专利名称:源于生物体的异物检查法的制作方法
技术领域：
本发明涉及各种制品中的制造品质量管理技术，具体说是涉及一种用来对“制品或制品制造设备中作为异物混入的源于生物体的物质是来源于哪个个体的”进行鉴定的源于生物体的异物检查法。尤其是涉及一种在制品中混入毛发等生物体的物质的异物时，对质量有很大影响的食品等的制造品质量管理技术。
另一方面，根据毛发等的源于生物体的物质中含有的DNA序列来鉴定个人，近年来在法医学、科学搜查等领域中较活跃，即使在民间企业中也有以亲子鉴定为目的进行DNA鉴定。
但是，将DNA序列信息用于各种制品中的制造品质量管理是目前还没有的。
在制品或有可能使异物混入制品中的设备、装置、机器、备品、部件等中含有的异物内，尤其是对毛发等的源于生物体的物质迅速鉴定是哪个个体的(通常指个人)，在改善由于异物混入使价值显著降低的食品等的制品的制造工艺方面是很重要的课题。若能够迅速鉴定，可以向使异物混入的个人进行问询，调查异物混入的原因，从而督促此人注意或可以采取有效的对策并改善制造工艺。
但是，以往对混入异物的调查(证据的收集等)，一般都是在异物发现很长时间后才进行，此时，由于时间的推移证据散失，信息收集需要花很长时间，并且多缺乏准确性。所以，根据调查结果确定原因以及由此采取有效对策都是很难的。本发明可以解决这些课题提高制品尤其是食品的质量。
另外，DNA等的核酸序列信息是个人特有的信息，必须确保对核酸序列信息的保密。
另外，本发明的目的在于提供一种在确保对个人特有的核酸序列信息保密的同时，用来对“在制品或制品的制造相关的设备中作为异物混入的源于生物体的物质是来源于哪个个体的”进行迅速鉴定的源于生物体的异物检查法。
本发明包括以下发明(1)一种源于生物体的异物检查法，包括对于在制品或制品的制造相关的设备中作为异物混入的源于生物体的物质，根据该源于生物体的物质中含有的核酸序列信息对“混入的源于生物体的物质是来源于哪个个体的”进行鉴定。所述个体通常是指有机会在制品或制品的制造相关的设备中混入源于生物体的物质的个人。另外，所说的制品的制造相关的设备是指包括包装、运输工序在内的制造工艺中所用的所有设备、装置、机器、备品、部件等。
(2)根据(1)中所述的源于生物体的异物检查法，其中核酸为DNA。
(3)根据(1)中所述的源于生物体的异物检查法，其中核酸为RNA。
(4)根据(1)～(3)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，其中制品为食品。在食品等的制品中，由于毛发等的生物体的物质作为异物混入时严重地降低了质量，所以将本发明用于食品有很大的价值。
(5)根据(1)～(4)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，其中源于生物体的物质为毛发。在食品等中作为源于生物体的物质很容易混入毛发。
(6)根据(1)～(5)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，在制品的制造前预先采集在制品或制品制造相关的设备中有机会混入源于生物体的物质的个体的含有核酸的物质。所说的含有核酸的物质为血液、毛发、皮肤、趾甲、口腔粘膜等，但是，不限于这些。由此，在源于生物体的物质作为异物真的混入时，通过解析混入的源于生物体的物质的核酸序列，能够迅速地鉴定。
(7)根据(6)所述的源于生物体的异物检查法，通过将作为异物混入的源于生物体的物质的核酸序列与预先解析的核酸序列进行对照，鉴定混入的源于生物体的物质是来源于哪个个体的物质。由此，在源于生物体的物质作为异物真的混入时，可以迅速的检查和鉴定。
(8)根据(6)所述的源于生物体的异物检查法，检查委托人在制品的制造前采集在制品或制品制造相关的设备中有机会混入源于生物体的物质的个体的含有核酸的物质，获得检体，在所得检体中附上与个体信息(姓名等)无关的编号，将所得检体和不带有个人信息的编号或记号一起交给检查受托人，委托核酸序列的解析检查，检查受托人解析被委托检查的检体中的核酸序列，将解析的核酸序列信息对应于不带有个人信息的编号或记号作为核酸序列解析数据保存。检查委托人通常是该制品的制造者。检查受托人通常是能够解析核酸序列的机关或本行业人员。由此，在确保保密个人特有的核酸序列信息的同时，在源于生物体的物质作为异物真的混入时，能够对混入的源于生物体的物质的核酸序列进行解析并且迅速鉴定。
(9)根据(8)所述的源于生物体的异物检查法，在制品或制品的制造相关的设备中作为异物混入源于生物体的物质时，检查委托人将该混入的源于生物体的物质交给检查受托人，委托该核酸序列的解析检查，检查受托人解析混入的源于生物体的物质的核酸序列，通过对照该核酸序列与所述核酸序列解析数据，检查混入的源于生物体的物质的核酸序列与哪个编号或记号对应的核酸序列一致，或者在所述核酸解析序列数据中没有与混入的源于生物体的物质的核酸序列一致的，将一致的编号或记号或者没有一致的情况通知检查委托人。由此，在确保保密个人特有核酸序列信息的同时，在源于生物体的物质作为异物真的混入时，能够对混入的源于生物体的物质的核酸序列进行解析并且迅速鉴定。
