RHO激酶抑制剂的制作方法

rho激酶抑制剂
1.本技术是申请日为2013年10月7日、申请号为201380063599.7、发明名称为“rho激酶抑制剂”的发明专利申请的分案申请。
发明领域
2.本发明涉及rock1和/或rock2的抑制剂。还提供了可用于治疗疾病的抑制rock1和/或rock2的方法。
3.相关申请的交叉引用
4.本技术要求2012年10月5日提交的美国申请第61/710,373号以及2013年6月27日提交的美国申请第61/840,288号的优先权，通过引用将其全部内容并入本文。
5.发明背景
6.rho相关的蛋白激酶(rock)是细胞骨架动力学和细胞运动的关键细胞内介质。rho激酶通过磷酸化介导了rhoa的许多下游靶，包括例如肌球蛋白轻链，结合亚基和lim
‑
激酶2的肌球蛋白轻链磷酸酶。这些底物介导了肌动蛋白丝组织和收缩力。在平滑肌细胞中，rho激酶介导了钙致敏和平滑肌收缩。rho激酶的抑制阻断了5
‑
ht和苯肾上腺素激动剂诱导的肌肉收缩。当被引入至非平滑肌细胞中时，rho激酶诱导了应激纤维形成并且对于通过rhoa介导的细胞转化是必需的。rho激酶参与了多个细胞过程，包括但不限于细胞粘附、细胞运动和迁移、生长控制、细胞收缩和胞质分裂。rho激酶还参与na/h交换转运系统活化、应激纤维形成、内收蛋白活化和诸如血管收缩、支气管平滑肌收缩、血管平滑肌和内皮细胞增殖、血小板聚集和其他的生理过程中。
7.动物模型中的rho激酶活性的抑制已经证明了rho激酶抑制用于治疗人疾病的许多益处。这些包括心血管疾病，例如高血压、动脉硬化、再狭窄、心脏肥大、高眼压症、脑缺血、脑血管痉挛、勃起功能障碍，中枢神经系统疾病，例如神经元变性和脊髓损伤，以及瘤形成中的模型。rho激酶活性的抑制已被证明抑制肿瘤细胞的生长和转移、血管生成、动脉血栓形成疾病，例如血小板聚集和白细胞聚集、哮喘、眼内压力调节和骨吸收。患者中的rho激酶活性的抑制具有用于控制脑血管痉挛和缺血蛛网膜下腔出血、减少眼内压力、通过小梁网组织的松弛增加了眼房水外流、改善向视神经的血液流动和保护健康神经节细胞的益处。
8.在哺乳动物中，rho激酶由两个同种型：rock1(rockβ；p160
‑
rock)和rock2(rockα)组成。rock1和rock2被差异表达，并在特定组织中被介导。例如，rock1普遍以相对高的水平表达，而rock2优选被表达在心脏和脑和骨骼肌中。所述同种型也被表达在一些组织中并以发育阶段特异性方式表达。rock1是凋亡过程中用于半胱天冬酶
‑
3切割的底物，而rock2不是。平滑肌特异性碱性调宁蛋白仅由rock2磷酸化。
9.鉴于所涉及的细胞过程和疾病的范围，选择性地抑制一种rho激酶、或抑制rock1和rock2的化合物是理想的。
10.概述
11.如下文所述，本发明涉及具有式i
‑
xxv的化合物。在某些实施方案中，本发明提供
了式i化合物：
[0012][0013]
其中：
[0014]
x选自n或c
‑
r1；
[0015]
y选自n或c
‑
r5；
[0016]
z选自n或c
‑
r3；
[0017]
r1选自由h、低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0018]
r2是具有式
‑
a
‑
r
10
的基团；
[0019]
a选自由共价键、芳基、杂芳基、环烷基和杂环基组成的组；
[0020]
r
10
选自由h、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基、c1‑
c
10
烷基、c2‑
c
10
烯基和
‑
(m)
x
‑
(ch2)
y
‑
r
11
组成的组；
[0021]
m选自由n
‑
r
20
、cr
21
r
22
和c＝o组成的组；
[0022]
x是0或1；
[0023]
r
20
选自h和c1‑5烷基；
[0024]
r
21
和r
22
独立地选自由h、卤素和低级烷基组成的组，或者r
21
和r
22
可以与它们连接的原子合起来一起形成c3‑6环烷基；
[0025]
y为0、1、2、3、4、5或6；
[0026]
r
11
选自由h、c1‑6烷基、任选取代的c3‑6环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂环基组成的组，其中任选的取代基选自由低级烷基、c1‑6环烷基、氧代、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0027]
可选地r
11
选自由
‑
nr
13
r
14
、
‑
c(＝o)nr
13
r
14
和
‑
c(＝o)r
12
和
‑
co2r
12
组成的组；
[0028]
r
12
选自由c1‑
c
10
烷基、芳基、杂芳基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳烷基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c3‑
c6环烷基、c1‑
c6烷氧基、(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、羟基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0029]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c6环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0030]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、氧代、羟基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0031]
r3选自由h、低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0032]
r5选自由h、低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0033]
r6选自由h、低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0034]
r7选自由h和低级烷基组成的组；并且
[0035]
r8是含氮杂环系统环，其可以包含选自n、o和s的0
‑
2个另外的环杂原子，并且可以未被取代或可以被1至3个选自卤素、cn、氧代、羟基、氨基、低级烷基、全氟低级烷基和低级烷氧基的取代基取代。
[0036]
本发明包括包含本发明的化合物和药学上可接受的载体和/或稀释剂的药物组合物。
[0037]
本发明包括组合物，所述组合物包含基本上纯的本发明的化合物和其药学上可接受的盐、立体异构体或水合物，以及药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。
[0038]
本发明提供了抑制哺乳动物中的rho激酶的方法。本发明提供了治疗患有疾病的患者的方法，所述方法包括向需要这种治疗的患者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。在某些这样的实施方案中，式i
‑
xxv化合物抑制rock2。在某些这样的实施方案中，式i
‑
xxv化合物选择性地抑制rock2。根据本发明治疗的非限制性疾病和病况包括心血管疾病，如高血压、动脉粥样硬化、再狭窄、心脏肥大、高眼压症、脑缺血、脑血管痉挛、阴茎勃起功能障碍，中枢神经系统病症，如神经元变性和脊髓损伤，动脉血栓形成病症如血小板聚集和白细胞聚集，哮喘、眼内压的调节和骨吸收。在瘤形成中，抑制rho激酶就抑制了肿瘤细胞的生长和转移以及血管生成。
[0039]
本发明提供了一种治疗受试者中的自身免疫性病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。自身免疫性病症包括但不限于类风湿关节炎、(多发性硬化)、系统性红斑狼疮(sle；狼疮)、银屑病、克罗恩氏病、特应性皮炎、湿疹或移植物抗宿主病(gvhd)。
[0040]
本发明提供了一种治疗受试者中的心血管病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。心血管病症包括但不限于高血压、动脉粥样硬化、再狭窄、心脏肥大、高眼压症、脑缺血、脑血管痉挛或勃起功能障碍。
[0041]
本发明提供了一种治疗受试者中的炎症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。炎症包括但不限于哮喘、心血管炎症、肾炎或动脉硬化。
[0042]
本发明提供了一种治疗受试者中的中枢神经系统病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。中枢神经系统病症包括但不限于神经元变性或脊髓损伤，以及亨廷顿氏病、帕金森氏病、阿尔茨海默氏症、肌萎缩性侧索硬化症(als)或多发性硬化。
[0043]
本发明提供了一种治疗受试者中的动脉血栓形成病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。动脉血栓形成病症的非限制性实例是血小板聚集或白细胞聚集。
[0044]
本发明提供了一种治疗受试者中的纤维化病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。纤维化病症的非限制性实例是肝纤维化、肺纤维化或肾纤维化。
[0045]
本发明提供了一种维持上皮稳定性的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。
[0046]
本发明提供了一种治疗受试者中的青光眼或调节受试者中的眼内压的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。青光眼的非限制性实例为原发性开角型青光眼、急性闭角型青光眼、色素性青光眼、先天性青光眼、正常眼压性青光眼或继发性青光眼。
[0047]
本发明提供了一种治疗受试者中的瘤形成病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。瘤形成病症包括但不限于淋巴瘤、癌、白血病、肉瘤或胚细胞瘤，例如鳞状细胞癌、小细胞肺癌、垂体癌、食道癌、星形细胞瘤、软组织肉瘤、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质胚细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝细胞癌、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、肝癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、脑癌、子宫内膜癌、睾丸癌、胆管癌、胆囊癌、胃癌、黑色素瘤或头颈癌。
[0048]
本发明还提供了一种治疗受试者中的代谢综合征、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、2型糖尿病或葡萄糖不耐受症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。
[0049]
此外，本发明提供了一种治疗受试者中的骨质疏松症或促进受试者中的骨形成的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。
[0050]
本发明还提供了一种治疗受试者中的代谢综合征、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、2型糖尿病或葡萄糖不耐受症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式i
‑
xxv化合物。
[0051]
已经发现rho激酶调节th17和treg功能，以及il
‑
17和il
‑
21在免疫系统细胞中的产生。因此，本发明提供了使用rho激酶抑制剂(包括但不限于式i
‑
xxv化合物以及式xxx
‑
xxxvi化合物)调节免疫响应的方法。
附图说明
[0052]
图1示出了本发明的化合物。
[0053]
图2示出了本发明的化合物。
[0054]
图3示出了本发明的化合物。
[0055]
图4示出了本发明的化合物。
[0056]
图5示出了针对rock1对rock2的抑制的剂量反应曲线。化合物对应于本文中的实施方案，具体如下：k100
‑
5，实施例12；kd
‑
25，slx
‑
2119；3272，实施例28；k100
‑
04，实施例14；k100
‑
16，实施例43；k100
‑
21；实施例38；k100
‑
23，实施例52；k100
‑
24，实施例111；k100
‑
25，实施例56；k100
‑
26，实施例13；3266，实施例26。
[0057]
图6比较了在实施方案43、48和118的化合物中rock1和rock2的抑制。
[0058]
图7示出了rock2选择性抑制剂kd025(slx 2119)体外抑制了人cd4
+
t细胞中的il
‑
17/il
‑
21分泌(a)和增殖(b)。
[0059]
图8示出了rock2 sirna，但不是rock1 sirna，抑制了il
‑
17和il
‑
21分泌。图a，左侧：抗
‑
rock1 sirna使rock1表达减少了约75％。抗
‑
rock2 sirna使rock2表达减少了约
85％。图a，右侧：rock2 sirna，但不是rock1 sirna，抑制了il
‑
17和il
‑
21表达。未观察到ifn
‑
γ的抑制。图b：rock2 sirna，但不是rock1 sirna，抑制了stat3、irf4和rorγt的磷酸化。图c：rock2 sirna，但不是rock1 sirna，抑制了mlc的磷酸化。
[0060]
图9示出了kd025(slx 2119)抑制了stat3磷酸化。(a)用kd025预处理t细胞，随后通过抗
‑
cd3/cd28抗体刺激。(b)在th17
‑
时滞条件下细胞培养5天，随后用kd025处理3小时。(c)采用0μm、2.5μm、5μm或10μm kd025通过抗
‑
cd3/cd28、tgf
‑
β和il
‑
1β将cd4
+
t细胞活化48小时。
[0061]
图10示出了rock2选择性抑制剂kd025抑制了在来自ra患者的cd3/cd28刺激的cd4
+
t细胞中的il
‑
17、il
‑
21和ifn
‑
γ的离体产生。图a：在ra患者中，kd025抑制了il
‑
17和il
‑
21以及ifn
‑
γ的tcr刺激。图b：ifn
‑
γ产生的抑制与疾病活动度评分(das)相关联。图c：通过细胞内染色表明的产生il
‑
17和ifn
‑
γ的t细胞的频率。
[0062]
图11示出了kd025活化stat5磷酸化。将新鲜纯化的cd4
+
t细胞用抗cd3/cd28(5μg/ml)、tgf
‑
β(5ng/ml)、il
‑
1β(50ng/ml)的刺激性抗体以及指定剂量的选择性rock2抑制剂kd025培养2天。
[0063]
图12示出了用指定剂量的选择性rock2抑制剂kd025处理过的人cd4
+
t细胞中的foxp3表达。
[0064]
图13示出了在treg中kd025介导的rock2抑制对通过cd4
+
cd25
‑
t细胞的il
‑
17分泌的影响。
[0065]
图14示出了kd025介导的rock2抑制对treg中的tgf
‑
β诱导的stat3、mlc和smad2/3的磷酸化的影响。
[0066]
图15a
‑
c示出了kd025介导的rock2抑制对(a)il
‑
17、(b)il
‑
21和(c)ifn
‑
γ产生在分离的pbmc中的刺激的影响。在第1天和第8
‑
14天用120mg/天的kd025治疗六名患者，并用安慰剂治疗两名患者。在第1天和第15天分离pbmc，并检测响应于通过抗cd3/cd28抗体的刺激的il
‑
17和il
‑
21产生。第2名患者和第7名患者7接受安慰剂。*＝被施用给第2名患者和第7名患者的安慰剂。图d
‑
f示出了增加kd025的剂量对(d)il
‑
17、(e)il
‑
21和(f)ifn
‑
γ产生在分离的pbmc中的刺激的影响。
[0067]
图16a
‑
c分别示出了通过噬菌体展示鉴别的抗
‑
vegfr2抗体的人重链、λ轻链和κ轻链可变域序列。
[0068]
发明详述
[0069]
本发明涉及具有式i的化合物：
[0070][0071]
其中：
[0072]
x选自n或c
‑
r1；
[0073]
y选自n或c
‑
r5；
[0074]
z选自n或c
‑
r3；
[0075]
r1选自由h、低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷
基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0076]
r2是具有式
‑
a
‑
r
10
的基团；
[0077]
a选自由共价键、芳基、杂芳基、环烷基和杂环基组成的组；
[0078]
r
10
选自由h、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基、c1‑
c
10
烷基、c2‑
c
10
烯基和
‑
(m)
x
‑
(ch2)
y
‑
r
11
组成的组；
[0079]
m选自由n
‑
r
20
、cr
21
r
22
和c＝o组成的组中；
[0080]
x是0或1；
[0081]
r
20
选自h和c1‑5烷基；
[0082]
r
21
和r
22
独立地选自由h、卤素和低级烷基组成的组，或者r
21
和r
22
可以与它们连接的原子合起来一起形成c3‑6环烷基；
[0083]
y为0、1、2、3、4、5或6；
[0084]
r
11
选自由h、c1‑6烷基、任选取代的c3‑6环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂环基组成的组，其中任选的取代基选自由低级烷基、c1‑6环烷基、氧代、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0085]
可选地r
11
选自由
‑
nr
13
r
14
、
‑
c(＝o)nr
13
r
14
和
‑
c(＝o)r
12
和
‑
co2r
12
组成的组；
[0086]
r
12
选自由c1‑
c
10
烷基、芳基、杂芳基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳烷基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c3‑
c6环烷基、c1‑
c6烷氧基、(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、羟基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0087]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c6环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0088]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、氧代、羟基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0089]
r3选自由h、低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0090]
r5选自由h、低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0091]
r6选自由h、低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基、全氟低级烷基和(低级烷基)
‑
o
‑
(低级烷基)组成的组；
[0092]
r7选自由h和低级烷基组成的组；并且
[0093]
r8是含氮杂环系统环，其可以包含选自n、o和s的0
‑
2个另外的环杂原子，并且可以未被取代或可以被1至3个选自卤素、cn、氧代、羟基、氨基、低级烷基、全氟低级烷基和低级烷氧基的取代基取代。
[0094]
在本发明的某些实施方案中，r8的环系统是饱和的，包含一个或多个双键，或者是芳族的。包含r8的环系统优选为具有4至10个环原子的单环或双环系统。在本发明的某些方
面中，r8选自：
[0095][0096]
其中r9选自h、卤素和低级烷基。
[0097]
在某些实施方案中，r2是取代的芳基并优选为取代的苯基。
[0098]
在本发明的某些方面，根据本发明的可用化合物包括具有式ii、iii或iv的那些：
[0099][0100]
其中r2、r6、r7、x和z如上文对式i所定义。
[0101]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式v或vi的那些：
[0102][0103]
其中r6、r7、x、z和r
10
如上文对式i所定义。
[0104]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式vii的那些：
[0105][0106]
其中r6、r7、x、z和r
10
如上文对式i所定义。
[0107]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式ix的那些：
[0108][0109]
其中r6、r7、x和z如上文对式i所定义，并且t是
‑
(ch2)
y
‑
r
11
，其中y和r
11
如上文对式i所定义。
[0110]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式x的那些：
[0111][0112]
其中r6、r7、x和z如上文对式i所定义，并且r’是如上文对式i所定义的r
13
。
[0113]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式xi的那些：
[0114][0115]
其中r6、r7、x和z如上文对式i所定义，并且t1是如上文对式i所定义的r
12
。
[0116]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式xii的那些：
[0117][0118]
其中r6、r7、x和z如上文对式i所定义，并且t1是如上文对式i所定义的r
12
。
[0119]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式xiii的那些：
[0120][0121]
其中r6、r7、x和z如上文对式i所定义，a是如上文对式i所定义的m并且w是如上文对式i所定义的r
12
。
[0122]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式xiv的那些：
[0123][0124]
其中x、z和r
13
如上文对式i所定义。
[0125]
在本发明的某些方面，对于上面描述的每种化合物，部分
[0126][0127]
可选自杂芳基，使得y为n。在本发明的其他方面，y和x两者都是n，并且在另外其他方面，x、y和z各自是n。在本发明的优选方面，此杂芳基选自下列基团中的任何一个：
[0128][0129]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式xv的那些：
[0130][0131]
其中r6、r7和r
10
如上文对式i所定义。
[0132]
在本发明的其他方面，根据本发明的可用化合物包括具有式xvi的那些：
[0133][0134]
或其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中：
[0135]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环或芳族环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0136]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、
‑
oh、
‑
nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0137]
r2选自h和卤素；
[0138]
每个r3和r4独立地选自由h、c1‑
c8烷基、
‑
cn、卤素、
‑
oh、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
nr
31
r
32
、c1‑
c3全氟烷基、
‑
o
‑
(ch2)
a
nr
31
r
32
、
‑
nr
31
‑
(ch2)
a
nr
33
r
34
、
‑
nr
31
‑
(ch2)
a
or3、芳基、c3‑
c7环烷基、具有多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)的取代基取代；
[0139]
r
31
和r
32
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组；
[0140]
或r
31
和r
32
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0141]
r
33
和r
34
独立地选自由h和c1‑
c8烷基组成的组；
[0142]
a选自0至6；
[0143]
r5选自h和c1‑
c6烷基；
[0144]
r6选自由h、卤素和c1‑
c6烷基组成的组。
[0145]
在本发明的一个实施方案中，r
13
选自由c1‑
c8烷基、c3‑
c7环烷基和三至十二元杂环组成的组。在本发明的另一实施方案中，r
13
选自由异丙基、环烷基、n
‑
吗啉代和3
‑
吡啶组成的组。在本发明的一个实施方案中，r
14
是h。在本发明的一个实施方案中，r2是h。在本发明的另一个实施方案中，r2是f。在本发明的一个实施方案中，r3选自由h、c1‑
c8烷基和c1‑
c3全氟烷基组成的组。在本发明的另一实施方案中，r3选自由h、ch3和cf3组成的组。在本发明的一个实施方案中，r4选自由h、c1‑
c8烷基、c1‑
c3全氟烷基和三至十二元杂环组成的组。在本发明的另一实施方案中，r4选自由h、ch3、cf3、哌嗪基和n
‑
吗啉代组成的组。
[0146]
在本发明的方面，根据本发明可用的化合物包括具有式xvii的那些：
[0147][0148]
或其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中：
[0149]
x选自由
‑
nh
‑
c(＝o)
‑
chr
13
r
14
；
‑
nh
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
b
‑
nr
13
r
14
；
‑
c(＝o)
‑
nr
13
r
14
组成的组；
[0150]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0151]
每个r3和r4独立地选自由h、c1‑
c8烷基、
‑
cn、卤素、
‑
oh、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
nr
31
r
32
、c1‑
c3全氟烷基、
‑
o
‑
(ch2)
a
nr
31
r
32
、芳基、c3‑
c7环烷基、具有多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0152]
r
31
和r
32
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组；
[0153]
a选自0至6；
[0154]
b选自0至1。
[0155]
在本发明的实施方案中，r
13
是三至十二元杂环。在本发明的另一实施方案中，r
13
选自由异丙基、环烷基、n
‑
吗啉代、3
‑
吡啶基、四氢吡喃基、哌啶基和四氢硫吡喃二氧化物组成的组中。在本发明的另一实施方案中，r
13
选自由以下组成的组：
[0156]
在本发明的一个实施方案中，r
14
是h。在本发明的实施方案中，r3和r4各自为h。
[0157]
在本发明的另一方面，根据本发明可用的化合物包括具有式xviii的那些：
烷基)、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环或芳族环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0173]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、
‑
oh、
‑
nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0174]
y选自由s、ch2和
‑
cr
31
r
32
‑
组成的组；
[0175]
r2选自h和卤素；
[0176]
每个r3和r4独立地选自由h、c1‑
c8烷基、
‑
cn、卤素、
‑
oh、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
nr
31
r
32
、c1‑
c3全氟烷基、
‑
o
‑
(ch2)
a
nr
31
r
32
、
‑
nr
31
‑
(ch2)
a
nr
33
r
34
、
‑
nr
31
‑
(ch2)
a
or
33
、芳基、c3‑
c7环烷基、具有多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)的取代基取代；
[0177]
r
31
和r
32
独立地选自由h、卤素、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组；
[0178]
或r
31
和r
32
可以合起来一起形成三至十二元环烷基或具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0179]
r
33
和r
34
独立地选自由h和c1‑
c8烷基组成的组；
[0180]
a选自0至6。
[0181]
在本发明的实施方案中，y形成三元环烷烃。在本发明的另一实施方案中，y是氟。
[0182]
在本发明的另一方面，根据本发明可用的化合物包括具有式xx的那些：
[0183][0184]
或其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中：
[0185]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环或芳族环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0186]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、
‑
oh、
‑
nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0187]
r4选自由h、c1‑
c8烷基、
‑
cn、卤素、
‑
oh、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
nr
31
r
32
、cf3、
‑
o
‑
(ch2)
a
nr
31
r
32
、芳基、c3‑
c7环烷基、具有多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0188]
r
31
和r
32
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组；
[0189]
或r
31
和r
32
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0190]
r5选自h和c1‑
c6烷基。
[0191]
在本发明的另一方面，根据本发明可用的化合物包括具有式xxi的那些：
[0192][0193]
或其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中：
[0194]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环或芳族环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0195]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、
‑
oh、
‑
nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0196]
r4选自由h、c1‑
c8烷基、
‑
cn、卤素、
‑
oh、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
nr
31
r
32
、c1‑
c3全氟烷基、
‑
o
‑
(ch2)
a
nr
31
r
32
、芳基、c3‑
c7环烷基、具有多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0197]
r
31
和r
32
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组；
[0198]
或r
31
和r
32
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0199]
a选自0至6。
[0200]
在本发明的另一方面，根据本发明可用的化合物包括具有式xxii的那些：
烷基)、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环或芳族环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0214]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、
‑
oh、
‑
nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0215]
x选自0至1；
[0216]
r2选自由环己基吡啶、1h
‑
吡唑和吡啶组成的组；
[0217][0218]
x选自n或cr3；
[0219]
y选自n或cr3；
[0220]
z选自n或cr4；
[0221]
其中x、y、z中的至少一个为n；
[0222]
r4选自由h、c1‑
c8烷基、
‑
cn、卤素、
‑
oh、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
nr
31
r
32
、cf3、
‑
o
‑
(ch2)
a
nr
31
r
32
、nr
31
‑
(ch2)
a
nr
33
r
34
、
‑
nr
31
‑
(ch2)
a
or
33
、芳基、c3‑
c7环烷基、具有多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)的取代基取代；
[0223]
r
31
和r
32
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组；
[0224]
或r
31
和r
32
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0225]
a选自0至6；
[0226]
q选自基团nr5和o；
[0227]
r5选自h和c1‑
c6烷基。
[0228]
在本发明的另一方面，根据本发明可用的化合物包括具有式xxiv的那些：
[0229][0230][0231]
或其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中：
[0232]
r
12
选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、氨基、nr
31
r
32
、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环或芳族环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0233]
x选自0至2；
[0234]
每个r3和r4独立地选自由h、c1‑
c8烷基、
‑
cn、卤素、
‑
oh、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
nr
31
r
32
、cf3、
‑
o
‑
(ch2)
a
nr
31
r
32
、芳基、c3‑
c7环烷基、具有多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0235]
r
31
和r
32
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、c3‑
c7环烷基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组；
[0236]
或r
31
和r
32
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0237]
a选自1至6。
[0238]
在本发明的另一方面，根据本发明可用的化合物包括具有式xxv的那些：
[0239][0240]
或其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中：
[0241]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环或芳族环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、氧代、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0242]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、
‑
oh、
‑
nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0243]
x选自0至3；
[0244]
r
15
选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、芳基、杂芳基、杂环和c3‑
c7环烷基组成的组；
[0245]
每个r3和r4独立地选自由h、c1‑
c8烷基、
‑
cn、卤素、
‑
oh、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
nr
31
r
32
、cf3、
‑
o
‑
(ch2)
a
nr
31
r
32
、芳基、c3‑
c7环烷基、具有多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取
代；
[0246]
r
31
和r
32
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基和
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组；
