f和hb42-r以及hb43-f和hb43-r(表2，seqidno：4-7)。

本发明还提供用于扩增所述基因gs10cdna序列的特异性pcr引物对，所述引物对的上、下游引物序列分别为cds74-f和cds74-r(表2，seqidno：8-9)

借由上述技术方案，本发明至少具有下列优点及有益效果：

本发明首次分离克隆了一个新的控制水稻粒型的基因gs10，突变体功能丧失型突变导致籽粒的粒长变短、粒宽变宽、粒重减轻。过表达gs10基因可导致籽粒增大，产量增加。gs10基因对水稻粒型形成的分子机制研究有重要意义，本发明为水稻粒型改良育种提供了新的基因资源，大大推进了水稻育种进程。

附图说明

图1为本发明gs10突变体产生短宽的籽粒；其中，a-b：野生型和gs10突变体成熟的谷粒；c：野生型和gs10突变体的糙米；d-g：野生型和gs10突变体的粒长(d)，粒宽(e)，粒厚(f)和千粒重(g)。标尺：a-c，5mm。数据：平均值±标准差(d-g中n＝30)。**表示p＜0.01，p值来于t检测。

图2为本发明较佳实施例中野生型和gs10突变体的农艺相关性状比较；其中，a：野生型和gs10突变体成熟期的植株；b：野生型和gs10突变体的稻穗。c：野生型和gs10突变体的剑叶；d-o：野生型和gs10突变体的株高(d)、穗长(e)、每穗初级枝梗数(f)、每穗次级枝梗数(g)、每穗粒数(h)、剑叶长(i)、剑叶宽(j)、倒二叶长(k)、倒二叶宽(l)、每株穗数(m)、抽穗期(n)和单株产量(o)等性状的比较。标尺：a-c，5mm。数据：平均值±标准差(d-o中n＝30)。*表示p＜0.05，**表示p＜0.01，p值来于t检测。

图3为本发明较佳实施例中gs10调控颖壳细胞的大小；其中，a：野生型和gs10突变体的在开花之前的小花；b-c：野生型(b)和gs10突变体(c)颖壳外表面的扫描电镜图；d-g：野生型(d)和gs10突变体(e)颖壳内表面的扫描电镜图；f-g：野生型和gs10突变体颖壳外表皮细胞的长度(f)和宽度(g)；h-i：野生型和gs10突变体颖壳内表皮细胞的长度(h)和宽度(i)；j：野生型和gs10突变体颖壳纵向细胞数目。标尺：a，5mm；b-e，100μm。数据：平均值±标准差(f-i中n＝100，j中n＝10)，**表示p＜0.01，p值来于t检测。

图4为本发明较佳实施例中gs10的精细定位和候选基因的预测；其中，a：gs10/02428f2植株的成熟谷粒；b：gs10/02428f2植株的糙米；c：gs10基因的初定位区间；红色箭头指示胚乳凹陷的糙米；d：gs10基因的精细定位区间；e：精细定位区间上的15个orf；红色标注的orf是候选基因；f：loc_os10g21940在rgap数据库上预测的转录本；g：loc_os10g21940在rigw数据库上预测的转录本；黑框表示外显子，黑框间的黑线表示内含子；红色字母代表缺失的碱基。标尺：a-b，5mm。

图5为本发明较佳实施例中gs10互补株系(com-1，com-2)的表型鉴定；其中，a-d：野生型(a)、gs10突变体(b)和互补株系(c-d)成熟期的植株；e：野生型、gs10突变体和互补株系的谷粒；f-g：野生型、gs10突变体和互补株系的粒长(f)、粒宽(g)、千粒重(h)、株高(i)、穗长(j)、剑叶长(k)和剑叶宽(l)。标尺：a-d，10cm；e，10mm。数据：平均值±标准差(f-l中n＝5)。**表示p＜0.01，p值来于t检测。

