本发明涉及从新疆一枝蒿中分离得到的单体化合物一枝蒿酮酸及以它为母体化合物所合成的一系列2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺类衍生物，经活性检测发现部分化合物具有抗甲型流感病毒(h1n1和h3n2)感染的药物用途。
背景技术：
菊科植物新疆一枝蒿(artemisiarupestrisl.)在新疆民间用药历史悠久，具有抗炎、抗过敏、抗菌、抗癌、增强免疫力、解蛇毒、保肝、抗氧化等活性。目前对新疆一枝蒿的研究主要侧重于其化学成分的鉴定，而且有几种以一枝蒿为主要成分的复方制剂已经上市。由新疆银朵兰维药股份有限公司生产的复方一枝蒿颗粒(国药准字z20026711)主要用于解毒利咽，感冒，发烧，咽喉肿痛。其成份主要为一枝蒿，大青叶，板蓝根。
一枝蒿酮酸(rupestonicacid)是从新疆一枝蒿中分离出的一种含多官能团的倍半萜类化合物，本课题组率先对其进行了初步的抗甲、乙型流感病毒和单纯i、ii型疱疹病毒活性研究，结果表明此化合物对乙型流感病毒具有一定的抑制活性。
中国专利[cn201110213499.0]一种合成一枝蒿酮酸异噁唑酰胺类衍生物的方法，此类衍生物中n-[3-(4-氟苯基)-异噁唑-5-基]-甲基-一枝蒿酮酸酰胺(cam106)具有较好的抗甲型流感病毒感染的药物用途，其结构式为：
在此基础上进一步研究表明化合物cam106具有广谱的抗流感病毒活性和独特的抗流感病毒作用机制，通过上调宿主细胞的血红素加氧酶-1(hemeoxygenase-1)而发挥作用，其抗流感作用不仅与抗炎抗氧化有关，而且显示了对先天免疫应答的调节作用。
卤代芳环是一类具有广泛生物活性的分子结构，在药物分子中引入卤代芳环可以改变药物分子与受体结合的性质。中国专利[cn201710377511.9]一种合成2-取代一枝蒿酮酸甲酯类衍生物的方法，此类衍生物中部分化合物具有抗甲、乙型流感病毒感染的药物用途。
本发明将卤代芳环引入到一枝蒿酮酸异噁唑酰胺分子中，合成了一系列2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺类衍生物，反应条件温和，实验步骤简捷。
参考文献：
赵江瑜,阿吉艾克拜尔·艾萨.有机化学,2012,2:333-337.
阿吉艾克拜尔·艾萨,赵江瑜.cn201110213499.0.
mal.l.,wangh.q.,wup.,etal.freeradic.bio.med.,2016,96:347-361.
黄国正，王新诚，赵江瑜,阿吉艾克拜尔·艾萨.cn201710377511.9
obulm.,wangx.c.,zhaoj.y.,etal.mol.divers.,2019,23:1-9.
技术实现要素：
本发明的目的在于，提供一种2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺类衍生物及其制备方法和用途，该类衍生物是由一枝蒿酮酸和硫酸二甲酯合成一枝蒿酮酸甲酯后，在强碱二异丙基氨基锂的作用下，和不同取代苄基溴反应，合成而得衍生物3a-3w，然后在氢氧化锂条件下脱甲酯，得到2-取代一枝蒿酮酸衍生物4a-4w，在碱性条件下，与3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑反应而得一系列2-取代一枝蒿酮酸异噁唑酰胺类衍生物5a-5w，并对所合成的衍生物5a-5w进行了初步的体外抗甲型流感病毒(h3n2,h1n1)活性测试。实验结果表明：本发明所述的衍生物具备抗甲型流感病毒(h1n1,n3n2)的药物中的用途。该方法反应条件温和，实验步骤简捷。
本发明所述的一种2-取代一枝蒿酮酸异噁唑酰胺衍生物，该类衍生物的结构通式为(ⅰ)：
其中r为：苄基、2-氟苄基、3-氟苄基、4-氟苄基、2-氯苄基、3-氯苄基、4-氯苄基、2-溴苄基、3-溴苄基、4-溴苄基、2-碘苄基、3-碘苄基、4-碘苄基、2,3-二氟苄基、2,4-二氟苄基、2,5-二氟苄基、2,6-二氟苄基、3,4-二氟苄基、3,5-二氟苄基、2-三氟甲基苄基、3-三氟甲基苄基、4-三氟甲基苄基或3,5-双三氟甲基苄基。
所述2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺衍生物的制备方法，按下列步骤进行：
a、将一枝蒿酮酸溶于二氯甲烷中，然后将碳酸钾加入到反应体系中，再滴加硫酸二甲酯，加热回流3h，冷却后过滤不溶物，滤液用氨水去除剩余的硫酸二甲酯，分液，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥，去除二氯甲烷后，得到粗产物，将粗产物经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得一枝蒿酮酸甲酯；
b、将步骤a得到的一枝蒿酮酸甲酯，溶于干燥的四氢呋喃中，在温度-78℃下搅拌5分钟，将二异丙基氨基锂滴加到反应体系中，在温度-78℃下搅拌1小时，再将不同取代苄基溴滴加到反应体系中，温度-78℃下搅拌30分钟，自然升至室温，然后在室温下搅拌2小时，反应结束后，加入饱和氯化铵溶液，去除四氢呋喃，加入乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比10:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得2-取代一枝蒿酮酸甲酯3a-3w；
c、将步骤b得到的2-取代一枝蒿酮酸甲酯3a-3w溶解于四氢呋喃和水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入乙酸乙酯和水，分液，水相用盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得2-取代一枝蒿酮酸衍生物4a-4w；
d、将步骤c得到的2-取代一枝蒿酮酸4a-4w溶于干燥的四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得2-取代一枝蒿酮酸异噁唑酰胺衍生物5a-5w，其各名称为：
5a为n-[3'-(对氟苯基)-异噁唑-5'-基]-甲基-[2-(苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5b为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5c为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5d为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5e为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5f为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5g为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5h为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5i为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5j为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5k为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5l为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5m为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5n为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',3'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5o为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',4'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5p为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',5'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5q为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',6'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5r为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',4'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5s为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',5'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5t为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5u为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5v为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺；
5w为n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',5'-双三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺。
所述2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺衍生物在制备抗甲型流感病毒h1n1和h3n2药物中的用途。
所述2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺衍生物中5f、5g、5h、5k、5l、5m、5q、5r、5s和5u在制备抗甲型流感病毒h1n1药物中的用途。
所述2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺衍生物中5a、5b、5c、5f、5g、5i、5k、5l、5m、5n、5o、5p、5q和5v在制备抗甲型流感病毒h3n2药物中的用途。
本发明所述的2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺衍生物及其制备方法和用途，其合成路线如下：
其中r为：苄基、2-氟苄基、3-氟苄基、4-氟苄基、2-氯苄基、3-氯苄基、4-氯苄基、2-溴苄基、3-溴苄基、4-溴苄基、2-碘苄基、3-碘苄基、4-碘苄基、2,3-二氟苄基、2,4-二氟苄基、2,5-二氟苄基、2,6-二氟苄基、3,4-二氟苄基、3,5-二氟苄基、2-三氟甲基苄基、3-三氟甲基苄基、4-三氟甲基苄基或3,5-双三氟甲基苄基。
本发明所述的2-取代的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺衍生物及其制备方法和用途，将所合成的衍生物5a-5w进行了初步的体外抗甲型流感病毒(h3n2,h1n1)活性测试。实验结果表明：对于h1n1亚型，部分化合物表现出了较好的活性，其中化合物5f(ic50＝2.62μm)、5g(ic50＝3.77μm)、5l(ic50＝2.24μm)、5q(ic50＝3.76μm)和5u(ic50＝4.57μm)具有比阳性对照(达菲ic50＝4.75μm和淋巴韦林ic50＝5.45μm)更好的活性，尤其是化合物5u(si＝10)对甲型流感病毒h1n1亚型的选择性最好；对于甲型流感病毒h3n2亚型，大部分化合物表现出了对其活性，其中化合物5a(ic50＝4.02μm)、5b(ic50＝3.89μm)、5c(ic50＝3.89μm)、5f(ic50＝3.77μm)、5g(ic50＝3.39μm)、5i(ic50＝3.49μm)、5l(ic50＝3.23μm)、5m(ic50＝5.58μm)、5o(ic50＝1.13μm)、5p(ic50＝0.88μm)、5q(ic50＝3.76μm)和5v(ic50＝3.55μm)具有比阳性对照(达菲ic50＝6.02μm和淋巴韦林ic50＝5.86μm)较好的活性。尤其是化合物5o和5p具有与母体化合物cam106(ic50＝2.53μm)相当的抗h3n2流感病毒活性。
具体实施方式
依据实施例对本发明进一步说明，但本发明不仅限于这些实施例。
试剂：一枝蒿酮酸按常规方法分离，纯度：99％,hplc检测，其余的试剂均为市售的分析纯。
实施例1
n-[3'-(对氟苯基)-异噁唑-5'-基]-甲基-[2-(苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5a)的制备：
a、称取一枝蒿酮酸(1)100mg(0.4mmol)溶于20ml二氯甲烷中，然后将碳酸钾111mg(0.8mmol)加入到反应体系中，再滴加硫酸二甲酯76μl(0.8mmol)，加热回流3h，冷却后过滤不溶物，滤液用氨水去除剩余的硫酸二甲酯，分液，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥，去除二氯甲烷后，得到粗产物，将粗产物经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得93mg一枝蒿酮酸甲酯(2)纯品，产率89％；
b、将步骤a得到的一枝蒿酮酸甲酯(2)90mg(0.345mmol)溶于干燥的四氢呋喃10ml中，在温度-78℃下搅拌5分钟，然后将二异丙基氨基锂828μl(0.414mmol，0.5m四氢呋喃溶液)滴加到反应体系中，在温度-78℃下搅拌1小时，然后将苄基溴0.414mmol溶于干燥的2ml四氢呋喃中，再滴加到反应体系，在温度-78℃下搅拌30分钟，自然升至室温，然后在室温下搅拌2小时，反应结束后，加入1ml饱和氯化铵溶液，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比10:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得75mg2-苄基一枝蒿酮酸甲酯(3a)纯品，产率62％；