[0247]
或r
31
和r
32
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素和c1‑
c6烷基的取代基取代；
[0248]
a选自1至6。
[0249]
在本发明的其他方面，所述rock2抑制化合物可以选自2006年3月27日提交的pct/us2006/011271中公开的rock2化合物，将其全部内容并入本文。因此，所述rock2抑制化合物可具有式xxxi：
[0250][0251]
或其药学上可接受的盐，其中：
[0252]
r1选自由
‑
o
‑
(ch2)
y
‑
co2r
12
、
‑
(ch2)
y
‑
c(＝o)nr
13
r
14
、
‑
o
‑
(ch2)
y
‑
杂芳基、
‑
o
‑
(ch2)
y
‑
环烷基、
‑
o
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
y
‑
nr
13
r
14
、
‑
o
‑
(ch2)
z
‑
nr
13
r
14
、
‑
nh
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
y
‑
nr
13
r
14
、
‑
nh
‑
c(＝o)
‑
x
‑
r
15
、
‑
nh
‑
(ch2)
y
‑
nr
13
r
14
组成的组；
[0253]
r
12
选自由c1‑
c6烷基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个在一个或多个碳原子处可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0254]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
16
r
17
、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0255]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、oh、nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0256]
x选自共价键、o、nh和c1‑
c6烷基；
[0257]
r
15
选自由杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、oh、nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0258]
或r
15
选自
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
16
r
17
、
‑
co2r
18
、
‑
o
‑
(ch2)
x
‑
co2r
18
和
‑
c(＝o)nr
16
r
17
；
[0259]
r
16
和r
17
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c1‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、oh、nh2、cn和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0260]
或r
16
和r
17
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0261]
r
18
选自由h、芳烷基、杂芳基、c1‑
c6烷基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0262]
x选自0至6；
[0263]
y选自0至6；
[0264]
z选自2至6；
[0265]
每个r2独立地选自由低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基和全氟低级烷基组成的组；
[0266]
每个r3独立地选自由低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基和全氟低级烷基组成的组；
[0267]
r4选自
‑
(ch2)
a
‑
nr
43
r
44
、
‑
y
‑
r
42
、
‑
o
‑
(ch2)
a
‑
co2r
42
、
‑
o
‑
(ch2)
a
‑
c(＝o)nr
43
r
44
、
‑
o
‑
(ch2)
a
‑
杂芳基、
‑
o
‑
(ch2)
a
‑
环烷基、
‑
o
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
a
‑
nr
43
r
44
、
‑
o
‑
(ch2)
c
‑
nr
43
r
44
、
‑
nh
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
a
‑
nr
43
r
44
、
‑
nh
‑
c(＝o)
‑
y
‑
r
45
、
‑
nh
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
a
‑
nr
43
r
44
；
[0268]
r
42
选自由c1‑
c6烷基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
46
r
47
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
46
r
47
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组，其中的每一个在一个或多个碳原子处可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0269]
r
43
和r
44
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c1‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
46
r
47
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
46
r
47
、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0270]
或r
43
和r
44
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0271]
y选自共价键、o、nh和c1‑
c6烷基；
[0272]
r
45
选自由h、芳基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
46
r
47
、
‑
co2r
48
、
‑
o
‑
(ch2)
b
‑
co2r
48
和
‑
c(＝o)nr
46
r
47
组成的组，
[0273]
r
46
和r
47
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c1‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的
组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0274]
或r
46
和r
47
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0275]
r
48
选自由h、芳基、芳烷基、杂芳基、c1‑
c6烷基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
46
r
47
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0276]
a选自0至6；
[0277]
b选自0至6；
[0278]
c选自2至6；
[0279]
r5选自由h、c1‑
c6烷基、
‑
(ch2)
d
‑
c(＝o)
‑
nr
53
r
54
、
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
d
‑
nr
53
r
54
、
‑
c(＝o)
‑
x
‑
r
55
和
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
d
‑
nr
53
r
54
组成的组；
[0280]
r
53
和r
54
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
56
r
57
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
56
r
57
、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0281]
或r
53
和r
54
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0282]
r
55
选自由h、芳基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
56
r
57
、
‑
co2r
58
、
‑
o
‑
(ch2)
e
‑
co2r
58
和
‑
c(＝o)nr
56
r
57
组成的组，
[0283]
r
56
和r
57
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c1‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0284]
或r
56
和r
57
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0285]
r
58
选自由h、芳基、芳烷基、杂芳基、c1‑
c6烷基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
56
r
57
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0286]
d选自0至6；
[0287]
e选自0至6；
[0288]
r6选自由h、c1‑
c6烷基、
‑
(ch2)
r
‑
c(＝o)
‑
nr
63
r
64
、
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
r
‑
nr
63
r
64
、
‑
c(＝o)
‑
x
‑
r
65
和
‑
c(＝o)
‑
(ch2)
r
‑
nr
63
r
64
组成的组；
[0289]
r
63
和r
64
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
66
r
67
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
66
r
67
、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0290]
或r
63
和r
64
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0291]
r
65
选自由h、芳基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
66
r
67
、
‑
co2r
68
、
‑
o
‑
(ch2)
s
‑
co2r
68
和
‑
c(＝o)nr
66
r
67
组成的组，
[0292]
r
66
和r
67
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c1‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0293]
或r
66
和r
67
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0294]
r
68
选自由h、芳基、芳烷基、杂芳基、c1‑
c6烷基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
66
r
67
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0295]
r选自0至6；
[0296]
s选自0至6；
[0297]
n选自0至4；
[0298]
m选自0至3；并且
[0299]
p选自0至1。
[0300]
在式xxxi的一个实施方案中，r4和r5独立地选自h和c1‑
c6烷基。在另一个实施方案中，r4和r5是h。
[0301]
在本发明的一个实施方案中，所述式xxxi化合物具有式xxxii：
[0302][0303]
或其药学上可接受的盐，其中r1、r2、r3、n和m与式i化合物情况相同。
[0304]
在本发明的一个实施方案中，所述式xxxi化合物具有式xxxiii：
[0305][0306]
或其药学上可接受的盐，其中r1、r2、r3、n和m与式i化合物情况相同。
[0307]
在本发明的一个实施方案中，所述式xxxi化合物具有式xxxiv：
[0308][0309]
或其药学上可接受的盐，其中：
[0310]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
16
r
17
、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0311]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0312]
x选自共价键、o、nh和c1‑
c6烷基；
[0313]
r
16
和r
17
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0314]
或r
16
和r
17
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0315]
每个r2独立地选自由低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基和全氟低级烷基组成的组；
[0316]
每个r3独立地选自由低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基和全氟低级烷基
烷基)
‑
c(＝o)nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个在一个或多个碳原子处可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0330]
每个r2独立地选自由低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基和全氟低级烷基组成的组；
[0331]
每个r3独立地选自由低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基和全氟低级烷基组成的组；
[0332]
n选自0至4；并且
[0333]
m选自0至3。
[0334]
在本发明的一个实施方案中，所述式xxxi化合物具有式xxxv
a
：
[0335][0336]
或其药学上可接受的盐，其中：
[0337]
r
12
选自由c1‑
c6烷基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个在一个或多个碳原子处可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代。
[0338]
在本发明的另一实施方案中，所述rho激酶抑制剂具有xxxvi：
[0339][0340]
或其药学上可接受的盐，其中：
[0341]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
16
r
17
、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全
氟烷基的取代基取代；
[0342]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0343]
r
16
和r
17
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0344]
或r
16
和r
17
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0345]
每个r2独立地选自由低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基和全氟低级烷基组成的组；
[0346]
每个r3独立地选自由低级烷基、cn、卤素、羟基、低级烷氧基、氨基和全氟低级烷基组成的组；
[0347]
n选自0至4；并且
[0348]
m选自0至3。
[0349]
在本发明的一个实施方案中，所述式xxxvi化合物具有式xxxvi
a
：
[0350][0351]
或其药学上可接受的盐，其中：
[0352]
r
13
和r
14
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
nr
16
r
17
、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
c(＝o)nr
16
r
17
、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c3‑
c7环烷基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0353]
或r
13
和r
14
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、c3‑
c7环烷基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0354]
r
16
和r
17
独立地选自由h、c1‑
c8烷基、c2‑
c8烯基、c2‑
c8炔基、
‑
(c1‑
c6烷基)
‑
o
‑
(c1‑
c6烷基)、芳基、芳烷基、杂芳基、c3‑
c7环烷基、包含多达3个杂原子的三至十二元杂环组成的组，其中的每一个可以任选地被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代；
[0355]
或r
16
和r
17
可以合起来一起形成具有多达3个杂原子的三至十二元杂环，其任选地
被1至3个独立地选自卤素、c1‑
c6烷基、c2‑
c6烯基、c1‑
c6烷氧基、氧代、羟基、氨基、氰基和c1‑
c3全氟烷基的取代基取代。
[0356]
在本发明的进一步方面，所述式xxxi化合物是slx
‑
2119：
[0357][0358]
在本发明的进一步方面，所述rho激酶抑制剂选自由以下组成的组：
[0359]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺，
[0360]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
(2
‑
甲氧基乙基)乙酰胺，
[0361]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
(吡啶
‑3‑
基)乙酰胺，
[0362]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑1‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)乙酮，
[0363]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑1‑
吗啉代乙酮，
[0364]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
甲基乙酰胺，
[0365]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
((r)
‑
吡咯烷
‑3‑
基)乙酰胺，
[0366]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
((s)
‑
吡咯烷
‑3‑
基)乙酰胺，
[0367]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
((r)
‑
四氢呋喃
‑3‑
基)乙酰胺，
[0368]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑1‑
(哌啶
‑1‑
基)乙酮，
[0369]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
叔丁基乙酰胺，
[0370]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
乙基乙酰胺，
[0371]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
(氰基甲基)乙酰胺，
[0372]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
环丁基乙酰胺，
[0373]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丁基乙酰胺，
[0374]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
(2，2，2
‑
三氟乙基)乙酰胺，
[0375]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
环己基乙酰胺，
[0376]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
新戊基乙酰胺，
[0377]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
(丙
‑2‑
炔基)乙酰胺，
[0378]
n
‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基)
‑4‑
甲基哌嗪
‑1‑
甲酰胺，
[0379]3‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基)
‑
1，1
‑
二甲基脲，
[0380]
n
‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基)
‑2‑
甲氧基乙酰胺，
[0381]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基氨基)
‑2‑
氧代乙酸甲酯，
[0382]1‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基)
‑3‑
(2
‑
(二甲基氨基)乙基)脲，
[0383]
n
‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基)
‑2‑
吗啉代乙酰胺，
[0384]
n
‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基)
‑3‑
(4
‑
异丙基哌嗪
‑1‑
基)丙酰胺，n
‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基)哌啶
‑4‑
甲酰胺，和n
‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)
‑6‑
(2
‑
甲氧基乙氧基)喹唑啉
‑2‑
基)苯基)丁酰胺。
[0385]
在本发明的进一步方面，所述rho激酶抑制剂是：
[0386][0387]
如本文所使用的术语“杂原子”指除碳或氢以外的任何元素的原子。优选的杂原子是氮、氧和硫。
[0388]
术语“烷基”是指饱和脂族基的基团，包括直链烷基和支链烷基。在优选的实施方案中，直链或支链烷基在其主链中具有10个或更少的碳原子(例如，对于直链而言c1‑
c
10
，对于支链而言c3‑
c
10
)。类似地，优选的环烷基在其环结构中具有3
‑
10个碳原子，并且更优选在所述环结构中具有3至6个碳原子。
[0389]
除非对碳原子的数量另有指定，如本文中使用的“低级烷基”是指如上定义的烷基，但具有一到六个碳原子，并且更优选一至四个碳原子。类似地，“低级烯基”和“低级炔基”具有类似的链长度(c2‑
c6)。优选的烷基是低级烷基。在优选的实施方案中，本文中指定的作为烷基的取代基是低级烷基。
[0390]
术语“环烷基”是指在环内具有3至7个碳原子的饱和碳环基。优选的环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
[0391]
如本文中使用的术语“芳烷基”是指被芳基(例如，芳族或杂芳族基)取代的烷基。
[0392]
术语“烯基”和“炔基”是指在长度和可能的取代基上与上述烷基类似的不饱和脂族基，但分别包含至少一个双键或三键。
[0393]
如本文中使用的术语“芳基”包括5
‑
和6
‑
元单环芳族基团，其可以包括零到四个杂原子，例如苯、芘、吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、三唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶等等。在环结构中具有杂原子的那些芳基也可被称为“芳基杂环”、“杂芳族”或“杂芳基”。芳族环可在一个或多个环位置处被如上所述的取代基取代，这样的取代基例如卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、烷氧基、氨基、硝基、巯基、亚氨基、酰氨基、膦酸酯、次膦酸酯、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺酰基、磺酰氨基、酮、醛、酯、杂环基、芳族或杂芳族部分、
‑
cf3、
‑
cn等等。术语“芳基”还包括具有两个或更多个环的多元环系统，其中两个邻接环(所述环是“稠合环”)共有两个或更多个碳，其中所述环中的至少一个是芳族的，例如其他环可以是环烷基、环烯基、芳基和/或杂环基。
[0394]
术语“杂环基(heterocyclyl)”或“杂环基(heterocyclic group)”是指3
‑
至10
‑
元环结构，更优选5
‑
或6
‑
元环，其环结构包括一到四个杂原子。杂环也可以是多元环。杂环基包括，例如噻吩、噻蒽、呋喃、吡喃、异苯并呋喃、色烯、呫吨、吩噁嗪、吡咯、咪唑、吡唑、异噻唑、异噁唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、吲嗪、异吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、异喹啉、喹啉、酞嗪、萘啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、嘧啶、菲咯啉、吩嗪、吩砷嗪、吩噻嗪、呋咱、吩噁嗪、吡咯烷、氧杂环戊烷、硫杂环戊烷、噁唑、哌啶、哌嗪、吗啉、内酯、内酰胺如氮杂环丁酮和吡咯烷酮、磺内酰胺、磺内酯等等。所述杂环可以在一个或多个位置处被如上所述的取代基取代，这样的取代基例如卤素、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、氨基、硝基、巯基、亚氨基、酰氨基、膦酸酯、次膦酸酯、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺酰基、酮、醛、酯、杂环基、芳族或杂芳族部分、
‑
cf3、
‑
cn等等。
[0395]
术语“多环基(polycyclyl)”或“多环基(polycyclic group)”是指两个或更多个环(例如，环烷基、环烯基、芳基和/或杂环基)，其中两个邻接环共有两个或更多个碳，例如，所述环是“稠合环”。通过非毗连原子结合的环被称为“桥连”环。所述多环基的每个环可以被如上所述的取代基取代，这样的取代基例如卤素、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、氨基、硝基、巯基、亚氨基、酰氨基、膦酸酯、次膦酸酯、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺酰基、酮、醛、酯、杂环基、芳族或杂芳族部分、
‑
cf3、
‑
cn等等。
[0396]
如本文中使用的术语“硝基”是指
‑
no2。术语“卤素(halogen)”或“卤素(halo)”表
示
‑
f、
‑
cl、
‑
br或
‑
i。术语“羟基”是指
‑
oh。
[0397]
术语“胺”和“氨基”是指未取代和取代的胺，例如，可以由以下通式表示的部分：
[0398][0399]
其中r、r
′
和r
″
各自独立地代表h、烷基、烯基、炔基、芳烷基、芳基和杂环基，并且最优选h或低级烷基。
[0400]
如本文中使用的术语“烷氧基(alkoxyl)”或“烷氧基(alkoxy)”是指具有连接的氧基的如上定义的烷基。代表性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基等。术语低级烷氧基是指具有1至6个碳原子的烷氧基。
[0401]
如本文中使用的术语“氧代”是指具有与另一个原子、特别是与碳或硫的双键的氧原子。
[0402]
如本文所用，每个表述的定义，例如烷基、m、n、r等，当它在任何结构中出现一次以上时，旨在独立于它另外在相同结构中的定义。
[0403]
应该理解的是，“取代的”、“取代”或“被......取代”包括这样的取代是根据被取代原子和取代基所允许的化合价的暗含条件，并且该取代产生稳定的化合物，例如，不会自发地进行转化例如重排、环化、消除等。
[0404]
如本文所用，术语“取代的”被设想包括有机化合物的所有允许的取代基。在一个广泛的方面，允许的取代基包括有机化合物的非环状和环状、支链和非支链、碳环和杂环、芳族和非芳族的取代基。示例性的取代基包括，例如，如上文所述的那些。
[0405]
本发明的某些化合物可以特定的几何或立体异构形式存在。本发明涵盖所有这样的化合物，包括其顺式和反式异构体、r
‑
和s
‑
对映体、非对映体、其外消旋混合物及其其他混合物，均落入本发明的范围之内。另外的不对称碳原子可存在于取代基中，如烷基。所有这样的异构体以及其混合物都包括在本发明中。
[0406]
本发明化合物的某些实施方案可含有碱性官能团，如氨基或烷氨基，并因此能够形成具有药学上可接受的酸的药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的盐”在上下文中是指本发明化合物的相对无毒的无机和有机酸加成盐。代表性的盐包括hcl盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐(napthylate)和甲磺酸盐等。(参见，例如，berge等人，“pharmaceutical salts”，j.pharm.sci.(1977)66：1
‑
19)。
[0407]
在其他情况下，本发明的化合物可含有一个或多个酸性官能团，并因此能够形成具有药学上可接受的碱的药学上可接受的盐。代表性的盐包括碱金属或碱土金属盐，例如锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐等。可用于碱加成盐的形成的代表性有机胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。(参见，例如，berge等人，同上)。
[0408]
在一个方面，本发明提供了是rho激酶抑制剂的式i化合物。rho激酶(rock)，一种丝氨酸/苏氨酸激酶，作为小gtp结合蛋白rho的靶蛋白，并且是许多细胞功能，包括焦点粘连、运动、平滑肌收缩和胞质分裂的重要介质。在平滑肌中，rock在ca
2+
致敏和血管张力的控制中起重要作用。它调节球蛋白ii的肌球蛋白ii轻链的磷酸化水平，主要是通过肌球蛋白
磷酸酶的抑制，并有助于平滑肌收缩中的激动剂诱导的ca
2+
致敏。
[0409]
rho激酶以两种形式：rock 1(rockβ；p160
‑
rock)和rock2(rockα)存在。在一些实施方案中，式i化合物选择性地抑制rock1。在一些实施方案中，式i化合物选择性地抑制rock2。在一些实施方案中，式i化合物相对于rock1和rock2的抑制无选择性。
[0410]
确定激酶抑制的方法是现有技术中公知的。例如，酶的激酶活性和试验化合物的抑制能力可通过测定底物的酶特异性磷酸化来确定。可使用商业测定和试剂盒。例如，激酶抑制可使用测定(molecular devices)来确定。该测定方法包括使用荧光标记的肽底物。通过目标激酶使该标记的肽磷酸化有助于经由磷酸基团和三价金属之间的特定的高亲和相互作用将所述肽结合到基于所述三价金属的纳米颗粒。与纳米颗粒的接近导致增加的荧光偏振。通过激酶抑制剂抑制该激酶防止了底物的磷酸化，从而限制了荧光标记的底物结合到纳米颗粒。这样的测定可以与微孔测定形式相容，实现了同时确定多种化合物的ic
50
。
[0411]
在本发明的另一方面，提供了治疗患有疾病的患者的方法，所述方法包括向需要这样的治疗的患者施用治疗有效量的本发明的化合物。如本文所用的短语“治疗有效量”是指含有本发明的化合物的化合物、材料或组合物的量，该量对在动物中的至少一个细胞亚群中以可适用于任何医学治疗的合理的利益/风险比，例如可适用于任何医学治疗的合理的副作用产生某些期望的治疗效果是有效的。
[0412]
抑制rho激酶和或rho激酶介导的磷酸化的本发明化合物可用于治疗患有涉及rho激酶功能的心血管和非心血管疾病的患者，如高血压、肺高压、动脉粥样硬化、再狭窄、冠状心脏病、心脏肥大、高眼压症、视网膜病、缺血性疾病、脑缺血、脑血管痉挛、阴茎勃起功能障碍、外周循环障碍、外周动脉阻塞性疾病、青光眼，(例如，调节眼内压力)、纤维样肺、纤维样肝、肌瘤肾、慢性阻塞性肺疾病(copd)、成人呼吸窘迫综合症、中枢神经系统疾病，如神经元变性和脊髓损伤。此外，本发明的rho激酶抑制剂可用于治疗诸如血小板聚集和白细胞聚集的动脉血栓形成病症和骨吸收。
[0413]
在某些实施方案中，本发明的rho激酶抑制剂用于治疗炎症，包括但不限于哮喘、心血管炎症、肾炎和动脉硬化。
[0414]
本发明的rho激酶抑制剂抑制了肿瘤细胞的生长和转移，以及血管生成，并且可用于治疗瘤形成疾病。瘤形成疾病包括因异常或不受控制的细胞分裂引起的任何恶性生长或肿瘤，并且可以通过淋巴系统或血流扩散到身体的其他部位。瘤形成疾病包括但不限于，淋巴瘤(通常为恶性的淋巴组织的肿瘤)，癌(来源于上皮组织的任何恶性肿瘤)，白血病(血液形成组织的恶性肿瘤；其特征在于白细胞的异常增殖)，肉瘤(产生自结缔组织(骨或肌肉等)的通常恶性肿瘤)和胚细胞瘤(前体细胞中的恶性肿瘤)。非限制性实例包括鳞状细胞癌、小细胞肺癌、垂体癌、食道癌、星形细胞瘤、软组织肉瘤、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质胚细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝细胞癌、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、肝癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、脑癌、子宫内膜癌、睾丸癌、胆管癌、胆囊癌、胃癌、黑色素瘤或不同类型的头颈癌。
[0415]
根据本发明，rock抑制剂用于实现体重减轻和/或限制体重增加。在一个优选的实施方案中，rock抑制剂是rock2选择性的。rock
‑
2抑制剂促进了正常受试者中的体重减轻，
并限制了易肥胖的受试者中的体重增加。
[0416]
在本发明的一个实施方案中，rock抑制剂被用来减少或防止胰岛素抵抗或恢复胰岛素敏感性。因此，在一个实施方案中，本发明的化合物用于促进或还原胰岛素依赖性葡萄糖摄取。在本发明的另一个实施方案中，本发明的rock抑制剂用于促进或还原葡萄糖耐受性。在本发明的另一个实施方案中，本发明的rock抑制剂用于治疗代谢综合征。在另一个实施方案中，本发明的rock抑制剂用于减少或防止高胰岛素血症。在本发明的一个实施方案中，rock抑制剂用于治疗糖尿病(尤其是2型糖尿病)。本发明的rock抑制剂还可以用于促进或恢复胰岛素介导的血管平滑肌细胞(vsmc)的松弛。在优选的实施方案中，rock抑制剂是rock2选择性的。
[0417]
在某些实施方案中，本发明的化合物可用于治疗中枢神经系统病症。这样的病症可能涉及神经元变性或对神经组织的物理损伤，包括但不限于亨廷顿氏病、帕金森氏病、阿尔茨海默氏症、肌萎缩性侧索硬化症(als)或多发性硬化。在某些实施方案中，本发明的化合物具有对于治疗这样的病症特别有用的性质(例如有利的组织分布于中枢神经系统的组织中)以及穿过血脑屏障的能力。
[0418]
本发明提供了为同种型选择性的泛rock抑制剂(即抑制rock1和rock1化合物)以及rock抑制剂。如上所述，在本发明的某些实施方案中，rock2选择性抑制剂可以是优选的。例如，一项研究发现相比于无肿瘤的肝，rock2经常在肝细胞癌中是过表达的而rock1表达未被改变。其他可受益于采用rock2选择性抑制剂的治疗的癌症包括但不限于结肠癌和膀胱癌。与此相反，在乳腺肿瘤中已经观察到的rock1表达水平更高。任何癌症可被测试，以确定是否有rock1和/或rock2的过表达并依此进行治疗。在某些情况下，rock1和rock2同种型在调节某些下游靶方面显示出相似性。
[0419]
在另一个方面，本发明提供了与药学可接受的载体(添加剂)和/或稀释剂一起配制的包含治疗有效量的一种或多种式i化合物的药学上可接受的组合物。如在下面详细描述的，可以将本发明的药物组合物特别配制用于以固体或液体形式施用，包括适合于以下施用的那些：(1)口服施用，例如，灌服剂(水性的或非水性的溶液或悬浮液)，片剂(例如针对颊、舌下和全身吸收的那些)、大丸剂、粉末、颗粒、施用于舌的糊剂；(2)胃肠外施用，例如通过皮下、肌内、静脉内或硬膜外注射，例如，无菌溶液或悬浮液，或持续释放的制剂；(3)局部施用，例如作为乳膏、软膏或涂在皮肤上的控释贴剂或喷雾剂；(4)阴道内或直肠内，例如作为阴道栓剂、霜剂或泡沫剂；(5)舌下施用；(6)经眼；(7)经皮；或(8)经鼻。
[0420]
如本文所用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内，适合与人类和动物的组织接触而没有毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，并且与合理的利益/风险比相当的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
[0421]