(10)根据(9)所述的源于生物体的异物检查法，检查委托人根据通知的编号或记号鉴定源于生物体的物质的来源个体。
(11)根据(1)～(10)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，检查的核酸序列是来源于线粒体的核酸。
(12)根据(1)～(10)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，是通过序列法进行核酸序列的检查。
(13)根据(1)～(10)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，通过测出碱基置换、插入或缺失的方法或者通过计算小卫星、微卫星的重复数的方法进行核酸序列的检查。测出碱基置换的方法，包括各种单核苷多态测出法。(12)和(13)的方法可以依据目的组合使用。
(14)根据(1)～(13)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，在核酸序列检查前进行核酸扩增。
(15)根据(1)～(13)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，为提高个体鉴定的准确率，合用元素分析法(荧光X线分析法、ICP发光分析法、ICP质量分析法、原子吸收法、PIXE法等)。
(16)根据(1)～(14)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，为提高个体鉴定的准确率，合用光(红外、可见、紫外)吸收分析法。
(17)根据(1)～(14)之任一项所述的源于生物体的异物检查法，为提高个体鉴定的准确率，合用微细表面形状观察法(光学显微镜、激光显微镜、原子间力显微镜、扫描型电子显微镜等)。
根据本发明的方法，在制品或制造设备等中发现源于生物体的物质后，可以在短时间内并且准确的鉴定来源。该来源的特定信息将成为确认关于异物责任的有力证据。若明确了与异物有关的责任所在，就可以改善用于减少含有异物的次品的工序，或者对制造负责人进行适当地处分(分担赔偿责任、罚款等)。另一方面，对于与异物混入原因无关的工作者也可以给出无责任的有力证据。
本发明在稳定提供更高质量的制品方面发挥重要作用。例如，如实施例中所示，若在某些食品中含有毛发时，在以往对造成原因的工序不清楚，难于改善工序解决问题。但是，根据本发明，由于能够迅速准确地明确造成原因的工序，所以，可以迅速进行改善，从而显著减少在以后的产品中含有异物的几率。所以，实施本发明的源于生物体的异物检查法而制造的食品，可以说要比没有实施该方法的食品卫生。另外，根据一般消费者发现任何源于生物体的异物并且要求索赔时，能够采取更加迅速、准确的对策，从而提供更加卫生的食品。
图2是表示本发明的源于生物体的异物检查法的更具体的实施例的流程图，在食品制造工序中混入毛发的来源检查的简图。
首先制造商等的检查委托人，对于核酸序列的解析，要征得有可能在制品或制品的制造相关设备中混入异物的全部人员(通常为工作人员)的同意，才能向核酸序列的解析机关或本行业人员等的检查受托人委托检查。
受托检查的检查受托人，向检查委托人提供采集检体的必要物质。在图2中，作为采集检体的必要物质的例子，示例了采血用的滤纸。
检查委托人，在对象个人从事该制品的制造业务前，从对象个人的全部人员中采取含有核酸的检体。其中可以使用血液、毛发、皮肤、口腔粘膜等的生物体材料，但不限于这些。在图2中作为检体，示例出了在采血用滤纸上采血的例子。此时，检查委托人，在采集的检体中标上与个人信息(姓名等)没有任何联系的编号(或记号)，预先制作该编号(或记号)与姓名的对应表。检查委托人，对该对应表或个人信息不向包括检查受托人在内的其他人公开。
检查委托人，仅将采集的附有编号(或记号)的检体交给检查受托人，委托对各检体的核酸序列进行解析。此时，检查委托人，仅将附有编号(或记号)的检体交给检查受托人，对鉴定的个人信息均不公开。
检查受托人，对各检体的核酸序列进行解析(核酸序列的读取或者进行类型分类)。并且，使所得检体的核酸序列与检体附有的序号相对应，作为核酸序列解析数据保管。在图2中示例了核酸解析数据的例子。检查受托人不将该核酸序列解析数据向包括检查委托人在内的其他人公开。由此，可以防止个体特有的核酸序列信息的泄漏。
由此，在确保保密个人特有的核酸序列信息的同时，在制品或制品的制造相关设备中源于生物体的物质真的作为异物混入时，能够迅速的采取对策。
以下，对在制品或制品的制造相关设备中源于生物体的物质真的作为异物混入的情况进行说明。
作为检查委托人的该制品的制造业者，发现在在制品或制品的制造相关设备中源于生物体的物质真的作为异物混入的源于生物体的物质。或者制造者以外的第三者(流通者、消费者等)发现在制品中作为异物混入的源于生物体的物质，并且向制造业者提供该源于生物体的物质。在图2中，示例了食品中混入人的毛发的例子。检查委托人将发现的或者被提供的源于生物体的物质交给检查受托人，委托对该源于生物体的物质的核酸序列进行解析。
