1.本发明涉及天然产物纯化分离领域，具体涉及一种疏水离子液体选择性萃取分离青蒿素/青蒿烯的方法。
背景技术：
2.近年，天然活性物质的应用越来越广泛，尤其在医学领域。据统计，1981年至2019年间美国fda新批准的药物中22.7％来自天然物质或其衍生物。天然植物是天然活性物质的主要来源，含有多种成分，其中有些成分结构相似，但生物活性截然不同，杂质的存在会降低或抑制天然活性物质的药效。因此，分离纯化获得高品质天然活性物质已成为食品、医药、化妆品等相关行业的研究热点和前沿方向。
3.青蒿素是一种典型的天然药物，其主要来源于植物黄花蒿。黄花蒿中物质种类繁多，含双氢青蒿素、青蒿酸、青蒿烯、青蒿素b和脱氧青蒿素等与青蒿素结构类似的物质。传统工艺主要通过柱层析方法分离获得青蒿素产品，action等人使用ito多层线圈分离萃取器，以异辛烷和乙酸乙酯为固定相，甲醇和水混合溶液为流动相，使含有10％青蒿烯的青蒿素乙酸乙酯
‑
甲醇
‑
异辛烷溶液流经萃取器，收集馏分35
‑
55，通过旋蒸、硫酸镁干燥、结晶等一系列过程获得青蒿素产品。该方法步骤繁琐，需要使用大量有机溶剂，且无法实现青蒿烯与青蒿素的有效分离。青蒿素和青蒿烯结构极其相似，仅差一个c＝c双键，物化性质(极性、溶解性等)相近，二者的选择性分离是一挑战性难题，亦是获得高纯度青蒿素产品的瓶颈问题。
4.结构、性质可设计的离子液体被广泛应用于各个领域，包括催化、分离、海水淡化等，在天然产物分离方面更是表现出了优异的特性。离子液体骨架可以接枝双键、羟基、羧基等官能团，通过π
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π络合、氢键、疏水等相互作用分离天然活性同系物。例如，浙江大学邢华斌教授课题组使用离子液体分离结构仅相差1
‑
2个甲基的生育酚同系物、辣椒碱和双氢辣椒碱同系物、大豆异黄酮苷元同系物(相差一个羟基或烷氧基)等。本课题组前期研究(专利申请号：202110992793.x)表明，亲水离子液体(如n
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烯丙基
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n,n,n
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三甲基季胺氯)水溶液可以将青蒿烯从青蒿素粗品中萃取出，冷却结晶有机溶剂相即可获得高纯度青蒿素产品。离子液体包括亲水和疏水两大类，研究发现疏水离子液体也可实现青蒿素与青蒿烯的选择性分离，与亲水离子液体体系的区别在于疏水离子液体可以将青蒿素萃取至离子液体相。
5.本发明以疏水离子液体为介质萃取分离青蒿素和青蒿烯，可以将青蒿素选择性萃取至离子液体相，之后用有机溶剂进行反萃取，冷却结晶即可获得高品质青蒿素产品。与传统分离方法相比，本发明的方法简单、高效，是一绿色环保的工艺。
技术实现要素：
6.本发明的目的在于提供一种高效、绿色、环保纯化青蒿素的方法，利用离子液体与青蒿素之间的强相互作用，选择性将青蒿素从粗品中萃取出，获得高品质青蒿素产品。
7.为达此目的，本发明采用以下技术方案：
8.将离子液体与含有青蒿素粗品的有机溶剂混合，恒温震荡，静置分层得到两相溶液，用高效液相色谱分别测定两相中青蒿素、青蒿烯的浓度，计算获得分离选择性。
9.作为本发明一种优选的技术方案，所述的离子液体为1
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乙基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺、1
‑
羟乙基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺、n
‑
乙基
‑
吡啶双三氟甲磺酰亚胺、1
‑
丁基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺中的一种或多种，依靠离子液体与青蒿素之间的疏水作用将青蒿素选择性萃取到离子液体相，之后用有机溶剂进行反萃取，冷却结晶即可获得青蒿素产品。
10.作为本发明一种优选的技术方案，所述的青蒿素粗品中青蒿烯的质量含量为1～10％。
11.作为本发明一种优选的技术方案，所述离子液体与含有青蒿素粗品的有机溶剂溶液体积比为0.5:1～5:1。
12.作为本发明一种优选的技术方案，所述溶解青蒿素粗品的有机溶剂为环己烷、正己烷、石油醚中的一种或两种。