如本文所用的短语“药学上可接受的载体”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(例如，润滑剂、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌、或硬脂酸)，或包封材料的溶剂，涉及将主题化合物从一个器官或身体的一部分携带或输送到另一个器官或身体的一部分。每种载体必须在与制剂的其他成分相容且不伤害患者的意义上是“可接受的”。可充当药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：(1)糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；(4)粉末状黄蓍胶；(5)麦芽；(6)
明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；(9)油，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇，例如丙二醇；(11)多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)ph缓冲溶液；(21)聚酯，聚碳酸酯和/或聚酐；和(22)在药物制剂中使用的其他无毒的可相容物质。
[0422]
如上所述，本发明化合物的某些实施方案可含有碱性官能团，如氨基或烷氨基，并因此能够与药学上可接受的酸形成药学上可接受的盐。在这一点上，术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的相对无毒的无机和有机酸加成盐。这些盐可在施用媒介物或剂型制备工艺中原位制备，或通过使呈其游离碱形式的本发明的经纯化的化合物分别与合适的有机或无机酸反应，并分离出由此在随后的纯化过程中形成的盐。代表性的盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐(napthylate)、甲磺酸盐、葡庚糖酸盐、乳糖酸盐和月桂基磺酸盐等。(参见，例如，berge等人，(1977)“pharmaceutical salts”，j.pharm.sci.66：1
‑
19)。
[0423]
主题化合物的药学上可接受的盐包括所述化合物的常规的无毒盐或季铵盐，例如，来自无毒有机酸或无机酸。例如，这些常规无毒盐包括衍生自无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的那些；和通过有机酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2
‑
乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、异硫羰酸(isothionic)等制备的盐。
[0424]
在其他情况下，本发明的化合物可含有一个或多个酸性官能团，并因此能够与药学上可接受的碱形成药学上可接受的盐。在这一点上，术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的相对无毒的无机和有机碱加成盐。同样，这些盐可在施用媒介物或剂型制备工艺中原位制备，或通过使呈其游离碱形式的本发明的经纯化的化合物分别与合适的碱(例如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐)、与氨水或与药学上可接受的伯胺、仲胺或叔胺反应。代表性的碱金属或碱土金属盐包括锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐和铝盐等。可用于碱加成盐的形成的代表性有机胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。(参见，例如，berge等人，同上)。
[0425]
润湿剂、乳化剂和诸如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁的润滑剂以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于所述组合物中。
[0426]
药学上可接受的抗氧化剂的实例包括：(1)水溶性抗氧化剂，如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠等；(2)油溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基苯甲醚(bha)、丁基化羟基甲苯(bht)、卵磷脂、没食子酸酸丙酯、α
‑
生育酚等；和(3)金属螯合剂，如柠檬酸、乙二胺四乙酸(edta)、山梨醇、酒石酸、磷酸等。
[0427]
本发明的制剂包括适合于口服、鼻、局部(包括口腔和舌下)、直肠、阴道和/或胃肠外施用的那些。所述制剂可以方便地以单位剂量形式呈现，并且可以通过药学领域中任何公知的方法来制备。可与载体材料组合以产生单一剂量形式的活性成分的量将取决于待治疗的宿主、施用的具体模式而变化。可与载体材料组合以产生单一剂量形式的活性成分的
量通常将是产生治疗效果的化合物的量。通常，以100％计，该量的范围将为活性成分的约0.1％至约99％，优选约5％至约70％，最优选约10％至约30％。
[0428]
在某些实施方案中，本发明的制剂包括选自由环糊精、纤维素、脂质体、胶束形成剂(例如胆汁酸)和聚合物载体(例如聚酯和聚酐)组成的组中的赋形剂；以及本发明的化合物。在某些实施方案中，上述的制剂使得本发明的化合物是口服生物可利用的。
[0429]
制备这些制剂或组合物的方法包括将本发明的化合物与载体和任选的一种或多种辅助成分关联的步骤。一般而言，通过均匀且紧密地将本发明的化合物与液体载体或细碎的固体载体或两者关联，然后(如果必要的话)将产物成形来制备所述制剂。
[0430]
适于口服施用的本发明的制剂可以是胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用调味的基质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)、粉剂、颗粒剂、或作为在水性或非水性液体中的溶液或悬浮液、或作为水包油或油包水液体乳剂、或作为酏剂或糖浆、或作为软锭剂(使用惰性基质，如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)和/或漱口剂等形式，每一种均含有预定量的作为活性成分的本发明的化合物。本发明的化合物还可作为大丸剂、药糖剂或糊剂施用。
[0431]
在用于口服施用(胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、粉剂、颗粒剂、含片等)的本发明的固体剂型中，将活性成分与一种或多种药学上可接受的载体混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或下述的任何一种：(1)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘合剂，例如，羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；(3)保湿剂，例如甘油；(4)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；(5)溶液阻滞剂，如石蜡；(6)吸收促进剂，例如季铵化合物和表面活性剂，如泊洛沙姆和月桂基硫酸钠；(7)湿润剂，例如，鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯和非离子表面活性剂；(8)吸附剂，如高岭土和膨润土；(9)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠、硬脂酸锌、硬脂酸钠、硬脂酸以及其混合物；(10)着色剂；和(11)控释剂，例如交聚维酮或乙基纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，所述药物组合物还可以包含缓冲剂。相似类型的固体组合物也可用作软和硬壳明胶胶囊中的填充剂，所述胶囊使用诸如乳糖或牛奶糖的赋形剂以及高分子量聚乙二醇等。
[0432]
片剂可以任选地与一种或多种辅助成分通过压制或模制来制备。压制片可使用粘合剂(例如，明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，淀粉羟乙酸钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备。模制片可通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物来制备。
[0433]
本发明的药物组合物的片剂和其他固体剂型，如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂，可任选地被刻痕或用包衣剂和壳材制备，例如肠溶包衣剂和其他在药物配制领域中公知的包衣剂。它们也可以被配制成提供在其中的活性成分的缓释或控释，例如采用提供所需释放曲线的不同比例的羟丙基甲基纤维素、其他聚合物基质、脂质体和/或微球。它们可被配制成用于快速释放，例如冷冻干燥。它们可以通过例如细菌截留滤器过滤或通过掺入可以溶解于无菌水中的无菌固体组合物形式的灭菌剂，或者在使用前立即掺入一些其他无菌可注射介质来灭菌。这些组合物也可任选含有遮光剂，并且可以是这样的组合物：它们仅或优选在胃肠道的某一部分中释放出活性成分，任选以延迟的方式。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。所述活性成分也可以呈(适当时)具有一种或多种上述赋形剂的微囊化形式。
[0434]
用于口服施用的本发明化合物的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性成分之外，所述液体剂型可以含有通常在本领域中使用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3
‑
丁二醇、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇脂肪酸酯、以及其混合物。
[0435]
除惰性稀释剂之外，所述口服组合物还可以包括佐剂，例如湿润剂、乳化剂和悬浮剂，甜味剂，调味剂，着色剂，芳香剂和防腐剂。
[0436]
除活性化合物之外，悬浮液可含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和西黄蓍胶以及其混合物。
[0437]
适于直肠或阴道施用的本发明的药物组合物的制剂可以作为栓剂呈现，其可通过将一种或多种本发明的化合物与一种或多种合适的无刺激性赋形剂或载体混合来制备，所述赋形剂或载体包括例如，可可脂、聚乙二醇、栓剂蜡或水杨酸盐，而且其在室温下是固体，但在体温下是液体，因此其将在直肠或阴道腔中融化并释放出活性化合物。
[0438]
适于阴道施用的本发明的制剂还包括含有诸如本领域已知的适当的载体的阴道栓剂、棉塞、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫剂或喷雾制剂。
[0439]
用于本发明化合物的局部或透皮施用的剂型包括粉剂、喷雾剂、软膏、糊剂、霜剂、洗剂、凝胶、溶液、贴剂和吸入剂。所述活性化合物可以与药学上可接受的载体以及与可能需要的任何防腐剂、缓冲剂或推进剂在无菌条件下混合。
[0440]
除本发明的活性化合物之外，所述软膏、糊剂、霜剂和凝胶剂可以含有赋形剂，例如动物和植物脂肪、油、蜡、链烷烃、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌或其混合物。
[0441]
除本发明的化合物之外，粉剂和喷雾剂可以含有赋形剂，例如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末或这些物质的混合物。喷雾剂可以另外含有常规的推进剂，如氯氟烃和挥发性的未取代烃，如丁烷和丙烷。
[0442]
透皮贴剂具有向身体提供本发明的化合物的受控递送的额外优点。这样的剂型可以通过将所述化合物溶解或分散在适当的介质中来制备。吸收促进剂也可以用于增加通过皮肤的化合物通量。这种通量的速率可以通过提供速率控制膜或将所述化合物分散在聚合物基质或凝胶中来控制。
[0443]
眼用制剂、眼用软膏、粉剂、溶液等也被认为在本发明的范围内。
[0444]
适于胃肠外施用的本发明的药物组合物包含一种或多种本发明的化合物与一种或多种药学上可接受的无菌等渗水性或非水性溶液、分散体、悬浮液或乳剂或无菌粉末(其在使用之前可被重建成无菌可注射溶液或分散体)，其可以包含糖、醇、抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质或悬浮剂或增稠剂。
[0445]
在本发明的药物组合物中可以采用的合适的水性和非水性载体的实例包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其合适的混合物、植物油(如橄榄油)和可注射的有机酯(如油酸乙酯)。可以通过例如使用包衣材料(如卵磷脂)，在分散体的情况下通过保持所需的粒径以及通过使用表面活性剂来保持适当的流动性。
[0446]
这些组合物还可含有佐剂，如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可以通过包含各
种抗菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚山梨酸等确保防止微生物对主题化合物的作用。在组合物中包括等渗剂(如糖、氯化钠等)也可能是理想的。此外，可注射药物形式的延长吸收可以通过包含延迟吸收的试剂(如单硬脂酸铝和明胶)来实现。
[0447]
在一些情况下，为了延长药物的效果，减缓来自皮下注射或肌肉注射的药物的吸收是理想的。这可以通过使用水溶性差的结晶或无定形材料的液体悬浮液来实现。药物的吸收速率则取决于其溶解速率，溶解速率转而可能取决于晶体尺寸和结晶形式。可选地，胃肠外施用的药物形式的延迟吸收通过将所述药物溶解或悬浮在油性媒介物中来实现。
[0448]
可注射的储库形式通过在可生物降解的聚合物中形成主题化合物的微囊基质而制成，所述聚合物例如聚丙交酯
‑
聚乙交酯。根据药物与聚合物的比例，以及所用具体聚合物的性质，药物释放的速率可以得到控制。其他可生物降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。贮库可注射制剂还通过将所述药物包埋在与身体组织相容的脂质体或微乳剂中来制备。
[0449]
当本发明的化合物作为药物施用给人类和动物时，可以将它们本身或作为含有与药学上可接受的载体组合的例如0.1
‑
99％(更优选10
‑
30％)的活性成分的药物组合物给予。
[0450]
本发明的制剂可以通过口服、胃肠外、局部或直肠给予。当然，它们以适于每种施用途径的形式给予。例如，它们以片剂或胶囊形式，通过注射、吸入、眼用洗剂、软膏、栓剂等施用，例如通过注射、输注或吸入施用；通过洗剂或软膏外用；并通过栓剂直肠施用。口服施用是优选的。
[0451]
如本文所用的短语“胃肠外施用(parenteral administration)”和“胃肠外施用(asdminstered parenterally)”是指除肠内和局部施用以外的施用模式，通常通过注射，并且包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、真皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节下、囊下、蛛网膜下、脊柱内和胸骨内注射和输注。
[0452]
如本文所用的短语“全身施用(systemic administration)”、“全身施用(asdminstered systemically)”、“外周施用(peripheral administration)”和“外周施用(administered peripherally)”是指不是直接进入中枢神经的化合物、药物或其他材料的施用，以使得其进入患者的系统，并因此进行代谢和其他类似过程，例如皮下施用。
[0453]
可以通过任何合适的施用途径将这些化合物施用给人类和其他动物用于治疗，所述施用途径包括口服、经鼻，如通过例如喷雾、直肠、阴道内、胃肠外、脑池内和局部，如通过粉剂、软膏或滴剂，包括经颊和舌下途径。
[0454]
无论选择的施用途径如何，可以以适宜的水合形式使用的本发明的化合物、和/或本发明的药物组合物都可以通过本领域技术人员所熟知的常规方法配制成药学上可接受的剂型。
[0455]
可以改变本发明的药物组合物中的活性成分的实际剂量水平，从而获得对实现特定患者的期望治疗反应是有效的活性成分的量、组合物和施用方式，而对患者无毒。
[0456]
所选择的剂量水平将取决于多种因素，所述因素包括使用的本发明的特定化合物或其酯、盐或酰胺的活性、施用途径、施用时间、所采用的具体化合物的排泄速率或代谢速率、吸收速率和吸收程度、治疗的持续时间、与所采用的具体化合物的组合中的其他药物、化合物和/或材料、待治疗的患者的年龄、性别、体重、疾患、一般健康状况和既往医疗史、以
及医学领域中熟知的类似因素。
[0457]
具有本领域普通技术的医师或兽医可以容易地确定和规定所需药物组合物的有效量。例如，医师或兽医可以低于为了达到期望的治疗效果所需的水平开始药物组合物中使用的本发明的化合物的剂量，并逐渐增加剂量，直至达到期望的效果。
[0458]
通常，本发明的化合物的合适的日剂量将是对产生治疗效果有效的最低剂量的所述化合物的量。这样的有效剂量通常取决于上述因素。通常，当用于指定的镇痛效果时，用于患者的本发明的化合物的口服、静脉内、脑室内和皮下剂量的范围将为每天每公斤体重约0.0001至约100mg。
[0459]
在某些实施方案中，将一定剂量的化合物或组合物以每天、每隔一天、每两天、每隔三天、每周一次、每周两次、每周三次或每两周一次地施用给受试者。如果需要的话，所述活性化合物的有效日剂量可以作为两个、三个、四个、五个、六个或更多个子剂量施用，在全天的合适间隔、任选地以单位剂量形式单独地施用。在一些实施方案中，将一定剂量的化合物或组合物施用2天、3天、5天、7天、14天或21天。在某些实施方案中，将一定剂量的化合物或组合物施用1个月、1.5个月、2个月、2.5个月、3个月、4个月、5个月、6个月或更长。
[0460]
上述的施用方案仅用于说明目的而提供并且不应被认为是限制性的。本领域普通技术人员将容易理解，所有剂量都在本发明的范围内。
[0461]
虽然可以单独施用本发明的化合物，但优选的是，将所述化合物作为药物制剂(组合物)施用。
[0462]
接受这种治疗的患者是任何有需要的动物，包括灵长类，特别是人类，以及其它哺乳动物诸如马、牛、猪和羊等；以及通常为家禽和宠物。
[0463]
本发明的化合物可以本身施用，或者以与药学上可接受的载体的混合物施用，并且还可以与抗微生物剂，如青霉素、头孢菌素类、氨基糖苷类和糖肽联合施用。因此，联合治疗包括按当施用后续的药剂时首先施用的药剂的治疗效果未完全消失的方式依次、同时和单独施用所述活性化合物。
[0464]
将本发明的活性化合物加入至动物饲料优选通过制备包含有效量的活性化合物的适当的饲料预混物以及将所述预混物引入完整的日粮(ration)中实现。
[0465]
可选地，可以将含有活性成分的中间浓缩物或饲料添加剂混合到饲料中。可以制备和施用这样的饲料预混物和完整的日粮的方式描述在参考书中(
″
applied animal nutrition
″
，w.h.freedman和co.，san francisco，u.s.a.，1969或
″
livestock feeds and feeding
″
o和b books，corvallis，ore.，u.s.a.，1977)。
[0466]
微乳化技术可用于改善亲脂性(水不溶性)药剂的生物利用度。实例包括trimetrine(dordunoo，s.k.，等人，drug development and industrial pharmacy，17(12)，1685
‑
1713，1991)和rev 5901(sheen，p.c.，等人，j pharm sci 80(7)，712
‑
714，1991)。除此之外，微乳化通过优先引导吸收到淋巴系统、而不是循环系统提供增强的生物利用度，这由此绕开了肝脏并防止化合物在肝胆循环中的破坏。
[0467]
在本发明的一个方面，所述制剂含有由本发明的化合物和至少一种两亲性载体形成的胶束，其中所述胶束具有小于约100nm的平均直径。更优选的实施方案提供具有小于约50nm的平均粒径的胶束，并且甚至更优选的实施方案提供具有小于约30nm或者甚至小于约20nm的平均直径的胶束。
[0468]
尽管设想了所有合适的两亲性载体，但是目前优选的载体通常是具有公认安全(gras)状态的载体，且当溶液与复杂的水相(例如存在于人肠胃道中的水相)接触时所述载体可以溶解本发明的化合物，又可以在随后的阶段中将本发明的化合物微乳化。通常，满足这些要求的两亲性成分具有为2
‑
20的hlb(亲水至亲油平衡)值，并且其结构包含c
‑
6至c
‑
20的范围内的直链脂族基团。实例是聚乙二醇化的脂肪酸甘油酯和聚乙二醇。
[0469]
特别优选的两亲性载体是饱和的和单不饱和的聚乙二醇化的脂肪酸甘油酯，如由完全或部分氢化的不同植物油获得的那些。这种油可以有利地由三脂肪酸甘油酯、二脂肪酸甘油酯和单脂肪酸甘油酯以及相应的脂肪酸的二聚乙二醇酯和单聚乙二醇酯，其中特别优选的脂肪酸组合物包含癸酸4
‑
10％、癸酸3
‑
9％、月桂酸40
‑
50％、肉豆蔻酸14
‑
24％、棕榈酸4
‑
14％和硬脂酸5
‑
15％。两亲性载体的另一可用的类型包括：用饱和或单不饱和的脂肪酸(span
‑
系列)或相应的乙氧基化类似物(tween
‑
系列)部分酯化的脱水山梨糖醇和/或山梨醇。
[0470]
市售的两亲性载体是特别考虑的，包括gelucire
‑
系列、labrafil、labrasol或lauroglycol(全部由gattefosse corporation制造和配送，saint priest，france)、peg
‑
单
‑
油酸酯、peg
‑
二油酸酯、peg
‑
单
‑
月桂酸酯和二月桂酸、卵磷脂、聚山梨醇酯80等(由在美国和世界各地的一些公司生产和配送)。
[0471]
适用于本发明中的亲水性聚合物是易溶于水、能够被共价连接到囊泡形成脂质的那些，它们是体内耐受的且没有毒性作用(即是生物相容的)。合适的聚合物包括聚乙二醇(peg)、聚乳酸(也称为聚丙交酯)、聚乙醇酸(也称为聚乙交酯)、聚乳酸
‑
聚乙醇酸共聚物和聚乙烯醇。优选的聚合物是具有约100或120道尔顿到约5,000或10,000道尔顿、并且更优选约300道尔顿至约5,000道尔顿的分子量的那些。在一个特别优选的实施方案中，聚合物为具有约100至约5,000道尔顿的分子量、更优选具有约300约5,000道尔顿的分子量的聚乙二醇。在一个特别优选的实施方案中，聚合物是750道尔顿的聚乙二醇(peg(750))。相比于在标准聚乙二醇化技术中使用的5000道尔顿或更高的大分子量，本发明中使用的聚合物具有显著较小的分子量(约100道尔顿)。聚合物也可以通过在其中的单体数量定义；本发明的一个优选实施方案使用具有至少约3个单体的聚合物，这样的peg聚合物包含三个单体(约150道尔顿)。
[0472]
适合于在本发明中使用的其他亲水性聚合物包括聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基噁唑啉、聚乙基噁唑啉、聚羟丙基甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺、聚二甲基丙烯酰胺和衍生的纤维素如羟甲基纤维素或羟乙基纤维素。
[0473]
在某些实施方案中，本发明的制剂包括选自由下述组成的组的生物相容性聚合物：聚酰胺、聚碳酸酯、聚烯烃、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的聚合物、聚乙烯基聚合物、聚乙交酯、聚硅氧烷、聚氨酯和其共聚物、纤维素、聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、乳酸和乙醇酸的聚合物、聚酐、聚(原)酯、聚(丁酸)、聚(戊酸)、聚(丙交酯
‑
共
‑
己内酯)、多糖、蛋白质、聚透明质酸、聚氰基丙烯酸酯和其共混物、混合物或共聚物。
[0474]
本发明的制剂的释放特征取决于封装材料、被封装的药物的浓度和释放改性剂的存在。例如，释放可以被操纵为ph依赖性的，如使用只在低ph(如在胃中)或更高的ph值(如在肠中)下释放的ph敏感包衣。肠溶包衣可用于防止释放发生，直到在通过胃之后。多种包衣剂或被封装在不同材料中的腈胺的混合物可以用于获得在胃中的初始释放，接着稍后释
放在肠道中。释放也可以通过加入盐或成孔剂操纵，所述盐或成孔剂可以通过自胶囊扩散来增加水摄取或药物的释放。改变药物的溶解度的赋形剂也可用于控制释放速率。还可以掺入增强基质的降解或自所述基质的释放的试剂。它们可以被加入到药物，作为单独的相(即，作为微粒)加入，或可被共溶解在聚合物相中，这取决于所述化合物。在所有情况下，所述量应介于0.1和30％(w/w聚合物)之间。降解增强剂的类型包括无机盐，如硫酸铵和氯化铵，有机酸如柠檬酸、苯甲酸和抗坏血酸，无机碱如碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙、碳酸锌和氢氧化锌，和有机碱如硫酸鱼精蛋白、精胺、胆碱、乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺以及表面活性剂如以及成孔剂作为微粒加入，所述成孔剂将微结构加入至基质(即，水溶性化合物如无机盐和糖)。所述范围应该是1至30％(w/w聚合物)。
[0475]
摄取还可通过改变颗粒在肠道中的停留时间来操纵。这可以例如通过用粘膜粘合剂聚合物包衣所述颗粒、或通过选择粘膜粘合剂聚合物作为封装材料来实现。实例包括大多数具有游离羧基的聚合物，如脱乙酰壳多糖、纤维素，特别是聚丙烯酸酯(如本文所用，聚丙烯酸酯是指包含诸如氰基丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的丙烯酸酯基团和改性的丙烯酸酯基团的聚合物)。
[0476]
上述的施用方案仅用于说明目的而提供并且不应被认为是限制性的。本领域普通技术人员将容易理解，所有剂量都在本发明的范围内。
[0477]
有利地，可以将本发明的化合物与第二药剂一起施用给需要其的患者。当rho激酶抑制剂与第二药剂一起施用时，所述rh
o
激酶抑制剂和所述第二药剂可以依次或伴随地施用。依次地意味着将一种药剂施用一段时间，然后施用第二药剂，在此之后可以施用所述第一药剂。当药剂被依次施用时，水平或一种药剂可能在施用所述第二药剂时未被保持在治疗有效水平，反之亦然。伴随地意味着所述第一药剂和第二药剂根据使两种药剂保持在基本上治疗有效的水平的方案施用，即使不是同时施用所述药剂。每个药剂可以按单次或多次剂量施用，并且所述剂量可以按任何方案施用，所述方案包括但不限于每日两次、每日一次、每周一次、每两周一次和每月一次。
[0478]
本发明还包括辅助施用。辅助施用意味着除了已被施用以治疗疾病或疾病症状的第一药剂之外，将第二药剂施用于患者。在一些实施方案中，辅助施用包括将第二药剂施用于患者，其中所述第一药剂的施用没有足够地治疗所述疾病或疾病症状。在其他实施方案中，辅助施用包括将所述第二药剂施用于患者，所述患者的疾病已经通过第一药剂的施用得到了有效治疗，其中期望联合治疗改善所述治疗的结果。在一些实施方案中，施用所述第一药剂和第二药剂的效果是协同的。在一些实施方案中，相比于单独地施用所述药剂中的任一种，所述第一药剂和第二药剂的施用防止了复发或延长了复发之前的时间。在一些实施方案中，所述第一药剂和第二药剂的施用允许减少所述第一药剂和第二药剂的剂量和/或施用频率。
[0479]
在本发明的一个实施方案中，将本发明的rho激酶抑制剂和抗肿瘤剂施用给需要其的受试者。在另一个实施方案中，将本发明的rho激酶抑制剂和血管生成抑制剂施用给需要其的受试者。在另一个实施方案中，将本发明的rho激酶抑制剂和抗炎剂施用给需要其的受试者。在另一个实施方案中，施用本发明的rho激酶抑制剂和免疫抑制剂。所述第二药剂可以是，但不限于小分子、抗体或其抗原结合片段、或辐射。
[0480]
抗肿瘤剂包括但不限于细胞毒化学治疗剂、靶向小分子和生物分子和辐射。除了
本发明的rho激酶抑制剂之外，还可以施用的用于肿瘤治疗的化合物和药剂包括以下：伊立替康、依托泊苷、喜树碱、5
‑
氟尿嘧啶、羟基脲、他莫昔芬、紫杉醇、卡培他滨、卡铂、顺铂、博来霉素、放线菌素d、吉西他滨、阿霉素、正定霉素、环磷酰胺和放疗，所述放疗可以是体外的(例如，体外放射治疗(ebrt))或者体内的(例如，近距离放射疗法(bt))。
[0481]
靶向小分子和生物分子包括但不限于，信号转导途径的组分的抑制剂，如酪氨酸激酶的调节剂和受体酪氨酸激酶的抑制剂和结合到特异于肿瘤的抗原的药剂。实例包括表皮生长因子受体(egfr)的抑制剂，包括吉非替尼、埃罗替尼、西妥昔单抗、her2的抑制剂(例如，曲妥珠单抗、曲妥珠单抗艾坦辛(emtansine)(曲妥单抗
‑
dm1；t
‑
dm1)和帕妥珠单抗)、抗vegf抗体和片段(例如，贝伐单抗)、抑制cd20的抗体(例如利妥昔单抗、替伊莫单抗(ibritumomab))、抗vegfr抗体(例如，雷莫芦单抗(imc
‑
1121b)、imc
‑
1c11和cdp791)、抗pdgfr抗体和伊马替尼。小分子激酶抑制剂可以特异于具体的酪氨酸激酶或可以是两种或多种激酶的抑制剂。例如，化合物n
‑
(3，4
‑
二氯
‑2‑
氟苯基)
‑7‑
({[(3ar，6as)
‑2‑
甲基八氢环戊烷并[c]吡咯
‑5‑
基]甲基}氧基)
‑6‑
(甲氧基)喹唑啉
‑4‑
胺(也称为xl647、exel
‑
7647和kd
‑
019)是若干种受体酪氨酸激酶(rtk)的体外抑制剂，所述受体酪氨酸激酶包括egfr、ephb4、kdr(vegfr)、flt4(vegfr3)和erbb2，并且也是src激酶的抑制剂，所述src激酶参与了导致肿瘤对某些tki的无应答的途径中。在本发明的一个实施方案中，治疗有此需要的受试者包括式i的rho激酶抑制剂的施用以及kd
‑
019的施用。
[0482]
达沙替尼(bms
‑
354825；bristol
‑
myers squibb，new york)是另一种口服可生物利用的atp
‑
位点竞争性src抑制剂。达沙替尼还靶向bcr
‑
abl(美国fda批准的用于具有慢性粒细胞性白血病(cml)或费城染色体阳性(ph+)急性淋巴细胞白血病(all)的患者)以及c
‑
kit、pdgfr、c
‑
fms、epha2和src家族激酶。src和bcr
‑
abl的两种其他口服的酪氨酸激酶抑制剂是波舒替尼(ski
‑
606)和塞卡替尼(azd0530)。
[0483]
根据本发明，血管生成抑制剂可以结合本发明的化合物一起被施用给受试者。血管生成抑制剂包括抑制新血管生长的任何物质。例如，血管生成抑制剂包括vegf、plgf的拮抗剂和vegf受体，包括本文公开的抗体。抑制剂是指生物过程的抑制剂或靶的抑制剂。在这方面，血管生成抑制剂是减少血管生成的药剂。rho激酶抑制剂是一种诸如atp结合的竞争性抑制剂的药剂，其抑制rho激酶的固有活性或阻断rho激酶的相互作用。拮抗剂是指降低或抑制与靶相关联的细胞中的活性或功能的物质。例如，vegf拮抗剂降低或阻断与vegf相关联的细胞中的功能。vegf拮抗剂可作用于vegf，通过结合到vegf以及阻断至其受体的结合和/或可作用于参与了vegf介导的信号转导的另一细胞组分。类似地，vegfr2拮抗剂是一种药剂，其通过结合到vegfr2和阻断配体结合或与vegfr2底物的相互作用降低或阻断vegf2介导的信号转导，或作用于另一细胞组分以减少或阻断vegfr2介导的信号转导。因此，血管生成抑制剂包括本文所示的新颖的抗
‑
vegfr2抗体(图11)和但不限于vegf、vegfr1、vegfr2、pdgf、pdgfr
‑
β、神经毡蛋白
‑
1(nrp1)的拮抗剂和补体。
[0484]
vegf结合剂的非限制性实例包括vegf抗体和vegf陷阱(即，vegf受体的配体结合域)。在一般情况下，vegf陷阱是包含一种或多种vegf受体蛋白的vegf结合域的蛋白质。vegf
‑
陷阱包括但不限于可溶性vegfr
‑
1、可溶性神经毡蛋白1(nrp1)、可溶性vegfr
‑
3(其结合vegf
‑
c和vegf
‑
d)和阿柏西普(zaltrap；eyelea；vegf陷阱r1r2)，包括融合至人igg1的恒定域(fc)的人血管内皮生长因子受体vegfr1和vegfr2的细胞外域的片段。康柏西普
(kh902)是包含融合至人igg1的fc部分的vegfr
‑
1(flt
‑
1)的细胞外域2和vegfr
‑
2(kdr)的细胞外域3、4的融合蛋白。包含各种组合的kdr和flt
‑
1 ig
‑
样域的若干个vegf陷阱被描述在美国专利8,216,575中。darpin(为设计的锚蛋白重复蛋白(designed ankyrin repeat protein)的首字母缩写)是通常表现出高度特异性和高亲和力的靶蛋白结合的被遗传工程化的抗体模拟蛋白质。mp0112是一种血管内皮生长因子(vegf)抑制剂，并已进入用于治疗湿黄斑变性和糖尿病性黄斑水肿的临床试验。
[0485]
根据本发明，vegf表达可被靶向。例如，vegf抑制剂ptc299通过选择性结合vegf信使rna(mrna)的5
′‑
和3
′‑
非翻译区(utr)后转录地靶向vegf，从而防止vegf的翻译。哌加他尼(macugen)是一种针对vegf
‑
165的rna适体。
[0486]
胎盘生长因子(plgf)已牵涉病理性血管生成。plgf结构上与vegf相关并且也是用于vegfr
‑
1的配体。因此，包括vegfr1的细胞外域(参见上文)的vegf陷阱可用于靶向plgf。
[0487]
pdgf由四条形成同型二聚体pdgf
‑
aa、bb、cc和dd以及异型二聚体pdgf
‑
ab的多肽链组成。所述pdgf受体(pdgfr)
‑
α和
‑
β介导pdgf功能。具体地讲，pdgfrα结合到pdgf
‑
aa、
‑
bb、
‑
ab和
‑
cc，而pdgfrβ与
‑
bb和
‑
dd相互作用。pdgf结合剂的非限制性实例包括抗
‑
pdgf抗体和pdgf陷阱。靶向pdgf的药剂包括fovista
tm
(e10030，ophthotech)、聚乙二醇化的适体靶向pdgf
‑
b和ax102(sennino等人，2007，cancer res.75(15)：7359
‑
67)、结合pdgf
‑
b的dna寡核苷酸适体。
[0488]
靶向pdgf受体的药剂包括雷莫卢单抗(imc
‑
3g3，人igg1)(一种抗pdgfrα抗体)、克莱拉尼(cp
‑
868596)(一种pdgfrα(ic
50
＝0.9nm)和pdgfrβ(ic
50
＝1.8nm)的选择性抑制剂)和尼罗替尼(一种pdgfrα和pdgfrβ以及其他酪氨酸激酶的抑制剂)。
[0489]
血管生成抑制剂包括阻断由例如vegf、pdgf、vegf或pdgf受体的配体或补体介导的信号转导的细胞内药剂。抑制血管生成抑制剂的细胞内药剂包括以下内容，但不限于此。舒尼替尼(sutent；su11248)是vegfr1
‑
vegfr3、pdgfrα和pdgfrβ、干细胞因子受体(ckit)、flt
‑
3和集落刺激因子
‑
1受体(csf
‑
1r)的泛特异性小分子抑制剂。阿西替尼(ag013736；inlyta)是另一种抑制vegfr
‑1‑
vegfr
‑
3、pdgfr和ckit的小分子酪氨酸激酶抑制剂。西地尼布(azd2171)是vegfr
‑1‑
vegfr
‑
3、pdgfrβ和ckit的抑制剂。索拉非尼(nexavar)是另一种包括vegfr、pdgfr和raf激酶在内的若干种酪氨酸蛋白激酶的小分子抑制剂。帕唑帕尼(votrient；(gw786034)抑制vegfr
‑
1、
‑
2和
‑
3、ckit和pdgfr。foretinib(gsk1363089；xl880)抑制vegfr2和met。cp
‑
547632是一种作为vegfr
‑
2和碱性成纤维细胞生长因子(fgf)激酶的强效抑制剂。e
‑
3810((6
‑
(7
‑
((1
‑
氨基环丙基)甲氧基)
‑6‑
甲氧基喹啉
‑4‑
基氧基)
‑
n
‑
甲基
‑1‑
萘甲酰胺)抑制纳mol范围内的vegfr
‑
1、
‑
2和
‑
3及fgfr
‑
1和
‑
2激酶。布立尼布(bms
‑
582664)是一种也抑制fgf受体信号传导的vegfr
‑
2抑制剂。ct
‑
322(adnectin)是一种基于人纤连蛋白域并结合到且抑制vegfr2的活化的小蛋白。凡德他尼(caprelas；zactima；zd6474)是vegfr2、egfr和ret酪氨酸激酶的抑制剂。x
‑
82(xcovery)是一种通过生长因子受体vegfr和pdgfr信号传导的小分子吲哚酮抑制剂。
[0490]
抗炎剂和免疫抑制剂包括类固醇药物，如糖皮质激素(例如，地塞米松)、fk506(他克莫司)、环孢素、芬戈莫德、干扰素如ifnβ或ifnγ、肿瘤坏死因子
‑
α(tnf
‑
α)结合蛋白如英夫利昔单抗(remicade)、依那西普(enbrel)或阿达木单抗(humira)和霉酚酸。
[0491]
在某些实施方案中，本发明的rock抑制剂与用于治疗代谢紊乱的药剂共施用。例
如，对于肥胖症的治疗，所述rock抑制剂可与减肥药物组合，例如但不限于苯丁胺、脂肪吸附抑制剂(例如赛尼可)、食欲抑制剂等。用于帮助减肥的方法包括例如胃束带手术、胃旁路手术或胃间隔手术。对于胰岛素抵抗或代谢综合征或高胰岛素血症，本发明的rock抑制剂可与降低胆固醇水平的化合物共同施用，例如，一种或多种诸如他汀类、贝特类或烟酸的药物。对于与这种疾病相关联的高血压，本发明的rock抑制剂可与例如一种或多种抗高血压药物如利尿剂或血管紧张素转换酶(ace)抑制剂共同施用。可以在包括生活方式的改变例如增加的体力活动、改进的饮食和/或戒烟的治疗方案中使用本发明的rock抑制剂。在某些实施方案中，所述rock抑制剂是rock2选择性的。
[0492]
th17细胞是分泌il
‑
17、il
‑
21和il
‑
22的辅助cd4
+
t细胞的新子集。th17细胞的促炎活性可以对感染期间的宿主是有益的，但不加控制的th17功能已被相关于到并积极地涉及了若干个自身免疫病理学和急性移植物抗宿主病(gvhd)(一种特征在于对由存在于干细胞或骨髓接种中的成熟t细胞介导的靶器官的选择性上皮损伤的疾病)的发展。事实上，与滑膜组织和疾病活动性的破坏相关的高水平的il
‑
17在类风湿关节炎(ra)和系统性红斑狼疮(sle)患者的血清和活检物中被检测到。关节炎关节中的il
‑
17病理作用与其促炎性细胞因子产生的刺激和相关联，并且t细胞和先天免疫细胞的增加的募集。此外，在采用抗
‑
cd3/cd28抗体离体刺激之后，th17细胞的数量在ra患者的外周血中显著增加，并且il
‑
17的升高的浓度可见于其pbmc的上清液中。此外，在多发性硬化症(ms)患者中，还富集了髓鞘反应性th17细胞并产生大量的il
‑
22和ifn
‑
γ。此外，相比于具有克罗恩氏病(cd)的相同的受试者的健康区域，显著更高数量的il
‑
17
+
细胞在感染疾病的肠区域中被检测到。
[0493]
th17细胞的发育和功能取决于特异性细胞内信号传导途径的活化。类固醇受体型核受体rorγt选择性地表达在th17细胞并似乎对il
‑
17产生是所需的。已经观察到rorγt的诱导经由stat3依赖性机制由il
‑
6、il
‑
21和il
‑
