技术特征：
1.重组胶原蛋白，其氨基酸序列a)如序列表中的seq id no：1所示；或b)是对序列表中的seq id no：1所示的序列添加、缺失和/或取代一个或几个氨基酸残基而得的氨基酸序列。2.核酸分子，其编码权利要求1所述的重组ⅲ型人源胶原蛋白。3.载体或宿主细胞，其含有权利要求2所述的核酸分子。4.制备权利要求1所述的重组胶原蛋白的方法，其包括，用权利要求3所述的宿主细胞表达。5.人造角膜，其由包括如下步骤的方法制备：(1)分别配制重组胶原蛋白或甲基丙烯酸化重组胶原蛋白水溶液、壳聚糖或羧甲基壳聚糖的乙酸或水溶液、edc与nhs水溶液和β
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甘油磷酸钠与碳酸氢钠水溶液；(2)将重组胶原蛋白或甲基丙烯酸化重组胶原蛋白水溶液与壳聚糖或羧甲基壳聚糖的乙酸水或水溶液混合均匀，制得第一混合溶液；(3)将edc与nhs水溶液、与第一混合溶液混合均匀，任选加入光引发剂，制得第二混合溶液；(4)将β
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甘油磷酸钠与碳酸氢钠水溶液与第二混合溶液混合均匀，并置于模具内固化成型，得到人造角膜；和(5)任选将人造角膜取出并保存于磷酸盐缓冲液中。6.权利要求5所述的人造角膜，其中，甲基丙烯酸化重组胶原蛋白由包括如下步骤的方法制备：(a)将重组胶原蛋白溶于磷酸缓冲液中，制得胶原蛋白磷酸盐溶液；(b)向胶原蛋白磷酸盐溶液加入甲基丙烯酸酐，进行反应，优选反应45～75分钟；(c)将步骤(b)得到的反应液离心，取上清液稀释并透析；和(d)任选进行冷冻干燥。7.权利要求5所述的人造角膜，其中步骤(1)中，重组胶原蛋白或甲基丙烯酸化重组胶原蛋白的浓度为1～30％(w/v)，优选为3～25％(w/v)；壳聚糖或羧甲基壳聚糖的浓度为0.5～6％(w/v)，优选为1～4％(w/v)；乙酸的浓度为0.05～1.0％(v/v)，优选为0.1～0.5％(v/v)；edc与nhs的总浓度为1～20％(w/v)，优选为3～12％(w/v)；edc与nhs的重量比为5～10：10～15，优选为6～8：12～14；β
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甘油磷酸钠的浓度为10～60％(w/v)，优选为25～55％(w/v)；和/或，碳酸氢钠的浓度为2～10％(w/v)，优选为3～6％(w/v)。8.权利要求5所述的人造角膜，其中,步骤(2)中，重组胶原蛋白或甲基丙烯酸化重组胶原蛋白水溶液与壳聚糖或羧甲基壳聚糖的乙酸水或水溶液的体积比为1：0.1～1：5，优选为1:0.2～1:5；和/或步骤(4)中，β
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甘油磷酸钠与碳酸氢钠水溶液与第二混合溶液的体积比为1：1～1：10，优选为1:2～1:5。9.权利要求5所述的人造角膜，其中步骤(3)中，
edc与nhs水溶液与第一混合溶液的体积比为1:1～1:30，优选为1:5～1:15；光引发剂为i2959或lap；和/或，光引发剂的浓度为0～2％(w/v)，优选为0.2～0.5％(w/v)。10.权利要求5所述的人造角膜的制备方法或权利要求5所述的人造角膜在制备角膜替换制品、角膜修复制品、软性角膜接触镜、硬性角膜接触镜、角膜细胞体外培养制品或眼部缓释药物载体中的应用。
技术总结
本发明提供了一种重组人源胶原蛋白及其人造眼角膜。另外，本发明还提供了该人造眼角膜的制备方法及其应用等。膜的制备方法及其应用等。
技术研发人员：杨树林 王子勋 朱帅
受保护的技术使用者：南京艾澜德生物科技有限公司
技术研发日：2021.08.18
技术公布日：2021/11/14