c、将步骤b得到的(3a)2-苄基一枝蒿酮酸甲酯70mg(0.200mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂24mg(1.000mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得64mg2-苄基一枝蒿酮酸(4a)纯品，产率95％；
核磁数据1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.30–7.18(m,5h),6.36(s,1h),5.72(s,1h),3.24(dd,j＝13.5,4.1hz,1h),2.86–2.77(m,3h),2.50–2.37(m,2h),2.30–2.24(m,1h),1.75–1.68(m,1h),1.64(s,3h),1.61–1.46(m,4h),0.57(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ209.17,173.29,171.26,145.45,139.76,136.52,128.82,128.42,126.24,125.70,52.92,52.74,38.14,37.64,37.58,36.38,34.39,31.63,29.69,12.60,8.15；
d、将步骤c得到的(4a)2-苄基一枝蒿酮酸59mg(0.175mmol溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯133mg(0.350mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺45mg(0.350mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑50mg(0.262mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得79mg目标化合物(5a)n-[3'-(对氟苯基)-异噁唑-5'-基]-甲基-[2-(苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率88％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.72(dd,j＝7.6,5.3hz,2h),7.24–7.21(m,2h),7.17(d,j＝7.6hz,3h),7.13–7.07(m,2h),6.69(t,j＝5.7hz,1h),6.47(s,1h),5.58(s,1h),5.36(s,1h),4.63(d,j＝6.0hz,2h),3.19(dd,j＝13.4,3.9hz,1h),2.88–2.78(m,3h),2.45–2.34(m,2h),2.25–2.18(m,1h),1.71–1.65(m,1h),1.60(s,3h),1.58–1.43(m,4h),0.53(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ209.13,173.44,169.32,169.02,165.05,162.57,161.72,150.89,139.72,136.36,128.79,128.72,128.63,128.42,126.24,116.18,116.02,115.96,100.39,52.94,52.69,38.39,37.97,37.55,36.26,35.41,34.35,31.33,12.54,8.12。
实施例2
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5b)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备72mg2-(2'-氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3b)，产率56％；
将得到的(3b)2-(2'-氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯67mg(0.180mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂22mg(0.9mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得61mg2-(2'-氟苄基)-一枝蒿酮酸(4b)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.24–7.15(m,2h),7.07–6.99(m,2h),6.36(s,1h),5.72(s,1h),3.22(dd,j＝13.6,4.5hz,1h),2.88–2.77(m,3h),2.57(dd,j＝13.7,10.3hz,1h),2.42(dd,j＝19.5,12.1hz,1h),2.34–2.29(m,1h),1.75–1.69(m,1h),1.64(s,3h),1.62–1.46(m,4h),0.58(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.83,173.37,171.53,162.39/159.96,145.59,136.46,131.28/131.24,128.09/128.01,126.75/126.60,125.60,124.09/124.06,115.37/115.15,52.81,51.53,38.13,37.73,36.44,34.44,31.64,30.38,12.57,8.15；
将得到的(4b)2-(2'-氟苄基)-一枝蒿酮酸56mg(0.157mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯119mg(0.313mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺40mg(0.313mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑45mg(0.235mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得71mg目标化合物(5b)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率85％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.73(m,2h),7.23–7.15(m,2h),7.13(t,j＝8.6hz,2h),7.06–6.97(m,2h),6.49(s,1h),6.43(t,j＝5.8hz,1h),5.57(s,1h),5.39(s,1h),4.66(d,j＝6.0hz,2h),3.22(dd,j＝13.6,4.3hz,1h),2.90–2.85(m,1h),2.84–2.80(m,2h),2.52(dd,j＝13.5,10.6hz,1h),2.42(dd,j＝19.9,12.3hz,1h),2.32–2.27(m,1h),1.73–1.68(m,1h),1.62(s,3h),1.60–1.47(m,4h),0.56(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.53,172.90,169.07,168.92,165.09,162.60,162.38,161.76,159.95,151.07,136.43,131.25,128.65,127.99,126.62,124.04,116.17,115.96,115.35,115.13,100.45,52.74,51.44,38.64,37.92,36.35,35.38,34.41,31.37,30.41,12.51,8.13。
实施例3
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5c)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备66mg2-(3'-氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3c)，产率52％；
将得到的(3c)2-(3'-氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯61mg(0.166mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂20mg(0.830mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化(ph≈3)，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥。再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得56mg2-(3'-氟苄基)-一枝蒿酮酸(4c)纯品，产率95％；核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.24–7.20(m,1h),7.01–6.97(m,1h),6.96–6.86(m,2h),6.37(s,1h),5.73(s,1h),3.22(dd,j＝13.5,4.1hz,1h),2.87–2.77(m,3h),2.50–2.37(m,2h),2.28–2.23(m,1h),1.76–1.69(m,1h),1.64(s,3h),1.62–1.42(m,4h),0.58(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.82,173.45,171.55,164.04/161.59,145.51,142.41/142.34,136.58,129.90/129.82,125.68/125.63,124.53/124.51,115.71/115.50,113.32/113.11,52.75,52.58,38.16,37.66,37.23,36.39,34.46,31.58,12.59,8.11；
将得到的(4c)2-(3'-氟苄基)-一枝蒿酮酸51mg(0.144mmol)放入烧瓶中，溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯109mg(0.288mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺37mg(0.288mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑41mg(0.215mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得63mg目标化合物(5c)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率82％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.76–7.71(m,2h),7.23–7.18(m,1h),7.14–7.09(m,2h),6.97(d,j＝7.7hz,1h),6.93–6.84(m,2h),6.53(t,j＝6.0hz,1h),6.48(s,1h),5.58(s,1h),5.38(s,1h),4.65(d,j＝6.0hz,2h),3.19(dd,j＝13.5,4.1hz,1h),2.88–2.77(m,3h),2.46–2.40(m,1h),2.40–2.36(m,1h),2.24–2.18(m,1h),1.72–1.67(m,1h),1.61(s,3h),1.59–1.46(m,4h),0.55(d,j＝7.1hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.57,173.19,169.13,168.94,165.08,164.01,162.59,161.75/161.74,161.57,150.92,142.45/142.38,136.48,129.93/129.84,128.72/128.64,124.54/124.51,116.18,116.00/115.96,115.65,115.45,113.32,113.11,100.43,52.68,52.61,38.46,37.98,37.23,36.28,35.39,34.43,31.27,12.54,8.13。
实施例4
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5d)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备69mg2-(4'-氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3d)，产率54％；
将得到的(3d)2-(4'-氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯64mg(0.173mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂21mg(0.865mmol),在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得58mg2-(4'-氟苄基)-一枝蒿酮酸(4d)纯品，产率95％；
核磁数据如下：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.19–7.12(m,2h),6.99–6.91(m,2h),6.36(s,1h),5.71(s,1h),3.16(dd,j＝13.7,4.2hz,1h),2.85–2.76(m,3h),2.48(dd,j＝13.7,10.3hz,1h),2.41(dd,j＝19.4,11.8hz,1h),2.25–2.21(m,1h),1.76–1.65(m,2h),1.63(s,3h),1.60–1.49(m,3h),0.58(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.96,173.33,171.38,162.69/160.26,145.52,136.61,135.31/135.27,130.26/130.18,125.59/125.56,115.30,115.09,52.85,52.61,38.14,37.63,36.57,36.44,34.43,31.60,29.66,12.59,8.08.
