从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法
【专利说明】
[0001]
技术领域： 本发明涉及一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法。
[0002]
【背景技术】： 茄尼醇是药物合成的重要原料，是合成泛醌类药物不可替代的关键中间体。目前许多 发达国家已生产和广泛应用的辅酶QlO均须依赖高纯度的茄尼醇作为原料。辅酶QlO在医 药保健和化妆品领域中应用十分广泛，近年来随着国际市场上辅酶QlO建议用量的提高和 需求量的日益增大，国际市场对茄尼醇的需求量也与日倶增。因此制备高纯度茄尼醇对于 深入研究其药理药效及相关应用具有重要意义。
[0003] 茄尼醇的测定方法较多，国内外均有大量的报道，主要有薄层色谱法，气相色谱 法，薄层分离-库仑滴定法，柱色谱分离重量法，薄层扫描法等，但一般为分析规模及半制 备规模，制备通量很小。
【发明内容】
[0004] 本发明旨在提供一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的高效制备工艺，茄尼醇的含 量达到98%以上。
[0005] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下： 一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法：土豆叶提取物，经大孔树脂柱分离及制备 高效液相色谱两步高效纯化，获得纯度大于98%的茄尼醇，其具体步骤如下： (1) 样品提取： 将土豆叶粉碎过20目筛，，以乙醇溶液渗漉提取，合并乙醇提取液，浓缩至无醇味，得 乙醇提取物； (2) 树脂柱分离除杂： 将步骤（1)乙醇提取物]过大孔树脂，依次用水、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇洗脱。收 集80%乙醇洗脱物，浓缩至无醇味，得粗提物。
[0006] (3)制备高效液相色谱精制： 浓缩后的粗物用甲醇溶液溶解、微孔滤膜过滤、高效液相制备色谱分离，以甲醇-乙醇 溶液为洗脱体系，紫外检测器210nm检测，收集制备图谱中主要的色谱峰，相应流份干燥即 可得到纯度大于98%的茄尼醇。
[0007] 所述步骤（1)的具体过程为：乙醇的用量是土豆叶的5-10倍，渗漉时间6-9个小 时，渗漉温度为80 °C。
[0008] 所述步骤（2)的具体过程为：使用的大孔树脂为HZ-801。
[0009]所述步骤（3)的具体过程为：粗提取物用甲醇溶液溶解，色谱柱为Shim-pack PREP-ODS色谱柱（20mmX250mm，15ym)。流动相配比为：甲醇：乙醇（60 :40,V/V)，流动相 流速为10mL/min，进样量为300yL。
[0010] 以本发明从土豆叶提取物中提取和制备茄尼醇具有如下优点和进步： 1.本发明工艺简单。土豆叶提取物通过树脂分离和制备型高效液相制备两步高效纯 化，即可获取高纯度的产品。有利于资源利用最大化。
[0011] 2.本发明工艺非常适宜规模化工艺生产。发展的高效液相制备方法为快速制备方 法，适合大批量化学对照品的制备，高效制备之前有预处理步骤，避免了批量制备中制备柱 柱效下降过快的缺点，所用流动相不含有添加剂，可方便实现制备溶剂的回收利用，降低批 量制备的成本。
【附图说明】
[0012] 图1、茄尼醇制备工艺流程图； 图2、茄尼醇HPLC制备色谱图（210nm); 图3、茄尼醇HPLC分析图谱（210nm); 图4、茄尼醇APCI-MS图谱。
【具体实施方式】
[0013] 实施例1 将土豆叶粉碎过20目筛，以10倍于土豆叶子重量乙醇溶液渗漉提取6个小时，合并 乙醇提取液，回收乙醇水溶液，浓缩至无醇味，得乙醇提取物；将乙醇提取物过HZ-801大孔 树脂，依次用水、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇洗脱；将上述最后一步经过80%乙醇洗脱后 的洗脱物进行收集，将上述制得的洗脱物浓缩至无醇味，制成粗提物；将上述制得的浓缩后 的粗提取物先后经甲醇溶液溶解，经〇. 45ym微孔滤膜过滤，高效液相制备色谱分离，色谱 柱Shim-packPREP-ODS色谱柱（20謹X250謹，15ym)，然后再用流动相配比为：甲醇：乙醇 (60 :40,V/V)，流动相流速为lOmL/min的甲醇-乙醇溶液洗脱，经紫外检测器210nm检测， 进样量为300yL，收集保留时间为26. 5min-27. 5min，收集制备图谱中主要的色谱峰，相应 流份干燥后即可得到纯度大于98%的茄尼醇。
