一种细胞培养方法及其应用与流程

1.本发明涉及细胞培养领域，特别是一种细胞培养方法及其应用。


背景技术：

2.细胞培养分为动物细胞培养和植物细胞培养，其中动物细胞培养是指在生物体外无菌条件下，模拟体内正常生理状态下的基本条件和环境，分离培养机体组织细胞或建立细胞系，并使得细胞在体外培养容器中长期生长或繁殖的方法；而植物细胞培养是在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行震荡培养，得到分散成游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量细胞群体的一种技术。
3.对植物细胞培养过程中，光照与细胞分化密切相关，但是现有的培养设备不便于对培养的细胞进行周期性光照，影响植物细胞的培养。


技术实现要素：

4.本发明的目的是提供一种细胞培养方法及其应用，便于对培养的细胞进行周期性光照，影响植物细胞的培养。
5.一种细胞培养方法，包括以下步骤：
6.s1、取外植体消毒处理，然后从外植体直接分离出细胞；
7.s2、将分离出的细胞置于装有培养基的培养皿中；
8.s3、将培养皿放置在支撑装置上，进行光照培养；
9.s4、同时控制培养温度，适当补充新鲜培养液。
10.所述支撑装置包括底座、支板、支臂轴、托放机构、转盘和光照机构，支板固定在底座上，支臂轴横向固定在支板的上端，用于放置培养皿的托放机构连接在支臂轴的一端，转盘转动在支臂轴上，光照机构连接在转盘上。
11.所述光照机构包括灯座、照射灯和磁性板，转盘上连接有灯座，磁性板设置在灯座的下端，灯座上转动连接有照射灯。
12.所述光照机构还包括调节螺杆，转盘上转动有调节螺杆，灯座与调节螺杆螺纹连接。
13.所述光照机构还包括灯管夹，灯管夹固定在照射灯上，调节螺杆与灯管夹配合滑动连接。
14.所述托放机构包括托环、转环、安装长孔和托架，支臂轴上固定有托环，托环内转动有转环，转环的下端均匀设有三个安装长孔，三个安装长孔内均滑动有托架。
15.所述托架包括滑动座、方杆、托举弹簧、托板和限位柱，托板固定在方杆的上端，限位柱固定在方杆的下端，方杆上滑动有滑动座，托举弹簧设置在滑动座与托板之间，滑动座与安装长孔滑动连接。
16.所述托放机构还包括传动盘和夹紧螺杆，转环的下端转动有传动盘，传动盘与三个滑动座滑动连接，其中一个滑动座上转动有夹紧螺杆，夹紧螺杆与转环螺纹连接。
17.所述托放机构还包括夹柱，托板上远离转环中心端对称固定有两个夹柱。
18.所述的一种细胞培养方法在植物性细胞分化培养中的应用。
附图说明
19.图1是细胞培养方法的流程图；
20.图2是支撑装置的结构示意图；
21.图3是支撑装置的局部结构示意图；
22.图4是转盘的结构示意图；
23.图5是转环的结构示意图；
24.图6是对培养皿进行托放的实施例的示意图；
25.图7是托放机构的结构示意图；
26.图8是夹紧限位板的结构示意图；
27.图9是震动环架的结构示意图；
28.图10是传动架的结构示意图；
29.图11是光照机构的结构示意图一；
30.图12是光照机构的结构示意图二。
31.图中：
32.底座101；支板102；支臂轴103；托环104；转盘105；支撑方杆106；横杆架107；
33.转环201；传动盘202；安装长孔203；连动轴杆204；夹紧螺杆205；
34.滑动座301；方杆302；托举弹簧303；托板304；夹柱305；限位柱306；
35.夹紧限位板401；夹紧弹簧402；夹紧杆403；
36.三棱板501；震动环架502；圆角齿503；螺纹套504；
37.传动架601；传动轮602；连动轮603；
38.调节螺杆701；灯座702；照射灯703；灯管夹704；磁性板705。
具体实施方式
39.如图1所示：
40.一种细胞培养方法，包括以下步骤：
41.s1、取外植体消毒处理，然后从外植体直接分离出细胞；
42.s2、将分离出的细胞置于装有培养基的培养皿中；
43.s3、将培养皿放置在支撑装置上，进行光照培养；