将得到的(4d)2-(4'-氟苄基)-一枝蒿酮酸53mg(0.150mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯114mg(0.300mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺39mg(0.300mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑43mg(0.225mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得67mg目标化合物(5d)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率84％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.78–7.72(m,2h),7.18–7.10(m,4h),6.98–6.91(m,2h),6.52(t,j＝5.9hz,1h),6.49(s,1h),5.58(s,1h),5.39(s,1h),4.66(d,j＝5.9hz,2h),3.16(dd,j＝13.6,4.2hz,1h),2.87–2.77(m,3h),2.45–2.36(m,2h),2.22–2.17(m,1h),1.72–1.68(m,1h),1.61(s,3h),1.59–1.44(m,4h),0.56(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.80,173.16,168.96,165.09,162.65,161.75,160.23,150.95,136.51,135.35,130.24/130.16,128.73/128.64,116.20,115.98,115.33,115.12,100.43,52.91,52.56,38.39,37.94,36.60,36.32,35.40,34.41,31.31,12.55,8.11。
实施例5
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5e)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备60mg2-(2'-氯苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3e)，产率45％；
将得到的(3e)2-(2'-氯苄基)-一枝蒿酮酸甲酯55mg(0.142mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂17mg(0.710mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得50mg2-(2'-氯苄基)-一枝蒿酮酸(4e)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.34(dd,j＝7.3,2.0hz,1h),7.27(dd,j＝7.2,2.2hz,1h),7.20–7.12(m,2h),6.36(s,1h),5.72(s,1h),3.34(dd,j＝13.6,4.9hz,1h),2.89–2.76(m,3h),2.67(dd,j＝13.6,10.1hz,1h),2.47–2.39(m,2h),1.74–1.68(m,1h),1.65(s,3h),1.62–1.45(m,4h),0.59(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.77,173.10,171.49,145.57,137.51,136.49,134.02,131.24,129.58,127.76,126.76,125.63,52.56,50.76,38.15,37.78,36.39,34.57,34.27,31.68,12.52,8.16.
将得到的(4e)2-(2'-氯苄基)-一枝蒿酮酸45mg(0.122mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯93mg(0.244mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺31mg(0.244mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑35mg(0.183mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得57mg目标化合物n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5e)纯品，产率86％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.82–7.73(m,2h),7.37–7.32(m,1h),7.27–7.24(m,1h),7.22–7.08(m,4h),6.59–6.46(m,2h),5.59(s,1h),5.41(s,1h),4.67(dd,j＝6.0,1.8hz,2h),3.36(dd,j＝13.6,4.7hz,2h),2.92–2.81(m,3h),2.67–2.59(m,1h),2.48–2.38(m,2h),1.74–1.70(m,1h),1.65(s,3h),1.62–1.49(m,4h),0.59(dd,j＝7.1,1.5hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.63,172.91,168.96,165.08,162.59,161.75,151.03,137.47,136.45,133.98,131.28,129.56,128.73,128.64,127.77,126.76,116.18,115.94,100.42,52.49,50.61,38.58,37.94,36.28,35.37,34.23,31.38,30.92,12.49,8.16。
实施例6
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5f)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备77mg2-(3'-氯苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3f)，产率58％；
将得到的(3f)2-(3'-氯苄基)-一枝蒿酮酸甲酯72mg(0.187mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂22mg(0.935mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除有机溶剂，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，四氢呋喃有机相用无水硫酸钠干燥。再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得66mg2-(3'-氯苄基)-一枝蒿酮酸(4f)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.23–7.15(m,3h),7.11–7.08(m,1h),6.37(s,1h),5.73(s,1h),3.18(dd,j＝13.6,4.2hz,1h),2.86–2.78(m,3h),2.49–2.38(m,2h),2.26–2.21(m,1h),1.78–1.65(m,2h),1.64(s,3h),1.61–1.50(m,3h),0.59(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.67,173.29,171.48,145.46,141.86,136.61,134.17,129.66,128.88,127.02,126.51,125.73,52.76,52.55,38.16,37.68,37.18,36.39,34.47,31.54,12.60,8.11.
将得到的(4f)2-(3'-氯苄基)-一枝蒿酮酸61mg(0.164mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯125mg(0.328mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺42mg(0.328mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑47mg(0.247mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得74mg目标化合物(5f)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率82％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.78–7.71(m,2h),7.21–7.17(m,2h),7.17–7.05(m,4h),6.52–6.41(m,2h),5.57(s,1h),5.39(s,1h),4.65(d,j＝5.9hz,2h),3.17(dd,j＝13.6,4.1hz,1h),2.89–2.76(m,3h),2.46–2.34(m,2h),2.23–2.17(m,1h),1.79–1.63(m,2h),1.61(s,3h),1.57–1.47(m,3h),0.56(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.47,173.07,169.04,168.94,165.08,162.60,161.76,150.96,141.94,136.51,134.16,129.69,128.83,128.73,128.64,127.01,126.50,116.19,115.97,100.44,52.71,52.62,38.48,37.98,37.19,36.27,35.39,34.45,31.24,12.56,8.13。
实施例7
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5g)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备73mg2-(4'-氯苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3g)，产率55％；
将得到的(3g)2-(4'-氯苄基)-一枝蒿酮酸甲酯68mg(0.177mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂21mg(0.885mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得63mg2-(4'-氯苄基)-一枝蒿酮酸(4g)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.24–7.22(m,2h),7.16–7.12(m,2h),6.18(s,1h),5.60(s,1h),3.15(dd,j＝13.6,4.2hz,1h),2.83–2.75(m,3h),2.50–2.43(m,1h),2.42–2.33(m,1h),2.23–2.18(m,1h),1.74–1.63(m,2h),1.62(s,3h),1.59–1.48(m,3h),0.57(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.64,173.33,167.26,146.05,138.26,136.52,131.98,130.21,128.53,123.30,52.67,52.58,38.17,37.92,36.77,36.43,34.47,31.63,12.60,8.13.