检查受托人，对该源于生物体的物质的核酸序列进行解析(核酸序列的读取、或者类型分类)，将解析的核酸序列与预先制作并保管的核酸序列解析数据进行对照，将一致的编号(或者记号)通知给检查委托人。在核酸序列解析数据中若没有一致的核酸序列，也要将该意思通知给检查委托人。
检查委托人，根据检查受托人通知的检查结果，鉴定发现的源于生物体的物质的来源个体。若能够迅速鉴定异物的混入者，就可以向使异物混入的个体进行问询，调查异物混入的原因，从而通过督促此人注意或者采取有效的措施，可以对制造工艺进行迅速改善。
另一方面，若没有一致的核酸序列时，可能是受入材料或制造后的混入、或者故意的异物混入，要采取责备的对策。
在核酸序列的检查中，可以使用各种序列法(碱基序列测定法)、各种单碱基多态性(Single Nucleotide Polymorphisms；SNPs)解析法(Cargill，M.et alNature Genetics 22，231-238(1999)Characterization ofsingle-nucleotide Polymorphisms in coding regions of human genes)等的测出碱基置换的方法；测出插入或缺失的方法；计算重复序列(小卫星、微卫星)的重复次数(Variable Number of Tandem Repeats；VNTR，ShortTandem Repeats；STR)的计数方法(Nakamura，Y.et.alSience 235，1616-1622(1987)Variable Number of Tandem Repeats(VNTR)markers forhuman gene mapping)等。
作为序列法，有桑格法(Sanger)、Maxam-Gilbert法、Pyrosequence法(Ronaghi，M.et alScience 281，363-365(1998)A sequencing methodbased on real-time pyrophosphate)等，但是，不限于这些。
作为SNPs解析法，有利用DNA微阵列(Patrick，O，B.et.alNatureGenetics 21，33-37(1999)Exploring the new world of genome withmicroarrays)等的杂交法；Invader法(Victor，L.et.alNature Biotechnology17，292-296(1999)Polymorphism identification and quantitative detectionof genomic DNA invasive cleavage of oligonucleotide probes)；Taqman探针法(Shi，M.M.Clin Chem 47，164-172(2001)Enabling large-scalepharmacogenetic studies by high-throughput mutation detection andgenotyping technologies)；Masscode tag法(http//WWW.qiagen.com/literature/qiagennews/0201/1016749_QNews2200lp11-12.pdf)；allele specific PCR法(Soren，G.et.alGenome Res 10，258-266(2000)High-throughput SNP allele-frequency determination inpooled DNA samples by kinetic PCR)；RFLP法(Jazwinska，E.C.et.alAm J Hum Genet 43，175-181(1988)Gm typing by immunogloblin heavy-chain gene RFLP analysis)等。但是，并不限于这些。
作为重复序列的计数法，一般为在扩增含有重复序列的DNA区域后，通过电泳法检查扩增DNA分子量的方法，但是，不限于此。
所述的用于检查核酸序列的方法，根据目的可以组合使用。