44.s4、同时控制培养温度，适当补充新鲜培养液。
45.如图2-12所示：
46.所述支撑装置包括底座101、支板102、支臂轴103、托放机构、转盘105和光照机构，支板102固定在底座101上，支臂轴103横向固定在支板102的上端，用于放置培养皿的托放机构连接在支臂轴103的一端，转盘105转动在支臂轴103上，光照机构连接在转盘105上。
47.在使用时，底座101用于对装置的支撑，在将培养皿放置在托放机构上时，使培养皿水平放置；通过安装在板102上的往复电机，对转盘105进行往复传动，从而带动光照机构以支臂轴103为轴往复转动，从而形成对托放机构上的培养皿进行周期性往复光照，且可以
通过控制转盘105转动速度，对光照角度的周期进行调节，进一步形成对外植体细胞的光照培养。
48.如图2-12所示：
49.所述光照机构包括灯座702、照射灯703和磁性板705，转盘105上连接有灯座702，磁性板705设置在灯座702的下端，灯座702上转动连接有照射灯703。
50.通过照射灯703的灯光模拟阳光对培养皿进行周期性往复光照，照射灯703通过灯座702安装在转盘105上，从而转盘105转动，通过磁性板705对照射灯703进行吸引固定，使照射灯703可以保持与支臂轴103平行状态随转盘105转动形成对培养皿的周期照射。
51.进一步的，如图2-12所示：
52.所述光照机构还包括调节螺杆701，转盘105上转动有调节螺杆701，灯座702与调节螺杆701螺纹连接。
53.通过转动调节螺杆701，调节螺杆701通过螺纹传动灯座702在调节螺杆701上移动，从而更改灯座702与支臂轴103的间距，继而调节光照距离，使装置适应不同植物外植体的光照培养。
54.进一步的，如图2-12所示：
55.所述光照机构还包括灯管夹704，灯管夹704固定在照射灯703上，调节螺杆701与灯管夹704配合滑动连接。
56.通过灯管夹704的设置，当需要将照射灯703收起时，先通过调节螺杆701将灯座702调节至与支臂轴103的间距最小处，然后转动照射灯703在灯座702上转动，从而带动灯管夹704转动，直至灯管夹704夹紧在调节螺杆701的旋转钮上，从而使照射灯703与支臂轴103垂直，此时照射灯703保持关闭照射状态；且此状态便于对培养皿从托放机构上取放；同时通过灯管夹704夹紧在调节螺杆701的旋转钮上，形成对调节螺杆701的固定。
57.如图2-12所示：
58.所述托放机构包括托环104、转环201、安装长孔203和托架，支臂轴103上固定有托环104，托环104内转动有转环201，转环201的下端均匀设有三个安装长孔203，三个安装长孔203内均滑动有托架。
59.三个托架用于对培养皿的放置，通过传动转环201在托环104上缓慢转动，从而带动培养皿缓慢转动，配合照射灯703周期性照射，使培养皿内的细胞更好光照培养。
60.进一步的，如图2-12所示：
61.所述托架包括滑动座301、方杆302、托举弹簧303、托板304和限位柱306，托板304固定在方杆302的上端，限位柱306固定在方杆302的下端，方杆302上滑动有滑动座301，托举弹簧303设置在滑动座301与托板304之间，滑动座301与安装长孔203滑动连接。
62.通过三个托板304形成对培养皿的托举，且通过在托板304上设有橡胶板，避免培养皿在托板304上滑动，且避免培养皿与托板304接触时发生损坏，通过托举弹簧303的设置，形成在培养皿放置到托板304上后，对培养皿的弹性支撑，进一步形成对培养皿的保护，同时还可以根据培养皿挤压托举弹簧303的距离，判断培养皿中培养液添加的计量。
63.进一步的，如图2-12所示：
64.所述托放机构还包括传动盘202和夹紧螺杆205，转环201的下端转动有传动盘202，传动盘202与三个滑动座301滑动连接，其中一个滑动座301上转动有夹紧螺杆205，夹
紧螺杆205与转环201螺纹连接。