将得到的(4g)2-(4'-氯苄基)-一枝蒿酮酸58mg(0.155mmol)放入烧瓶中，溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯118mg(0.310mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺40mg(0.310mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑45mg(0.232mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得76mg目标化合物(5g)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-氯苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率90％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.81–7.73(m,2h),7.24(d,j＝1.9hz,1h),7.20–7.10(m,4h),6.50(s,1h),6.41–6.32(m,1h),5.58(s,1h),5.41(s,1h),4.68(d,j＝5.8hz,2h),3.17(dd,j＝13.5,4.2hz,1h),2.91–2.77(m,3h),2.50–2.36(m,2h),2.26–2.17(m,2h),1.78–1.69(m,1h),1.64(s,4h),1.59–1.49(m,6h),0.58(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.52,172.93,168.98,168.91,165.12,162.64,161.79,151.05,138.27,136.58,132.03,130.21,128.75,128.67,128.57,116.21,115.99,115.90,100.45,52.72,52.60,38.50,37.94,36.79,36.37,35.41,34.45,31.33,12.56,8.13。
实施例8
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5h)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备70mg2-(2'-溴苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3h)，产率47％；
将得到的(3h)2-(2'-溴苄基)-一枝蒿酮酸甲酯65mg(0.151mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂18mg(0.755mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得60mg2-(2'-溴苄基)-一枝蒿酮酸(4h)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.53(d,j＝7.9hz,1h),7.29–7.25(m,1h),7.24–7.20(m,1h),7.09–7.04(m,1h),6.35(s,1h),5.72(s,1h),3.34(dd,j＝13.6,4.9hz,1h),2.92–2.77(m,3h),2.69(dd,j＝13.6,10.1hz,1h),2.50–2.46(m,1h),2.45–2.36(m,1h),1.75–1.69(m,1h),1.65(s,3h),1.64–1.48(m,4h),0.60(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.65,172.99,171.25,145.53,139.19,136.51,132.93,131.27,128.01,127.39,125.62,124.56,52.44,50.77,38.15,37.81,36.97,36.37,34.26,31.70,12.52,8.16.
将得到的(4h)2-(2'-溴苄基)-一枝蒿酮酸55mg(0.131mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯100mg(0.262mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺34mg(0.262mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑38mg(0.196mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得68mg目标化合物(5h)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率87％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.77–7.71(m,2h),7.51(d,j＝7.9hz,1h),7.24–7.22(m,1h),7.22–7.18(m,1h),7.15–7.09(m,2h),7.08–7.02(m,1h),6.51–6.42(m,2h),5.57(s,1h),5.38(s,1h),4.65(d,j＝5.9hz,2h),3.33(dd,j＝13.6,4.8hz,1h),2.90–2.79(m,3h),2.63(dd,j＝13.5,10.2hz,1h),2.49–2.35(m,2h),1.73–1.67(m,1h),1.62(s,3h),1.59–1.47(m,4h),0.57(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.55,172.87,169.09,168.94,165.08,162.59,161.75,151.04,139.14,136.47,132.91,131.31,128.73,128.64,128.02,127.39,124.88,124.85,124.51,116.18,115.96,115.95,52.39,50.61,38.60,37.94,37.00,36.26,35.39,34.21,31.40,12.50,8.18。
实施例9
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5i)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备89mg2-(3'-溴苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3i)，产率60％；
将得到的(3i)2-(3'-溴苄基)-一枝蒿酮酸甲酯84mg(0.195mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂23mg(0.975mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得77mg2-(3'-溴苄基)-一枝蒿酮酸(4i)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.38(s,1h),7.35–7.30(m,1h),7.16–7.12(m,2h),6.36(s,1h),5.73(s,1h),3.18(dd,j＝13.6,4.2hz,1h),2.86–2.78(m,3h),2.48–2.40(m,2h),2.26–2.20(m,1h),1.78–1.66(m,2h),1.64(s,3h),1.62–1.51(m,3h),0.59(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.63,173.28,171.43,145.49,142.17,136.61,131.80,129.97,129.43,127.47,125.70,122.44,52.78,52.56,38.17,37.70,37.15,36.39,34.48,31.54,12.61,8.11.
将得到的(4i)2-(3'-溴苄基)-一枝蒿酮酸72mg(0.174mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯132mg(0.348mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺45mg(0.348mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑50mg(0.260mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得86mg目标化合物(5i)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率84％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.78–7.71(m,2h),7.38–7.35(m,1h),7.34–7.29(m,1h),7.18–7.07(m,4h),6.51–6.40(m,2h),5.57(s,1h),5.39(s,1h),4.65(d,j＝5.9hz,2h),3.17(dd,j＝13.5,4.1hz,1h),2.89–2.77(m,3h),2.47–2.34(m,2h),2.22–2.17(m,1h),1.78–1.63(m,2h),1.61(s,3h),1.58–1.49(m,3h),0.56(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.43,173.05,169.02,168.93,165.09,162.60,161.76,150.97,142.25,136.52,131.75,130.00,129.42,128.73,128.64,127.47,124.87,124.84,122.45,116.19,116.00,100.45,52.73,52.63,38.51,37.99,37.17,36.27,35.39,34.45,31.23,12.57,8.13。
实施例10
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5j)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备77mg2-(3'-溴苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3j)，产率52％；
将得到的(3j)2-(3'-溴苄基)-一枝蒿酮酸甲酯65mg(0.168mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂20mg(0.840mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3)，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得66mg2-(4'-溴苄基)-一枝蒿酮酸(4j)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.39(d,j＝8.3hz,2h),7.09(d,j＝8.3hz,2h),6.36(s,1h),5.72(s,1h),3.14(dd,j＝13.7,4.2hz,1h),2.86–2.76(m,3h),2.50–2.37(m,2h),2.26–2.20(m,1h),1.76–1.65(m,2h),1.63(s,3h),1.61–1.47(m,3h),0.58(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.80,173.41,171.49,145.46,138.71,136.61,131.50,130.60,125.70,120.10,52.66,52.58,38.13,37.61,36.81,36.45,34.44,31.61,12.61,8.14.
将得到的(4j)2-(4'-溴苄基)-一枝蒿酮酸61mg(0.147mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯112mg(0.294mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺38mg(0.294mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑42mg(0.221mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得71mg目标化合物(5j)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-溴苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率81％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.79–7.70(m,2h),7.41–7.33(m,2h),7.16–7.04(m,4h),6.51–6.42(m,2h),5.57(s,1h),5.38(s,1h),4.65(d,j＝5.9hz,2h),3.13(dd,j＝13.6,4.1hz,1h),2.87–2.75(m,3h),2.45–2.36(m,2h),2.22–2.16(m,1h),1.77–1.63(m,2h),1.61(s,3h),1.56–1.44(m,3h),0.55(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.43,173.04,169.03,168.93,161.76,150.97,142.34,137.71,136.52,135.37,130.17,128.73,128.65,128.08,116.20,116.02,115.98,100.45,52.76,52.64,38.53,38.00,37.07,36.27,35.39,34.45,31.22,12.57,8.13。
实施例11
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5k)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备91mg2-(2'-碘苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3k)，产率55％；
将得到的(3k)2-(2'-碘苄基)-一枝蒿酮酸甲酯86mg(0.179mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂21mg(0.895mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得79mg2-(2'-碘苄基)-一枝蒿酮酸(4k)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.83–7.80(m,1h),7.28–7.24(m,2h),6.91–6.86(m,1h),6.18(s,1h),5.60(s,1h),3.30(dd,j＝13.7,5.0hz,1h),2.95–2.91(m,1h),2.86–2.78(m,2h),2.69(dd,j＝13.7,10.2hz,1h),2.48–2.36(m,2h),1.72–1.66(m,1h),1.64(s,3h),1.59–1.48(m,4h),0.59(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.49,173.12,167.25,146.18,142.40,139.67,136.44,130.43,128.25,128.14,123.25,100.74,52.23,50.89,41.36,38.20,38.07,36.31,34.28,31.74,12.55,8.18.