23介导。stat3也直接结合到所述il
‑
17与il
‑
21启动子。除了rorγt和stat3之外，干扰素调节因子4(irf4)对th17细胞的分化是所需的，原因是irf4 ko小鼠无法挂接th17响应并对自身免疫响应的发展有抗性。最近的研究已经表明，通过rho激酶2(rock2)的对irf4的磷酸化调节了小鼠中的il
‑
17和il
‑
21产生和自身免疫的发展。
[0494]
根据本发明，通过rho激酶抑制靶向th17(il
‑
17
‑
分泌)细胞提供了一种用于治疗人中的th17细胞介导的疾病的方法，所述疾病包括但不限于自身免疫性疾病，例如类风湿关节炎(ra)、多发性硬化(ms)、系统性红斑狼疮(sle)、银屑病、克罗恩氏病、特应性皮炎、湿疹以及gvhd。在本发明的一个实施方案中，所述rho激酶抑制剂是式i化合物。在一些实施方案中，所述rho激酶抑制剂抑制rock1和rock2。在一些实施方案中，所述rho激酶抑制剂选择性地抑制rock2。rock2的选择性抑制提供了对th17细胞介导的疾病的治疗并且减少或预防了与rock活性的完全抑制相关的毒性。
[0495]
调节性t细胞(treg)在对自身抗原的免疫耐受的维持和抑制自身免疫应答中发挥了关键的作用，但同时防止了对肿瘤细胞的有效的免疫反应。事实上，分离自患有自身免疫性疾病(如类风湿关节炎(ra)和多发性硬化(ms))的患者的外周血的treg在其抑制效应子t细胞功能的能力中显示出缺陷，而treg的增加的累积与许多癌症中的不良预后相关。因此，treg功能的水平影响有效免疫和避免病理自身反应性之间的平衡。
[0496]
treg的发育和功能取决于特异性信号转导途径的活化。foxp3和stat5转录因子的
tgf
‑
β和il
‑
2活化表达均在treg抑制性功能的控制中起重要作用。另一方面，促炎性细胞因子通过stat3磷酸化的上调抑制了foxp3表达。根据本发明，rock2的药理抑制(例如，用选择性rock2抑制剂如kd025，rock2的rock2特异性sirna介导的抑制)，但不是rock1，导致人t细胞中的stat3磷酸化、干扰素调节因子4(irf4)和类固醇受体型核受体rorγt蛋白水平的下调。因此，rock2信号传导途径可能参与了treg功能的调节。
[0497]
应当理解和预期本领域的技术人员可以作出本文所公开的本发明的原理中的变型，并且其旨在表示这样的修改都将包括在本发明的范围内。
[0498]
在本技术中，引用了各种出版物。这些出版物在此通过引用全部并入本技术中，以更充分地描述本发明涉及的本领域的状态。下面的实施例进一步说明本发明，但不应该被解释为以任何方式限制本发明的范围。
实施例
[0499]
在下列实施例和制备中使用的缩写包括：
[0500]
ac2o
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙酸酐
[0501]
acoh
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙酸
[0502]
bn
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
苄基
[0503]
ꢀꢀ
硅藻土
[0504]
dcm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二氯甲烷
[0505]
diea
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二异丙基乙胺
[0506]
dmap
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ4‑
二甲氨基吡啶
[0507]
dme
ꢀꢀꢀꢀ
1，2
‑
二甲氧基乙烷
[0508]
dmf
ꢀꢀꢀꢀ
二甲基甲酰胺
[0509]
dmso
ꢀꢀꢀ
二甲基亚砜
[0510]
edc
ꢀꢀꢀꢀ1‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳化二亚胺盐酸盐
[0511]
etoac
ꢀꢀ
乙酸乙酯
[0512]
etoh
ꢀꢀꢀ
乙基醇或乙醇
[0513]
et2o
ꢀꢀꢀ
乙醚
[0514]
et3n
ꢀꢀꢀ
三乙胺
[0515]
g
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
克
[0516]
hobt
ꢀꢀꢀ1‑
羟基苯并三唑
[0517]
hplc
ꢀꢀꢀ
高压液相色谱
[0518]
h
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
小时
[0519]
mecn
ꢀꢀꢀ
乙腈
[0520]
min
ꢀꢀꢀꢀ
分钟
[0521]
meoh
ꢀꢀꢀ
甲基醇或甲醇
[0522]
ml
ꢀꢀꢀꢀꢀ
毫升
[0523]
mmol
ꢀꢀꢀ
毫摩尔
[0524]
ms
ꢀꢀꢀꢀꢀ
质谱
[0525]
nmr
ꢀꢀꢀꢀ
核磁共振
[0526]
iproh
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
异丙醇
[0527] 磷酸苯并三唑
‑1‑
基
‑
氧基三吡咯烷基
[0528]
rt
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
室温
[0529]
s
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
单峰
[0530]
t
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
三重峰
[0531]
thf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
四氢呋喃
[0532]
由synpep co.，6905的ct.dublin，ca 94568实施质谱，或采用waters zq2000单四极杆ms检测器将其记录在lc
‑
ms：waters 2695分离模块上。除非另有说明，在esi模式下运行所有质谱。使用mercury软件将1h nmr光谱记录于varian 400mhz仪器上。在这个范围内，未在这样的实施例中明确地描述本发明化合物的下列实施例的合成，一般而言所述合成如本文所述，并且可以容易地选择适当的起始原料用于合成实施例的化合物。
[0533]
实施例1
[0534]2‑
溴
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0535][0536]
将异丙胺(5.0g，7.20ml，84.6mmol)在63ml的dcm中的溶液冷却至
‑
10℃。向该溶液加入溴乙酰溴(8.53g，3.68ml，42.3mmol)在10.5ml dcm中的溶液。将反应混合物搅拌10分钟。从混合物中过滤出异丙基氢溴酸铵，然后将滤液真空浓缩以得到为白色固体的标题化合物(5.30g，70％)。
[0537]
实施例2
[0538]
n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0539][0540]
将3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚(0.50g，2.27mmol)、2
‑
溴
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(0.61g，3.41mmol)和k2co3(0.47g，3.41mmol)在dmf(3ml)中的混合物在室温下搅拌，随后加入冰水。将沉淀物过滤并用水洗涤并干燥以提供标题化合物(0.32g，44％)。
[0541]
实施例3
[0542]5‑
((2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0543][0544]
将2，4
‑
二氯嘧啶(1.99g，13.4mmol)、5
‑
氨基
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(3.4g，14.7mmol)、diea(3ml)和dmf(13ml)的混合物于65℃搅拌7小时、真空浓缩并用et2o滴定。将沉淀物过滤并用ipa洗涤并干燥以提供标题化合物(1.83g，40％)。
[0545]
实施例4
[0546]5‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0547][0548]
将5
‑
((2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(100mg，0.29mmol)、n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(130mg，0.41mmol)、pd(dppf)cl2.ch2cl2(20mg，0.02mmol)和k2co3(80mg，0.58mmol)在二噁烷/水(10和2ml)中的混合物在微波中加热30分钟。将反应进行后处理并通过色谱纯化以提供标题化合物(176mg，35％)。
[0549]
实施例5
[0550]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺hcl盐
[0551][0552]
将5
‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯溶解在二噁烷中的4m hcl中并在室温下搅拌2小时。在真空中除去挥发物，以得到为hcl盐的标题化合物。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.6(d，j＝6.8hz，6h)，3.93(m，1h)，4.51(s，2h)，6.75(d，j＝6hz，1h)，7.14(d，j＝7.6hz，1h)，7.44
‑
7.59(m，3h)，7.87
‑
7.91(m，3h)，8.09(s，1h)，8.18(s，1h)，8.31(d，j＝6.4hz，1h)，10.19(d，j＝0.8hz，1h)，13.10(s，1h).ms(es+)m/e 403(m+h)
+
。
[0553]
实施例6
[0554]2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酸叔丁酯
[0555][0556]3‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚，2
‑
溴乙酸叔丁酯
[0557]
将3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚(4g，18.2mmol)、2
‑
溴乙酸叔丁酯(5.7g，27.3mmol)和k2co3(3.44g，27.3mmol)在ch3cn(100ml)中的混合物于70℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水中并用etoac萃取。将有机层经na2so4干燥并除去，以得到残余物。将残余物通过柱色谱纯化以得到为白色固体的标题化合物(4g，67％)。
[0558]
实施例7
[0559]
n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0560][0561]
将化合物2，4
‑
二氯嘧啶(14.8g，0.1mol)、1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(14.6g，110mmol)和et3n(15g，150mmol)在etoh(200ml)中的混合物于80℃搅拌3小时。将反应混合物冷却并过滤。收集滤饼并干燥，以得到为固体的化合物5(15g，60％)。
[0562]
实施例8
[0563]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0564][0565]
于0℃在5分钟内向n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(7.35g，30mmol)、boc2o(18.9g，90mmol)在ch2cl2(150ml)中的混合物加入dmap(3.6g，30mmol)。在0.5小时后，完成反应。用水洗涤反应混合物，经na2so4干燥并除去以得到残余物，将残余物通过凝胶柱色谱纯化以得到为白色固体的标题化合物(6g，67％)。
[0566]
实施例9
[0567]5‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(叔丁氧基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)(叔丁氧基羰基)氨基)
‑
ih
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0568][0569]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(4g，8.9mmol)、2
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酸叔丁酯(3.3g，10mmol)、koac(35g，360mmol)、pd(dppf)2cl2(400mg)和boc2o(3.9g，18mmol)在二噁烷/水(10/1，100ml)中的混合物于100℃搅拌3天。将反应混合物倒入水中并用etoac萃取。将有机层经na2so4干燥并除去以得到残余物，将残余物通过凝胶柱色谱纯化以得到为固体的标题化合物(3g，54％)。
[0570]
实施例10
[0571]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酸
[0572]
[0573]
将化合物5
‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(叔丁氧基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)(叔丁氧基羰基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(2g)和cf3cooh(20ml)在dcm(20ml)中的混合物于25℃搅拌2小时。除去溶剂以得到为黄色固体的标题化合物(1.5g)。
[0574]
实施例11
[0575]
(s)
‑3‑
(2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酰氨基)吡咯烷
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0576][0577]
将2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酸(600mg，1.66mmol)、3
‑
氨基吡咯烷
‑1‑
羧酸叔丁酯(300mg，1.62mmol)、hatu(760mg，2mmol)和et3n(250mg，2mmol)在dmf(18ml)中的混合物于25℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水中并用etoac萃取。将有机层经na2so4干燥并浓缩以得到残余物，将残余物通过hplc纯化以提供为固体的标题化合物(300mg，50％)。
[0578]
实施例12
[0579]
(r)
‑2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
(吡咯烷
‑3‑
基)乙酰胺hcl盐
[0580][0581]1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ1.84
‑
1.96(m，1h)，2.07
‑
2.19(m，1h)，3.07
‑
3.38(m，4h)，4.40
‑
4.42(m，1h)，4.65(s，2h)，7.36(d，j＝6.4hz，1h)，7.56(t，j＝8.0hz，1h)，7.65(d，j＝8.0hz，1h)，7.90
‑
7.94(m，2h)，8.14
‑
8.29(m，2h)，8.66(d，j＝6.8hz，1h)，9.39
‑
9.80(m，3h)，11.87(s，1h).ms(es+)m/e 430(m+h)
+
。
[0582]
实施例13
[0583]
(r)
‑2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
(吡咯烷
‑3‑
基)乙酰胺hcl盐
[0584][0585]
将化合物2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酸(500mg，1.39mmol)、nh4cl(125mg，2mmol)、hatu(720mg，1.89mmol)和et3n(200mg，2mmol)在dmf(15ml)中的混合物于25℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水中并用etoac萃取。将有机层经
na2so4干燥并浓缩以得到残余物，将残余物通过hplc纯化以提供为固体的标题化合物(60.1mg，12％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ4.52(s，2h)，6.78(d，j＝6.4hz，1h)，7.19(dd，j＝9.6和1.6hz，1h)，7.40
‑
7.62(m，5h)，7.84
‑
7.87(m，2h)，8.11(s，1h)，8.15(s，1h)，8.33(d，j＝6.4hz，1h)，10.35(s，1h).ms(es+)m/e 361(m+h)
+
。
[0586]
实施例14
[0587]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑1‑
(1，1
‑
二氧代硫代吗啉代)乙酮tfa盐
[0588][0589]
将化合物2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酸(500mg，1.39mmol)、硫代吗啉1，1
‑
二氧化物(375mg，2.2mmol)、hatu(720mg，1.89mmol)和et3n(200mg，2mmol)在dmf(15ml)中的混合物于25℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水中并用etoac萃取。将有机层经na2so4干燥并浓缩以得到残余物，将残余物通过制备型hplc纯化以得到为固体的标题化合物(54.6mg，10％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ3.11(b，2h)，3.30(b，2h)，3.85(b，4h)，5.00(s，2h)，6.76(d，j＝6.4hz，1h)，6.91(s，1h)，7.09(s，1h)，7.16(dd，j＝8.0和2.4hz，1h)，7.45(t，j＝8.0hz，1h)，7.47
‑
7.50(m，2h)，7.81(s，1h)，7.86(d，j＝8.0hz，1h)，8.08(s，1h)，8.12(b，1h)，8.33(d，j＝6.4hz，1h)，10.26(s，1h).ms(es+)m/e 479(m+h)+。
[0590]
实施例15
[0591]
n
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯基)吗啉
‑4‑
甲酰胺
[0592][0593]
于40℃在10分钟内向三光气(600mg，2mmol)在thf(10ml)中的混合物滴加3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯胺(836mg，4mmol)和et3n(1.2g，12mmol)在thf(10ml)中的溶液。在0.5小时后，将吗啉(435mg，5mmol)加入到反应混合物中。在15分钟后，将反应混合物用饱和nh4cl淬灭、用etoac萃取。将有机层经na2so4干燥并浓缩以得到残余物，将残余物通过凝胶柱色谱纯化以得到为白色固体的标题化合物(530mg，50％)。
[0594]
实施例16
[0595]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(吗啉
‑4‑
甲酰氨基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0596][0597]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(300mg，0.7mmol)、n
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯基)吗啉
‑4‑
甲酰胺(250mg，0.8mmol)、csf(510mg，3mmol)、pd(pph3)4(120mg)和boc2o(432mg，2mmol)在二噁烷/水(10/1，10ml)中的混合物在微波下于130℃搅拌20分钟。将三罐合并。将反应混合物用水稀释并用etoac萃取。将有机层经na2so4干燥并浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱纯化以得到标题化合物(360mg)。
[0598]
实施例17
[0599]
n
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯基)吗啉
‑4‑
甲酰胺hcl盐
[0600][0601]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(吗啉
‑4‑
甲酰氨基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(360mg，粗品)在meoh/hcl(4m，20ml)中的混合物于25℃搅拌过夜。将反应混合物浓缩以得到为hcl盐的标题化合物(68mg)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ3.49(s，4h)，3.62(s，4h)，7.14(b，1h)，7.50(t，j＝7.6hz，1h)，7.60
‑
7.65(m，3h)，7.88(d，j＝6.8hz，1h)，8.22(s，1h)，8.28(d，j＝5.6hz，1h)，8.46(b，1h)，8.68(s，1h)，9.00(s，1h)，11.77(s，1h).ms(es+)m/e 416(m+h)
+
。
[0602]
实施例18
[0603]3‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯甲酸甲酯
[0604][0605]
将n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(3.7g，15mmol)、3
‑
甲氧基羰基)苯硼酸(3.3g，18mmol)、k2co3(4.14g，30mmol)和pd(dppf)2cl2(700mg)在二噁烷/水(4/1，75ml)中的混合物于100℃搅拌16小时。将反应混合物浓缩以得到标题化合物(7g，粗品)，其无需进一步纯化直接进行用于下步反应。
[0606]
实施例19
[0607]3‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯甲酸
[0608][0609]
向3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯甲酸甲酯(7g，粗品)在二噁烷(120ml)中的混合物加入naoh(2m，120ml)。将反应混合物回流1.5小时，然后冷却至室温并用etoac(100ml)萃取。将水相分离并用hcl(6m)酸化。将混合物过滤并收集滤饼、干燥以得到直接用于下步反应的标题化合物(1.3g，粗品)。
[0610]
实施例20
[0611]3‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)
‑
n
‑
(1，1
‑
二氧代四氢
‑
2h
‑
硫吡喃
‑4‑
基)苯甲酰胺tfa盐
[0612][0613]
将3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯甲酸(400mg，1.2mmol)、4
‑
氨基四氢
‑
2h
‑
硫吡喃1，1
‑
二氧化物(300mg，1.4mmol)，hatu(720mg，1.89mmol)和et3n(200mg，2mmol)在dmf(15ml)中的混合物于25℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水中并用etoac萃取。将有机层经na2so4干燥并浓缩以得到残余物，将残余物通过hplc纯化以得到为固体的标题化合物(81mg，20％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ2.19
‑
2.24(m，2h)，2.31
‑
2.33(m，2h)，3.12
‑
3.15(m，2h)，3.34
‑
3.38(m，2h)，4.23
‑
4.28(m，1h)，6.93(d，j＝6.8hz，1h)，7.58
‑
7.76(m，3h)，8.12(s，1h)，8.14(s，1h)，8.24(d，j＝7.2hz，1h)，8.31(d，j＝8.0hz，1h)，8.65(s，1h).ms(es+)m/e 463(m+h)
+
。
[0614]
实施例21
[0615]4‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯甲酰氨基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0616][0617]
将3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯甲酸(400mg，1.2mmol)、4
‑
氨基
‑
哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(300mg，1.5mmol)、hatu(720mg，1.89mmol)和et3n(200mg，2mmol)在dmf(15ml)中的混合物于25℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水中并用etoac萃取。将有机层经na2so4干燥并浓缩以得到残余物，将残余物通过hplc纯化以提供为固体的标题化合物(200mg，30％)。
[0618]
实施例22
[0619]3‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)
‑
n
‑
(哌啶
‑4‑
基)苯甲酰胺hcl盐
[0620][0621]
将4
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯甲酰氨基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(200mg)在meoh(5ml)中的hcl中的混合物于25℃下搅拌3小时。除去溶剂以提供为黄色固体的标题化合物(150mg)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ1.79
‑
1.87(m，2h)，1.98
‑
2.01(m，2h)，3.01
‑
3.04(m，2h)，3.32
‑
3.36(m，2h)，3.64
‑
3.69(m，1h)，7.10
‑
7.15(m，1h)，7.66(d，j＝8.0hz，1h)，7.75(t，j＝8hz，1h)，8.16(s，1h)，8.20(s，1h)，8.36(d，j＝6.8hz，1h)，8.42(d，j＝7.6hz，1h)，8.78(d，j＝7.2hz，1h)，8.90(s，1h)，8.96(s，1h)，11.73(s，1h).ms(es+)m/e 414(m+h)
+
。
[0622]
实施例23
[0623]
n
‑
(2
‑
氯
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0624][0625]
向化合物2，4
‑
二氯
‑5‑
甲基嘧啶(5g，30.8mmol)和5
‑
氨基吲唑(4.1g，30.8mmol)在无水乙醇(100ml)中的混合物加入na2co3(16g，154mmol)。将所得混合物在n2下于80℃加热过夜。在冷却至室温后，将混合物用水稀释并用etoac萃取。将有机相经无水na2so4干燥并在真空中浓缩，随后通过柱色谱于硅胶(用dcm∶meoh＝50∶1洗脱)上以得到为棕色固体的标题化合物(7g，收率87％)。
[0626]
实施例24
[0627]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0628][0629]
向n
‑
(2
‑
氯
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(5g，19.3mmol)在无水dcm(100ml)中的溶液加入boc2o(12.6g，57.9mmol)、tea(5.85g，57.9mmol)和dmap(1.17g，9.56mmol)。将所得混合物在室温下搅拌4小时。将混合物用水稀释并用dcm萃取。将有机相用无水na2so4干燥，且在真空中除去溶剂，随后通过柱色谱于硅胶(用pe∶ea＝10∶1洗脱)上纯化以得到为白色固体的标题化合物(5g，收率56％)。
[0630]
实施例25
[0631]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(环丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0632][0633]
向化合物5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.9g，4.14mmol)、化合物n
‑
环丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(1.57g，4.97mmol)和csf(1.89g，12.42mmol)在1，4
‑
二噁烷(20ml)和水(5ml)中的混合物加入pd(pph3)4(239mg，0.21mmol)。将所得的混合物在n2下于100℃加热过夜。在冷却至室温后，将混合物用水稀释并用etoac萃取，将有机相经无水na2so4干燥并在减压下浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱于硅胶(用pe∶ea＝5∶1洗脱)上纯化以得到为黄色固体的标题化合物(1.6g，收率62％)。
[0634]
实施例26
[0635]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺盐酸盐
[0636][0637]
向化合物5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(环丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(500mg，0.81mmol)在etoac(2ml)中的溶液加入hcl/etoac(10ml)中，并在室温下搅拌过夜。将形成的沉淀过滤并用etoac洗涤，在真空中干燥以得到为黄色固体的标题化合物(300mg，收率89％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ0.50
‑
0.54(m，2h)，0.70
‑
0.75(m，2h)，2.42(s，3h)，2.66
‑
2.71(m，1h)，4.51(s，2h)，7.27(dd，j＝8.4和2.4hz，1h)，7.49(t，j＝8.0hz，1h)，7.64
‑
7.68(m，2h)，7.72(s，1h)，8.04(s，2h)，8.20(s，1h)，8.28(s，1h).ms(es+)m/e 451(m+h)
+
。
[0638]
实施例27
[0639]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
((1
‑
(叔丁氧基羰基)哌啶
‑4‑
基)氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0640][0641]
向将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.4g，3.05mmol)、4
‑
(2
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰氨基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.68g，3.66mmol)和csf(1.39g，9.15mmol)在1，4
‑
二噁烷(20ml)和水(5ml)中的混合物加入pd(pph3)4(176mg，0.15mmol)。将所得的混合物在n2下于100℃加
热过夜。在冷却至室温后，将混合物用水稀释并用etoac萃取，将有机相经无水na2so4干燥并在减压下浓缩得到残余物，将残余物通过柱色谱于硅胶(用pe∶ea＝1∶1洗脱)上纯化以得到为黄色固体的标题化合物(1.1g，收率47％)。
[0642]
实施例28
[0643]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
(哌啶
‑4‑
基)乙酰胺盐酸盐
[0644][0645]
向5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
((1
‑
(叔丁氧基羰基)哌啶
‑4‑
基)氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(700mg，0.92mmol)在etoac(2ml)中的溶液加入hcl/etoac(10ml)，并在室温下搅拌过夜。将形成的沉淀过滤并用etoac洗涤，在真空中干燥以得到为黄色固体的标题化合物(230mg，收率54％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ1.73
‑
1.84(m，2h)，2.01
‑
2.05(m，2h)，2.42(s，3h)，3.02
‑
3.09(m，2h)，3.39
‑
3.43(m，2h)，3.99
‑
4.05(m，1h)，4.57(s，2h)，7.30(dd，j＝8.4和2.4hz，1h)，7.51(t，j＝8.4hz，1h)，7.67
‑
7.74(m，4h)，8.05(s，1h)，8.20(s，1h)，8.24(s，1h).ms(es+)m/e 494(m+h)
+
。
[0646]
实施例29
[0647]2‑
(3
‑
溴苯氧基)乙酸叔丁酯
[0648][0649]
向3
‑
溴苯酚(5g，28.9mmol)在mecn(100ml)中的溶液加入溴乙酸叔丁酯(6.76g，34.7mm0l)和k2co3(5.98g，43.3mmol)。将所得混合物在氮气下于80℃加热过夜。在冷却至室温后，将混合物用水稀释并用etoac萃取。将有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥、过滤并浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱于硅胶(pe∶ea＝50∶1)上纯化以得到为油状液体的标题化合物(7g，收率84％)。
[0650]
实施例30
[0651]2‑
(3
‑
溴苯氧基)乙酰氯
[0652][0653]
向2
‑
(3
‑
溴苯氧基)乙酸叔丁酯(4.6g，16mmol)在无水dcm(50ml)中的溶液加入tfa(18g，0.16m0l)并在室温下搅拌过夜。在tlc显示反应完成后，将混合物在减压下浓缩以得到粗酸。将该酸溶解于无水dcm(50ml)中，将草酰氯(2.44g，19.2mmol)和dmf(0.2ml)加入到该溶液中。将该混合物在室温下保持4小时。将混合物在减压下浓缩，以提供白色固体，将其不经进一步纯化用于下步反应。
[0654]
实施例31
[0655]2‑
(3
‑
溴苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0656][0657]
在0℃向2
‑
(3
‑
溴苯氧基)乙酰氯(2.3g，9.24mmol)在无水dcm(30ml)中的溶液加入三乙胺(2.8g，27.7mmol)和环丙胺(632mg，11.1mm0l)。然后将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应物用水稀释，并用etoac萃取。将有机层用na2so4干燥并在减压下浓缩得到残余物，将残余物通过柱色谱于硅胶(用pe∶ea＝5∶1洗脱)上纯化以得到为白色固体的标题化合物(1.95g，收率78％)。
[0658]
实施例32
[0659]
n
‑
环丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0660][0661]
向2
‑
(3
‑
溴苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(1.95g，7.25mmol)、双(频哪醇)二硼(2.76g，10.87mmol)和koac(2.13g，21.7mmol)在dmso(20ml)中的混合物加入pd(dppf)cl2‑
dcm(265mg，0.36mmol)。将所得的混合物在n2下于100℃加热过夜。在冷却至室温后，将混合物用水稀释并用etoac萃取，将有机相经无水na2so4干燥并在减压下浓缩得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用pe∶ea＝10∶1洗脱)上纯化以得到为白色固体的标题化合物(1.4g，收率60％)。
[0662]
实施例33
[0663]4‑
(2
‑
(3
‑
溴苯氧基)乙酰氨基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0664][0665]
在0℃向2
‑
(3
‑
溴苯氧基)乙酰氯(2.1g，8.43mmol)在无水dcm(30ml)中的溶液加入三乙胺(2.56g，25.3mmol)和4
‑
氨基
‑1‑
boc
‑
哌啶(2.02g，10.1mmol)。然后将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应物用水稀释，并用etoac萃取。将有机层用na2so4干燥并在减压下浓缩得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用pe∶ea＝5∶1洗脱)上纯化以得到为白色固体的标题化合物(2.8g，收率80％)。
[0666]
实施例34
[0667]4‑
(2
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰氨基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0668][0669]