65.通过转动夹紧螺杆205，形成对与夹紧螺杆205连接的滑动座301的位置的控制，使滑动座301靠近或远离转环201中心；在对滑动座301位置进行控制时，通过滑动座301与传动盘202的滑动，使传动盘202在转环201下端转动，配合安装长孔203使另外两个滑动座301与被控制滑动座301进行同步移动，从而形成通过夹紧螺杆205，同时控制三个滑动座301位置的目的，达到通过夹紧螺杆205同时控制三个托板304的位置，使装置可以适应不同大小的培养皿的放置。
66.进一步的，如图2-12所示：
67.所述托放机构还包括夹柱305，托板304上远离转环201中心端对称固定有两个夹柱305。
68.在通过夹紧螺杆205同时控制三个托板304的位置时，先将培养皿放置在三个托板304上，然后在转动夹紧螺杆205，使三个托板304继续向转环201中心靠近，从而使三个托板304上的夹柱305均顶紧培养皿的外边沿，从而进一步形成对培养皿的固定，避免培养皿在随转环201转动进行光照时，培养皿发生偏移或滑落，影响细胞的培养。
69.如图2-12所示：
70.所述支撑装置还包括支撑方杆106、传动架601、传动轮602、连动轮603和连动轴杆204，支撑方杆106固定在底座101上，支撑方杆106上滑动有传动架601，传动架601的一端转动有传动轮602，传动架601的另一端转动有连动轮603，传动轮602和连动轮603传动连接，连动轮603内键滑动有连动轴杆204，连动轴杆204固定在转环201的中心。
71.通过在传动架601与底座101之间设有控制伸缩杆，启动控制伸缩杆伸长，推动传动架601在支撑方杆106上上升，继而使传动轮602与转盘105侧面接触，往复的转盘105开始对传动轮602进行传动，传动轮602转动的同时对连动轮603传动，连动轮603通过连动轴杆204带动转环201转动，从而使转盘105的往复转动，传动转环201带动培养皿往复转动；
72.且通过控制伸缩杆可以调整传动轮602与转盘105侧面接触位置与支臂轴103的间距，从而控制传动比。
73.如图2-12所示：
74.所述支撑装置还包括三棱板501、震动环架502、圆角齿503、螺纹套504和横杆架107，三棱板501滑动在三个限位柱306的下端，震动环架502滑动在三棱板501上，震动环架502周向均匀设有多个圆角齿503，螺纹套504转动在震动环架502的中心且与三棱板501螺纹连接，连动轴杆204穿过螺纹套504，横杆架107固定在支臂轴103上。
75.初始时，横杆架107与圆角齿503不接触，在转环201往复转动时，转环201通过三个限位柱306带动三棱板501转动，三棱板501带动震动环架502往复转动，当需要对培养皿进行震动时，转动螺纹套504，通过螺纹套504与三棱板501的螺纹连接，螺纹套504带动震动环架502上升，从而使圆角齿503与横杆架107接触，配合托举弹簧303的弹力，使震动环架502通过托板304带动培养皿震动，从而便于培养皿呢细胞的分散；且通过转动螺纹套504，可以调节圆角齿503与横杆架107的接触程度，从而控制震动程度。
76.如图2-12所示：
77.所述支撑装置还包括夹紧限位板401、夹紧弹簧402和夹紧杆403，夹紧杆403的上端固定有夹紧限位板401，夹紧杆403滑动在托板304上，夹紧限位板401和托板304之间设有
夹紧弹簧402。
78.通过夹紧限位板401的设置，在培养皿放置在三个托板304上，三个托板304进一步靠近时，培养皿的边沿先与夹紧限位板401接触，形成对夹紧限位板401的挤压，从而使夹紧限位板401沿着培养皿的边沿向上滑动，直至夹紧限位板401受夹紧弹簧402的弹力影响夹紧培养皿的边沿，继续使三个托板304靠近，使培养皿的边沿顶紧夹柱305，从而形成通过夹柱305对培养皿的周向固定，通过三个夹紧限位板401对培养皿的上下方向固定，避免在对培养皿震动时，培养皿脱落。
79.所述的一种细胞培养方法在植物性细胞分化培养中的应用。
80.植物性细胞分化培养中更需要的进行周期性光照，通过支撑装置能够更好的针对不同植物进行调节光照调节。