将得到的2-(2'-碘苄基)-一枝蒿酮酸(4k)74mg(0.160mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯121mg(0.320mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺41mg(0.320mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑46mg(0.240mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得82mg目标化合物(5k)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率80％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.82(d,j＝7.7hz,1h),7.80–7.74(m,2h),7.26–7.23(m,2h),7.18–7.12(m,2h),6.92–6.87(m,1h),6.50(s,1h),6.41(s,1h),5.59(s,1h),5.40(s,1h),4.67(d,j＝5.9hz,2h),3.31(dd,j＝13.7,4.9hz,1h),2.96–2.84(m,3h),2.68(dd,j＝13.7,10.2hz,1h),2.50–2.39(m,2h),1.75–1.70(m,1h),1.65(s,3h),1.62–1.51(m,4h),0.60(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.38,172.74,169.07,168.90,165.10,162.61,161.76,151.07,142.35,139.68,136.52,130.46,128.74,128.66,128.26,128.16,116.19,115.97,115.95,100.42,52.28,50.79,41.37,38.68,37.96,36.25,35.40,34.23,31.43,12.51,8.18。
实施例12
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5l)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备92mg2-(3'-碘苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3l)，产率56％；
将得到的(3l)2-(3'-碘苄基)-一枝蒿酮酸甲酯86mg(0.179mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂21mg(0.895mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得79mg2-(3'-碘苄基)-一枝蒿酮酸(4l)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.59(s,1h),7.53(d,j＝7.9hz,1h),7.18(d,j＝7.7hz,1h),7.00(t,j＝7.7hz,1h),6.37(s,1h),5.73(s,1h),3.15(dd,j＝13.6,4.1hz,1h),2.86–2.78(m,3h),2.47–2.37(m,2h),2.22(dd,j＝10.9,3.9hz,1h),1.77–1.65(m,2h),1.64(s,3h),1.62–1.51(m,3h),0.58(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.64,173.29,171.48,145.49,142.26,137.77,136.61,135.39,130.14,128.09,125.73,94.38,52.79,52.57,38.17,37.71,37.04,36.39,34.47,31.53,12.62,8.12.
将得到的(4l)2-(3'-碘苄基)-一枝蒿酮酸74mg(0.160mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯121mg(0.320mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺41mg(0.320mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑46mg(0.240mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得89mg目标化合物(5l)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率85％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.79–7.71(m,2h),7.58(s,1h),7.52(d,j＝7.8hz,1h),7.19–7.09(m,3h),6.99(t,j＝7.7hz,1h),6.51–6.39(m,2h),5.57(s,1h),5.39(s,1h),4.66(d,j＝5.9hz,2h),3.14(dd,j＝13.5,4.0hz,1h),2.88–2.76(m,3h),2.46–2.31(m,2h),2.22–2.14(m,1h),1.74–1.64(m,2h),1.61(s,3h),1.58–1.49(m,3h),0.56(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.56,173.08,169.03,168.92,165.09,162.60,161.76,150.95,138.77,136.53,131.50,130.59,128.73,128.64,120.07,116.20,115.98,115.95,100.44,52.63,52.58,38.42,37.93,36.83,36.34,35.39,34.43,31.29,12.55,8.13。
实施例13
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5m)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备89mg2-(4'-碘苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3m)，产率54％；
将得到的(3m)2-(4'-碘苄基)-一枝蒿酮酸甲酯86mg(0.179mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂21mg(0.895mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得79mg2-(4'-碘苄基)-一枝蒿酮酸(4m)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.58(d,j＝8.2hz,2h),6.97(d,j＝8.2hz,2h),6.34(s,1h),5.70(s,1h),3.13(dd,j＝13.6,4.2hz,1h),2.86–2.76(m,3h),2.48–2.40(m,2h),2.25–2.20(m,1h),1.77–1.65(m,2h),1.63(s,3h),1.61–1.49(m,3h),0.58(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.80,173.49,171.48,145.71,139.42,137.46,136.58,130.94,125.37,91.50,52.69,52.55,38.14,37.63,36.92,36.46,34.44,31.63,12.61,8.16.
将得到的(4m)2-(4'-碘苄基)-一枝蒿酮酸74mg(0.160mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯121mg(0.320mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺41mg(0.320mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑46mg(0.240mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得87mg目标化合物(5m)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-碘苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率87％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.78–7.72(m,2h),7.57(d,j＝8.0hz,2h),7.13(t,j＝8.6hz,2h),6.95(d,j＝8.0hz,2h),6.48(s,1h),6.44(t,j＝6.1hz,1h),5.57(s,1h),5.38(s,1h),4.65(d,j＝5.9hz,2h),3.11(dd,j＝13.6,4.1hz,1h),2.88–2.74(m,3h),2.45–2.34(m,2h),2.22–2.16(m,1h),1.75–1.62(m,2h),1.61(s,3h),1.58–1.46(m,3h),0.55(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.54,173.08,169.03,168.92,165.09,162.60,161.76,150.96,139.44,137.46,136.53,130.93,128.73,128.65,116.20,115.98,115.95,100.45,53.42,52.60,38.43,37.93,36.94,36.34,35.40,34.43,31.29,12.55,8.13。
实施例14
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',3'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5n)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备80mg2-(2',3'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3n)，产率60％；
将得到的(3n)2-(2',3'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯75mg(0.194mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂23mg(0.970mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得69mg2-(2',3'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸(4n)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.05–6.96(m,3h),6.36(s,1h),5.73(s,1h),3.23(dd,j＝13.8,3.8hz,1h),2.89–2.77(m,3h),2.63(dd,j＝13.7,10.1hz,1h),2.43(dd,j＝19.5,12.1hz,1h),2.33–2.28(m,1h),1.76–1.66(m,2h),1.64(s,3h),1.63–1.49(m,3h),0.60(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.30,173.19,171.48,151.84/151.71/150.40/150.28,149.38/149.24/147.96/147.83,145.47,136.53,129.32/129.20,125.88/125.85/125.82/125.73/125.70,123.96/123.92/123.89/123.85,115.39,115.21,52.85,51.29,38.11,37.76,36.46,34.51,31.59,30.13,12.57,8.13.
将得到的(4n)2-(2',3'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸64mg(0.171mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯130mg(0.342mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺44mg(0.342mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑49mg(0.257mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得75mg目标化合物(5n)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',3'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率80％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.74(dd,j＝8.5,5.3hz,2h),7.12(t,j＝8.5hz,2h),7.05–6.94(m,3h),6.47(d,j＝8.2hz,2h),5.57(s,1h),5.39(s,1h),4.65(d,j＝6.0hz,2h),3.22(dd,j＝13.8,4.7hz,1h),2.90–2.78(m,3h),2.56(dd,j＝13.7,10.3hz,1h),2.43(dd,j＝19.6,12.2hz,1h),2.31–2.25(m,1h),1.75–1.63(m,2h),1.62(s,3h),1.60–1.46(m,3h),0.58(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.13,172.98,169.07,168.92,165.08,162.59,161.75,151.81,151.68,150.95,150.38,150.25,149.34,149.21,147.93,147.80,136.47,129.34,129.22,128.73,128.64,125.91,125.88,125.84,124.88,123.97,123.93,123.90,123.86,116.18,116.02,115.96,115.42,115.24,100.43,52.79,51.19,38.63,37.96,36.35,35.37,34.47,31.29,30.20,12.53,8.15。
实施例15
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',4'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5o)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备70mg2-(2',4'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3o)，产率52％；
将得到的(3o)2-(2',4'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯65mg(0.167mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂20mg(0.835mmol),在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得59mg2-(2',4'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸(4o)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.23–7.15(m,1h),6.83–6.74(m,2h),6.36(s,1h),5.72(s,1h),3.15(dd,j＝13.8,4.7hz,1h),2.87–2.77(m,3h),2.58(dd,j＝13.8,10.0hz,1h),2.42(dd,j＝19.9,12.7hz,1h),2.30–2.25(m,1h),1.78–1.64(m,3h),1.63(s,3h),1.59–1.47(m,2h),0.60(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.64,173.39,171.55,162.85/162.73/162.26/162.15,160.40/160.28/159.81/159.69,145.49,136.52,131.91/131.84/131.81/131.75,125.70,122.52/122.48,122.36/122.32,111.32/111.28,111.11/111.07,103.92/103.66/103.41,52.73,51.43,38.12,37.67,36.49,34.47,31.62,29.69,12.58,8.13.