[0014] 实施例2 将土豆叶粉碎过20目筛，以5倍于土豆叶子重量乙醇溶液渗漉提取9个小时，合并 乙醇提取液。回收乙醇水溶液，浓缩至无醇味，得乙醇提取物；将乙醇提取物过大孔树脂 HZ-801，依次用水、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇洗脱。收集80%乙醇洗脱物，所得洗脱液浓 缩无醇味。浓缩后的粗提物用甲醇溶液溶解，经〇. 45ym微孔滤膜过滤，高效液相制备色谱 分离，色谱柱Shim-packPREP-ODS色谱柱（20mmX250mm，15ym)。流动相配比为：甲醇：乙 醇（60 :40，V/V)，流动相流速为10mL/min，紫外检测器210nm检测，进样量为300yL。收集 保留时间为26. 5min-27. 5min，收集制备图谱中主要的色谱峰，相应流份干燥即可得到纯度 大于98%的前尼醇。
[0015] 实施例3 将土豆叶粉碎过20目筛，以7倍于土豆叶子重量乙醇溶液渗漉提取8个小时，合并 乙醇提取液。回收乙醇水溶液，浓缩至无醇味，得乙醇提取物；将乙醇提取物过大孔树脂 HZ-801，依次用水、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇洗脱。收集80%乙醇洗脱物，所得洗脱液浓 缩无醇味。浓缩后的粗提物用甲醇溶液溶解，经〇. 45ym微孔滤膜过滤，高效液相制备色谱 分离，色谱柱Shim-packPREP-ODS色谱柱（20mmX250mm，15ym)。流动相配比为：甲醇：乙 醇（60 :40，V/V)，流动相流速为10mL/min，紫外检测器210nm检测，进样量为300yL。收集 保留时间为26. 5min-27. 5min，收集制备图谱中主要的色谱峰，相应流份干燥即可得到纯度 大于98%的前尼醇。
【主权项】
1. 一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： (1) 样品提取： 将土豆叶粉碎过20目筛，以乙醇溶液渗漉提取，合并乙醇提取液，浓缩至无醇味，得乙 醇提取物； (2) 树脂柱分离除杂： 将步骤（1)乙醇提取物过大孔树脂，依次用水、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇洗脱，收 集80 %乙醇洗脱物，将上述制得的洗脱物浓缩至无醇味，制成粗提物； (3) 制备高效液相色谱精制： 将步骤（2)制得的粗提物先后经过甲醇溶解、微孔滤膜过滤、高效液相制备色谱分离， 再以甲醇-乙醇溶液为洗脱体系，紫外检测器210nm检测，收集制备图谱中主要的色谱峰， 相应流份干燥即可得到纯度大于98%的茄尼醇，茄尼醇的结构式如下：2. 如权利要求1所述的一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法，其特征在于：所述 步骤（1)乙醇的用量是土豆叶的5-10倍，渗漉时间6-9个小时。3. 如权利要求1所述的一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法，其特征在于：所述 步骤（1)的渗漉温度为80°C。4. 如权利要求1所述的一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法，其特征在于：所述 步骤（2)中的大孔树脂为HZ-801大孔树脂。5. 如权利要求1所述的一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法，其特征在于：所述 步骤（3)中色谱柱为 Shim-pack PREP-ODS 色谱柱（20mmX250mm，15 μ m)。6. 如权利要求1所述的一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法，其特征在于：所述 步骤⑶中流动相配比为：甲醇：乙醇（60 :40, V/V)。7. 如权利要求1所述的一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法，其特征在于：所述 步骤（3)中流动相流速为10mL/min，进样量为300 yL。
【专利摘要】本发明提供了一种从土豆叶中提取和制备茄尼醇的方法。药材粉末用乙醇80℃下回流浸提，提取液浓缩后，经大孔树脂柱分离及制备高效液相色谱两步高效纯化即可获得纯度大于98％的茄尼醇。本发明工艺步骤简单、纯度高，易于放大规模生产。
【IPC分类】C07C29/76, C07C33/02
【公开号】CN105152862
【申请号】CN201510582876
【发明人】梁勇, 黄宁, 何波
【申请人】中山森谱生物科技有限公司
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年9月14日