C1,2位脱氢甾体化合物的精制方法和应用与流程

c1,2位脱氢甾体化合物的精制方法和应用
技术领域
1.本发明涉及化学合成技术领域，尤其是涉及一种c1,2位脱氢甾体化合物的精制方法和应用。


背景技术：

2.甾体药物具有很强的抗感染、抗过敏、抗病毒和抗休克等药理作用。随着时代的不断发展，甾体药物已经成为仅次于抗生素的第二大类药物。甾体激素类药物分类：肾上腺皮质激素，包括氢化可的松，强的松等，可治疗阿狄森氏症，抗炎，抗过敏，抗休克的等；蛋白同化激素，其主要生理功能是抑制蛋白异化和促进蛋白合成，主要用于治疗蛋白质增加和合成不足引起的疾病；性激素，包括雌性激素、雄性激素和孕激素。
3.甾体药物母核a环c1,2位引入双键后，能成倍增加抗炎活性。目前，许多临床上常用重要甾体化合物的生产，特别是大多数具有抗炎能力的肾上腺皮质激素的生产均涉及c1,2位脱氢反应，如醋酸泼尼松等。甾体化合物的1,2位脱氢的方法一般包括化学法和微生物发酵法。化学法脱氢一般需要使用seo2，收率比较低，而且seo2对环境污染很大，目前已逐渐被生物法取代。微生物发酵法脱氢，现在应用较多的菌种是节杆菌，虽然避免了化学法的上述缺陷，但存在着底物浓度低、转化时间长、转化率和收率都比较低、分离纯化比较困难等缺点。在生物脱氢产物中往往包含众多杂质，尤其是c1,2位未脱氢杂质由于与脱氢产物性质接近，分子量相差很小，导致常规的硅胶柱分离方法和根据分子量分离的凝胶柱分离方法对于脱氢产物中的c1,2位未脱氢杂质的去除效果很不理想，因此，目前对c1,2位脱氢甾体化合物精制去除c1,2位未脱氢杂质仍然是一个难题。德国专利de1252677报道了醋酸泼尼松使用二氯乙烷结晶的精制工艺，但该工艺不仅收率低，只有75％，而且精制中需要使用大量的一类溶剂二氯乙烷，给环境和人员健康造成威胁。
4.有鉴于此，特提出本发明。


技术实现要素：

5.本发明的主要目的在于提供一种c1,2位脱氢甾体化合物的精制方法和应用，以期至少部分地解决上述技术问题中的至少之一。
6.作为本发明的第一个方面，本发明提供了一种c1,2位脱氢甾体化合物的精制方法，包括如下步骤：
7.将式i化合物在酸性条件下用氧化剂处理，得到精制后的式i化合物，所述式i化合物的结构式如下：
[0008][0009]
其中，式i化合物结构式中所示的r1、r2、r3、r4、r5和r6彼此独立地选择，且：
[0010]
r1＝h、甲基或卤素，卤素＝f、cl、br或i；
[0011]
r2＝h或卤素，卤素＝f、cl、br或i；
[0012]
r3＝h、羰基或oh；
[0013]
或，r2，
[0014]
r4＝h、oh或甲基；
[0015]
r5＝h、oh、r7、or7、ocor7或ocoor7，r7为六个碳以内的烷基；
[0016]
r6＝coch2oh、coch2ocor8、ocor8、cor8，r8为六个碳以内的烷基。
[0017]
本发明中式i化合物由式ii化合物的母核a环c1,2位引入双键后得到的，所述式ii化合物的结构式如下：
[0018][0019]
其中，式ii化合物结构式中所示的r1、r2、r3、r4、r5和r6彼此独立地选择，且：
[0020]
r1＝h、甲基或卤素，卤素＝f、cl、br或i；
[0021]
r2＝h或卤素，卤素＝f、cl、br或i；
[0022]
r3＝h、羰基或oh；
[0023]
或，r2，
[0024]
r4＝h、oh或甲基；
[0025]
r5＝h、oh、r7、or7、ocor7或ocoor7，r7为六个碳以内的烷基；
[0026]
r6＝coch2oh、coch2ocor8、ocor8、cor8，r8为六个碳以内的烷基。
[0027]
现有生物脱氢工艺并不能使式ii化合物的母核a环c1,2位完全脱氢，脱氢产物式i化合物与式ii化合物性质接近，且分子量相差很小，使得c1,2位未脱氢的式ii化合物成为式i化合物的杂质之一。此外，脱氢产物式i化合物中的杂质包括但不限于式ii化合物。采用现有技术中的精制方法并不理想。
[0028]
本发明通过化学法对式i化合物进行精制提纯，在酸性条件下，氧化剂选择性与c1,2位未脱氢杂质及其他杂质反应，使杂质被破坏，随母液被除去，从而达到除杂而不引进新杂质的效果，不仅降低了c1,2位未脱氢杂质及其他杂质在产品中的含量，提高了产品质量。此外，无需反复精制操作，缩短了工序步骤，降低了处理成本。
[0029]
进一步的，式i化合物结构式中所示的r1、r2、r3、r4、r5和r6彼此独立地选择，且：
[0030]
r1＝h、甲基或卤素，卤素＝f；
[0031]
r2＝h或卤素，卤素＝f；
[0032]
r3＝h、羰基或oh；
[0033]
或，r2，
[0034]
r4＝h或甲基；
[0035]
r5＝h、oh或ocor7，r7为四个碳以内的烷基；
[0036]