将得到的2-(2',4'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸(4o)54mg(0.145mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯110mg(0.290mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺39mg(0.290mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑42mg(0.217mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得73mg目标化合物(5o)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',4'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率91％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.80–7.74(m,2h),7.22–7.11(m,3h),6.82–6.75(m,2h),6.50(s,1h),6.45–6.36(m,1h),5.58(s,1h),5.40(s,1h),4.67(d,j＝5.9hz,2h),3.16(dd,j＝13.9,4.7hz,1h),2.84(dd,j＝25.6,15.1hz,3h),2.55(dd,j＝13.8,10.1hz,1h),2.44(dd,j＝19.7,12.5hz,1h),2.31–2.23(m,1h),1.76–1.67(m,2h),1.63(s,3h),1.61–1.50(m,3h),0.60(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.31,172.88,168.91,165.10,162.62,161.76,151.03,136.50,131.92/131.85/131.82/131.76,128.74/128.71/128.66,124.91/124.88,122.78,122.59,116.19,115.97/115.93,111.30/111.26,111.09/111.05,103.94,103.68,103.42,100.43,52.70,51.37,38.61,37.93,36.42,35.40,34.46,31.36,30.91,12.53,8.13。
实施例16
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',5'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5p)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备63mg2-(2',5'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3p)，产率47％；
将得到的(3p)2-(2',5'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯58mg(0.149mmol)，溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂18mg(0.745mmol),在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得53mg2-(2',5'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸(4p)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.02–6.91(m,2h),6.90–6.82(m,1h),6.37(s,1h),5.73(s,1h),3.17(dd,j＝14.0,4.6hz,1h),2.89–2.77(m,3h),2.61–2.55(m,1h),2.48–2.38(m,1h),2.31–2.27(m,1h),1.78–1.66(m,2h),1.64(s,3h),1.64–1.51(m,3h),0.61(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.31,173.25,171.43,159.70/158.30/157.27/155.91,145.43,136.55,128.60/128.52/128.42/128.34/125.78,117.55/117.50,117.31/117.26,116.39/116.31/116.14/116.05,114.56/114.47/114.32/114.23,109.99,52.76,51.26,38.12,37.72,36.46,34.50,31.60,30.31,12.59,8.16.
将得到的(4p)2-(2',5'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸48mg(0.128mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯98mg(0.256mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺33mg(0.256mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑37mg(0.193mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得60mg目标化合物(5p)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',5'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率85％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.78–7.67(m,2h),7.12(t,j＝8.6hz,2h),7.00–6.89(m,2h),6.89–6.81(m,1h),6.68(t,j＝5.9hz,1h),6.48(s,1h),5.60(s,1h),5.39(s,1h),4.65(d,j＝5.9hz,2h),3.19–3.11(m,1h),2.91–2.78(m,3h),2.53(dd,j＝13.7,10.2hz,1h),2.43(dd,j＝19.7,12.3hz,1h),2.30–2.24(m,1h),1.77–1.63(m,3h),1.62(s,3h),1.60–1.49(m,2h),0.59(d,j＝6.8hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.16,173.15,169.27,168.94,165.08/165.06,162.60,161.74,150.91,136.45,128.73/128.64,117.54/117.49,117.30/117.25,116.39/116.31,116.17/116.14,116.05/116.03,115.95,114.55,114.47,114.32,114.23,100.39/100.38,52.77,51.20,38.63,37.97,36.38,35.41,34.46,31.32,30.33,30.30,12.52,8.14。
实施例17
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',6'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5q)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备64mg2-(2',6'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3q)，产率48％；
将得到的(3q)2-(2',6'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯58mg(0.149mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂18mg(0.745mmol),在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得53mg2-(2',6'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸(4q)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.20–7.12(m,1h),6.86(t,j＝7.7hz,2h),6.35(s,1h),5.72(s,1h),3.18(dd,j＝13.6,4.9hz,1h),2.91–2.78(m,3h),2.63(dd,j＝13.6,10.8hz,1h),2.43(dd,j＝19.5,12.1hz,1h),2.34–2.29(m,1h),1.76–1.70(m,1h),1.65(s,3h),1.63–1.47(m,4h),0.58(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.17,172.87,171.27,162.86/162.77,160.40/160.32,145.46,136.48,128.00/127.90/127.80,125.72,115.58,111.21/111.14,111.02/110.95,53.16,50.27,38.09,37.78,36.53,34.71,31.63,23.96,12.54,8.19.
将得到的(4q)2-(2',6'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸48mg(0.128mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯98mg(0.256mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺33mg(0.256mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑37mg(0.193mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得63mg目标化合物(5q)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2',6'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率87％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.77–7.70(m,2h),7.19–7.08(m,3h),6.83(t,j＝7.7hz,2h),6.67(t,j＝6.0hz,1h),6.48(s,1h),5.59(s,1h),5.38(s,1h),4.64(d,j＝5.9hz,2h),3.14(dd,j＝13.7,5.0hz,1h),2.92–2.81(m,3h),2.59(dd,j＝13.6,10.9hz,1h),2.42(dd,j＝19.7,12.3hz,1h),2.31–2.24(m,1h),1.84–1.67(m,2h),1.61(s,3h),1.58–1.48(m,3h),0.55(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.13,172.98,169.29,168.97,165.05,162.80/162.72/162.56,161.72,160.35,160.26,150.88,136.38,128.81/128.73/128.63/128.55,127.98,127.87,124.90/124.87,116.24,116.14/116.08/116.02,115.87,115.71,115.51,115.31,111.19,111.13,111.00,110.94,100.49,100.30,53.23,50.19,38.69,37.91,36.43,35.51,34.64,31.34,23.99,12.52,8.15。
实施例18
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',4'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5r)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备72mg2-(3',4'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3r)，产率54％；
将得到的(3r)2-(3',4'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯67mg(0.173mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂21mg(0.865mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得62mg2-(3',4'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸(4r)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.10–6.99(m,2h),6.94–6.89(m,1h),6.37(s,1h),5.73(s,1h),3.13(dd,j＝13.7,4.3hz,1h),2.81(dd,j＝19.7,10.1hz,3h),2.49(dd,j＝13.7,10.0hz,1h),2.46–2.37(m,1h),2.23(dd,j＝10.3,4.4hz,1h),1.76–1.66(m,2h),1.63(s,3h),1.63–1.45(m,3h),0.60(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.70,173.54,171.10,151.39/151.27,150.30/150.17,148.93/148.80,147.85/147.72,145.28,136.70/136.64/136.58,125.79,124.77/124.74/124.71/124.68,117.62/117.46/117.19/117.02,52.65,52.51,38.15,37.64,36.54,36.44,34.50,31.54,12.60,8.09.