向4
‑
(2
‑
(3
‑
溴苯氧基)乙酰氨基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(2.8g，6.79mmol)、双(频哪醇)二硼(2.59g，10.2mmol)和koac(1.99g，20.4mmol)在dmso(30ml)中的混合物加入pd(dppf)cl2‑
dcm(249mg，0.34mmol)。将所得混合物在n2下加热至100℃过夜。在冷却至室温
后，将混合物用水稀释并用etoac萃取，将有机相经无水na2so4干燥并在减压下浓缩得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用pe∶ea＝5∶1洗脱)上纯化以得到为白色固体的标题化合物(1.7g，收率54％)。
[0670]
实施例35
[0671]
n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑6‑
氟
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0672][0673]
向2，4
‑
二氯嘧啶(730mg，4.89mmol)和6
‑
氟
‑5‑
氨基吲唑(740mg，4.89mmol)在无水乙醇(15ml)中的混合物加入na2co3(1.56g，14.7mmol)。将所得混合物在n2下于80℃加热过夜。在冷却至室温后，将混合物用水稀释并用etoac萃取，将有机相经无水na2so4干燥并在减压下浓缩得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用pe∶ea＝3∶1洗脱)上纯化以得到为棕色固体的标题化合物(750mg，收率58％)。
[0674]
实施例36
[0675]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑6‑
氟
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0676][0677]
向n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑6‑
氟
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(750mg，2.85mmol)在无水dcm(10ml)中的溶液加入boc2o(1.86g，8.55mmol)、tea(864mg，8.55mmol)和dmap(173mg，1.42mmol)。将所得混合物在室温下搅拌4小时。将混合物用水稀释并用dcm萃取。将有机相用无水na2so4干燥，并在真空中除去溶剂得到残余物，将残余物通过柱色谱于硅胶(用pe∶ea＝20∶1洗脱)上纯化以得到为白色固体的标题化合物(21g，收率60％)。
[0678]
实施例37
[0679]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑6‑
氟
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0680][0681]
向5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑6‑
氟
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(920mg，1.98mmol)在1，4
‑
二噁烷(16ml)和水(4ml)中的混合物加入n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(760mg，2.38mmol)、pd(pph3)4(115mg，0.1mmol)和csf(906mg，5.96mmol)。将所得的混合物在n2下于100℃加热过夜。在冷却至室温后，将混合物用水稀释并用etoac萃取，将有机相经无水na2so4干燥并在减压下浓缩得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用pe∶ea＝3∶1洗脱)上纯化以得到为黄色固体
的标题化合物(600mg，收率48％)。
[0682]
实施例38
[0683]2‑
(3
‑
(4
‑
((6
‑
氟
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺盐酸盐
[0684][0685]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑6‑
氟
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(520mg，0.84mmol)在etoac(2ml)中的混合物加入hcl/etoac(10ml)，并在室温下搅拌过夜。将形成的沉淀过滤并用etoac洗涤，在真空中干燥以得到为黄色固体的标题化合物(200mg，收率56％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ1.04(d，j＝6.4hz，6h)，3.88
‑
3.93(m，1h)，4.51(s，2h)，7.00(b，1h)，7.22(d，j＝7.6hz，1h)，7.49(t，j＝7.6hz，1h)，7.56(d，j＝10.4hz，1h)，7.75
‑
7.79(m，2h)，7.93(d，j＝7.2hz，1h)，8.09(d，j＝6.4hz，1h)，8.16(s，1h)，8.36(d，j＝6.4hz，1h)，11.09(s，1h).ms(es+)m/e 457(m+h)
+
。
[0686]
实施例39
[0687]
n
‑
(2
‑
氯
‑5‑
甲氧基嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0688][0689]
向2，4
‑
二氯
‑5‑
甲氧基嘧啶(3.56g，0.02mol)在etoh(80ml)中的混合物加入1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(2.66g，0.02mol)，然后加入diea(7.8g，0.06mol)。将所得混合物于45℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤饼用mtbe冲洗并收集以得到为棕色固体的标题化合物(4.4g，收率81％)。
[0690]
实施例40
[0691]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯
‑5‑
甲氧基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0692][0693]
向n
‑
(2
‑
氯
‑5‑
甲氧基
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(4.2g，15.3mmol)在dcm(50ml)中的混合物加入tea(4.6g的混合物，45.9mmol)、(boc)2o(8.32g，38.2mmol)和dmap(0.2g)。将所得混合物在室温下搅拌1小时并浓缩，随后通过柱色谱纯化以提供为浅黄色固体的标题化合物(5.5g，收率76％)。
[0694]
实施例41
[0695]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑5‑
甲氧基嘧
啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0696][0697]
在n2下向5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯
‑5‑
甲氧基
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.5g，3.16mmol)在溶剂(二噁烷∶水＝10∶1，33ml)中的溶液加入n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(1.2g，3.79mmol)、(boc)2o(1.38g，6.32mmol)、csf(1.4g，9.48mmol)，然后加入pd(pph3)4(0.11g，0.095mmol)。将所得混合物在90℃下搅拌24小时。将混合物通过柱色谱纯化以得到为白色固体的标题化合物(0.98g，收率49％)。
[0698]
实施例42
[0699]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑5‑
羟基嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0700][0701]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑5‑
甲氧基嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.2g，2mmol)和吡啶盐酸盐(7.8g)的混合物于140℃搅拌1小时。将反应冷却至室温。加入水(20ml)，接着加入nh3.h2o以调节ph值至6
‑
7。将混合物过滤。将滤饼收集并干燥以得到为灰色固体的标题化合物(0.46mmol，收率55％)。
[0702]
实施例43
[0703]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑5‑
(2
‑
(二甲基氨基)乙氧基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺tfa盐
[0704][0705]
向2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑5‑
羟基嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(450mg，1.07mmol)在thf(45ml)中的混合物加入2
‑
(二甲基氨基)乙醇(115mg，1.29mmol)，然后加入pph3(563mg，2.15mmol)。将所得混合物在室温下搅拌0.5小时。然后加入dead(374mg，2.15mmol)。将所得混合物在回流下加热过夜。在减压下除去溶剂，随后加入10ml的etoac和10ml的水。加入tfa以调节ph＝4
‑
5。将水性溶液浓缩并通过制备型hplc纯化以得到为黄色固体的标题化合物(0.1g，收率10％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ1.07(d，j＝6.4hz，6h)，2.94(d，j＝4.0hz，6h)，3.64
‑
3.65(m，2h)，3.92
‑
3.94(m，1h)，4.48(s，2h)，4.52
‑
4.53(m，2h)，7.02(dd，j＝9.2和1.6hz，1h)，7.37(t，j＝7.2hz，1h)，7.60
‑
7.89(m，5h)，8.12
‑
8.19(m，3h)，8.90(s，1h)，9.60(b，1h).ms(es+)m/e 490(m+h)
+
。
[0706]
实施例44
[0707]
n
‑
(2，6
‑
二氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0708][0709]
将2，4，6
‑
三氯嘧啶(3.67g，20mmol)、1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(2.66g，20mmol)和tea(3.03g，30mmol)在etoh(75ml)中的溶液在回流下加热过夜。除去溶剂后，在meoh中将残余物重结晶以提供为固体的标题化合物(4.2g，收率50％)。
[0710]
实施例45
[0711]
n
‑
(2
‑
氯
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0712][0713]
将n
‑
(2，6
‑
二氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(4.2g，15mmol)、1
‑
甲基哌嗪(2.0g，20mmol)和tea(3.03g，30mmol)在meoh(75ml)中的溶液回流过夜。除去溶剂后，在dcm中将残余物重结晶以得到为固体的标题化合物(3g，收率58％)。
[0714]
实施例46
[0715]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0716][0717]
向n
‑
(2
‑
氯
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(1.5g，4.4mmol)在dcm(20ml)中的溶液加入tea(0.93g，9.2mmol)、(boc)2o(3g，13.9mmol)和dmap(1.1g，9.2mmol)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。除去溶剂后，将残余物通过柱色谱于硅胶(用石油醚∶乙酸乙酯＝50∶1
‑
10∶1洗脱)上纯化以得到为固体的标题化合物(1.2g，收率50％)。
[0718]
实施例47
[0719]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0720][0721]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(0.600g，1.1mmol)、pd(dppf)cl2(50mg)、csf(0.501g，3.3mmol)和n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(0.640g，2mmol)在二噁烷/水(10∶1，10ml)中的溶液于100℃搅拌过夜。除去溶剂后，通过hplc纯化残余物以得到标题化合物(250mg，收率32％)。
[0722]
实施例48
[0723]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺tfa盐
[0724][0725]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(250mg，0.36mmol)在dcm(10ml)和tfa(3.0ml)中的溶液在室温下搅拌3小时。将混合物在真空中浓缩以提供为固体的标题化合物(150mg，收率70％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ1.02(d，j＝6.4hz，6h)，2.79(s，3h)，3.04(b，2h)，3.20
‑
3.27(m，2h)，3.47
‑
3.50(m，2h)，3.85
‑
3.93(m，1h)，4.45(s，2h)，4.71
‑
4.75(m，2h)，6.56(s，1h)，7.01(dd，j＝8.4和2.4hz，1h)，7.36(t，j＝8.0hz，1h)，7.41
‑
7.52(m，4h)，7.88(d，j＝7.6hz，1h)，7.98(s，2h)，9.53(s，1h)，10.00(s，1h).ms(es+)m/e 501(m+h)
+
。
[0726]
实施例49
[0727]
n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑6‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0728][0729]
将2，4
‑
二氯嘧啶(0.69g，4.6mmol)、6
‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
基胺盐酸盐(0.85g，4.6mmol)和tea(1.4g，13.8mmol)在etoh(16ml)中的溶液在回流下加热过夜。除去挥发物以得到粗制的标题化合物(1.7g)，将其不经纯化用于下步反应。
[0730]
实施例50
[0731]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑6‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0732][0733]
向n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑6‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(1.7g，粗品)在dcm(20ml)中的溶液加入tea(0.93g，9.2mmol)、(boc)2o(3g，13.9mmol)和dmap(1.1g，9.2mmol)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。除去溶剂后，通过柱色谱于硅胶(用石油醚∶乙酸乙酯＝50∶1
‑
10∶1洗脱)上纯化残余物以得到为固体的标题化合物(0.45g，2步收率21.1％)。
[0734]
实施例51
[0735]5‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑6‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0736][0737]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑6‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(0.45g，1.67mmol)、pd(dppf)c12(50mg)、na2co3(0.35g，3.34mmol)和n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(0.64g，2mmol)在二噁烷/水(10∶1，10ml)中的溶液于100℃搅拌过夜。除去溶剂后，通过hplc纯化残余物以得到标题化合物(180mg，收率17％)。
[0738]
实施例52
[0739]
n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4
‑
((6
‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺tfa盐
[0740][0741]
向5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑6‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(180mg，0.29mmol)在dcm(10ml)中的溶液加入tfa(1.5ml)。将混合物在室温下搅拌过夜，并在真空中浓缩以提供标题化合物(170mg，收率96％)。ms(es+)m/e 417(m+h)
+
。
[0742]
实施例53
[0743]
n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0744][0745]
向2，4
‑
二氯嘧啶(1.0g，6.7mmol)在etoh(20ml)中的溶液加入(1h
‑
吲唑
‑5‑
基)
‑
甲基
‑
胺(1.0g，6.8mmol)和tea(2.02g，20mmol)。将所得混合物回流过夜。除去溶剂以得到粗制的标题化合物(2.5g)，将其不经纯化用于下步反应。
[0746]
实施例54
[0747]5‑
((2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)(甲基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0748][0749]
向n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
n
‑
甲基
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(2.5g，粗品)在dcm(50ml)中的溶液加入tea(2.0g，20mmol)、(boc)2o(4.2g，19.2mmol)，并加入dmap(1.0g)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，并通过柱色谱纯化以得到为固体的标题化合物(0.95g，2步收率38.8％)。
[0750]
实施例55
[0751]5‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)(甲基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0752][0753]
在n2下向5
‑
((2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)(甲基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(0.6g，1.67mmol)在溶剂(二噁烷∶水＝4∶1，20ml)中的溶液加入n
‑
异丙基
‑2‑
[3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
[1，3，2]二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)
‑
苯氧基]
‑
乙酰胺(0.6g，1.88mmol)、(boc)2o(1.09g，5mmol)、k3po4(1.06g，5mmol)，t
‑
bu3p(0.4g，2mmol)和pd2(dba)3(0.1g)。将所得混合物于100℃搅拌24小时，并在真空中浓缩，提供粗物质，其不经进一步纯化用于进行下步反应。
[0754]
实施例56
[0755]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)(甲基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺tfa盐
[0756][0757]
向如上的5
‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)(甲基)氨
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯加入hcl/meoh(4m，5ml)，将混合物搅拌2.0小时。在真空中除去溶剂且将残余物通过hplc纯化以得到为tfa盐的标题化合物(120mg)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ1.20(d，j＝6.8hz，6h)，3.85(s，3h)，4.07
‑
4.13(m，1h)，4.62(s，2h)，6.37
‑
6.45(m，1h)，7.39(dd，j＝10.4和2.0hz，1h)，7.43(d，j＝2.0hz，1h)，7.60(t，j＝7.6hz，1h)，7.79(d，j＝8.8hz，1h)，7.86
‑
7.89(m，2h)，7.91(s，1h)，8.05(b，1h)，8.18(s，1h).ms(es+)m/e 417(m+h)
+
。
[0758]
实施例57
[0759]2‑
氯
‑
n
‑
(1h
‑
吡唑
‑4‑
基)嘧啶
‑4‑
胺
[0760][0761]
将2，4
‑
二氯嘧啶(200mg，2.41mmol)、1h
‑
吡唑
‑4‑
基胺(431mg，2.89mmol)和tea(730mg，7.23mmol)在异丙醇中的混合物(8ml)于50℃搅拌过夜。冷却后，将反应混合物浓缩。将粗产物不经纯化直接用于下一步骤。
[0762]
实施例58
[0763]4‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吡唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0764][0765]
向(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
(1h
‑
吡唑
‑4‑
基)
‑
胺(470mg，2.41mmol)、tea(730mg，7.23mmol)和dmap(607mg，4.82mmol)在无水dcm(15ml)中的混合物缓慢加入boc2o(1040mg，4.82mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时，并浓缩。将残余物通过柱色谱在硅胶上纯化以得到为白色固体的标题化合物(200mg，0.5mmol，收率21％)。
[0766]
实施例59
[0767]4‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吡唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0768][0769]
向4
‑
[叔丁氧基羰基(2
‑
氯
‑
嘧啶
‑4‑
基)
‑
氨基]
‑
吡唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(118.5mg，0.3mmol)、n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(134mg，0.42mmol)、na2co3(64mg，0.6mmol)和boc2o(130mg，0.6mmol)在etoh(3ml)和h2o(0.3ml)中的混合物加入pd(dppf)2cl2(21mg，0.03mmol)。在n2保护下在微波下将混合物于130
°
搅拌30分钟。冷却后，将混合物浓缩。将残余物通过快速柱色谱在硅胶上纯化，然后用p
‑
hplc纯化以得到为白色固体的标题化合物(30mg，0.066mmol，收率22％)。
[0770]
实施例60
[0771]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吡唑
‑4‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺tfa盐
[0772][0773]
向4
‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吡唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(167mg，0.369mmol)在dcm(20ml)中的溶液加入tfa(2ml)。将混合物在室温下搅拌5小时，然后浓缩以得到为黄色固体的标题化合物(170mg，0.364mmol，98％收率)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.20
‑
8.18(d，j＝7.2hz，1h)，8.07(s 2h)，7.80
‑
7.78(d，2h)，7.64
‑
7.60(t，j＝8.8hz，1h)，7.40
‑
7.40(dd，j＝9.6，2.4hz，1h)，6.91
‑
6.89(d，j＝7.2hz，1h)，4.63(s，2h)，4.13
‑
4.09(m，1h)1.18
‑
1.16(d，j＝6.4hz 6h).ms(es+)m/e 353(m+h)
+
。
[0774]
实施例61
[0775]5‑
((2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氧基)
‑
1h
‑
吲唑
[0776][0777]
将2，4
‑
二氯嘧啶(184mg，1.232mmol)、1h
‑
吲唑
‑5‑
醇(150mg，1.12mmol)和tea(340mg，3.36mmol)在etoh中的混合物(5ml)于80℃搅拌过夜。冷却后，将反应混合物浓缩。将粗产物不经纯化直接用于下一步骤。
[0778]
实施例62
[0779]5‑
((2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氧基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0780][0781]
向5
‑
((2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氧基)
‑
1h
‑
吲唑(275mg，1.12mmol)、tea(340mg，3.36mmol)和dmap(28mg，0.224mmol)在无水dcm(5ml)中的搅拌混合物缓慢加入boc2o(484mg，2.24mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后浓缩。将残余物通过柱色谱在硅胶上纯化以得到为白色固体的标题化合物(200mg，0.57mmol，收率50％)。
[0782]
实施例63
[0783]5‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氧基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0784]
[0785]
向5
‑
((2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氧基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(104mg，0.3mmol)、n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(134mg，0.42mmol)、t
‑
bu3p(61mg，0.3mmol)、k3po4.3h2o(160mg，0.6mmol)和boc2o(130mg，0.6mmol)在二噁烷(3ml)和h2o(0.4ml)中的混合物加入pd2(dba)3(27mg，0.03mmol)。在n2保护下将混合物于80
°
搅拌过夜。冷却后，将混合物浓缩。将残余物通过反相hplc纯化以得到为白色固体的标题化合物(58mg，0.115mmol，38％收率)。
[0786]
实施例64
[0787]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氧基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺hcl盐
[0788][0789]
将5
‑
((2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氧基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(340mg，0.675mmol)在hcl(g)/etoac(40ml)中的混合物在室温下搅拌3小时，然后浓缩以提供为白色固体的标题化合物(272mg，0.621mmol，92％收率)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.87
‑
8.85(d，j＝6.4hz，1h)，8.25(s 1h)，7.78
‑
7.71(m，2h)，7.69
‑
7.65(m，2h)，7.50
‑
7.43(m，3h)，7.30
‑
727(dd，j＝8.0，2.4hz，1h)，4.48(s，2h)，4.06
‑
4.00(m，1h)，1.14
‑
1.12(d，j＝6.4hz 6h).ms(es+)m/e 404(m+h)
+
。
[0790]
实施例65
[0791]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑1‑
(哌嗪
‑1‑
基)乙酮hcl盐
[0792][0793]
基本上采用与实施例12中描述的相同的程序来制备标题化合物。1h nmr(400mhz，cd3od)δ3.24(b，4h)，3.82(b，4h)，5.00(s，2h)，6.93(b，1h)，7.33(dd，j＝7.6和1.6hz，1h)，7.56(t，j＝8.4hz，1h)，7.68(d，j＝8.4hz，2h)，7.79(b，2h)，8.15(s，1h)，8.22(d，j＝7.2hz，2h)。(es+)m/e 430(m+h)
+
。
[0794]
实施例66
[0795]2‑
(3
‑
(4
‑
氨基
‑6‑
氯嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0796][0797]
实施例67
[0798]2‑
(3
‑
(6
‑
氨基
‑2‑
氯嘧啶
‑4‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0799][0800]
向4
‑
氨基
‑
2，6
‑
二氯嘧啶(1.016g，6.72mmol)、n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(2.032g，6.37mmol)和csf(2.858g，18.803mmol)在1，4
‑
二噁烷(31.2ml)和h2o(6.3ml)中的混合物加入pd(pph3)4(0.362g，0.313mmol)。将所得的混合物在n2下于100℃搅拌过夜。在冷却至室温后，将混合物在减压下浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用pe∶etoac＝2∶1洗脱)上纯化以得到为白色粉末的化合物2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基
‑6‑
氯嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(670mg，收率33％)和为白色粉末的2
‑
(3
‑
(6
‑
氨基
‑2‑
氯嘧啶
‑4‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(460mg，收率22％)。
[0801]
实施例68
[0802]2‑
(3
‑
(4
‑
氨基
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0803][0804]
向化合物2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基
‑6‑
氯嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(0.97g，3.031mmol)在n
‑
buoh(15ml)中的溶液加入1
‑
甲基哌嗪(1.5g，15mmol)并在n2下于120℃搅拌过夜。在冷却至室温后，将混合物在减压下浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用etoac∶meoh＝20∶1洗脱)上纯化以得到为浅黄色粉末的标题化合物(460mg，收率39％)。
[0805]
实施例69
[0806]2‑
(3
‑
(6
‑
氨基
‑2‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0807][0808]
向化合物2
‑
(3
‑
(6
‑
氨基
‑2‑
氯嘧啶
‑4‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(0.436g，1.363mmol)在n
‑
buoh(10ml)中的溶液加入1
‑
甲基哌嗪(0.682g，6.815mmol)并在n2下于120℃搅拌过夜。在冷却至室温后，将混合物在减压下浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用etoac∶meoh＝20∶1洗脱)上纯化以得到为浅黄色粉末的标题化合物(0.273g，收率52％)。
[0809]
实施例70
[0810]
n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4
‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)
‑6‑
(吡啶
‑4‑
基氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0811][0812]
向化合物2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基
‑6‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(460mg，1.199mmol)、4
‑
碘吡啶(319.5mg，1.559mmol)、pd2(dba)3(109.8mg，0.12mmol)和x
‑
phos(57mg，0.12mmol)在无水1，4
‑
二噁烷(15ml)中的混合物加入cs2co3(1.17g，3.3mmol)。将所得混合物在n2下加热至120℃过夜。在冷却至室温后，将混合物用1，4
‑
二噁烷稀释，并通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液，用etoac洗涤残余物并真空干燥以得到为白色固体的标题化合物(173mg，收率31.3％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ1.17(d，j＝6.4hz，6h)，2.36(s，3h)，2.55(t，j＝5.2hz，4h)，3.72(t，j＝4.8hz，4h)，4.06
‑
4.16(m，1h)，4.56(s，2h)，5.97(s，1h)，7.19(dd，j＝8.0和2.4hz，1h)，7.39(t，j＝8.0hz，1h)，7.78(d，j＝6.4hz，2h)，7.98(s，1h)，8.02(d，j＝8.0hz，1h)，8.32(d，j＝5.6hz，1h).m/e 462(m+h)
+
。
[0813]
实施例71
[0814]
n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(2
‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)
‑6‑
(吡啶
‑4‑
基氨基)嘧啶
‑4‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0815][0816]
向化合物2
‑
(3
‑
(6
‑
氨基
‑2‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(493mg，1.286mmol)，4
‑
碘吡啶(290mg，1.415mmol)，pd2(dba)3(117.8mg，0.129mmol)和x
‑
phos(61.4mg，0.129mmol)在无水1，4
‑
二噁烷(15ml)中的混合物加入cs2co3(1258mg，3.858mmol)。将所得混合物在n2下加热至120℃过夜。在冷却至室温后，将混合物用1，4
‑
二噁烷稀释，并通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液，并用etoac洗涤残余物并真空干燥以得到为白色固体的标题化合物(184mg，收率31.0％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ1.17(d，j＝6.4hz，6h)，2.36(s，3h)，2.57(t，j＝4.8hz，4h)，3.65(b，4h)，4.08