图6为本发明较佳实施例中野生型(a)、gs10突变体(b)和互补株系com-2(c)颖壳内表皮细胞的扫描电镜图及细胞长度(d)和宽度(e)统计结果。标尺：a-c，50μm。数据：平均值±标准差(d-e中n＝100)。**表示p＜0.01，p值来于t检测。

图7为本发明较佳实施例中gs10候选基因loc_os10g21940的不同转录本功能分析；其中，a：转录本loc_os10g21940.1和loc_os10g21940.2的靶位点示意图和纯合突变体ko-1和ko-2的碱基变异类型；黑框表示外显子，靶序列带单下划线，pam基序带双下划线，红色连字符表示碱基缺失，红色的碱基表示插入。b：野生型和敲除株系的成熟谷粒；c-d：野生型和敲除株系的粒长(c)和粒宽(d)。标尺：b，5mm。数据：平均值±标准差(c-d中n＝5)。**表示p＜0.01，p值来于t检测。

图8为本发明较佳实施例中gs10过表达株系的粒型鉴定；其中，a：gs10突变体和过表达植株的成熟谷粒；b：突变体和过表达株系的gs10表达水平；c-e：突变体和gs10过表达株系的粒长(c)、粒宽(d)和千粒重(e)。标尺：a，.5mm。数据：平均值±标准差(b中n＝3，c-e中n＝5)。**表示p＜0.01，p值来于t检测。

图9为本发明较佳实施例中日本晴背景里过表达gs10株系的表型分析；其中，a-c：nip和过表达株系的植株(a)、稻穗(b)和谷粒(c)的表型；d：nip和过表达株系的gs10表达水平；e-j：nip和过表达株系的株高(e)、穗长(f)、剑叶长(g)、剑叶宽(h)、粒长(i)、粒宽(j)和千粒重(k)。标尺：a，15cm；b，25mm；c，5mm。数据：平均值±标准差，(d中n＝3，e-k中n＝5)。**表示p＜0.01，p值来于t检测。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例均按照常规实验条件，如sambrook等分子克隆实验手册(sambrookj&russelldw，molecularcloning：alaboratorymanual，2001)，或按照制造厂商说明书建议的条件。

实施例1gs10的定位及候选基因的确定

本发明鉴定到一个新的水稻粒型突变体材料gs10，相对于野生型，gs10突变体谷粒的粒长变短、粒宽变宽、粒重变轻。颖壳的扫描电镜观察发现，突变体的颖壳表皮细胞变得较短较宽，这与突变体的粒型变化相吻合。遗传分析表明突变体的表型变异由一对隐性核基因控制。利用从gs10突变体/粳稻02428衍生的定位群体将gs10定位于第10染色体标记rm25272与c10-23之间130.93kb内，测序发现突变体在loc_os10g21940的外显子上存在一个g碱基的缺失，导致移码突变、蛋白翻译提前终止。随后，通过转基因互补、敲除及过表达实验证实了loc_os10g21940就是gs10。其中通过构建crispr/cas9基因敲除载体后转化野生型中恢8015后转基因植株籽粒变小，粒长变短、粒宽变宽、粒重减轻；利用互补实验验证基因功能：pcambia1300-gs10互补载体转化突变体gs10籽粒恢复表型；利用过表达验证基因功能：pubi1390-gs10过表达载体转化突变体gs10转基因植株粒长变长、粒宽变窄、粒重增加。gs10(loc_os10g21940)编码一个含1899氨基酸残基含nt-c2结构域和15个coiled-coil重复结构域的蛋白。经在ncbi、rgap、uniprot等基因/蛋白收录网站检索，gs10基因(登录号为loc_os10g21940或os10g0363700)是水稻中一个未经报道的新的基因，功能未知。

1、突变体粒型表型

利用从籼稻恢复系中恢8015(野生型，wt)的种子经⁶⁰co-γ射线辐射诱变衍生的突变体库中，鉴定到的一个新的粒型突变体gs10(grainshape10)，开展粒型基因的克隆和功能分析。与野生型相比，gs10突变体的成熟谷粒的粒长变得较短，而粒宽变得较宽(图1，a和b)；gs10突变体的糙米也同样呈较短较宽的表型(图1c)。相对于野生型，gs10的粒长减少了16.30％，而粒宽增加了7.53％(图1，d和e)。gs10的粒厚与野生型相当，没有统计上的差异(图1f)。在千粒重方面，gs10显著地低于野生型，减少了9.13％(图1g)。这些结果表明，gs10突变体形成较短、较宽及较轻的谷粒。

2、突变体农艺及产量性状

进一步对株型和产量相关性状进行考察。如图2(a和d)所示，突变体gs10的株高比野生型略有降低。与野生型相比，gs10的稻穗长度有显著地降低，并伴随着一次枝梗数、二次枝梗数和每穗粒数都减少(图2，b和e-h)。跟粒型的变化一致，gs10植株的叶片比野生型的较短但较宽(图2，c和i-l)。在穗数性状上，gs10突变体的单株穗数的均值略低于野生型，但没有检测到显著性地差异(图2m)。gs10植株抽穗期的平均值稍高于野生型(图2n)。在产量性状上，gs10的单株产量水平低于野生型，减少了17.03％(图2o)。综上所述，表明gs10单株产量的降低是由于粒重和每穗粒数同时减少引起；也反映出了导致gs10突变体粒型变异的基因gs10不但影响籽粒大小和形状，还可能会影响植株的株型和产量。

3、野生型和突变体gs10的颖壳细胞学观察

水稻颖壳的细胞数目和细胞大小共同决定颖壳的大小和形状，进而影响粒型。为了探究突变体gs10粒型变化是由于颖壳细胞数目变化引起的还是细胞大小变化导致的，利用扫描电镜对野生型和突变体gs10刚抽穗时小花的颖壳表皮细胞的数目和大小进行考察。与gs10颖壳呈较短较宽表型相符合，在外稃中间部位，gs10的外表皮细胞长度比野生型明显地减少，但是宽度显著地增加(图3，a-c、f和g)。同样地，相比于野生型，在gs10外稃中间部位的内表皮细胞变得较短但较宽(图3，d、e、h和i)。在对外稃外表皮的纵向细胞数目分析，发现突变体细胞数量的均值虽然稍低于野生型，但在统计上两者间没有显著性差异(图3j)。这些结果表明，gs10突变体粒型的变化主要是由于颖壳细胞变得较短宽致使细胞大小发生变化引起的。

4、gs10突变体的遗传分析

为了鉴定gs10突变体的变异表型的遗传特点，利用野生型(wt)和gs10突变体作为亲本，进行正反交试验。对杂交组合wt/gs10和gs10/wt分别衍生的f1和f2植株的表型考察和统计分析，发现这两个组合的f1植株的表型均呈野生型；不同组合的f2分离群体中，野生型表型植株数与gs10突变体表型植株数的分离比均符合3∶1(表1)。这些结果表明，gs10突变体的突变表型受到单隐性核基因控制。

表1突变体gs10表型的遗传分析

5、gs10的精细定位及候选基因的确定

为了精细定位gs10，以gs10突变体为母本与父本粳稻02428杂交，构建了一套gs10/02428f2定位群体。由于粒型相关性状是典型的受多基因控制的数量性状及父母本遗传背景差异较大，f2定位群体植株的成熟谷粒大小呈连续分布，因此很难直接从低代的f2定位群体中筛选到谷粒呈短宽类似于gs10突变体的隐性极端单株用于突变基因定位。但有趣的是，当无意中剥去f2植株成熟谷粒的外面谷壳，发现部分单株胚乳弯曲、腹部凹陷呈腹切，且这些单株的谷粒大小都偏向较小(图4，a和b)。据前人报道粒型基因srs3和d11/nbg4突变后均可导致变短宽的颖壳直接地阻碍胚乳的纵向伸长，进而引起胚乳和颖壳的生长发育不协调，最终导致籽粒出现腹切(dengetal2015；tongetal2018)。因此，假设部分f2单株产生腹切米是由于突变基因gs10抑制颖壳的纵向伸长，从而阻碍胚乳在垂直方向的伸长。本发明选择典型的腹切植株当作定位的极端单株用于gs10的连锁分析。

首先，利用从gs10/02428f2定位群体中仔细筛选出来19个腹切单株构建的dna混池，结合一套在亲本野生型中恢8015和02428间有多态性且均匀分布在12条染色体上的ssr标记，将突变基因gs10初步定位于第10染色体长臂上标记rm239和rm25366之间(图4c)。为了缩小定位区间，我们发展了一套群体数目较多的gs10/02428f2∶3定位群体，并从该群体中筛选出1964个籽粒较小且有腹切米性状的典型单株；联合新开发的位于初定位区间的6个ssr和2个indel标记，进一步地将目标基因精细定位于标记rm25272与c10-23之间130.93kb的区间内(图4d)。该定位区间在rgap(http：//rice.plantbiology.msu.edu)数据库上预测含有15个开放阅读框(orf)。对野生型和gs10突变体的这15个orf的基因组系列进行测序，与野生型系列比对，发现gs10突变体在第3个orf(loc_os10g21940)的最长的外显子上存在一个g碱基的缺失，该变异会引起移码突变并产生一个提前终止子，导致该基因的预测编码蛋白在c端减少了1372个氨基酸残基(图4，f和g)。根据以上结果，将loc_os10g21940确定为gs10的候选基因。

实施例2基因gs10的功能

本实施例中，利用基因敲除实验验证基因功能，通过构建crispr/cas9基因敲除载体后转化野生型中恢8015后转基因植株籽粒变小；进一步地，利用互补实验验证基因功能：pcambia1300-gs10互补载体转化突变体gs10籽粒恢复表型；更进一步地，利用过表达实验验证基因功能：pubi1390-gs10过表达载体转化突变体gs10转基因植株粒长变长、变窄、粒重增加。具体如下：

1、利用遗传互补验证gs10功能

为了验证候选基因loc_os10g21940的变异是否导致了gs10突变体粒型和株型的变化，首先开展了转基因互补试验。由于loc_os10g21940基因组序列较长，将其分成2段，经2次同源重组，将包含上游启动子区域、orf及下游非编码区总共全长为14.931kb的目标基因组片段整合到互补载体上(pcambia1300，购自cambia公司)。之后经过农杆菌介导，将构建好的互补载体导入gs10突变体中，利用潮霉素特异性引物pcr扩增和突变位点测序相结合进行t0代的阳性转基因验证。与野生型相似，t2代互补植株的谷粒比gs10突变体的更长、更窄、更重(图5，e-h)。正如预期，转基因互补植株的株型也与野生型类似，相比于gs10突变体，互补植株的呈较长的穗子、较细长的叶片、株高稍高的表型(图5，a-d和i-l)。进一步对开花前的颖壳进行扫描电镜分析，野生型和互补植株的颖壳外颖的内表皮细胞的平均长度均显著地高于gs10突变体而平均宽度均显著地降低，表明互补植株的细胞形态得到恢复(图6，a-e)。这些结果充分验证了gs10突变体的突变表型是由候选基因loc_os10g21940的一个g碱基缺失造成的，同时也确定了gs10基因有多效性，不仅调控粒型，还影响穗型、叶型及株高等株型相关性状。

2、利用基因敲除技术验证gs10功能

根据不同的数据库注释，loc_os10g21940基因预测的转录本不一样，将该基因在rgap和rigw(http：//rice.hzau.edu.cn/cgi-bin/rice)数据库预测的转录本分别命名为loc_os10g21940.1和loc_os10g21940.2(图4，f和g)。这个两个转录本的大部分外显子相同，loc_os10g21940.1主要在loc_os10g21940.2的第1个外显子前面多了3个外显子而在第3个外显子的后面少了1个外显子。为了验证这2个假设的转录本是否均有功能，应用dna编辑技术crispr/cas9系统分别对野生型中恢8015的gs10基因2个不同靶位点进行编辑。其中对应loc_os10g21940.2的靶位点序列为10g21940.2-sgrna(表2，图7)，crispr/cas载体bgk03购自百格基因科技(江苏)有限公司。经对t0代潮霉素基因检测呈阳性的转基因植株的靶位点进行测序，获得2个分别命名为ko-1和ko-2的纯合定向突变体(sgrna作用位点的核苷酸序列为5’-gtgccgaagtatcctcgctaagg-3’)。相对于野生型，突变体ko-1在loc_os10g21940.1的第2个外显子上缺失了1个a碱基，而突变体ko-2是在loc_os10g21940.2的第6个外显子插入1个c碱基，这2个突变都会造成翻译提前终止、预测编码蛋白缺失了大部分氨基酸残基(图7a)。对t2代转基因植株表型考察发现，ko-1株系的谷粒形状与大小跟野生型一样；而ko-2株系谷粒跟gs10突变体一样，与野生型相比，粒长显著地减少但粒宽显著地增加(图7，b-d)。此结果暗示，gs10行使粒型调控的功能是依赖于loc_os10g21940.2转录本，而不是loc_os10g21940.1转录本。

表2本发明相关实验仲用的引物及序列

3、利用基因过表达验证gs10功能

为进一步验证gs10功能蛋白确实是由log_os10g21940.2转录后翻译的。以野生型(中恢8015)提取稻穗2-3cm长度时期穗部的总rna反转录后得到的cdna为模板，pcr扩增出了loc_os10g21940.2的全长cds。之后将该cds片段同源重组到过表达载体上，构建了1个以玉米ubiquitin启动子驱动loc_os10g21940.2转录的过表达载体pubi1390-gs10(载体名称pubi1390，购自cambia公司)，并用农杆菌介导方法将该载体导入gs10突变体中。对t2代表型稳定的阳性转基因植株和gs10突变体的表达量检测和考种，结果显示在gs10突变体的遗传背景中过表达loc_os10g21940.2会产生更细长和更重的谷粒(图8，a-e)。由于多次实验均未能扩出loc_os10g21940.1的全长cds，因此推测在水稻中不存在loc_os10g21940.1转录本。综上所述，表明粒型基因gs10的mrna是由loc_os10g21940.2转录，该基因含10个外显子、编码1个含1899氨基酸残基的较大蛋白。

以上研究结果表明，gs10功能缺失突变会导致水稻产生更短、更宽、更轻的籽粒，这暗示在正常的水稻材料中上调gs10表达可产生较长、较窄、较重的籽粒。进一步地，通过构建gs10过表达载体proubiquitin∷gs10，并将过表达载体转入粳稻品种日本晴(nipponbare，nip)中，如预期结果，与对照nip相比，t2代gs10的过表达植株的粒长和粒重均显著地增加，而粒宽显著地减少；同时发现，gs10的过表达会改变株型，比如株高稍有增加、穗长变得更长、剑叶变得较长但较窄等(图9，a-k)。这些实验数据进一步证实了上调gs10的表达可产生较长、较窄、较重的籽粒，可用于在水稻粒型育种中增加水稻的粒重和产量。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之做一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

序列表

<110>中国水稻研究所

<120>水稻粒型基因gs10及其应用

<130>pi202010659

<160>9

<170>siposequencelisting1.0

<210>1

<211>10133

<212>dna

<213>水稻(oryzasativa)

<400>1

atgtcaagggtacctaaatggaagatcgaaaaagcgaaagtcaaggtagtcttccggcta60

caattccacgctacaaatgtaagttgcaatacatttttgttgaagtcatttatgttcttt120

cttggtgtttgttcaatatttgtttcatccatgcttgaataatcttgacatgtgttcttg180

tttcttttgtagattccatcaacagggtgggacaagctatttttgtccttcatttctgct240

gatacgggaaaggtatctgcaaagacaaataaagcaaatgtgaggaatggaagttgcaaa300

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