将得到的(4r)2-(3',4'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸57mg(0.151mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯115mg(0.302mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺39mg(302mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑44mg(0.227mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得71mg目标化合物(5r)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',4'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率85％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.79–7.71(m,2h),7.13(t,j＝8.6hz,2h),7.09–6.96(m,2h),6.91(s,1h),6.48(s,1h),6.40(t,j＝7.6hz,1h),5.57(s,1h),5.39(s,1h),4.66(d,j＝6.0hz,2h),3.13(dd,j＝13.7,4.3hz,1h),2.89–2.71(m,3h),2.47–2.33(m,2h),2.22–2.16(m,1h),1.75–1.69(m,1h),1.62(s,3h),1.59–1.48(m,4h),0.57(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.28,173.01,168.90,165.09,162.61,161.77,150.94,148.80,136.60,128.73,128.64,124.77/124.74/124.71,124.68,117.57,117.40,117.21,117.04,116.20,115.98,110.00,100.45,53.41,52.58,38.44,37.95,36.56,36.34,35.39,34.49,31.25,12.56,8.12。
实施例19
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',5'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5s)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备75mg2-(3',5'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3s)，产率55％；
将得到的(3s)2-(3',5'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸甲酯67mg(0.173mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂21mg(0.865mmol),在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得62mg2-(3',5'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸(4s)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.80–6.70(m,2h),6.68–6.61(m,1h),6.37(s,1h),5.73(s,1h),3.18(dd,j＝13.7,4.3hz,1h),2.88–2.75(m,3h),2.51–2.37(m,2h),2.26–2.20(m,1h),1.77–1.66(m,2h),1.64(s,3h),1.63–1.43(m,3h),0.61(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.25,173.26,171.22,164.24/164.12,161.78/161.65,145.36,143.82,136.65,125.75/125.72,111.73/111.66,111.55/111.48,102.12/101.87/101.62,52.73,52.24,38.15,37.68,37.20,36.41,34.54,31.52,12.59,8.12.
将得到的(4s)2-(3',5'-二氟苄基)-一枝蒿酮酸57mg(0.151mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯115mg(0.302mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺39mg(302mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑44mg(0.227mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得69mg目标化合物(5s)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',5'-二氟苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率83％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.78–7.71(m,2h),7.12(t,j＝8.6hz,2h),6.73(d,j＝6.0hz,2h),6.67–6.60(m,1h),6.48(s,1h),6.43(t,j＝6.1hz,1h),5.57(s,1h),5.39(s,1h),4.65(d,j＝6.0hz,2h),3.16(dd,j＝13.7,4.2hz,1h),2.91–2.75(m,3h),2.49–2.37(m,2h),2.23–2.17(m,1h),1.76–1.63(m,2h),1.62(s,3h),1.59–1.49(m,3h),0.58(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.07,173.08,168.99/168.90,165.09,164.23,164.10,162.60,161.77,161.63,150.92,143.98/143.89/143.80,136.56,128.73/128.64,116.19,116.02/115.97,111.70,111.45,102.13,101.88,101.62,100.46,52.70,52.29,38.51,38.00,37.21,36.31,35.38,34.52,31.20,12.56,8.14。
实施例20
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5t)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备84mg2-(2'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3t)，产率58％；
将得到的(3t)2-(2'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸甲酯79mg(0.188mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂23mg(0.940mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥。再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得73mg2-(2'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸(4t)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.63(d,j＝7.9hz,1h),7.46(t,j＝7.4hz,1h),7.40(d,j＝7.6hz,1h),7.31(t,j＝7.6hz,1h),6.36(s,1h),5.72(s,1h),3.38(dd,j＝14.4,5.1hz,1h),2.90–2.82(m,2h),2.80–2.71(m,2h),2.49–2.42(m,1h),2.41–2.36(m,1h),1.74–1.69(m,1h),1.67(s,3h),1.62–1.47(m,4h),0.59(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.61,173.11/173.08,171.48/171.43,145.49,138.64,136.39,131.61,131.35,129.17/128.88/128.58/128.29,126.41,126.29/126.24/126.18/126.12,125.64,52.55,51.79,38.09,37.74,36.29,34.25,33.47,31.63,29.69,12.49,8.19.
将得到的(4t)2-(2'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸68mg(0.166mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯127mg(0.332mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺43mg(0.332mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑48mg(0.250mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得83mg目标化合物(5t)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(2'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率86％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.82–7.71(m,2h),7.62(d,j＝7.8hz,1h),7.44(t,j＝7.8hz,1h),7.38(d,j＝7.6hz,1h),7.29(t,j＝7.6hz,1h),7.13(t,j＝8.5hz,2h),6.48(s,1h),6.42–6.35(m,1h),5.56(s,1h),5.38(s,1h),4.65(d,j＝6.0hz,2h),3.37(dd,j＝14.4,5.1hz,1h),2.91–2.76(m,3h),2.75–2.66(m,1h),2.43(dd,j＝19.3,12.1hz,1h),2.39–2.33(m,1h),1.74–1.66(m,1h),1.64(s,3h),1.59–1.47(m,4h),0.57(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.32,173.02,168.90,150.94,140.83,136.60,132.25,130.85,130.53,128.90,128.73,128.64,125.46/125.42,124.87/124.84,123.19/123.15,122.74,116.19,116.02/115.97,100.45,52.75,52.58,38.58,38.00,37.27,36.24,35.38,34.47,31.16,12.54,8.12。
实施例21
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5u)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备81mg2-(3'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3u)，产率56％；
将得到的(3u)2-(3'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸甲酯76mg(0.181mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂22mg(0.905mmol),在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得70mg2-(3'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸(4u)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.51–7.43(m,2h),7.43–7.35(m,2h),6.36(s,1h),5.72(s,1h),3.25(dd,j＝13.7,4.3hz,1h),2.86–2.75(m,3h),2.58(dd,j＝13.7,10.2hz,1h),2.41(dd,j＝20.0,12.4hz,1h),2.28–2.23(m,1h),1.78–1.65(m,2h),1.64(s,3h),1.61–1.49(m,3h),0.58(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.49,173.22,170.83,145.31,140.74,136.69,132.27,128.88,125.72,125.55/125.52/125.48/125.45,123.24/123.20/123.16/123.12,52.72,52.52,38.14,37.72,37.23,36.34,34.49,31.48,29.68,12.60,8.11.
将得到的2-(3'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸(4u)65mg(0.160mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯122mg(0.320mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺41mg(0.320mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑46mg(0.240mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得83mg目标化合物(5u)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率89％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.79–7.72(m,2h),7.50–7.35(m,4h),7.16–7.09(m,2h),6.48(s,1h),6.39(t,j＝5.8hz,1h),5.57(s,1h),5.39(s,1h),4.65(d,j＝6.0hz,2h),3.25(dd,j＝13.7,4.2hz,1h),2.89–2.76(m,3h),2.51(dd,j＝13.7,10.6hz,1h),2.41(dd,j＝19.8,12.4hz,1h),2.26–2.19(m,1h),1.73–1.67(m,1h),1.62(s,3h),1.57–1.41(m,4h),0.56(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.37,172.71,169.03,168.88,165.09,161.76,150.98,138.63,136.39,131.60,131.43,128.73,128.64,126.41,126.25,126.19,116.18,115.96,100.44,52.48,51.73,38.68,37.87,36.21,35.37,34.18,33.49,31.35,12.44,8.18。
实施例22
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5v)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备78mg2-(4'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3v)，产率54％；
将得到的(3v)2-(4'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸甲酯73mg(0.174mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂21mg(0.870mmol)，在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得67mg2-(4'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸(4v)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.53(d,j＝7.9hz,2h),7.33(d,j＝7.9hz,2h),6.37(s,1h),5.72(s,1h),3.24(dd,j＝13.6,4.3hz,1h),2.88–2.75(m,3h),2.58(dd,j＝13.6,10.2hz,1h),2.42(dd,j＝19.7,12.2hz,1h),2.31–2.25(m,1h),1.80–1.65(m,2h),1.64(s,3h),1.61–1.47(m,3h),0.59(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.69,173.53,171.71,145.47,143.90,136.65,129.18,125.75,125.41/125.38/125.34/125.30,52.68,52.43,38.15,37.56,37.20,36.39,34.47,31.55,12.59,8.14.