‑
4.14(m，1h)，4.54(s，2h)，6.57(s，1h)，7.08(dd，j＝8.0和2.4hz，1h)，7.39(t，j＝8.4hz，1h)，7.62(d，j＝7.6hz，1h)，7.69
‑
7.73(m，3h)，8.31(d，j＝6.4hz，1h).m/e 462(m+h)
+
。
[0817]
实施例72
[0818]4‑
((3
‑
溴苯氧基)甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0819][0820]
在氮气氛围下于0℃搅拌4
‑
(羟甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.5g，7.0mmol)、3
‑
溴苯酚(1.5g，7.0mmol)和pph3(2.7g，10.5mmol)在无水thf(30ml)中的溶液。在5分钟时间内向该混合物逐滴加入dead(1.8g，10.5mmol)，通过tlc监测反应。在起始原料完全消失后，将溶剂减压蒸发，并且通过柱色谱(pe/ea，9/1)纯化所得的油，以提供直接使用而不需要进一步
提纯的标题化合物(2.4g粗品)。m/e 372(m+h)
+
。
[0821]
实施例73
[0822]4‑
((3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0823][0824]
将4
‑
((3
‑
溴苯氧基)甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(2.4g，6.5mmol)、pin2b2(2.5g，9.7mmol)、pd(dppf)cl2(250mg)和乙酸钾(1.9g，19.4mmol)在50ml的二噁烷中的溶液脱气并用n2吹扫，于80℃加热14小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用etoac(300l)稀释、过滤//浓缩，并通过色谱(ea∶pe，1∶10)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(600mg，22％)。1h nmr(300mhz，cdcl3)δ7.38(1h，m)，7.27(2h，m)，6.96(1h，m)，3.82(2h，d，j＝6.0hz)，2.76(1h，m)，1.73(4h，m)，1.84(4h，m)。
[0825]
实施例74
[0826]5‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
((1
‑
(叔丁氧基羰基)哌啶
‑4‑
基)甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0827][0828]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(642mg，1.44mmol)、4
‑
((3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(600mg，1.44mmol)、koac(564mg，5.76mmol)、boc2o(604mg，2.88mmol)和pd(dppf)cl2(70mg)在二噁烷/水(30ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用dcm稀释、过滤，浓缩，并通过色谱(pe/ea，5/1)纯化以得到为黄色油状物的标题化合物(300mg，粗品)。m/e 701(m+h)
+
。
[0829]
实施例75
[0830]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(哌啶
‑4‑
基甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0831][0832]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
((1
‑
(叔丁氧基羰基)哌啶
‑4‑
基)甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(250mg，0.36mmol)溶解在30ml的hcl/et2o(饱和的)中。在室温下将它搅拌过夜。将混合物浓缩以得到残余物，用水稀释残余物，并通过ea萃取。使用饱和nahco3溶液将水相调节至11。将其浓缩且通过制备型tlc进一步纯化残余物，以提供为黄色固体的标题化合物(50mg，35％)。1h nmr(300mhz，cd3od)δ8.24(2h，m)，8.04(1h，s)，7.90(2h，m)，7.56(2h，m)，7.38(1h，t，j＝6.0hz)，7.04(1h，dd，j＝9.0hz，j＝3.0hz)，
6.65(1h，d，j＝6.0hz)，3.95(2h，d，j＝6.0hz)，3.42(2h，d，j＝3.0hz)，2.15(2h，t，j＝3.0hz)，2.12(1h，m)，2.07(2h，q，j＝3.0hz)，1.69(2h，q，j＝3.0hz)；m/e 401(m+h)
+
。
[0833]
实施例76
[0834]4‑
(3
‑
溴苯氧基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0835][0836]
在氮气氛围下于0℃搅拌4
‑
羟基哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.4g，7.0mmol)、3
‑
溴苯酚(1.2g，7.0mmol)和pph3(2.7g，10.4mmol)在无水thf(35ml)中的溶液。在5分钟时间内向该混合物逐滴加入dead(1.8g，10.4mmol)，通过tlc监测反应。在起始原料完全消失后，将溶剂减压蒸发，并且通过柱色谱(pe/ea，9/1)纯化所得的油以提供标题化合物(1.3g，52％)。m/e 357(m+h)
+
。
[0837]
实施例77
[0838]4‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0839][0840]
将4
‑
(3
‑
溴苯氧基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.3g，3.5mmol)、pin2b2(1.4g，5.3mmol)、pd(dppf)cl2(135mg)和乙酸钾(1.0g，10.6mmol)在20ml的二噁烷中的混合物脱气，用n2吹扫，并于80℃加热14小时。将混合物浓缩以得到残余物，用etoac(200ml)稀释残余物、过滤，浓缩，并通过色谱(ea∶pe，1∶10)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(500mg，36％)。1h nmr(300mhz，cdcl3)δ7.38(1h，m)，7.32(1h，m)，7.27(1h，m)，7.25(1h，m)，7.38(1h，m)，4.51(1h，m)，3.69(2h，m)，3.36(2h，m)，1.88(2h，m)，1.74(2h，m)，1.34(2h，m)。
[0841]
实施例78
[0842]5‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
(1
‑
(叔丁氧基羰基)哌啶
‑4‑
基氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0843][0844]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(221mg，0.5mmol)、4
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(200mg，0.5mmol)、koac(196mg，2.0mmol)、boc2o(210mg，1.0mmol)和pd(dppf)cl2(40mg)在二噁烷/水(30ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，用dcm稀释残余物、过滤，浓缩，并通过色谱(pe/ea，5/1)纯化以得到为黄色油状物的标题化合物(180mg，粗品)。m/e 687(m+h)
+
。
[0845]
实施例79
[0846]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(哌啶
‑4‑
基氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0847][0848]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
(1
‑
(叔丁氧基羰基)哌啶
‑4‑
基氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(170mg，0.25mmol)溶解在30ml的hcl/et2o(饱和的)中。在室温下将其搅拌过夜。将混合物浓缩以得到残余物，用水稀释残余物，并通过ea萃取。使用饱和nahco3溶液将水相调节至11。将其浓缩且通过制备型tlc进一步纯化残余物，以提供为黄色固体的标题化合物(20mg，21％)。1h nmr(300mhz，cd3od)δ8.26(1h，d，j＝6.0hz)，8.18(1h，s)，8.04(1h，s)，7.96(1h，s)，7.93(1h，t，j＝3.0hz)，7.56(2h，m)，7.42(1h，t，j＝9.0hz)，7.14(1h，dd，j＝9.0hz，j＝3.0hz)，6.87(1h，d，j＝6.0hz)，5.80(1h，m)，3.38(2h，m)，3.30(2h，m)，2.16(2h，m)，2.11(2h，m)；m/e 387(m+h)
+
。
[0849]
实施例80
[0850]2‑
(3
‑
溴
‑4‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0851][0852]
将2
‑
氯
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(1.7g，13.1mmol)、3
‑
溴
‑4‑
氟苯酚(2.5g，13.1mmol)和k2co3(2.7g，19.6mmol)在20ml丙酮中的溶液于60℃加热16小时。将混合物过滤并浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱(pe/ea，3/1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(2.5g，66％)。m/e 289(m+h)
+
。
[0853]
实施例81
[0854]
n
‑
环丙基
‑2‑
(4
‑
氟
‑3‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0855][0856]
将2
‑
(3
‑
溴
‑4‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(2.5g，8.7mmol)、pin2b2(3.3g，13.0mmol)、pd(dppf)cl2(330mg)和乙酸钾(2.6g，26.0mmol)在35ml二噁烷中的混合物脱气并用n2吹扫，于80℃加热14小时。将混合物浓缩以得到残余物，用etoac(200ml)稀释残余物、过滤、浓缩并通过色谱(ea∶pe，1∶5)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(600mg，21％)。m/e 336(m+h)
+
。
[0857]
实施例82
[0858]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)嘧啶
‑2‑
基)
‑4‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0859]
[0860]
将n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(150mg，0.61mmol)/n
‑
环丙基
‑2‑
(4
‑
氟
‑3‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(205mg，0.61mmol)、koac(240mg，2.45mmol)和pd(dppf)cl2(60mg)在二噁烷/水(20ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，用dcm稀释残余物、过滤、浓缩并通过色谱(dcm/meoh，20/1)纯化，随后通过制备型tlc进一步纯化以得到为黄色固体的标题化合物(35mg，14％)。1h nmr(300mhz，cd3od)δ8.26(1h，d，j＝6.0hz)，8.17(1h，s)，8.03(1h，s)，7.52(3h，m)，7.13(2h，m)，6.70(1h，d，j＝6.0hz)，4.53(2h，s)，2.72(1h，t，j＝3.0hz)，0.75(2h，t，j＝3.0hz)，0.57(2h，t，j＝3.0hz)；m/e 419(m+h)
+
。
[0861]
实施例83
[0862]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑2‑
基)
‑4‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0863][0864]
将n
‑
(2
‑
氯
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(209mg，0.80mmol)、n
‑
环丙基
‑2‑
(4
‑
氟
‑3‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(270mg，0.80mmol)、koac(316mg，3.22mmol)和pd(dppf)cl2(60mg)在二噁烷/水(20ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，用dcm稀释残余物、过滤、浓缩并通过色谱(dcm/meoh，20/1)纯化，随后通过制备型tlc进一步纯化以得到为黄色固体的标题化合物(35mg，10％)。1h nmr(300mhz，cd3od)δ8.16(1h，s)，8.12(1h，s)，8.02(1h，s)，7.70(1h，dd，j＝9.0hz，j＝3.0hz)，7.54(1h，d，j＝9.0hz)，7.44(1h，m)，7.10(2h，m)，4.46(2h，s)，2.69(1h，m)，2.31(3h，s)，0.73(2h，t，j＝3.0hz)，0.55(2h，t，j＝3.0hz)；m/e 433(m+h)
+
。
[0865]
实施例84
[0866]2‑
(3
‑
溴
‑5‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0867][0868]
将2
‑
氯
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(2.8g，20.9mmol)、3
‑
溴
‑5‑
氟苯酚(4.0g，20.9mmol)和k2co3(4.3g，31.4mmol)在40ml丙酮中的溶液于60℃加热16小时。将混合物过滤并浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱(pe/ea，3/1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(4.3g，71％)。m/e 288(m+h)
+
。
[0869]
实施例85
[0870]
n
‑
环丙基
‑2‑
(3
‑
氟
‑5‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0871][0872]
将2
‑
(3
‑
溴
‑5‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(4.3g，14.9mmol)、pin2b2(5.7g，22.4mmol)、pd(dppf)cl2(600mg)和乙酸钾(4.4g，44.8mmol)在50ml二噁烷中的溶液脱气并用n2吹扫，于80℃加热14小时。将混合物浓缩以得到残余物，用etoac(200ml)稀释残余物、过滤、浓缩并通过色谱(ea∶pe，1∶5)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(3.2g，64％)。m/e 336(m+h)
+
。
[0873]
实施例86
[0874]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)嘧啶
‑2‑
基)
‑5‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0875][0876]
将n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(340mg，1.4mmol)、n
‑
环丙基
‑2‑
(3
‑
氟
‑5‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(650mg，1.9mmol)、csf(835mg，5.5mmol)和pd(dppf)cl2(200mg)在二噁烷/水(20ml/3ml)中的混合物脱气并用n2冲洗，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，用dcm稀释残余物、过滤、浓缩并通过(dcm/meoh，20/1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(80mg，14％)。1h nmr(300mhz，cd3od)δ8.26(1h，d，j＝6.0hz)，8.08(1h，s)，8.06(1h，s)，7.78(1h，s)，7.65(1h，dd，j＝9.0hz，j＝3.0hz)，7.58(2h，s)，6.89(1h，dt，j＝9.0hz，j＝3.0hz)，6.66(1h，d，j＝6.0hz)，4.58(2h，s)，2.74(1h，m)，0.76(2h，t，j＝3.0hz)，0.58(2h，t，j＝3.0hz)；m/e 419(m+h)
+
。
[0877]
实施例87
[0878]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑2‑
基)
‑5‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0879][0880]
将n
‑
(2
‑
氯
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(360mg，1.4mmol)、n
‑
环丙基
‑2‑
(3
‑
氟
‑5‑
的混合物(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(650mg，1.9mmol)、csf(835mg，5.5mmol)和pd(dppf)cl2(200mg)在二噁烷/水(20ml/3ml)中的混合物脱气并用n2冲洗，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，将其用dcm稀释残余物、过滤、浓缩并通过色谱(dcm/meoh，20/1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(60mg，10％)。1h nmr(300mhz，cd3od)δ8.14(1h，s)，8.04(2h，m)，7.70(2h，m)，7.57(2h，m)，6.81(1h，dt，j＝9.0hz，j＝3.0hz)，4.51(2h，s)，2.72(1h，m)，2.29(3h，s)，0.72(2h，t，j＝
3.0hz)，0.57(2h，t，j＝3.0hz)；m/e 433(m+h)
+
。
[0881]
实施例88
[0882]3‑
((3
‑
溴苯氧基)甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0883][0884]
在氮气氛围下于0℃搅拌3
‑
(羟甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(935mg，4.35mmol)、3
‑
溴苯酚(753mg，4.35mmol)和pph3(1.71mg，6.53mmol)在无水thf(30ml)中的溶液。在5分钟时间内向该混合物逐滴加入dead(1.14g，6.53mmol)，通过tlc监测反应。在起始原料完全消失后，将混合物倒入ea(50ml)中，用盐水洗涤(3
×
20ml)，经na2so4干燥并过滤。将滤液减压蒸发，通过柱色谱(pe/ea，10/1)纯化所得的油状物以得到标题化合物(0.8g，粗品)。m/e 370(m+h)
+
。
[0885]
实施例89
[0886]3‑
((3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0887][0888]
将3
‑
((3
‑
溴苯氧基)甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(0.7g，1.9mmol)、pin2b2(0.72g，2.8mmol)、pd(dppf)cl2(154mg)和乙酸钾(556mg，5.67mmol)在二噁烷(50ml)中的溶液脱气并用n2吹扫，于80℃加热14小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用etoac(100ml)稀释，用盐水洗涤(3
×
30ml)，经na2so4干燥并过滤。将滤液减压蒸发，用柱色谱(ea∶pe，1∶5)纯化所得的油状物以得到标题化合物(0.9g，粗品)。m/e 418(m+h)
+
。
[0889]
实施例90
[0890]5‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
((1
‑
(叔丁氧基羰基)哌啶
‑3‑
基)甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0891][0892]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(240mg，0.54mmol)、3
‑
((3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)甲基)哌啶
‑1‑
羧酸叔丁酯(270mg，0.65mmol)、csf(788mg，5.4mmol)、boc2o(353mg，1.62mmol)和pd(dppf)cl2(88mg)在二噁烷/水(20ml/2ml)中的混合物脱气并用n2冲洗，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用etoac(100ml)稀释，用盐水洗涤(30ml
×
3)，经na2so4干燥并过滤。将滤液减压蒸发，用柱色谱(dcm∶meoh，50∶1)纯化所得的油状物以得到为黄色油状物的标题化合物(0.1g)。m/e 701(m+h)
+
。
[0893]
实施例91
[0894]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(哌啶
‑3‑
基甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0895][0896]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
((1
‑
(叔丁氧基羰基)哌啶
‑3‑
基)甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(100mg，0.14mmol)溶解在hfip(3ml)中，采用微波将该溶液于150℃搅拌1小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物通过制备型tlc(dcm∶meoh，4∶1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(40mg，70％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.26(d，j＝8.4hz，1h)，8.21(s，1h)，8.07(s，1h)，7.91
‑
7.88(m，2h)，7.61
‑
7.52(m，2h)，7.44(t，j＝8.0hz，1h)，7.14
‑
7.12(m，1h)，6.74(d，j＝6.4hz，1h)，4.11
‑
4.07(m，1h)，3.97
‑
3.93(m，1h)，3.58
‑
3.54(m，1h)，3.41
‑
3.31(m，1h)，3.00
‑
2.89(m，2h)，2.36
‑
2.27(m，1h)，2.04
‑
1.97(m，1h)，1.85
‑
1.78(m，1h)，1.56
‑
1.45(m，1h)；m/e 401(m+h)
+
。
[0897]
实施例92
[0898]3‑
(3
‑
溴苯氧基)吡咯烷
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0899][0900]
在氮气氛围下于0℃搅拌3
‑
羟基吡咯烷
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.0g，5.8mmol)、3
‑
溴苯酚(1.08g，5.8mmol)和pph3(2.28g，8.7mmol)在无水thf(35ml)中的溶液。在5分钟时间内向该混合物逐滴加入dead(1.51g，8.7mmol)，通过tlc监测反应。在起始原料完全消失后，将混合物倒入ea(50ml)中，用盐水洗涤(20ml
×
3)，经na2so4干燥并过滤。将滤液减压蒸发，通过柱色谱(pe/ea，10/1)纯化所得的油状物以得到标题化合物(0.8g，粗品)。m/e 342(m+h)
+
。
[0901]
实施例93
[0902]3‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)吡咯烷
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0903][0904]
将3
‑
(3
‑
溴苯氧基)吡咯烷
‑1‑
羧酸叔丁酯(0.8g，2.3mmol)、pin2b2(1.91g，7.5mmol)、pd(dppf)cl2(408mg)和乙酸钾(1.47g，15mmol)在二噁烷(50ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于80℃加热14小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用etoac(100ml)稀释，用盐水洗涤(3
×
30ml)，经na2so4干燥并过滤。将滤液减压蒸发，用柱色谱(ea∶pe，1∶5)纯化所得的油状物以得到为黄色油状物的标题化合物(450mg，粗品)。m/e 390(m+h)
+
。
[0905]
实施例94
[0906]5‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
(1
‑
(叔丁氧基羰基)吡咯烷
‑3‑
基氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0907][0908]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(466mg，1.05mmol)、3
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)吡咯烷
‑1‑
羧酸叔丁酯(488mg，1.25mmol)、csf(1.53g，10.5mmol)、boc2o(687mg，3.15mmol)和pd(dppf)cl2(172mg)在二噁烷/水(30ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用etoac(100ml)稀释，用盐水洗涤(3
×
30ml)，经na2so4干燥并过滤。将滤液减压蒸发，通过柱色谱(pe/ea，5/1)纯化所得的油状物以得到为黄色固体的标题化合物(200mg，28.5％)。m/e 673(m+h)
+
。
[0909]
实施例95
[0910]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(吡咯烷
‑3‑
基氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0911][0912]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
(1
‑
(叔丁氧基羰基)吡咯烷
‑3‑
基氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(135mg，0.25mmol)溶解在2ml浓盐酸中。将其在室温下搅拌5分钟。加入10ml水，然后用1n的naoh调节ph 9
‑
10。用ea萃取(30ml
×
3)，经na2so4干燥并过滤。将滤液减压蒸发，通过制备型tlc(dcm/meoh，5/1)纯化所得的油状物以得到为黄色固体的标题化合物(45mg，62.5％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.27(d，j＝6.0hz，1h)，8.17(s，1h)，8.05(s，1h)，7.98(d，j＝7.6hz，1h)，7.90
‑
7.86(m，1h)，7.59
‑
7.53(m，2h)，7.44(t，j＝8.0hz，1h)，7.11(dd，j＝2.0hz，j＝2.4hz，1h)，6.67(d，j＝6.0hz，1h)，5.28
‑
5.26(m，1h)，3.62
‑
3.31(m，4h)，2.40
‑
2.25(m，2h)；m/e 373(m+h)
+
。
[0913]
实施例96
[0914]2‑
(5
‑
溴
‑2‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0915][0916]
将2
‑
氯
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(1.0g，7.5mmol)、5
‑
溴
‑2‑
氟苯酚(1.44g，7.5mmol)和k2co3(1.55g，11.25mmol)在30ml丙酮中的溶液于60℃加热16小时。将混合物过滤并浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱(pe/ea，2/1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(1.2g，55.3％)。m/e 288(m+h)
+
。
[0917]
实施例97
[0918]
n
‑
环丙基
‑2‑
(2
‑
氟
‑5‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0919][0920]
将2
‑
(5
‑
溴
‑2‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(0.83g，2.88mmol)、pin2b2(1.1g，4.33mmol)、pd(dppf)cl2(120mg)和乙酸钾(0.85g，8.64mmol)在35ml二噁烷中的混合物脱气并用n2吹扫，于80℃加热14小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用etoac(100ml)稀释，用盐水洗涤(3
×
30ml)，经na2so4干燥并过滤。将滤液减压蒸发，通过柱色谱(pe/ea，2/1)纯化所得的油状物以得到为油状物的标题化合物(600mg，21％)。m/e 336(m+h)
+
。
[0921]
实施例98
[0922]2‑
(5
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)嘧啶
‑2‑
基)
‑2‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0923][0924]
将n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(147mg，0.6mmol)、n
‑
环丙基
‑2‑
(2
‑
氟
‑5‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(300mg，0.89mmol)、koac(235mg，2.4mmol)和pd(dppf)cl2(70mg)在二噁烷/水(20ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用dcm(30ml)稀释并过滤。浓缩滤液并通过柱色谱(dcm/meoh，10/1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(35mg，14％)。1h nmr(400mhz，dmso)δ13.01(s，1h)，9.65(s，1h)，8.33(d，j＝5.6hz，1h)，8.21
‑
8.20(m，1h)，8.09
‑
7.96(m，3h)，7.62
‑
7.55(m，2h)，7.39
‑
7.34(m，1h)，6.68(d，j＝6.0hz，1h)，4.64(s，2h)，2.70
‑
2.65(m，1h)，0.63
‑
0.59(m，2h)，0.48
‑
0.43(m，2h)；m/e 419(m+h)
+
。
[0925]
实施例99
[0926]2‑
(5
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)
‑5‑
甲基嘧啶
‑2‑
基)
‑2‑
氟苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0927][0928]
将n
‑
(2
‑
氯
‑5‑
甲基嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(100mg，0.38mmol)、n
‑
环丙基
‑2‑
(2
‑
氟
‑5‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(130mg，0.38mmol)、koac(151mg，1.55mmol)和pd(dppf)cl2(50mg)在二噁烷/水(20ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用dcm(30ml)稀释并过滤。浓缩滤液并通过柱色谱(dcm/meoh，10/1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(10mg，2.9％)。1h nmr(400mhz，dmso)δ13.01(s，1h)，8.62(s，1h)，8.21(s，1h)，8.17(d，j＝4.0hz，1h)，8.11
‑
8.09(m，2h)，7.97
‑
7.94(m，1h)，7.85
‑
7.82(m，1h)，7.71
‑
7.68(m，1h)，7.59
‑
7.56(m，1h)，7.31
‑
7.26(m，1h)，4.58(s，2h)，2.68
‑
2.63(m，1h)，2.25(s，3h)，
0.66
‑
0.58(m，2h)，0.47
‑
0.43(m，2h)；m/e 433(m+h)
+
。
[0929]
实施例100
[0930]
n
‑
(6
‑
氯
‑2‑
(吡咯烷
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[0931][0932]
将n
‑
(2，6
‑
二氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(0.88g，3.17mol)、吡咯烷(225mg，3.17mmol)和dipea(818mg，6.34mmol)在buoh(30ml)中的混合物于120℃搅拌12小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物通过制备型hplc纯化以得到为白色固体的标题化合物(0.8g，80％)。m/e 315(m+h)
+
。
[0933]
实施例101
[0934]5‑
(6
‑
(3
‑
(2
‑
(环丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑2‑
(吡咯烷
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0935][0936]
将n
‑
(6
‑
氯
‑2‑
(吡咯烷
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(300mg，0.95mmol)、n
‑
环丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(452mg，1.43mmol)、csf(1.38g，1.55mmol)和pd(dppf)cl2(150mg)在二噁烷/水(30ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热16小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用dcm(50ml)稀释并过滤。浓缩滤液并通过柱色谱(dcm/meoh中，10/1)纯化以得到为黄色固体的标题化合物(90mg，16％)。m/e 570(m+h)
+
。
[0937]
实施例102
[0938]2‑
(3
‑
(6
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)
‑2‑
(吡咯烷
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0939][0940]
将5
‑
(6
‑
(3
‑
(2
‑
(环丙基氨基)
‑2‑
氧代乙氧基)苯基)
‑2‑
(吡咯烷
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(90mg，0.16mmol)溶解在hfip(2ml)中，采用微波将溶液于150℃搅拌1小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物通过制备型tlc纯化(dcm∶meoh，4∶1)以得到为黄色固体的标题化合物(35mg，46.7％)。1h nmr(400mhz，dmso)δ12.92(s，1h)，9.27(s，1h)，8.32(s，1h)，8.19(d，j＝4.4hz，1h)，7.99(s，1h)，7.60(s，1h)，7.56
‑
7.47(m，3h)，7.39(t，j＝8.0hz，1h)，7.02(dd，j＝2.0hz，j＝2.0hz，1h)，6.47(s，1h)，4.50(s，2h)，
3.63
‑
3.60(m，4h)，2.73
‑
2.66(m，1h)，1.95
‑
1.98(m，4h)，0.66
‑
0.61(m，2h)，0.51
‑
0.47(m，2h)；m/e 470(m+h)
+
。
[0941]
实施例103
[0942]3‑
(3
‑
溴苯基)
‑
n
‑
环丙基丙酰胺
[0943][0944]
将3
‑
(3
‑
溴苯基)丙酸(3.0g，13.1mmol)加入到socl2(10ml)的溶液中并于70℃搅拌2小时。将混合物在减压下浓缩。将残余物溶解于ch2cl2(20ml)中，然后于0℃逐滴加入到环丙胺(1.17g，19.6mmol)和三乙胺(4.0g，39.3mmol)的混合物中，然后将反应混合物在环境温度下搅拌过夜。用1n的hcl淬灭反应混合物，用盐水洗涤有机层、干燥、浓缩成残余物。将残余物通过色谱(pe/ea∶1/1至1/2)纯化以得到为白色固体的标题化合物(2.8g，79％)。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.36(m，2h)，7.15(m，2h)，5.53(s，1h)，2.94(t，2h)，2.68(s，1h)，2.41(t，2h)，0.77(m，2h)，0.44(m，2h).m/e 268(m+h)
+
。
[0945]
实施例104
[0946]
n
‑
环丙基
‑3‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯基)丙酰胺
[0947][0948]
将pdcl2(dppf)(420mg，0.5mmol)加入到3
‑
(3
‑
溴苯基)
‑
n
‑
环丙基丙酰胺(2.8g，10.3mmol)、4，4，4
′
，4
′
，5，5，5
′
，5
′‑
八甲基
‑
2，2
′‑
双(1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷)(3.9g，15.5mmol)和koac(2.5g，25.7mmol)在二噁烷(80ml)中的混合物中。在氮气下将混合物于100℃搅拌过夜。然后将反应混合物真空浓缩，并将残余物通过色谱(pe/ea∶5/1至1/1)纯化以得到为灰白色固体的标题化合物(3.0g，92％)。1h nmr(300mhz，cdcl3)δ7.60
‑
7.67(m，2h)，7.27
‑
7.33(m，2h)，5.47(s，1h)，2.92
‑
2.97(m，2h)，2.41(t，2h)，2.04(s，1h)，1.34(s，12h)，0.70
‑
0.72(m，2h)，0.38
‑
0.40(m，2h)；m/e 316(m+h)
+
。
[0949]
实施例105
[0950]5‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
(3
‑
(环丙基氨基)
‑3‑
氧代丙基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0951][0952]
在n2气流下将pdcl2(dppf)(165mg，0.21mmol)加入到n
‑
环丙基
‑3‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯基)丙酰胺(380mg，1.2mmol)、boc2o(650mg，3.0mmol)、csf(600mg，4.0mmol)和5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(446mg，1.0mmol)在二噁烷/h2o(30ml，10/1)中的混合物中。在氮气氛围下将混合物于100℃搅拌24小时。该反应混合物用ea(60ml)萃取，用盐水洗涤、干燥、真空浓缩，并将残余物通过色谱(pe/ea∶5/0至1/5)纯化以得到为黄色油状物的标题化合物产物(240mg)。
m/e 599(m+h)
+
。
[0953]
实施例106
[0954]3‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯基)
‑
n
‑
环丙基丙酰胺
[0955][0956]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
(3
‑
(环丙基氨基)
‑3‑
氧代丙基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(220mg，0.367mmol)加入到饱和hcl在乙醚(30ml)中的混合物中。在环境温度下将该混合物搅拌3小时。然后将混合物过滤，并将黄色固体加入到盐酸(5ml)中，然后搅拌10分钟，并用h2o(50ml)稀释、过滤。将得到的灰白色晶体作为盐酸盐加入到饱和nahco3(10ml)并搅拌2小时。将混合物过滤，用h2o(10ml)洗涤固体、干燥以得到为灰白色固体的标题化合物(50mg，34％)。1h nmr(300mhz，dmso)δ13.00(s，1h)，9.62(s，1h)，8.34
‑
8.32(m，3h)，8.22(m，1h)，8.06(s，1h)，7.85(s，1h)，7.55(m，1h)，7.40(m，3h)，6.66(d，1h)，2.90(m，2h)，2.60(m，1h)，2.40(m，2h)，0.57(m，2h)，0.33(m，2h)。m/e 399(m+h)
+
。
[0957]
实施例107
[0958]2‑
(3
‑
溴苯基硫基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0959][0960]
将2
‑
氯
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(1.33g，10mmol)、3
‑
溴苯硫酚(1.6g，8.5mmol)和k2co3(4.8g，35mmol)在30ml丙酮中的溶液于70℃下加热过夜。将混合物过滤并浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱(pe/ea，1/1)纯化以得到为白色固体的标题化合物(2.4g，96％)。1h nmrδ(300mhz，cdcl3)7.39(1h，m)，7.31(1h，m)，7.14(2h，m)，6.71(1h，s)，3.58(2h，s)，2.64
‑
2.77(1h，m)，0.73
‑
0.84(2h，m)，0.41(2h，m)；m/e 286(m+h)
+
。
[0961]
实施例108
[0962]
n
‑
环丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯硫基)乙酰胺
[0963][0964]
将2
‑
(3
‑
溴苯基硫基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺(2.43g，9.1mmol)、pin2b2(3.5g，13.7mmol)、pd(dppf)cl2(730mg)和乙酸钾(2.67g，27.3mmol)在30ml二噁烷中的混合物脱气并用n2吹扫，于95℃加热12小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用etoac(200ml)稀释、过滤、浓缩并通过色谱(ea∶pe，1∶1)纯化以得到为黄色油状物的标题化合物(2.4g，82％)。m/e 286(m+h)
+
。
[0965]
实施例109
[0966]5‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
(2
‑
(环丙基氨基)
‑2‑
氧代乙硫)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[0967][0968]
将n
‑
环丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯硫基)乙酰胺(380mg，1.1mmol)、n
‑
(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(246mg，1.0mmol)、csf(730mg，5.0mmol)、boc2o(650mg，3.0mmol)和pd(dppf)cl2(1700mg)在二噁烷/水(27ml/3ml)中的混合物脱气并用n2吹扫，于100℃加热24小时。将混合物浓缩以得到残余物，将残余物用dcm稀释、过滤，浓缩，并通过色谱(dcm/meoh中，20/1)纯化以得到为黄色固体的粗制标题化合物(200mg)。m/e 617(m+h)
+
。
[0969]
实施例110
[0970]2‑
(3
‑
(4
‑
(1h
‑
吲唑
‑5‑
基氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯硫基)
‑
n
‑
环丙基乙酰胺
[0971][0972]
将5
‑
(叔丁氧基羰基(2
‑
(3
‑
(2
‑
(环丙基氨基)
‑2‑
氧代乙硫)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(209mg，0.80mmol)在浓hcl(3ml)中的混合物搅拌10分钟，随后加入冰。用nahco3溶液将反应混合物调节至ph10，用ch2cl2/meoh(1/1，20ml)萃取。过滤并浓缩滤液以得到残余物，将残余物通过色谱(dcm/meoh，20/1)纯化，随后进一步通过制备型tlc纯化以得到为黄色固体的标题化合物(25mg，18％)。1h nmr(300mhz，cd3od)δ8.36(1h，m)，8.24(1h，d，j＝6hz)，8.14(2h，m)，8.05(1h，s)，7.56(2h，s)，7.49(1h，m)，7.41(1h，d，j＝6hz)，6.63(1h，d，j＝6hz)，3.60(2h，s)，2.58(1h，m)，0.61(2h，m)，0.36(2h，m)；m/e 417(m+h)
+
。
[0973]
实施例111
[0974]2‑
(3
‑
(4
‑
氨基嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0975][0976]
在n2下将2
‑
氯嘧啶
‑4‑
胺(0.50g，3.8mmol)、n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(1.46g，4.6mmol)、csf(1.75g，11.4mmol)和pd(pph3)4(0.2g，0.2mmol)在二噁烷(8ml)和h2o(2ml)中的混合物于100℃下搅拌过夜。在冷却至室温后，将混合物在减压下浓缩以得到残余物，将残余物通过柱色谱在硅凝胶(用pe∶etoac＝1∶1洗脱)上纯化以得到为无色油状物的标题化合物(400mg，收率36％)。
[0977]
实施例112
[0978]
n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4
‑
(吡啶
‑4‑
基氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0979][0980]
在n2下将化合物2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(300mg，1.1mmol)、4
‑
溴吡啶(258mg，1.3mmol)、cs2co3(1026mg，3.3mmol)、pd2(dba)3(96mg，0.1mmol)和x
‑
phos(51mg，0.1mmol)在无水二噁烷(30ml)中的混合物于120℃搅拌过夜。在冷却至室温后，将混合物过滤，浓缩滤液，将残余物用etoac洗涤，然后过滤以提供为白色固体的标题化合物(200mg，收率52％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ10.09(s，1h)，8.47
‑
7.92(m，8h)，7.45(t，j＝7.6hz，1h)，7.12
‑
6.82(m，2h)，4.52(s，2h)，3.99
‑
3.92(m，1h)，1.06(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 364(m+h)
+
。
[0981]
实施例113
[0982]2‑
氯
‑4‑
(4
‑
(吡啶
‑4‑
基)哌啶
‑1‑
基)嘧啶
[0983][0984]
将2，4
‑
二氯嘧啶(745mg，5mmol)、1，2，3，4，5，6
‑
六氢
‑
[4，4
′
]联吡啶(811mg，5mmol)和tea(758mg，7.5mmol)在etoh(15ml)中的混合物在回流下搅拌过夜。在除去溶剂后，通过柱色谱在硅胶(用石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1
‑
1∶1洗脱)上纯化得到为白色固体的标题化合物(500mg，收率36.4％)。
[0985]
实施例114
[0986]
n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4
‑
(4
‑
(吡啶
‑4‑
基)哌啶
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺
[0987][0988]
将2
‑
氯
‑4‑
(4
‑
(吡啶
‑4‑
基)哌啶
‑1‑
基)嘧啶(500mg，1.82mmol)，加入pd(dppf)2cl2(50mg)、na2co3(579mg，5.46mmol)和n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(871mg，2.73mmol)在二噁烷/水(10∶1，10ml)中的混合物于100℃搅拌过夜。在除去溶剂后，用p
‑
hplc纯化残余物以得到为固体的标题化合物(300mg，收率35.2％)。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.80(d，j＝6.8hz，2h)，8.23(d，j＝7.6hz，1h)，8.10(d，j＝6.4hz，2h)，7.83
‑
7.81(m，2h)，7.59(t，j＝8.4hz，1h)，7.37
‑
7.20(m，2h)，5.54(d，j＝13.2hz，1h)，4.62(s，2h)，4.52(d，j＝14hz，1h)，4.12
‑
4.06(m，1h)，3.61
‑
3.47(m，4h)，2.26
‑
1.89(m，4h)，1.17(d，j＝7.6hz，6h)；m/e 432(m+h)
+
。
[0989]
实施例115
[0990]
4，6
‑
二氯
‑2‑
碘嘧啶
[0991][0992]
向化合物4，6
‑
二氯嘧啶
‑2‑
胺(39g，237.82mmol)在ch3cn(300ml)、ch2i2(1000ml)中的溶液加入t
‑
buono(129.3g，1.25mol)并将该混合物加热至回流过夜。将混合物在减压下浓缩，并将残余物通过柱色谱纯化以得到为黄色固体的标题化合物(30g，收率46％)。
[0993]
实施例116
[0994]2‑
(3
‑
(4，6
‑
二氯嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0995][0996]
向化合物4，6
‑
二氯
‑2‑
碘嘧啶(13.92g，50.64mmol)、n
‑
异丙基
‑2‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙酰胺(18g，56.39mmol)、na2co3(13.88g，130.96)在dme(150ml)和水(50ml)中的混合物加入pd(pph3)4(5.04g，4.36mmol)，并在n2下并将该混合物加热至回流过夜。然后将反应混合物倒入水(100ml)中，用etoac萃取(150ml
×
2)，将有机相用盐水洗涤，用na2so4干燥，并在减压下浓缩，并将残余物通过柱色谱纯化以得到为白色固体的标题化合物(9.05g，收率52％)。
[0997]
实施例117
[0998]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
氯嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[0999][1000]
向化合物2
‑
(3
‑
(4，6
‑
二氯嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(5.7g，16.75mmol)在iproh(110ml)中的溶液加入dipea(6.5g，48.82mmol)和1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(2.23g，17.25mmol)，并将反应混合物加热至回流过夜。将反应混合物在减压下浓缩，并将残余物通过柱色谱纯化以得到标题化合物(3.22g，收率44％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.05(s，1h)，9.90(s，h)，8.09(b，2h)，7.95
‑
7.89(m，3h)，7.59
‑
7.41(m，3h)，7.12(d，j＝8.0hz，1h)，6.66(s，1h)，4.51(s，2h)，4.00
‑
3.94(m，1h)，1.08(d，j＝6.4hz，6h)；m/e 437(m+h)
+
。
[1001]
实施例118
[1002]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1003]
[1004]
向2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
氯嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(300mg，0.687mmol)在iproh(20ml)中的搅拌溶液在室温下加入et3n(3ml)和哌嗪(592mg，6.87mmol)。将混合物于110℃搅拌过夜。然后反应混合物在减压下浓缩，并将残余物通过制备型hplc纯化以提供标题化合物(114mg，收率34％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.91(s，1h)，9.01(s，1h)，8.08(s，1h)，8.02(s，1h)，7.94
‑
7.89(m，3h)，7.51
‑
7.35(m，3h)，7.04(dd，j＝8.0和2.0hz，1h)，5.82(s，1h)，4.50(s，2h)，3.98
‑
3.92(m，1h)，3.48(b，4h)，2.76(b，4h)，1.07(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 487(m+h)
+
。
[1005]
实施例119
[1006]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
吗啉代吡啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1007][1008]
使用与2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(实施例118)相同的程序来合成标题化合物(112mg，收率34％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.93(s，1h)，9.09(s，1h)，8.08(s，1h)，8.03(s，1h)，7.95
‑
7.91(m，3h)，7.49
‑
7.38(m，3h)，7.05(d，j＝8.0hz，1h)，5.84(s，1h)，4.50(s，2h)，3.94(b，1h)，3.69(s，4h)，3.52(s，4h)，1.06(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 488(m+h)
+
。
[1009]
实施例120
[1010]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(4
‑
甲基
‑
1，4
‑
二氮杂环庚烷
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1011][1012]
使用与2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(实施例118)相同的程序来合成标题化合物(100mg，收率65％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.94(s，1h)，9.00(s，1h)，8.13(s，1h)，8.05(s，1h)，7.97
‑
7.91(m，3h)，7.53
‑
7.05(m，4h)，5.75(s，1h)，4.53(s，2h)，4.02
‑
3.62(m，5h)，2.64(b，2h)，2.50(b，2h)，2.26(s，3h)，1.92(b，2h)，1.09(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 515(m+h)
+
。
[1013]
实施例121
[1014]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(1，4
‑
二氮杂环庚烷
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1015][1016]
使用与2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(实施例118)相同的程序来合成标题化合物(110mg，收率32％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.90(s，1h)，8.96(s，1h)，8.11(s，1h)，8.02(s，1h)，7.92
‑
7.03(m，5h)，5.74(s，1h)，4.50(s，2h)，3.96
‑
3.68(m，3h)，2.85(b，2h)，2.66(b，2h)，2.31(b，2h)，1.77(b，2h)，1.07(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 501(m+h)
+
。
[1017]
实施例122
[1018]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(二甲基氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1019][1020]
使用与2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(实施例118)相同的程序来合成标题化合物(101mg，收率33％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.90(s，1h)，9.00(s，1h)，8.10(s，1h)，8.02(s，1h)，7.97
‑
7.88(m，3h)，7.48(s，2h)，7.38(t，j＝8.0hz，1h)，7.03(d，j＝7.2hz，1h)，5.73(s，1h)，4.50(s，2h)，3.98
‑
3.93(m，1h)，3.07(s，6h)，1.08(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 446(m+h)
+
。
[1021]
实施例123
[1022]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌啶
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1023][1024]
使用与2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(实施例118)相同的程序合成标题化合物(110mg，收率33％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.91(s，1h)，8.98(s，1h)，8.09(s，1h)，8.02(s，1h)，7.94
‑
7.89(m，3h)，7.49
‑
7.03(m，5h)，5.85(s，1h)，5.00(s，2h)，3.96
‑
3.93(m，1h)，3.58(b，4h)，1.55(b，6h)，1.07(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 486(m+h)
+
。
[1025]
实施例124
[1026]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
((2
‑
甲氧基乙基)(甲基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1027][1028]
使用与2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(实施例118)相同的程序来合成标题化合物(110mg，收率33％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.00(s，1h)，9.07(s，1h)，8.15(s，1h)，8.08(s，1h)，8.05
‑
7.92(m，3h)，7.53(s，1h)，7.42(t，j＝8.0hz，1h)，7.07(d，j＝7.6hz，1h)，5.79(s，1h)，4.53(s，2h)，4.03
‑
3.95(m，1h)，2.78(b，2h)，3.59
‑
3.56(m，2h)，3.29(s，3h)，3.07(s，3h)，1.10(d，j＝6.8hz，1h)；m/e 490(m+h)
+
。
[1029]
实施例125
[1030]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
((2
‑
(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1031][1032]
使用与2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(实施例118)相同的程序来合成标题化合物(100mg，收率29％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.91(s，1h)，8.99(s，1h)，8.09(s，1h)，8.02(s，1h)，7.96
‑
7.86(m，3h)，7.49
‑
7.03(m，4h)，5.71(s，1h)，4.46(s，2h)，4.00
‑
3.92(m，1h)，3.67(b，2h)，3.30(b，2h)，3.01(s，3h)，2.15(s，6h)，1.07(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 503(m+h)
+
。
[1033]
实施例126
[1034]2‑
(3
‑
(4
‑
氯
‑6‑
(2
‑
(二甲基氨基)乙氧基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1035][1036]
向化合物2
‑
(3
‑
(4，6
‑
二氯嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(1g，2.9mmol)在甲苯(24ml)中的溶液加入naoh(232mg，5.8mmol)和2
‑
(二甲基氨基)乙醇(261mg，2.9mmol)。将所得混合物于110℃搅拌3小时。然后将反应混合物用水稀释并用dcm萃取。将有机层经na2so4干燥、过滤并在减压下浓缩以提供残余物，将残余物通过柱色谱在硅胶(用dcm∶meoh＝100∶1洗脱)上纯化以得到为固体的标题化合物(550mg，收率48％)。
[1037]
实施例127
[1038]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑6‑
(2
‑
(二甲基氨基)乙氧基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺
[1039][1040]
向化合物2
‑
(3
‑
(4
‑
氯
‑6‑
(2
‑
(二甲基氨基)乙氧基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)
‑
n
‑
异丙基乙酰胺(100mg，0.25mmol)在etoh(1ml)中的溶液加入1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(101.5mg，0.76mmol)和tfa(0.25ml)。将所得混合物加热至80℃过夜。将混合物浓缩并通过色谱在硅胶柱上纯化，并再次通过制备型tlc纯化以得到为浅黄色固体的标题化合物(100mg，收率16％)。1h nmr(400mhz，meod)δ8.05
‑
7.96(m，4h)，7.54
‑
7.49(m，2h)，7.40
‑
7.08(m，2h)，5.94(s，1h)，4.55(s，4h)，4.14
‑
4.06(m，1h)，2.79
‑
2.76(m，2h)，2.33(s，6h)，1.16(d，j＝6.8hz，6h)；m/e 490(m+h)
+
。
[1041]
实施例128
[1042]
吗啉
‑4‑
羧酸3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯基酯
[1043][1044]
在0℃向3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚(500mg，2.27mmol)、dmap(277.3mg)和et3n(450.46mg，4.54mmol)在dcm(10ml)中的混合物逐滴地加入吗啉
‑4‑
羰酰氯(339.5mg，2.27mmol)在dcm(10ml)中的溶液。将水加入到该混合物中，并用dcm萃取(40ml
×
2)。将有机相用na2so4干燥并在减压下浓缩以得到标题化合物(600mg，收率79％)，将其直接用于下一步骤。
[1045]
实施例129
[1046]
吗啉
‑4‑
羧酸3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯基酯
[1047][1048]
在室温下向5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(100mg，0.2243mmol)在etoh(3ml)和h2o(0.3ml)中的搅拌溶液加入na2co3(47.54mg，0.4485mmol)、(boc)2o(93.29mg，0.4485mmol)和吗啉
‑4‑
羧酸3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯基酯(149.44mg，0.4485mmol)。通过将氮气鼓入穿过该溶液将混合物脱气，加入pd(pph3)2cl2(15.07mg，0.02243mmol)，将混合物在微波辐射下于110℃加热20分钟。将混合物干燥并在减压下浓缩并将残余物通过柱色谱在硅胶(dcm∶meoh＝50∶1)上纯化以得到标题化合物(50mg，收率53％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.02(s，1h)，9.66(s，1h)，8.33
‑
8.18(m，4h)，7.55
‑
7.51(m，3h)，7.25(d，j＝8.0hz，1h)，6.67(d，j＝5.6hz，1h)，3.64(b，6h)，3.45(b，2h)；m/e 417(m+h)
+
。
[1049]
实施例130
[1050]
二甲基氨基甲酸3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯基酯
[1051][1052]
在0℃向3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚(500mg，2.23mmol)、dmap(277.4mg)和et3n(450.46mg，4.46mmol)在dcm(15ml)中的混合物逐滴地加入二甲基氨基甲酰氯(238.6mg，2.23mmol)在dcm(15ml)中的溶液，将反应混合物在室温下搅拌过夜。将水加入到该混合物中，并用dcm萃取(40ml
×
2)。将有机相用na2so4干燥并在减压下浓缩以得到标题化合物(500mg，收率76％)，将其直接用于下一步骤。
[1053]
实施例131
[1054]
二甲基氨基甲酸3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯基酯
[1055][1056]
在室温下向5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(100mg，0.2243mmol)在etoh(3ml)和h2o(0.3ml)中的搅拌溶液加入na2co3(47.54mg，0.4485mmol)、(boc)2o(93.29mg，0.4485mmol)和二甲基氨基甲酸3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯基酯(130.58mg，0.4485mmol)。通过将氮气鼓入穿过该溶液将混合物脱气，加入pd(pph3)2cl2(15.07mg，0.02243mmol)，并将混合物在微波辐射下于110℃加热20分钟。将混合物在减压下浓缩并将残余物通过柱色谱在硅胶(dcm∶meoh＝50∶1)上纯化以得到标题化合物(30mg，收率37％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.02(s，1h)，9.66(s，1h)，8.34
‑
8.04(m，5h)，7.55
‑
7.47(m，3h)，7.21(d，j＝8.0hz，1h)，6.67(d，j＝5.6hz，1h)，3.07(s，3h)，2.94(s，3h)；m/e 375(m+h)
+
。
[1057]
实施例132
[1058]3‑
((3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)甲基)吡啶
[1059][1060]
在搅拌下于0℃向3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚(1.5g，6.8mmol)在dmf(20ml)中的溶液分批加入nah(0.82g，20.4mmol)。30分钟后，在0℃分批加入化合物3
‑
(氯甲基)吡啶盐酸盐(1.4g，8.9mmol)，并将所得混合物温热至20℃并搅拌16小时。将其用水淬灭，用etoac萃取(100ml
×
3)，并将萃取液用盐水洗涤，经na2so4干燥，在减压下浓缩，并将残余物通过色谱在硅胶柱(洗脱用pe∶ea＝10∶1至2∶1洗脱)上纯化以得到为白色固体的标题化合物(1g，收率50％)。
[1061]
实施例133
[1062]
1h
‑
吲唑
‑5‑
基(2
‑
(3
‑
(吡啶
‑3‑
基甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基甲酸叔丁酯
[1063][1064]
在n2氛围下将化合物3
‑
((3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)甲基)吡啶(1g，3.2mmol)、化合物5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(670mg，1.5mmol)、k2co3(414mg，3mmol)和pd(dppf)2cl2(109mg，0.15mmol)在二噁烷(20ml)和h2o(5ml)中的混合物于90℃加热16小时。然后将其浓缩，并将残余物通过色谱在硅胶柱(用dcm∶meoh＝100∶1至20∶1洗脱)上纯化以得到为淡红色油状物的标题化合物(370mg，收率50％)。
[1065]
实施例134
[1066]
1h
‑
吲唑
‑5‑
基(2
‑
(3
‑
(吡啶
‑3‑
基甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基甲酸叔丁酯
[1067][1068]
向dcm(5ml)中的(370mg，0.75mmol)加入tfa(5ml)，并将所得的溶液于20℃搅拌3小时。将其浓缩并将残余物溶于dcm/meoh(10∶1，100ml)中，用水性k2co3和盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并将残余物通过色谱在硅胶柱(用dcm∶meoh＝100∶1至20∶1洗脱)上纯化并于meoh中重结晶以得到为浅黄色固体的标题化合物(110mg，收率37％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.04(s，1h)，9.67(s，1h)，8.71(s，1h)，8.57(s，1h)，8.35(d，j＝5.6hz，1h)，8.05(s，1h)，8.00
‑
7.89(m，4h)，7.56
‑
6.68(m，6h)，5.25(s，2h)。
[1069]
13.02(s，1h)，9.66(s，1h)，8.33
‑
8.18(m，4h)，7.55
‑
7.51(m，3h)，7.25(d，j＝8.0hz，1h)，6.67(d，j＝5.6hz，1h)，3.64(b，6h)，3.45(b，2h)；m/e 417(m+h)
+
。
[1070]
实施例135
[1071]4‑
((3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)甲基)吡啶
[1072][1073]
在搅拌下于0℃向化合物3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚(1.5g，6.8mmol)在dmf(20ml)中的溶液分批加入nah(0.82g，20.4mmol)。30分钟后，在0℃分批加入化合物4
‑
(氯甲基)吡啶(1.4g，8.9mmol)，并将所得混合物温热至20℃并搅拌16小时。将其用水淬灭，用etoac萃取(100ml
×
3)，并将萃取液用盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并将残余物通过色谱在硅胶柱(用pe∶ea＝10∶1至2∶1洗脱)上纯化以得到为白色固体的标题化合物(1g，收率50％)。
[1074]
实施例136
[1075]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(吡啶
‑4‑