r6＝coch2oh、coch2ocor8、ocor8、cor8，r8为四个碳以内的烷基。
[0037]
进一步的，将式i化合物加入溶剂中，用酸试剂调节至酸性，在一定温度下加入氧化剂反应，得到精制后的式i化合物。
[0038]
进一步的，将式i化合物加入溶剂中，用酸试剂调节ph＝2-5，在0-20℃加入氧化剂反应，得到精制后的式i化合物。
[0039]
在本发明中，反应的典型但非限制性的ph例如可以为2、2.2、2.4、2.6、2.8、3、3.2、3.4、3.6、3.8、4、4.2、4.4、4.6、4.8或5；反应的典型但非限制性的温度例如可以为0℃、1℃、2℃、3℃、4℃、5℃、6℃、7℃、8℃、9℃、10℃、11℃、12℃、13℃、14℃、15℃、16℃、17℃、18℃、19℃或20℃。
[0040]
进一步的，所述氧化剂选自次氯酸盐或双氧水。
[0041]
进一步的，所述酸试剂选自有机酸。
[0042]
进一步的，所述溶剂选自低级醇类溶剂、氯代烃类溶剂、酯类溶剂或酮类溶剂中的一种或几种的组合。
[0043]
进一步的，所述氧化剂选自次氯酸盐，所述次氯酸盐选自次氯酸钠、次氯酸钙或次氯酸锌。
[0044]
进一步的，所述酸试剂选自甲酸、乙酸或丁二酸。
[0045]
进一步的，所述低级醇类溶剂选自c1-c3的醇类溶剂。
[0046]
进一步的，所述氯代烃类溶剂选自氯仿或二氯甲烷。
[0047]
进一步的，所述酯类溶剂选自乙酸乙酯、乙酸甲酯或乙酸正丁酯中的一种或几种的组合。
[0048]
进一步的，所述酮类溶剂选自丙酮、甲乙酮、甲基异丁基酮、环己酮或丁酮中的一
种或几种的组合。
[0049]
本发明式i化合物中c1,2位未脱氢杂质的含量与式i化合物的合成路线有关，因合成路线的不同c1,2位未脱氢杂质的含量有所不同，一般约为1.5％～2.5％。可根据式i化合物中c1,2位未脱氢杂质的含量调整氧化剂的加入量，因此，本发明对氧化剂的加入量不再做具体性限定，只要采用本发明所述的精制方法去除c1,2位未脱氢杂质和其他杂质，均落在本发明的保护范围内。
[0050]
作为本发明的第二个方面，本发明还提供了上述精制方法在制备c1,2位脱氢甾体化合物中的应用。
[0051]
进一步的，所述c1,2位脱氢甾体化合物经c1,2位未脱氢甾体化合物的c1,2位脱氢得到；所述c1,2位脱氢甾体化合物选自泼尼松、甲基泼尼松龙醋酸酯、甲基强的松龙、醋酸泼尼松、泼尼松龙、泼尼松龙戊酸酯、迪普罗酮、醋酸异氟泼尼松、17-乙酸勃地酮、醋酸泼尼松龙环氧或双氟可龙戊酸酯。
[0052]
进一步的，所述c1,2位脱氢甾体化合物选自泼尼松或醋酸泼尼松。
[0053]
本发明中c1,2位脱氢甾体化合物包括但不限于上述化合物。
[0054]
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0055]
(1)本发明通过化学法对式i化合物进行精制提纯，在酸性条件下，氧化剂选择性与c1,2位未脱氢杂质及其他杂质反应，使杂质被破坏，随母液被除去，从而达到除杂而不引进新杂质的效果，大大降低了c1,2位未脱氢杂质及其他杂质在产品中的含量，提高了产品质量。通过本发明方法精制后可将总杂质hplc含量降至0.2％以下，其中c1,2位未脱氢杂质hplc含量降至0.05％以下，符合国际标准。此外，本发明方法无需反复精制操作，缩短了工序步骤，降低了处理成本。
[0056]
(2)本发明将上述精制方法用于制备c1,2位脱氢甾体化合物，提高了产品质量，且无需反复精制操作，缩短了工序步骤，降低了处理成本。
附图说明
[0057]
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0058]
图1为实施例4-1中精制后醋酸泼尼松的hplc谱图；
[0059]
图2为实施例4-1中精制前醋酸泼尼松(粗品)的hplc谱图。
具体实施方式
[0060]
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0061]
为了有助于更清楚的理解本发明，下面将结合实施例对本发明的技术方案进行进一步地说明。
[0062]
实施例中所用的精制前的c1,2位脱氢甾体化合物，如泼尼松粗品、甲基泼尼松龙醋酸酯粗品、甲基强的松龙粗品、醋酸泼尼松粗品、泼尼松龙粗品、泼尼松龙戊酸酯粗品、迪普罗酮粗品、醋酸异氟泼尼松粗品、17-乙酸勃地酮粗品、醋酸泼尼松环氧粗品以及双氟可龙戊酸酯粗品均来自天津药业研究院股份有限公司自制，其中c1,2位未脱氢杂质hplc含量约为1.5％～2.5％。
[0063]
实施例1泼尼松的精制
[0064]