在检查核酸序列前，一般要进行核酸扩增。在核酸扩增法中，已知有PCR法(Saiki，R.K.et.alScience 230，1350-1354(1985)Enzymaticamplification of beta-globin genomic sequences and restriction site analysisfor diagnosis of sickle cell anemia)；LAMP法(Notomi，T.et.alNucleic AcidsRes，28(12)，e63(2000)Loop-mediated isothermal amplification of DNA)；ICAN法(http//WWW.takara.co.jp/news/2000/07-07/00-i-019.htm)；TMA法(Jonas，V.et.alJ.Clin Microbiol 31，2410-2416(1993)Detection and identification ofMycobacterium tuberculosis directly from sputum sediments by amplificationof rRNA)等，但是，不限于这些。在核酸扩增中，可以使用抑制各种核酸扩增阻碍物质的影响的Ampdirect试剂(Nishimura，N.et alAnn ClinBiochem 37，674-680(2000)Direct PCR from whole blood without DNAisolation)。
检查核酸的部位，选择在个体之间变异的部位。该部位存在于线粒体DNA或核DNA等中。在线粒体DNA中，尤其D-LOOP区域已知是变异大的领域。另外，在核DNA中，已知小卫星·微卫星的重复数(VNTR·STR)有个体之间差异，在法医学等中的个人鉴定经常使用。另外，也可以通过对SNPs进行必要的解析鉴定个人。但是，检查核酸的部位，不限于这些，另外，也可以选择碱基的置换、插入、以及缺失的部位，所述部位，根据目的可以组合选择。
在制品或制品的制造相关的设备中发现源于生物体的异物时，如所述，立即对其中含有的核酸序列进行解析，与预先制作并保管的核酸序列解析数据对照，鉴定异物来源的个体。在本发明中，辅助地合用元素分析法(荧光X线分析法、ICP发光分析法、ICP质量分析法、原子吸收法、PIX法等)、光(红外、可见、紫外)吸收分析法、微细表面形状观察法(光学显微镜、激光显微镜、原子间力显微镜、扫描型电子显微镜等)等的各种分析观察法，并且取得用于个体鉴定的佐证，可以进一步提高鉴定的准确率。例如以毛发为例，可以获得如染色、脱色的程度、粗、不均等的特征，在异物的检查中作为用于个体鉴定的佐证。
由此，根据本发明的源于生物体的异物检查法，在确保保密个人特有的核酸序列信息的同时，能够迅速地对“在制品或制品的制造相关的设备中作为异物混入的源于生物体的物质是源于哪个个体的”进行鉴定。
即，在制品或制品的制造相关的设备等中有机会混入源于生物体的物质的个人，在制造前预先对特征核酸序列进行解析，由此可以显著缩短源于生物体的异物检查的时间和提高准确性。其原因在于，通过在发生异物混入前预先进行对该检查必要对象的限制、取得同意检查作业、以及对对象的核酸序列解析，在真的发现异物时，可以立即进行异物的核酸序列解析和鉴定作业。
另一方面，核酸序列为重要的个人信息，要求特别慎重处理。关于这一点，在本发明的方法中，由于检查委托方没有知道核酸序列信息的途径，检查受托方没有知道个人信息的途径，所以，可以防止个人核酸序列信息的泄漏。
通过具备以上的条件，在制造工艺管理中可以引入个体核酸序列检查，在制品或制品的制造相关的设备等中混入源于生物体的异物时，可以在短时间内并且准确地调查其源于生物体的异物的来源。
1.作为制造食品A的食品制造者的核酸序列检查委托人，作为核酸序列检查对象选择在食品A的制造中有机会混入异物(毛发等)的个人。
2.检查委托人在所述对象的全部成员中获得关于实施核酸序列检查的同意。
3.检查委托人，在制造前委托检查受托人对与食品A的制造相关的核酸序列进行检查。
4.检查受托人，向检查委托人提供所述对象个人的人数份的采血器具。每个人的采血要在各个滤纸上进行。每一张滤纸标上不同的编号(系列数字)和编码。
5.检查委托人，在滤纸上进行所述对象的个人采血。收集采血后的滤纸，制作个人与滤纸上编号一致的表作为信息保管。该信息绝对不能向检查受托人公开。
6.检查委托人，将采血后的滤纸交给检查受托人，委托核酸序列检查。在采血后的各滤纸上，不记载任何姓名等个人信息。
7.检查受托人，从检查委托人获得采血后的滤纸，解析核酸序列。检查序列部位，根据对象数增减，要确保有充分的量。将所得核酸序列信息与系列数字对应并保存。具体的说就是，通过PCR等方法对滤纸中含有的血液中的DNA的一部分进行扩增，用测序装置获得序列信息。在滤纸血的DNA扩增中，可以使用抑制由于血液成分扩增阻碍的Ampdirect试剂。将系列数字向计算机输入之类的管理作业可以使用条形码读出器。所得核酸序列解析数据不但不向检查委托人公开，也不向任何他人公开。
8.在确实从食品A中发现异物(毛发)时，检查委托人将该毛发送给检查受托人。
9.检查受托人分析送来毛发中含有的DNA序列，与核酸序列解析数据中的所述对象个人的核酸序列数据进行对照。若有一致的，将该系列数字通知检查委托人。若没有一致的，也将该意思传达到。
10.检查委托人，根据检查受托人所得的系列数字鉴定个人。检查委托人向鉴定的个人问询并调查异物混入的原因，或督促该个人注意、或采取有效的对策，从而可以改善制造工艺。另一方面，若没有一致的核酸序列的情况，可能是受入材料或制造后的混入、或者故意的异物混入，要采取责备的对策。