基甲氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1076][1077]
在微波反应器中于110℃和n2氛围下将化合物4
‑
((3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)甲基)吡啶(139mg，0.44mmol)(6个批次)、化合物5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(100mg，0.22mmol)、na2co3(47mg，0.44mmol)、boc2o(96mg，0.44mmol)和pd(pph3)2cl2(15.4mg，0.022mmol)在etoh(2ml)和h2o(0.2ml)中的混合物加热20分钟。然后将其冷却，用水稀释，用dcm萃取，将萃取物浓缩并将残余物通过色谱在硅胶柱(用dcm∶meoh＝100∶1至20∶1洗脱)上纯化并从meoh重结晶以得到为浅黄色固体的标题化合物(110mg，收率23％)。1h nmr(400mhz，meod)δ8.51(d，j＝5.6hz，2h)，8.25(d，j＝6.0hz，1h)，8.15(s，1h)，8.05
‑
7.94(m，3h)，7.57
‑
7.16(m，6h)，6.65(d，j＝6.0hz，1h)，5.26(s，2h))；m/e 395(m+h)
+
。
[1078]
实施例137
[1079]2‑
(3
‑
(2
‑
甲氧基乙氧基)苯基)
‑
4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
[1080][1081]
在室温下向3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚(800mg，3.636mmol)在dcm(20ml)中的混合物加入ki(1.2g，7.273mmol)、k2co3(1.307g 10.091mmol)和1
‑
溴
‑2‑
甲氧基乙烷(1.01g，7.273mmol)。将混合物于80℃搅拌过夜。用dcm(30ml
×
2)萃取该混合物，将有机相用na2so4干燥并在减压下浓缩，并将残余物通过柱色谱纯化以得到标题化合物(550mg，收率50％)。
[1082]
实施例138
[1083]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(2
‑
甲氧基乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1084][1085]
在室温下向5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(100mg，0.2243mmol)在etoh(3ml)和h2o(0.3ml)中的搅拌溶液加入na2co3(47.54mg，0.4485mmol)、(boc)2o(93.29mg，0.4485mmol)和2
‑
(3
‑
(2
‑
甲氧基乙氧基)苯基)
‑
4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷(124.76mg，0.4485mmol)。通过将氮气鼓入穿过该溶液将混合物脱气，然后加入pd(pph3)2cl2(15.07mg，0.02243mmol)，并将混合物在微波辐射下于110℃加热20分钟。将混合物在减压下浓缩并将残余物通过柱色谱在硅胶(dcm∶meoh＝50∶1)上纯化以得到标题化合物(40mg，收率49％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.01(s，1h)，9.61(s，1h)，8.32(d，j＝5.6hz，1h)，8.21(s，1h)，8.01
‑
7.91(m，3h)，7.55
‑
7.36(m，3h)，7.04(d，j＝7.6hz，1h)，6.65(d，j＝5.6hz，1h)，4.16(b，2h)，3.68(b，2h)；m/e 362(m+h)
+
。
[1086]
实施例139
[1087]
1h
‑
吲唑
‑5‑
基(2
‑
(3
‑
甲氧基苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基甲酸叔丁酯
[1088][1089]
在室温下向5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(100mg，0.2243mmol)在etoh(3ml)和h2o(0.3ml)中的搅拌溶液，加入na2co3(47.54mg，0.4485mmol)、(boc)2o(93.29mg，0.4485mmol)和(3
‑
甲氧基苯基)硼酸(68.17mg，0.4485mmol)。通过将氮气鼓入穿过该溶液将混合物脱气，然后加入pd(pph3)2cl2(15.07mg，0.02243mmol)，并将混合物在微波辐射下于110℃加热20分钟。将混合物在减压下浓缩并将残余物通过柱色谱在硅胶上纯化以得到标题化合物(80mg，收率85％)。
[1090]
实施例140
[1091]
n
‑
(2
‑
(3
‑
甲氧基苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1092][1093]
在室温下向1h
‑
吲唑
‑5‑
基(2
‑
(3
‑
甲氧基苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基甲酸叔丁酯(1g，2.39mmol)在dcm(20ml)中的搅拌溶液加入tfa(10ml)，并将混合物在室温下搅拌过夜。然后将混合物在减压下浓缩并将残余物通过制备型hplc纯化以得到为白色固体的标题化合物(200mg，收率26％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.05(s，1h)，10.02(s，1h)，8.32(d，j＝6.0hz，1h)，8.17(s，1h)，8.05(s，1h)，7.89
‑
7.42(m，3h)，7.09(d，j＝7.6hz，1h)，6.72(d，j＝6.0hz，1h)，3.83(s，3h)；m/e 318(m+h)
+
。
[1094]
实施例141
[1095]4‑
(2
‑
(3
‑
溴代苯氧基)乙基)吗啉
[1096][1097]
向3
‑
溴苯酚(7.8g，45.2mmol)在dmf(120ml)中的溶液加入4
‑
(2
‑
氯乙基)吗啉(8.54g，45.2mmol)、k2co3(414mg，3mmol)和ki(7.5mg，45.2mmol)，并将所得混合物于20℃加热并搅拌16小时。将其用水淬灭，用etoac萃取(200ml
×
3)，并将萃取液用盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并将残余物通过色谱在硅胶柱(用dcm∶meoh＝100∶1到20∶1洗脱)上纯化
以得到为红色液体的标题化合物(7g，收率54％)。
[1098]
实施例142
[1099]4‑
(2
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙基)吗啉
[1100][1101]
在n2氛围下将化合物4
‑
(2
‑
(3
‑
溴苯氧基)乙基)吗啉(1.1g，3.8mmol)、bipn(1.47mg，5.8mmol)、koac(0.83mg，8.5mmol)和pd(dppf)2cl2(0.28mg，0.38mmol)在二噁烷(15ml)中的混合物于90℃加热16小时。然后将其浓缩，并将残余物通过色谱在硅胶柱(用dcm∶meoh＝100∶1至20∶1洗脱)上纯化以得到为淡红色油状物的标题化合物(1g，收率78％)。
[1102]
实施例143
[1103]
1h
‑
吲唑
‑5‑
基(2
‑
(3
‑
(2
‑
吗啉代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基甲酸叔丁酯
[1104][1105]
在n2氛围下将化合物4
‑
(2
‑
(3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯氧基)乙基)吗啉(1g，3.2mmol)、化合物5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(670mg，1.5mmol)、k2co3(414mg，3mmol)和pd(dppf)2cl2(109mg，0.15mmol)在二噁烷(20ml)和h2o(5ml)中的混合物于90℃加热16小时。然后将其浓缩，并将残余物通过色谱在硅胶柱(用dcm∶meoh＝100∶1至20∶1洗脱)上纯化以得到为淡红色油状物的标题化合物(380mg，收率50％)。
[1106]
实施例144
[1107]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(2
‑
吗啉代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1108][1109]
向化合物1h
‑
吲唑
‑5‑
基(2
‑
(3
‑
(2
‑
吗啉代乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基甲酸叔丁酯(380mg，0.75mmol)在dcm(5ml)中的溶液加入tfa(5ml)，并将所得的溶液于20℃搅拌3小时。将其浓缩并将残余物溶于dcm/meoh中(10∶1，100ml)中，用水性k2co3和盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并将残余物通过色谱在硅胶柱(用dcm∶meoh＝80∶0至15∶1洗脱)上纯化并从etoac和pe中重结晶以得到为浅黄色固体的标题化合物(120mg，收率39％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.04(s，1h)，9.65(s，1h)，8.36(m，3h)，8.08(s，1h)，7.94(s，1h)，7.57
‑
7.38(m，3h)，7.06(d，j＝8.0hz，1h)，6.68(d，j＝5.6hz，1h)，4.17(t，j＝5.6hz，2h)，3.58(s，4h)，2.73(t，j＝5.6hz，2h)，2.67(s，4h)；m/e 417(m+h)
+
。
[1110]
实施例145
[1111]5‑
((2
‑
(3
‑
乙酰基苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[1112][1113]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(100mg，0.22mmol)、3
‑
乙酰基苯基)硼酸(73.7mg，0.44mmol)、na2co3(47.6mg，0.44mmol)、(boc)2o(98mg，0.44mmol)、pd(pph3)cl2(16mg，0.022mmol)在etoh∶h2o(3.3ml，10∶1)中的溶液在微波辐射下于110℃加热20分钟。反应后，将其蒸发，加入ea和水，分离有机层，用饱和盐水洗涤，经na2so4干燥、浓缩并通过硅胶纯化以得到标题化合物(64mg，收率67％)。
[1114]
实施例146
[1115]5‑
((2
‑
(3
‑
(1
‑
氨基乙基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[1116][1117]
向5
‑
((2
‑
(3
‑
乙酰基苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(500mg，1.2mmol)，aconh4(924mg，12mmol)在meoh(10ml)中的搅拌溶液加入nabh3cn(91mg，1.44mmol)，将混合物在回流下搅拌6小时。反应后，将其蒸发，用水稀释，过滤以得到为白色固体的标题化合物(300mg，粗品)。
[1118]
实施例147
[1119]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(1
‑
氨基乙基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1120][1121]
将5
‑
((2
‑
(3
‑
(1
‑
氨基乙基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(300mg，粗品)在hcl/meoh(20ml)中的溶液于40℃搅拌6小时。反应后，将其蒸发，然后加入水，用饱和na2co3调节ph值至9，过滤以得到粗产物，将其通过制备型hplc纯化，以提供为白色固体的标题化合物(100mg)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.03(s，1h)，9.65(s，1h)，8.44(s，1h)，8.35(d，j＝5.6hz，2h)，8.18(d，j＝7.2hz，1h)，8.05(s，1h)，7.55
‑
7.40(m，4h)，6.67(d，j＝5.6hz，1h)，4.12
‑
4.07(m，1h)，2.08(b，2h)，1.31(d，j＝6.4hz，3h)；m/e 331(m+h)
+
。
[1122]
实施例148
[1123]5‑
((2
‑
(4
‑
乙酰基苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[1124][1125]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.5g，粗品)、(4
‑
乙酰基苯基)硼酸(1.12g，6.8mmol)、na2co3(721mg，6.8mmol)、(boc)2o(1.48g，6.8mmol)、pd(pph3)cl2(239mg，0.34mmol)在etoh∶h2o(16.5ml，10∶1)中的溶液在微波辐射下于110℃下加热20分钟。反应后，将其蒸发，加入ea和水，分离有机层，用饱和盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩以得到标题化合物(2.6g，粗品)。
[1126]
实施例149
[1127]5‑
((2
‑
(4
‑
(1
‑
氨基乙基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[1128][1129]
向5
‑
((2
‑
(4
‑
乙酰基苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(2.6g，6.1mmol)、aconh4(4.7g，61mmol)在meoh(60ml)中的搅拌溶液加入nabh3cn(461mg，7.32mmol)，将混合物在回流下搅拌10小时。反应后，蒸发溶剂，然后加入水，过滤以得到标题化合物(2.1g，粗品)。
[1130]
实施例150
[1131]
n
‑
(2
‑
(4
‑
(1
‑
氨基乙基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1132][1133]
将5
‑
((2
‑
(4
‑
(1
‑
氨基乙基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(2.1g，粗品)在hcl/meoh(60ml)中的溶液于40℃搅拌6小时。反应后，蒸发溶剂，然后加入
水，用饱和na2co3调整ph至9，过滤以得到粗产物，将其通过制备型hplc纯化以得到为白色固体的标题化合物(113.5mg)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.02(s，1h)，9.58(s，1h)，8.34
‑
8.27(m，4h)，8.20(s，1h)，8.08(s，1h)，7.56(s，2h)，7.49(d，j＝6.0hz，1h)，4.05
‑
4.03(m，1h)，1.27(d，j＝6.4hz，3h)；m/e 331(m+h)
+
。
[1134]
实施例151
[1135]2‑
(3
‑
(2，2
‑
二乙氧基乙氧基)苯基)
‑
4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
[1136][1137]
向化合物3
‑
(4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷
‑2‑
基)苯酚(550mg，2.5mmol)、2
‑
溴
‑
1，1
‑
二乙氧基乙烷(985mg，5mmol)、cs2co3(2.43g，7.5mmol)在dmf(25ml)中的混合物加入ki(106mg，1mmol)，然后将混合物于110℃搅拌过夜。反应后，加入水，然后用ea萃取，用饱和盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩以得到为浅黄色油状物的标题化合物(360mg，粗品)。
[1138]
实施例152
[1139]5‑
((2
‑
(3
‑
(2，2
‑
二乙氧基乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[1140][1141]
将2
‑
(3
‑
(2，2
‑
二乙氧基乙氧基)苯基)
‑
4，4，5，5
‑
四甲基
‑
1，3，2
‑
二氧硼杂环戊烷(100mg，粗品)、5
‑
((叔丁氧基羰基)(2
‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(70mg，0.15mmol)、na2co3(65mg，0.6mmol)、(boc)2o(130mg，0.6mmol)、pd(pph3)cl2(20mg，0.03mmol)在etoh∶h2o(4.4ml，10∶1)中的混合物在微波辐射下于110℃下加热20分钟。反应后，将其蒸发，加入ea和水，分离有机层，用饱和盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩，并通过制备型tlc纯化以得到标题化合物(30mg)。
[1142]
实施例153
[1143]2‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶
‑2‑
基)苯氧基)乙醛
[1144][1145]
向5
‑
((2
‑
(3
‑
(2，2
‑
二乙氧基乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(510mg，0.98mmol)在thf(20ml)中的溶液逐滴加入3m hcl(10ml)，然后将混合物在回流下搅拌7小时。反应后，将其蒸发，然后加入水，用饱和na2co3调整ph至9，过滤以得到标题化合物(420mg，粗品)。
[1146]
实施例154
[1147]
n
‑
(2
‑
(3
‑
(2
‑
(异丙基氨基)乙氧基)苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1148][1149]
向2
‑
(3
‑
(4
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)嘧啶一2
‑
基)苯氧基)乙醛(420mg，粗品)、异丙胺(245mg，4.16mmol)在meoh(15ml)中的搅拌溶液加入nabh3cn(131mg，2.08mmol)，将该混合物在回流下搅拌7小时。反应后，将其蒸发并通过制备型hplc纯化以得到为白色固体的标题化合物(90mg)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.02(s，1h)，9.65(s，1h)，8.34(d，j＝6.0hz，1h)，8.27(s，1h)，8.10(s，1h)，7.94(d，j＝3.2hz，2h)，7.57
‑
7.38(m，3h)，7.05(d，j＝8.0hz，1h)，6.68(d，j＝6.0hz，1h)，4.106
‑
4.079(m，1h)，2.91(s，2h)，2.80
‑
2.77(m，1h)，1.61(b，1h)，1.00(d，j＝6.4hz，6h)；m/e 389(m+h)
+
。
[1150]
实施例155
[1151]
n
‑
(2，6
‑
二氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1152][1153]
在室温下向2，4，6
‑
三氯嘧啶(5.5g，30mmol)在etoh(100ml)中的搅拌溶液加入tea(1.5g，45mmol)和化合物1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(3.99g，30mmol)。将混合物回流过夜。在除去溶剂后，将残余物在meoh中重结晶以得到为固体的标题化合物(3.4g，收率40％)。
[1154]
实施例156
[1155]4‑
(6
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑2‑
氯嘧啶
‑4‑
基)哌嗪
‑1‑
羧酸叔丁酯
[1156][1157]
在室温下向n
‑
(2，6
‑
二氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(1g，3.5mmol)在etoh(10ml)中的搅拌溶液加入tea(1.4g，7mmol)和化合物哌嗪
‑1‑
羧酸叔丁酯(0.67g，3.5mmol)。将混合物回流过夜。反应后，加入水，分离有机层和饱和盐水，经na2so4干燥并在减压下浓缩以得到标题化合物(1.2g)，将其无需进一步纯化直接用于下步反应。
[1158]
实施例157
[1159]5‑
((叔丁氧基羰基)(6
‑
(4
‑
(叔丁氧基羰基)哌嗪
‑1‑
基)
‑2‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[1160]
[1161]
在室温下向4
‑
(6
‑
((1h
‑
吲唑
‑5‑
基)氨基)
‑2‑
氯嘧啶
‑4‑
基)哌嗪
‑1‑
羧酸叔丁酯(1.2g，粗品)在dcm(10ml)中的搅拌溶液加入(boc)2o(3g，14mmol)、tea(1.4g，14mmol)和dmap(0.5g，3.5mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。反应后，加入水，分离有机层，用柠檬酸一水合物和饱和盐水洗涤，经na2so4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱在硅胶上纯化以得到标题化合物(0.6g)。
[1162]
实施例158
[1163]5‑
((叔丁氧基羰基)(6
‑
(4
‑
(叔丁氧基羰基)哌嗪
‑1‑
基)
‑2‑
(3
‑
甲氧基苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯
[1164][1165]
将5
‑
((叔丁氧基羰基)(6
‑
(4
‑
(叔丁氧基羰基)哌嗪
‑1‑
基)
‑2‑
氯嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(600mg，0.95mmol)、(3
‑
甲氧基苯基)硼酸(160mg，1.05mmol)、na2co3(201mg，1.9mmol)、pd(dppf)cl2(70mg，0.095mmol)在二噁烷∶h2o(6.6ml，10∶1)中的混合物在微波辐射下于140℃加热20分钟。反应后，将其蒸发，加入ea和水，分离有机层，用饱和盐水洗涤，经na2so4干燥，浓缩并通过硅胶纯化以得到标题化合物(250mg，收率37.5％)。
[1166]
实施例159
[1167]
n
‑
(2
‑
(3
‑
甲氧基苯基)
‑6‑
(哌嗪
‑1‑
基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1168][1169]
向5
‑
((叔丁氧基羰基)(6
‑
(4
‑
(叔丁氧基羰基)哌嗪
‑1‑
基)
‑2‑
(3
‑
甲氧基苯基)嘧啶
‑4‑
基)氨基)
‑
1h
‑
吲唑
‑1‑
羧酸叔丁酯(250mg)在dcm(5ml)中的溶液加入tfa(1ml)。将混合物在室温下搅拌30分钟。将其蒸发，然后加入水，用饱和na2co3调整ph至9，过滤以得到为白色固体的标题化合物(115mg，收率80％)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ12.98(s，1h)，9.30(s，1h)，8.09(s，1h)，8.00(s，1h)，7.53
‑
7.37(m，6h)，7.03(d，j＝8.8hz，1h)，6.50(s，1h)，3.82(s，3h)，3.73(b，4h)，3.39(s，1h)，2.71(b，4h)；m/e 402(m+h)
+
。
[1170]
实施例160
[1171]
n
‑
(2
‑
氯
‑6‑
(2
‑
(二甲基氨基)乙氧基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1172][1173]
在室温下向n
‑
(2，6
‑
二氯嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(2g，7mmol)在etoh(20ml)中的搅拌溶液加入tea(2.8g，7mmol)和2
‑
(二甲基氨基)乙醇(0.64g，7mmol)。将混合物回流过
夜。反应后，加入水，分离有机层和饱和盐水，经na2so4干燥并在减压下浓缩以得到标题化合物(1.5g)。将残余物用于下一步骤中。
[1174]
实施例161
[1175]
n
‑
(6
‑
(2
‑
(二甲基氨基)乙氧基)
‑2‑
(3
‑
甲氧基苯基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺
[1176][1177]
将n
‑
(2
‑
氯
‑6‑
(2
‑
(二甲基氨基)乙氧基)嘧啶
‑4‑
基)
‑
1h
‑
吲唑
‑5‑
胺(1.5g，4.5mmol)、(3
‑
甲氧基苯基)硼酸(661mg，5mmol)、na2co3(954mg，9mmol)、pd(dppf)cl2(300mg，0.45mmol)在二噁烷∶h2o(22ml，10∶1)的混合物在微波辐射下于140℃加热30分钟。反应后，将其蒸发，加入ea和水，分离有机层，用饱和盐水洗涤，经na2so4干燥并浓缩，通过制备型hplc纯化以得到为白色固体的标题化合物(125mg)。1h nmr(400mhz，dmso
‑
d6)δ13.00(s，1h)，9.67(s，1h)，8.18(s，1h)，8.04(s，1h)，7.56
‑
7.41(m，5h)，7.08
‑
6.86(m，2h)，4.46
‑
4.43(m，1h)，3.83(s，3h)，2.66
‑
2.63(m，2h)，2.22(s，6h)；m/e 405(m+h)
+
。
[1178]
实施例162
[1179][1180]
采用如上所述的程序合成下列化合物：
[1181]
[1182][1183]
实施例181
[1184]
rock1和rock2化合物选择性
[1185]
rho激酶抑制的剂量响应曲线得自于millipore基于免疫的96孔板测定(millipore目录号csa001)。纯化的活性rock1和rock2从invitrogen获得(rocki目录号，pv3691和rock2目录号，pv3759)。所述试剂盒组分包括测定板，它们预先涂有重组mypt1，其包含特异性磷酸化的thr696。化合物的抑制活性根据制造商的方案进行测量。简要地说，将降低浓度的测试化合物或已知rock抑制剂y
‑
27963(从50um至0.003um)加入至含有在测定稀释缓冲液中的5mm mgcl2和10毫单位rock1或rock2的反应缓冲液。将此混合物重叠于96孔板，并通过加入2.5um的atp开始反应。该测定在30℃进行30分钟，并以120rpm轻微振荡。通过用tris
‑
缓冲盐水和吐温洗涤缓冲液洗涤该板3次来终止该测定。抗磷酸化mypt1(thr696)抗体被加入到每个孔以检测磷酸化底物并在室温下孵育1小时，此后在室温下于1小时内加入hrp标记的抗兔igg二抗。洗涤后使用底物试剂使该测定显影并在tecan infinite m1000上读取450nm处的吸光度，反映相对剩余的rock磷酸化活性。
[1186]
表示rock1和rock2的抑制以及某些化合物对rock2抑制的选择性的数据示于表1中。
[1187][1188]
rock1的抑制对rock2的抑制的剂量响应曲线示于图5。
[1189]
实施例182
[1190]
rock1和rock2化合物选择性
[1191]
rho激酶抑制的剂量响应曲线得自于invitrogen z
′‑
lyte
tm
激酶分析试剂盒(invitrogen目录号pv3793)。纯化的活性rock1和rock2从invitrogen获得(rock1目录号，pv3691和rock2目录号，pv3759)。所述试剂盒组分包括香豆素和荧光素标记的基于肌球蛋白轻链2(kkrpqrrysnvf)的肽、含显影试剂的专有蛋白酶和用于终止显影反应的专有终止缓冲液。化合物的抑制活性根据制造商的方案进行测量。简要地说，将降低浓度的测试化合物或已知rock抑制剂y
‑
27963(从10um至2.56
×
10
‑5um)加入至含有50mm hepes ph 7.5、5mm mgcl2、5mm egta和0.05％brij
‑
35的反应缓冲液，并且在测定稀释缓冲液中rock1为0.18ug/ml或rock2为0.8ug/ml。将该混合物重叠在白色96孔半区域板中，并通过加入5um atp rock1或12um atp rock2开始反应。该测定在室温下进行1小时，接着加入显影试剂，并在室温下进一步孵育1小时。然后加入终止试剂，并且该反应以及香豆素和荧光素发射信号立即在tecan infinite m1000荧光板读数器(激发：400nm；发射分别为445nm和520nm)上读取。通过将测试样品的发射率与对照样品比较，计算磷酸化百分数值，并使用prism确定产生激酶活性1/2抑制的抑制剂的浓度(ic
50
)。表2提供了为上述实施例的化合物的ic
50
浓度。几种化合物在测量肌球蛋白轻链磷酸化(pmlc)的抑制的初步测定中也表现出活性。对于标记为nd的化合物而言，在采用的测试条件下活性是不可检测的。
[1192]
[1193][1194]
实施例183
[1195]
rock2选择性抑制剂kd025体外抑制了il
‑
17/il
‑
21在人cd4
+
t细胞中的分泌和增殖
[1196]
导致细胞因子分泌和增殖的静息t细胞的活化涉及来自抗原呈递细胞(apc)的两个不同信号，该信号通过t细胞受体(tcr)/cd3复合物与cd28受体的共刺激模拟。通过使用新鲜纯化的cd4
+
人t细胞和抗cd3和cd28的刺激抗体来刺激响应于tcr活化的il
‑
17和il
‑
21分泌，发现采用rock2选择性抑制剂kd025的治疗以剂量依赖的方式显著地抑制了il
‑
17与il
‑
21分泌。在相同条件下，对ifn
‑
γ分泌的抑制是不太稳健的并仅在高剂量(10μm)的抑制剂下显著(图7a)。类似地，仅在kd025的最高浓度(10μm)观察到任何对il
‑
2分泌的抑制。与对细胞因子分泌的抑制效果一致，采用kd025对t细胞的治疗下调了其体外响应于tcr刺激而增殖的能力(图7b)。
[1197]
实施例184
[1198]
rock2 sirna(但不是rock1 sirna)抑制了il
‑
17和il
‑
21分泌
[1199]
为了证实rock2在调节人t细胞中的il
‑
17和il
‑
21分泌中的作用，我们特异性地通过rna干扰使rock1和rock2表达沉默。特异性rock1和rock2小干扰rna(sirna)使蛋白质表达水平分别降低了72％和84％。rock2(但不是rock1)的沉默显著地减少了il
‑
17和il
‑
21，对人t细胞中的ifn
‑
γ分泌产生的影响最小(图8)。
[1200]
实施例185
[1201]
kd025抑制了stat3磷酸化
[1202]
stat3经由rorγt表达的调节和直接结合到所述il
‑
17与il
‑
21启动子而在th17分化中起到关键作用。此外，最近的研究已经表明，rhoa依赖性stat3刺激需要rock活性并导致了氨基酸y705上的stat3磷酸化的活化。使用两种不同的实验设计，kd025被证明显著地下调了stat3的磷酸化。在一项实验中，采用kd025预处理t细胞，然后用抗
‑
cd3/cd28抗体刺激。采用kd025的预处理导致了stat3的磷酸化减少(图9a)。在不同的实验中，我们在th17
‑
时滞条件下将细胞培养5天，然后采用所述rock2选择性抑制剂处理3小时。通过用rock2抑制剂进行处理减少了stat3磷酸化(图9b)。在独立实验中，验证了stat3以及ifr4和rorγt的磷酸化的降低(图9c)。
[1203]
实施例186
[1204]
kd025下调了在来自ra患者的cd4
+
t细胞中的il
‑
17、il
‑
21和ifn
‑
γ分泌并降低了ifn
‑
γ和il
‑
17表达细胞增加的频率
[1205]
类风湿关节炎(ra)是一种慢性自身免疫性炎症性疾病，其导致关节结构的破坏。虽然参与到ra发展的致病事件未被充分了解，但是促炎细胞因子，如tnf
‑
α、il
‑
1β、ifn
‑
β、il
‑
6和更新的il
‑
17在诱发和保持ra发病中的关键作用是有据可查的。此外，相比于健康对照，th17细胞在ra患者外周血中的频率显著增加并且与疾病活动度评分(das)相关联。
[1206]
cd4
+
t细胞提纯自在疾病不同阶段的ra患者的外周血或提纯自健康对照，并在kd025的存在下用抗cd3/cd28抗体离体刺激。在cd4
+
t细胞中，所述rock2选择性抑制剂以stat3依赖模式响应于tcr刺激而显著地下调了il
‑
17、il
‑
21和ifn
‑
γ的分泌(图10a)。对比于健康对照，ifn
‑
γ分泌的抑制程度与il
‑
17和il
‑
21的抑制水平是相当的。在ra患者中，ifn
‑
γ产生的抑制与疾病活动度评分(das)相关联(图10b)。来自2名不同的ra患者的cd4
+
t细胞在kd025存在下的培养显著地降低了产生il
‑
17的细胞和产生ifn
‑
γ的细胞两者的频率，如细胞内染色所表明(图10c)。
[1207]
实施例187
[1208]
kd025上调了stat
‑
5磷酸化
[1209]
cd4
+
t细胞的细胞因子il
‑
6、tgf
‑
β、il
‑
1β、il
‑
23和抗原刺激的存在导致il
‑
17和il
‑
21分泌的诱导和th17细胞的效应子集的发育。同时，treg的发育和功能被抑制。为了确定rock2抑制对treg的作用，在浓度为0μm、0.5μm、1μm和2.5μm的选择性rock2抑制剂kd025的存在下，采用针对cd3/cd28的刺激性抗体(5μg/ml)、tgf
‑
β(5ng/ml)和il
‑
1β(50ng/ml)将新鲜纯化的人cd4
+
t细胞活化2天。western印迹分析表明采用kd025的治疗以剂量依赖的方式显著地上调了stat5在位点y694处的磷酸化。(图11)。因此，rock2抑制下调了stat3磷酸化，而在th17
‑
时滞条件下活化的人cd4
+
t细胞中的stat5磷酸化增加。
[1210]
实施例188
[1211]
kd025增加了foxp3
+
细胞在cd4
+
t细胞中的比例
[1212]
foxp3为treg的谱系特异性转录因子并且对于这些细胞的发育和抑制性功能是至关重要的。stat5信号传导积极地调节在t细胞中的foxp3表达的体外和体内诱导和稳定。采用选择性rock2抑制剂kd025对人cd4
+
t细胞的治疗在5天的体外th17时滞活化之后显著地增加了foxp3
+
细胞的百分数。(图12)。
[1213]
实施例189
[1214]
kd025上调了在cd4
+
cd25
‑
t细胞中的il
‑
17分泌的treg抑制
[1215]
用kd025将新鲜纯化的cd4
+
cd25
+
人treg细胞处理3小时、洗涤，与cd4
+
cd25
‑
效应子t细胞按1∶4和1∶9(treg∶t效应子)混合，并使用抗cd3和cd28的刺激性抗体活化2天。kd025介导的rock2抑制显著地增加了treg抑制在cd4
+
cd25
‑
效应子t细胞中的il
‑
17分泌的能力。(图13)。
[1216]
实施例190
[1217]
kd025以独立于smad2/3的方式抑制了tgf
‑
β诱导的stat3和mlc磷酸化
[1218]
选择性rock2抑制剂kd025以剂量依赖的方式下调了tgf
‑
β诱导的stat3和mlc磷酸化，但smad2/3的磷酸化保持不变。(图14)。tgf
‑
β涉及t细胞的th17和treg子集两者的发育
和功能。然而，当treg在smad2/3依赖性的信号传导机制中被调节时，tgf
‑
β以独立于smad2/3的方式调节了th17细胞，所述方式被认为是非典型的tgf
‑
β诱导的信号传导。此外，已证明rock蛋白参与了癌细胞中的独立于smad的tgf
‑
β信号传导。
[1219]
实施例191
[1220]
用kd025对患者的治疗抑制了在分离的pbmc中的il
‑
17和il
‑
21产生的离体刺激
[1221]
在试验期间的第1天和第8
‑
14天对8名患者施用120mg/天的kd025或安慰剂。在试验开始和结束时收集外周血单核细胞(pbmc)并通过在固定化的抗cd3/cd28抗体上铺板来刺激72小时，并测定il
‑
17、il
‑
21和ifn
‑
γ的水平。图15示出了在第1天从六名受试者分离出的pbmc中可以诱导出高水平的il
‑
17和il
‑
21。在这六名受试者中，五名受试者接受了rock2选择性抑制剂kd025，而一名接收安慰剂。il
‑
17分泌的诱导在从采用kd025治疗的五名受试者中的四名受试者分离出的pbmc中得到显著抑制(图15b)，并且il
‑
21分泌的诱导在来自采用kd025治疗的全部五名受试者的pbmc中得到显著抑制(图15a)。未观察到对ifn
‑
γ的影响。
[1222]
然后，测定在施用了40mg/天、120mg/天、240mg/天或320mg/天的kd025的22名患者中的细胞因子诱导的抑制。图15d
‑
f分别示出了il
‑
21、il
‑
17和ifn
‑
γ分泌的剂量
‑
响应关系。
[1223]
实施例192
[1224]
抗
‑
vegfr2抗体
[1225]
鉴定出结合人vegfr2、阻断配体vegfa到hvegfr2的结合并抑制vegfr2磷酸化和由vegfa刺激的下游信号转导的两种中和抗体mab 101和mab 102。表3和图16表示cdr的氨基酸序列和抗体的可变域。mab 101和mab 102的k
d
分别为约6.6mm和1.7nm。
[1226][1227]
mab 101的重链通过κ轻链基因(κ
‑
文库)和λ轻链基因(λ
‑
文库)重组。通过针对人vegfr2和小鼠vegfr2两者来淘选λ
‑
文库发现20个独特的λ轻链变体。通过针对人vegfr2和小鼠vegfr2两者来淘选κ
‑
文库发现22个独特的κ轻链变体。表4表示cdr的氨基酸序列和轻链的可变域。mab 105、106和107的k
d
分别提高约10倍(分别为0.24nm、0.22nm和0.12nm)。
[1228]