13.作为本发明一种优选的技术方案，所述进行反萃取的有机溶剂为乙醚。
14.作为本发明一种优选的技术方案，所述反萃取过程中乙醚与离子液体的体积比为1:1～5:1。
15.作为本发明一种优选的技术方案，所述震荡温度为30～60℃，时间为0.5～7h，震荡温度下静置4h分层得到两相溶液。
16.作为本发明一种优选的技术方案，将离子液体与含有1～10％青蒿烯的青蒿素粗品有机溶剂溶液按照0.5:1～5:1体积比混合，于30～60℃恒温震荡0.5～7h，震荡温度静置4h分层得到两相溶液，分别取萃取相(离子液体相)和萃余相(有机溶剂相)各0.5ml，以甲醇定容至5ml，用高效液相色谱测定两相中青蒿素、青蒿烯浓度，计算分配系数和分离选择性。
17.本发明提供一种疏水离子液体选择性萃取分离青蒿素和青蒿烯的方法，所采用离子液体不易挥发，设计性强，同时，与传统方法相比，本发明方法简单，是一种高效、绿色的纯化分离方法。
具体实施方式
18.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
19.实施例1
20.1)将1
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乙基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺与含有青蒿烯/青蒿素(青蒿烯含量3.0％)的环己烷溶液等体积混合，于40℃震荡1h，40℃静置4h，分层得到两相溶液。
21.2)用注射器分别取萃取相(离子液体相)和萃余相(有机溶剂相)各0.5ml，用甲醇定容至5ml，用高效液相色谱分别测定两相中青蒿素、青蒿烯的浓度，计算获得青蒿素/青蒿烯分离选择性为15.56。
22.实施例2
23.1)将1
‑
羟乙基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺与含有青蒿烯/青蒿素(青蒿烯含量
2.8％)的石油醚溶液等体积混合，于40℃震荡1h，40℃静置4h，分层得到两相溶液。
24.2)用注射器分别取萃取相(离子液体相)和萃余相(有机溶剂相)各0.5ml，用甲醇定容至5ml，用高效液相色谱分别测定两相中青蒿素、青蒿烯的浓度，计算获得青蒿素/青蒿烯分离选择性为27.16。
25.实施例3
26.1)将1
‑
羟乙基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺与含有青蒿烯/青蒿素(青蒿烯含量7.6％)的环己烷溶液等体积混合，于40℃震荡1h，40℃静置4h，分层得到两相溶液。
27.2)用注射器分别取萃取相(离子液体相)和萃余相(有机溶剂相)各0.5ml，用甲醇定容至5ml，用高效液相色谱分别测定两相中青蒿素、青蒿烯的浓度，计算获得青蒿素/青蒿烯分离选择性为16.59。
28.实施例4
29.1)将n
‑
乙基
‑
吡啶双三氟甲磺酰亚胺与含有青蒿烯/青蒿素(青蒿烯含量2.1％)的环己烷溶液等体积混合，于40℃震荡1h，40℃静置4h，分层得到两相溶液。
30.2)用注射器分别取萃取相(离子液体相)和萃余相(有机溶剂相)各0.5ml，用甲醇定容至5ml，用高效液相色谱分别测定两相中青蒿素、青蒿烯的浓度，计算获得青蒿素/青蒿烯分离选择性为3.69。
31.实施例5
32.1)将1
‑
丁基
‑3‑
甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺与含有青蒿烯/青蒿素(青蒿烯含量2.1％)的环己烷溶液等体积混合，于40℃震荡1h，40℃静置4h，分层得到两相溶液。
33.2)用注射器分别取萃取相(离子液体相)和萃余相(有机溶剂相)各0.5ml，用甲醇定容至5ml，用高效液相色谱分别测定两相中青蒿素、青蒿烯的浓度，计算获得青蒿素/青蒿烯分离选择性为4.68。
34.采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,hplc)测定萃取相(e)/萃余相(r)中青蒿素/青蒿烯浓度，根据以下公式计算青蒿素、青蒿烯的分配系数(d)和分离选择性(s)。
[0035][0036][0037]
以上所述，仅为本项发明的具体实施步骤，但是本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的人员在本发明揭露技术范围内，可轻易想到的变化或者替代，都应涵盖在本发明的保护范围之内。