将得到的(4v)2-(4'-三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸62mg(0.153mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯117mg(0.306mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺40mg(0.306mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑44mg(0.2300mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得82mg目标化合物(5v)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(4'-三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率92％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ.77–7.70(m,2h),7.51(d,j＝7.9hz,2h),7.31(d,j＝7.9hz,2h),7.15–7.08(m,2h),6.51(t,j＝6.0hz,1h),6.48(s,1h),5.57(s,1h),5.38(s,1h),4.65(d,j＝6.0hz,2h),3.22(dd,j＝13.6,4.3hz,1h),2.88–2.76(m,3h),2.50(dd,j＝13.6,10.5hz,1h),2.41(dd,j＝19.7,12.3hz,1h),2.26–2.21(m,1h),1.75–1.64(m,2h),1.62(s,3h),1.57–1.46(m,3h),0.56(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ208.41,173.20,169.09,168.93,165.08,162.60,161.75,150.87,143.98,136.53,129.16,128.72,128.63,125.42,125.38,125.35,125.31,116.19,115.98,100.43,52.62,52.48,38.37,37.95,37.24,36.28,35.39,34.46,31.24,12.54,8.13。
实施例23
n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',5'-双三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺(5w)的制备：
以实施例1步骤a的方法制备一枝蒿酮酸甲酯(2)；
以实施例1步骤b的方法制备71mg2-(3',5'-双三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸甲酯(3w)，产率42％；
将得到的(3w)2-(3',5'-双三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸甲酯66mg(0.135mmol)溶解于5ml四氢呋喃和250μl水的混合溶剂中，再加入氢氧化锂16mg(0.675mmol),在室温下搅拌，过夜，反应结束后，去除四氢呋喃，加入10ml乙酸乙酯和10ml水，分液，水相用1m盐酸酸化ph＝3，用乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥。再经洗脱剂体积比3:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得61mg2-(3',5'-双三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸(4w)纯品，产率95％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.73(s,1h),7.68(s,2h),6.38(s,1h),5.73(s,1h),3.28(dd,j＝13.9,4.6hz,1h),2.85–2.77(m,3h),2.73(dd,j＝13.8,9.5hz,1h),2.42(dd,j＝19.9,12.5hz,1h),2.30–2.25(m,1h),1.78–1.67(m,2h),1.64(s,3h),1.63–1.45(m,3h),0.62(d,j＝7.0hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ207.97,173.33/173.31,171.41/171.39,145.26,142.27,136.90,132.09/131.76/131.43/131.10,129.07/129.03,125.92,124.62,121.90,120.43/120.39/120.35/120.32,52.77,52.07,38.16,37.67,37.01,36.34,34.63,31.36,12.63,8.08.
将得到的(4w)2-(3',5'-双三氟甲基苄基)-一枝蒿酮酸56mg(0.117mmol)溶于干燥的10ml四氢呋喃中，在室温下搅拌5分钟，然后将(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯89mg(0.234mmol)加入到反应体系中，然后将n,n-二异丙基乙胺30mg(0.234mmol)滴加到反应体系中，搅拌5分钟，再将3-(对氟苯基)-5-氨甲基异噁唑34mg(0.176mmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌，过夜，tlc检测反应完全后，除去四氢呋喃，将残渣溶解在20ml乙酸乙酯，依次用水和饱和食盐水洗涤，再经洗脱剂体积比2:1的石油醚:酸乙酯柱层析纯化，即得61mg目标化合物(5w)n-[3"-(对氟苯基)-异噁唑-5"-基]-甲基-[2-(3',5'-双三氟甲基苄基)一枝蒿酮酸]酰胺纯品，产率80％；
核磁数据：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.76–7.69(m,3h),7.67(s,2h),7.11(t,j＝8.6hz,2h),6.60(t,j＝5.9hz,1h),6.47(s,1h),5.58(s,1h),5.38(s,1h),4.64(d,j＝6.0hz,2h),3.26(dd,j＝13.9,4.5hz,1h),2.89–2.76(m,3h),2.63(dd,j＝13.9,9.9hz,1h),2.42(dd,j＝19.8,12.4hz,1h),2.25–2.19(m,1h),1.75–1.63(m,2h),1.60(s,3h),1.59–1.45(m,3h),0.58(d,j＝6.9hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ207.72,173.19,173.16/173.13,169.15/169.12,168.89,165.08,162.59,161.75,150.74,142.49,136.68,132.11/131.78/131.45/131.12,129.00/128.97,128.70/128.62,124.84/124.61,121.90,120.42/120.39/120.35,116.18/116.16,115.96,100.43,52.92,52.18,38.60,38.06,37.06,36.21,35.37,34.58,31.03,12.53,8.10。
实施例24
将所合成的一枝蒿酮酸异噁唑酰胺类衍生物5a-5w进行了初步的体外抗流感病毒活性测试：
抗甲型流感病毒的药物的用途的生物活性测定：
测试原理：以狗肾细胞为病毒宿主，测定样品抑制病毒引起细胞病变程度(cpe)；
测试材料：
1.病毒株：流感病毒a/fm/1/47(h1n1)和流感病毒a/汉防/359/95(h3n2)，在鸡胚尿囊腔内培养传代(2018.3)，温度-80℃保存；
2.样品处理：样品临用前dmso配成母液，再用培养液作3倍稀释，各8个稀释度；
3.阳性对照药：利巴韦林(rbv)，湖北天药药业股份有限公司(批号31712252)，磷酸奥司他韦，上海罗氏制药有限公司分装(批号sh0071)；
测试方法：狗肾细胞接种96孔培养板，置浓度5％co2，温度37℃培养，24小时后感染流感病毒1/210-5，吸附2小时，弃病毒液，加入含有不同稀释度样品及阳性对照药的维持液，同时设细胞对照孔和病毒对照孔，浓度5％co2,温度37℃培养，待病毒对照组病变程度(cpe)达4+时观察各组细胞病变程度(cpe)，用reed-muench法分别计算样品对细胞的半数有毒浓度(tc50)和对病毒的半数抑制浓度(ic50)，活性结果如表1所示：
表1一枝蒿酮酸衍生物5a-5w抗甲型流感病毒(h1n1、h3n2)的活性数据
–：表示样品在最大无毒剂量无抗病毒活性；tc50：药物半数有毒浓度；ic50：药物对病毒半数抑制浓度；si：选择指数，si＝tc50/ic50。
从表中可以看出：对甲型流感病毒h1n1,化合物5f、5g、5h、5k、5l、5m、5q、5r、5s和5u具备一定的抗h1n1型流感病毒活性，其中化合物5f、5g、5l、5q和5u具备比阳性对照更好的活性。对甲型流感病毒h3n2,化合物5a、5b、5c、5f、5g、5i、5k、5l、5m、5n、5o、5p、5q和5v具备一定的抗h3n2型流感病毒活性，其中化合物5a、5b、5c、5f、5g、5i、5l、5m、5o、5p、5q和5v具备比阳性对照更好的活性，尤其是化合物5o和5p的活性跟化合物cam106相当。化合物5f、5g、5l和5q对h1n1和h3n2型流感病毒均有比阳性对照更好的活性。化合物5t的毒性最小，化合物5t和5u对h1n1型流感病毒的选择指数比较好，化合物5m对h3n2型流感病毒的选择指数比较好。