在反应瓶中加入二氯甲烷400ml、丙酮400ml、泼尼松粗品100g，降温至10℃，加入乙酸调节ph＝4，滴加8％次氯酸钠溶液115ml，在10℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加10％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的泼尼松97.5g，收率97.5％。hplc纯度99.87％，c1,2位未脱氢杂质0.03％，总杂质0.13％。
[0065]
实施例2甲基泼尼松龙醋酸酯的精制
[0066]
在反应瓶中加入乙酸乙酯1000ml、甲基泼尼松龙醋酸酯粗品100g，降温至0℃，加入乙酸调节ph＝3，滴加10％次氯酸钠溶液120ml，在0℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加8％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的甲基泼尼松龙醋酸酯97.4g，收率97.4％。hplc纯度99.87％，c1,2位未脱氢杂质0.04％，总杂质0.13％。
[0067]
实施例3甲基强的松龙的精制
[0068]
在反应瓶中加入乙醇1000ml、甲基强的松龙粗品100g，降温至20℃，加入甲酸调节ph＝5，加入次氯酸钙22g，在20℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加12％硫代硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的甲基强的松龙97.3g，收率97.3％。hplc纯度99.80％，c1,2位未脱氢杂质0.05％，总杂质0.20％。
[0069]
实施例4醋酸泼尼松的精制
[0070]
实施例4-1
[0071]
在反应瓶中加入氯仿500ml、甲醇200ml、醋酸泼尼松粗品100g，降温至10℃，加入冰乙酸调节ph＝4，滴加8％次氯酸钠溶液115ml，在10℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加10％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的醋酸泼尼松97.9g，收率97.9％。hplc纯度99.97％，c1,2位未脱氢杂质未检出，总杂质0.03％。
[0072]
实施例4-2
[0073]
在反应瓶中加入乙酸乙酯1000ml、醋酸泼尼松粗品100g，降温至0℃，加入冰乙酸调节ph＝3，滴加10％次氯酸钠溶液120ml，在0℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加8％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的醋酸泼尼松97.4g，收率97.4％。hplc纯度99.96％，c1,2位未脱氢杂质未检出，总杂质0.04％。
[0074]
实施例4-3
[0075]
在反应瓶中加入丙酮1000ml、醋酸泼尼松粗品100g，降温至20℃，加入甲酸调节ph＝5，加入次氯酸钙22g，在20℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加12％硫代硫酸
钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的醋酸泼尼松97.3g，收率97.3％。hplc纯度99.95％，c1,2位未脱氢杂质未检出，总杂质0.05％。
[0076]
实施例4-4
[0077]
在反应瓶中加入二氯甲烷500ml、乙醇500ml、醋酸泼尼松粗品100g，降温至5℃，加入甲酸酸调节ph＝2，加入次氯酸锌30g，在5℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加10％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的醋酸泼尼松97.5g，收率97.5％。hplc纯度99.96％，c1,2位未脱氢杂质未检出，总杂质0.04％。
[0078]
实施例4-5
[0079]
在反应瓶中加入乙醇1000ml、醋酸泼尼松粗品100g，降温至8℃，加入丁二酸调节ph＝1，滴加30％双氧水17ml，在8℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加8％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的醋酸泼尼松96.8g，收率96.8％。hplc纯度99.96％，c1,2位未脱氢杂质未检出，总杂质0.04％。
[0080]
实施例4-6
[0081]
在反应瓶中加入丙酮1000ml、醋酸泼尼松粗品100g，降温至15℃，加入丁二酸调节ph＝6，滴加30％双氧水20ml，在15℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加12％硫代硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的醋酸泼尼松97.0g，收率97.0％。hplc纯度99.95％，c1,2位未脱氢杂质未检出，总杂质0.05％。
[0082]
实施例5泼尼松龙的精制
[0083]
在反应瓶中加入二氯甲烷1000ml、泼尼松龙粗品100g，降温至5℃，加入甲酸调节ph＝2，加入次氯酸锌30g，在5℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加10％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的泼尼松龙97.2g，收率97.2％。hplc纯度99.85％，c1,2位未脱氢杂质0.04％，总杂质0.15％。
[0084]
实施例6泼尼松龙戊酸酯的精制
[0085]
在反应瓶中加入乙醇1000ml、泼尼松龙戊酸酯粗品100g，降温至8℃，加入丁二酸调节ph＝1，滴加30％双氧水17ml，在8℃反应，hplc监测至c1,2位未脱氢杂质。滴加8％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的泼尼松龙戊酸酯96.5g，收率96.5％。hplc纯度99.84％，c1,2位未脱氢杂质0.05％，总杂质0.16％。
[0086]
实施例7迪普罗酮的精制
[0087]
在反应瓶中加入乙酸乙酯1000ml、迪普罗酮粗品100g，降温至15℃，加入丁二酸酸调节ph＝6，滴加滴加30％双氧水20ml，在15℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加12％硫代硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的迪普罗酮96.8g，收率96.8％。hplc纯度99.86％，c1,2位未脱氢杂质0.04％，总杂质0.14％。
[0088]
实施例8醋酸异氟泼尼松的精制
[0089]
在反应瓶中加入乙酸乙酯800ml、醋酸异氟泼尼松粗品100g，降温至10℃，加入乙酸调节ph＝4，滴加8％次氯酸钠溶液，在10℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加10％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的醋酸异氟泼尼松97.5g，收率97.5％。hplc纯度99.83％，c1,2位未脱氢杂质0.05％，总杂质0.17％。
[0090]
实施例917-乙酸勃地酮的精制
[0091]
在反应瓶中加入乙醇1000ml、17-乙酸勃地酮粗品100g，降温至20℃，加入甲酸调节ph＝5，加入次氯酸钙22g，在20℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加12％硫代硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的17-乙酸勃地酮97.3g，收率97.3％。hplc纯度99.85％，c1,2位未脱氢杂质0.03％，总杂质0.15％。
[0092]
实施例10醋酸泼尼松龙环氧的精制
[0093]
在反应瓶中加入乙醇1000ml、醋酸泼尼松环氧粗品100g，降温至15℃，加入丁二酸酸调节ph＝6，滴加30％双氧水20ml，在15℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加12％硫代硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的醋酸泼尼松环氧96.7g，收率96.7％。hplc纯度99.82％，c1,2位未脱氢杂质0.04％，总杂质0.18％。
[0094]
实施例11双氟可龙戊酸酯
[0095]
在反应瓶中加入丙酮400ml、乙醇400ml、双氟可龙戊酸酯粗品100g，降温至10℃，加入乙酸调节ph＝4，滴加8％次氯酸钠溶液，在10℃反应，hplc监测至无c1,2位未脱氢杂质。滴加10％亚硫酸钠溶液，至淀粉碘化钾试纸不变蓝。减压浓缩，加纯化水，降温至15℃析晶1h，过滤得滤饼，干燥至恒重，得精制后的双氟可龙戊酸酯97.6g，收率97.6％。hplc纯度99.84％，c1,2位未脱氢杂质0.05％，总杂质0.16％。
[0096]
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。