在上述实施例中，示例了本发明的源于生物体的异物检查法的一个实施方式。但是，本发明可以以各种方式实施。所以，上述实施例只不过是所有各点中的一个例子，没有限定的意思。另外，只要属于本发明范围之内的变动都属于本发明的保护范围内。
权利要求
1.一种源于生物体的异物的检查法，包括对于在制品或制品的制造相关设备中作为异物混入的源于生物体的物质，由该来源物质中含有的核酸序列信息，鉴定混入的源于生物体的物质是源于哪个个体。
2.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，其中，核酸为DNA。
3.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，其中，核酸为RNA。
4.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，其中，制品为食品。
5.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，其中，源于生物体的物质为毛发。
6.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，在制品制造前，对在制品或制品的制造相关的设备中有机会混入源于生物体的物质的个体，采集其含有核酸的物质，预先对该含有核酸的物质中含有的核酸序列进行解析。
7.根据权利要求
6所述的源于生物体的异物检查法，通过将作为异物混入的源于生物体的物质的核酸序列与预先解析的核酸序列对照，从而鉴定混入的源于生物体的物质是源于哪个个体的。
8.根据权利要求
6所述的源于生物体的异物检查法，检查委托人，在制品制造前，对在制品或制品的制造相关的设备中有机会混入源于生物体的物质的个体，采集其含有核酸的物质获得检体，在采集的检体上标上与个体信息无关的编号或记号，将该检体和没有公开个体信息的编号或记号一起交给检查受托人，委托核酸序列的解析检查；检查受托人对委托检查的检体中的核酸序列进行解析，不将解析的核酸序列信息向检查委托人公开，并且使其与标记的编号或记号相对应作为核酸序列解析数据保管。
9.根据权利要求
8所述的源于生物体的异物检查法，在制品或制品制造相关设备中作为异物确实有混入源于生物体的物质时，检查委托人将该混入的源于生物体的物质交给检查受托人，委托该核酸序列的解析检查；检查受托人对混入的源于生物体的物质的核酸序列进行解析，通过将该核酸序列与所述核酸序列解析数据进行对照，检查混入的源于生物体的物质的核酸序列与哪个编号或记号对应的核酸序列一致，或者还是在所述核酸序列解析数据中没有与混入的源于生物体的物质的核酸序列一致的，将一致的编号或记号、或没有一致的结果通知检查委托人。
10.根据权利要求
9所述的源于生物体的异物检查法，检查委托人由通知的编号或记号来鉴定源于生物体的物质是源于哪个个体。
11.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，检查的核酸序列是源于线粒体的核酸。
12.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，通过序列法检查核酸序列。
13.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，通过测出碱基置换、插入火缺失的方法、或计算小卫星、微卫星的重复次数的方法对核酸序列进行检查。
14.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，在核酸序列检查前进行核酸扩增。
15.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，为提高个体鉴定的准确率，合用元素分析法，即荧光X线分析法、ICP发光分析法、ICP质量分析法、原子吸收法、PIXE法等。
16.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，为提高个体鉴定的准确率，合用光吸收分析法。
17.根据权利要求
1所述的源于生物体的异物检查法，为提高个体鉴定的准确率，合用微细表面形状观察法，即光学显微镜、激光显微镜、原子间力显微镜、扫描型电子显微镜等。
专利摘要
一种源于生物体的异物检查法，用于在各种制品的制造品质量管理中，在确保对个人特有核酸序列信息进行保密的同时，快速的对在制品或制品的制造相关设备中作为异物混入的源于生物体的物质是源于哪个个体的进行鉴定。这种方法包括，对于在制品或制品制造相关的设备中作为异物混入的源于生物体的物质，由该源于生物体的物质中含有的核酸序列信息来鉴定混入的生物体的物质是源于那个个体(通常为个人)的。
文档编号G01Q60/00GKCN1442693SQ03106835
公开日2003年9月17日 申请日期2003年3月3日
发明者白崎良成, 西村直行 申请人:株式会社岛津制作所导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan