一种用于清除污水与复育河道的组合物的制备与应用方法与流程

本发明为一种用于清除污水与复育河道的多孔洞物质与微生物组合物，该组合物用于控制河道污染、城市污水与养殖废水。

背景技术：

由于生活污染物的长期沉降、累积，导致城市河道黑臭底泥淤积，城市河道底泥污染是水体黑臭的重要来源，黑臭河道水体的外源污染与底泥污染两者成为河道水体污染的主要来源。

城市河道黑臭主要是过量纳污导致水体供氧和耗氧失衡的结果，水体缺氧乃至厌氧条件下污染物转化并产生氨氮、硫化氢、挥发性有机酸等臭恶臭物质以及铁、锰硫化物等黑色物质。生活污水是导致城市河道黑臭的最普遍和最主要的污染源。其他污染源还有：生活垃圾、有机工业废水、合流制管网溢流污水、污水厂尾水、畜禽养殖场粪便污水等。

水体中的有机污染是造成黑臭水最主要的因素，水体中的污染物又大部分为有机性污染物质，有机污染物质为水体中最主要的耗氧物质，这些有机污染物质排放入河川，前期在好氧微生物的分解作用下，将有机物质分解成CO₂、H₂O，造成水中的溶氧量大幅降低导致缺氧，厌氧微生物即取而代之继续分解水中的有机物质，产生硫化物使水体变黑，厌氧作用分解有机物质产生的H₂S、NH₃和CH₄多种小分子化合物的气味混和飘出水面，使水体飘散臭味。也有研究指出，当水体当中还有大量的有机碳、有机氮及有机磷污染时，不管水中的溶氧量的多少，在适宜的温度下都会被好氧的放线菌以及厌氧的微生物的降解，并且生成不同类型的物质来导致水体变黑发臭。

含有大量有机物质、营养物质，耗氧速率高，一般处于强还原环境，河道底泥二次污染易导致水体中氨氮、亚硝酸盐、硫化物、粪臭等有害物质含量过高，造成水体黑臭，影响城市景观和居民生活。河道污染底泥对上覆水体水质产生大的影响，底泥的治理能有效控制和减少其COD(化学需氧量Chemical oxygen demand)、氮、磷营养盐等污染的释放和对上覆水体的污染，因此控制河道底泥污染，是城市河 道水环境改良的重要环节。

以往用于控制底泥污染的措施主要是疏竣清淤，这种方法成本较高，底泥的再处置也是一个复杂环保难题：通过水体曝气增氧，可一定程度减少底泥污染，但对较浅的河道易导致底泥再悬浮：在河道中添加微生物制剂，这种方法对增强水体自净能力有一定作用，缺点是在河道中微生物制剂易流失，频繁投放，成本过高。

生物修复是指生物、特别是微生物催化降解有机污染物，从而修复被污染环境或消除环境中污染物的过程。水体中的微生物种类多、代谢类型多样、适应能力强，利用水体中原先存在的微生物修复污染水体，强化自然界的净化能力治理被污染的水体，具有投入少、耗能低、管理方便、安全等优点，符合建立经济节约、资源回圈、可持续发展社会理念。

微生物固定化方法是指利用化学或物理的方法，将游离微生物定位于限定的空间区域内，并保持完整性，且能反复使用的基本技术。固定化技术可对完整细胞进行固定，可最大限度地维持生物酶完整性和稳定性，提高单位元体积内微生物密度和流动速率，修复过程不受稀释率高于微生物生长率的限制，固定化微环境有利于遮罩外界环境的不利影响，固定化颗粒的水力性质和沉降性能可灵活控制，是一项高效实用的污染环境修复技术。

目前微生物的固定化方法在国内外尚没有统一的分类标准，方法也多种多样，但主要有表面吸附(结合)固定化、交联(键联)固定化、(多聚体)包埋固定化和自身固定化(微生物细胞间自交联固定化)等几种方法。固定化微生物技术中，以包埋法最为常见。包埋法是将微生物封闭在天然高分子多糖类或合成高分子凝胶的网路中，从而使微生物固定化。其特点是能将固定化微生物制备成各种形状(球状、块状、圆柱状、膜状、布状、管状等)，并且固定化后的微生物能增值，所以对它的研究最多，应用也最广。包埋法中使用的材料主要有海藻酸钠、聚乙烯醇、三醋酸纤维、琼脂等，并添加辅助材料如活性炭、累托石、石灰石等以提高包埋材料的性能。在废水的微生物处理过程中，主要利用微生物的生物化学作用，废水中的有机污染物作为微生物生 命活动过程中所需要的营养物质，并在微生物的生命活动过程中被吸收利用，并被转化为易于分离或无害的物质。微生物在水体中具有改良水质、生物自净、抑制藻类过度繁殖、控制水体富营养化、增加溶氧、降低COD、降低氨氮、降低磷含量、改善水环境生态平衡等功能。有研究表明，在未对河道底泥进行治理的情况下，经过氧化塘预处理、河道水体增氧、水体原位强化生物修复等措施的治理，河道下游水体又逐渐恢复黑臭。在对河道底泥进行生物强化氧化修复后，河道污染水体水质得到显著的改善和提高。

包埋固定化生物催化剂(IBC,immobilized biocatalysts)的优点包括：成本低、固定化容易操作并可制成各种形状，可于常温常压下进行固定化、固定化对微生物无害、固定化后载体内细胞漏出少，环境中其他微生物不易进入、基质通透性佳、物理强度与化学稳定度佳(王建龙,2002)。

生物催化剂(Biocatalyst)是指具有催化能力的蛋白酶或是生物活细胞，在特殊情况下也可能是核酸(Cech,1993)，酶是在所有生命体中必要的物质，酶可以有效率并且有选择性的催化各种生命体中的化学转换。1839年，Payen和Persozu研究了处于发芽状态的大麦水解淀粉为糊精和糖的过程，并纯化出淀粉酶(Payen,1839)。在1973年时日本千烟一郎利用聚丙烯酰胺凝胶包埋固定化具有高活性天门冬氨酸酶的大肠杆菌(Escherichia coli)天门冬氨酸(千烟一郎,1975)。在此之后固定化生物催化剂(Immobilized biocatalyst)的相关研究并迅速的发展。

沸石为一种常见生物催化剂的载体，通过固体吸附法将微生物细胞吸附到沸石表面，沸石的结构是以硅或铝氧化物的四面体骨架结构(SiO₄或AlO₄)作为基本单位，通过氧原子连结硅、铝的四面体形成一种三度空间骨架结构(Oliveira and Rubio,2007,Malekian et al.,2011)。因为铝原子带三价电荷，与氧原子结合成AlO₄四面体骨架结构时，整个结构呈现带负电荷的状态，因此会吸附周遭附近的负电荷离子来中和其电性，也因为这样的一种骨架构造产生了许多孔穴和空洞，沸石具有其他矿物还大的表面积(400-800m2/g)，这样的结构使得沸石拥有 强大的吸附力以及离子交换能力，沸石表面的孔洞大小均匀，平均在0.3mm-1.0mm，小于此直径的物质都会被吸附(Popov et al.,2012)。利用沸石做生物催化剂载体，除了沸石表面拥有许多孔洞表积大、对微生物细胞没有伤害性，在生物脱氮工艺中，一方面沸石自身也可以经由离子交换的过程中吸附水中的氨氮，另一方面通过沸石静电作用将硝化菌固定并在沸石表面形成一层生物膜，生物膜会将沸石自身吸附水中的氨氮经由化学转化为硝酸盐，一种自我吸收并且自我硝化的循环发生在沸石的表面，沸石氨氮的能力因为表面微生物的作用不断的再生，所以利用沸石做微生物催化剂载体在生物脱氮的工艺中，过程中为同时兼赋了物理吸附、离子交换以及生物硝化三个过程(Bai et al.,2010)。

本发明的固定化复合益生菌剂(CBM,complex beneficial microorganism)投入污染河道后，不易流失，不仅加强微生物菌剂对污染物的降解作用，其固定化基质还可促进对底泥释放污染物的吸附固定作用，进一步达到减少底泥对上覆水体污染。

本发明选择沸石为载体，沸石平均比重为2.12，体积在0.05-0.15cm³范围较合适，其孔隙度适合微牛伞物的吸附固定，可对完整的微生物细胞进行固定，避免人为破坏生物酶的完整性和生化反应的稳定性；增殖速度快、效果好。沸石为载体的固定化细胞颗粒对于静止或缓流污染水体中的底泥，可根据污染程度直接投加，操作简单，无需改变自然环境和修筑大规模构筑物，不产生二次污染。沸石来源丰富，价格便宜。节省投资，简化流程，实践上安全可靠，经济上费用低廉，工程投资仅为物理法、化学法修复的30-50％。

本发明所使用的载体可以球形藻胶代替。采用复合菌(硝化菌与反硝化菌)，加上使用两相(有氧与缺氧)的藻胶包埋，其原理为利用该球形藻胶内部的氧气分布不同，由于氧气的渗透力，藻胶内部为缺氧区(anaerobic zone)；藻胶外部为有氧区(aerobic zone)。有效去除污水中氨氮分为两个步骤：硝化作用(nitrification；有氧状态)产物为硝酸(NO₃)，与亚硝酸(NO₂)；反硝化作用(denitrification；厌氧状态)产物为氮气(N₂)。有氧环境，只能进行硝化作用；反之，只能进行反硝化作 用。一般污染河道或污水处理池，很难同地点同时维持有氧与厌氧状态，或仅是包埋单一硝化菌种，其除氨氮效果均不佳；本发明采用的藻胶具有两相(有氧和缺氧)的藻胶包埋复合菌组合物，对于污水中氨氮更有效率

本发明选择的微生物为兼性厌氧混合菌，固定化后的微生物能长期保持清洁；固定化细胞颗粒的微环境有利于遮罩土著原生菌、毒性物质对微生物体的恶性竞争、吞噬和毒害，使其在复杂环境条件下稳定地发挥高效能。本发明采用生物修复主要指微生物修复，具体为无机载体沸石吸附固定微生物，对复合菌吸附速度快、增殖效果好。

本发明也属于底泥生物修复剂，由复合微生物菌剂、增氧剂和固定化载体组成，还可包括生物营养剂和生物解毒剂辅助药物，达到高效去除污水中污染物的目的。由于多数河道污染区域大、具流动性，原生型微生物很难形成优势降解菌群，污染底泥的特殊性质无疑对生物修复提出更高的要求，必须筛选组合优势降解菌群，而且微生物固定化颗粒其密度，才能使优势降解微生物菌群接触到污染底泥，达到去除有机污染物的目的。

生态清淤剂是一种性能优异的环境净化剂，通过提高水体的生命力和自净能力，迅速地改善水质，是一种经济的净化方法。生态清淤剂具有沉淀的功能，其本身及其附着的微生物不易流失，即使在水流动的河道、湖沼、水库和涨退潮的海滩、港湾等地方，都可以有效的起作用。即便在很深的水域里，都能沉入到底部，把淤泥里的有机物吸收分解掉，并达到净水、增氧、消除恶臭等效果。实际应用中，其它生物载体在河道需要固定才能起作用，而且往往会被水流冲垮需进行整复，而使用生态清淤剂则不会有此现象。

施放生态清淤剂，不用清淤机械、清运污泥，没有散发臭气的清淤场面。由于污染情况和污泥情况不同，根据已往的应用实例，施放一次生态清淤剂，河道的淤泥4-6个月可以减少20-30公分。施放生态清淤剂后，不需要曝气充氧设备，原来缺氧黑臭的河道很快净化。水质得到净化后可以看到很多水生动物，促进水生生物的食物链修复。这个过程无需投放鱼苗和其它物种，几十天就长了许多水生生物与鱼 群，因此很适合净化底质污染和水体生态修复。

用生态清淤剂消除污泥替代清淤同时修复水生生态，可以与原有河道综合治理任务对接，大大减少治理难度，提高治理效果，而且无二次污染。施放生态清淤剂之后，净化剂及其吸附固着的微生物生物量巨大，可以吸收分解水体和淤泥里含有的氨氮、硝酸盐、亚硝酸盐、硫化氢、硫化合物以及其它营养成分、致臭物。生态清淤剂的作用是吸收分解淤泥里含有的有机物，当有机物被完全吸收分解之后，底泥表面就是一层不被吸收分解的砂石无机物，泥面变为灰白色。生态清淤剂还可以投放到污水处理池、污泥池里，可以分解除去剩余淤泥、净化水质、消除恶臭等。生态清淤剂在净化海滩淤泥、分解水产养殖场淤泥、改善污水处理的水质，去除臭味、去除有毒的藻类和净化湖泊水体等，都有出色的净化能力。

技术实现要素：

一种用于清除污水与复育河道的组合物，该组合物包括改性沸石与微生物组合物。

一种用于清除污水与复育河道的组合物，该组合物包括藻胶与微生物组合物。

该微生物组合物的共同培养条件为以28℃、转速200rpm、光照强度为1000lux的光照下，连续培养7天；再加入5％糖蜜、0.4％尿素及0.15％磷酸二氢钾后，温度控制于28℃并以发酵槽连续发酵5天。

该改性沸石制作方法为将丝光沸石(mordenite，化学式为(Ca,Na₂,K₂)Al₂Si₁₀O₂₄·7H₂O)以蒸馏水洗净烘干，再将沸石浸泡于5％盐酸中2小时；再以蒸馏水洗净至pH值为中性并烘干，并将沸石浸泡于5％氢氧化钠中2小时，以蒸馏水洗净至pH值为中性并烘干。

一种使用组合物清除污水与复育河道的方法，该组合物包括改性沸石与微生物组合物。

将该组合物投入污水中或河道中，即可降解水中污染物。

该组合物添加于污水量为每公升污水加3-8克。

该污水指水沟、蓄水池、污水下水道、河道处的污水。

该组合物添加于河道量为每平方公尺河水面积加400-750克。

该清除污染的方法包括降低胺离子、亚硝酸离子、含硫化合物、含磷化合物、固态悬浮粒子浓度，与降低生物需氧量、化学需氧量。

本发明的有益效果为：本技术特别适合于无法开展疏浚作业的场合。克服了费用昂贵、杂音过大、易散发臭味、难以处置问题等难题。采用复合底质净化剂能够对重金属和磷起到一定稳定、无害的作用。如铬和磷均能作为沉积物转入底泥而减少对上覆水体的释放。采用新型底质净化剂能够对严重污染的河道进行泥水一体化生态修复。该技术操作简单，对河道防洪无任何不利影响，运行过程中无额外费用。

附图说明

图1为扫描式电子显微镜拍摄改性沸石与沸石包覆CBM(A为NaOH/HCl处理的沸石的SEM图，B为处理后沸石包覆复合益生菌剂的SEM图)；

图2为以朗模等温吸附方程式分析改性沸石对于氨氮吸附；

图为3复合生物催化剂与沸石吸附氨氮的能力；

图为4固定化生物催化剂处理淡水废水的(A)氨氮浓度、(B)亚硝酸离子浓度；

图5为固定化生物催化剂处理海水废水的(A)氨氮浓度、(B)亚硝酸离子浓度；

图6为固定化生物催化剂处理海水养殖污水的(A)氨氮浓度、(B)亚硝酸离子浓度、(C)COD浓度、(D)含硫分子浓度；

图7为固定化生物催化剂处理河道底黑臭污水的(A)氨氮浓度、(B)亚硝酸离子浓度、(C)COD浓度、(D)悬浮固态粒子浓度、(E)含磷分子浓度、(F)含硫分子浓度；

图8为复合有益微生物各培养期各菌种定量分析。

具体实施方式

CBM复合益生菌发酵制备

使用购自新竹食品工业研究所生物资源及保存中心(BCRC)的纯种菌株，富集扩大培养光合细菌、枯草芽孢杆菌、硝化菌、乳酸菌、霉菌类、放线菌、酵母菌，7大类菌株以共栖培养制备复合益生菌 (CBM)，该复合菌包括以下菌种：Rhodopseudomonas palustris、Rhodospirillum rubrum、Rhodobacter sphaeroides、Lactobacillus pentosus、Lactococcus lactis、Bacillus subtilis、Saccharomycopsis fibuligera、Ochrobactrum anthropi、Thiosphaera pantotropha、Achromobacter denitrificans、Pseudomonas stutzeri、Penicillium citrinum、Chaetomium globosum、Aspergillus oryzae、Aspergillus niger、Myrothecium verrucaria、Pichia psedopastoris、Streptomyces albulus。依据各菌株的培养基以及最佳生长条件进行培养；培养基配方如下所示：

YM MEDIUM(Saccharomycopsis fibuligera)

YPD MEDIUM(Pichia psedopastoris)

YEAST STARCH MEDIUM II(Streptomyces albulus)

LACTOBACILLI MRS BROTH(Lactobacillus pentosus、Lactococcus lactis)

NURIENT MEDIUM(Rhodopseudomonas palustris、Rhodospirillum rubrum、Rhodobacter sphaeroides、Achromobacter denitrificans、Ochrobactrum anthropi、Pichia psedopastoris、Bacillus subtilis)

NS(non-sulfur)MEDIUM(Rhodopseudomonas palustris、Rhodospirillum rubrum、Rhodobacter sphaeroides)

矿物质混和液:硫酸镁水合物(MgSO₄·H₂O):0.2g，磷酸氢钾(K₂HPO₄):1.0g硫酸铁水合物(FeSO₄·H₂O):0.5g氯化钙CaCl₂:0.02g二氯化锰 (MnCl₂·H₂O):0.002g钼酸钠(NaMoO₄·H₂O):0.001g最后加蒸馏水至1.0L。

MALT EXTRACT MEDIUM I(Blakeslaa’s Formula)(Aspergillus oryzae、Chaetomium globosum、Penicillium citrinum)

灭菌之前先加入葡萄糖

POTATO DEXTROSE MEDIUM(PDA)(Aspergillus niger)

待上述各纯种菌株达109cfu/ml后，经将各纯种菌液等量混合，再以厌氧与60Lux光照、搅动50rpm方式培养5～7天共存培养(symbiotic culture)，此目的是使混合厌氧菌与好氧菌的培养液提供给不同菌群的所需物质(包括：碳源与氮源；氨基酸、糖类、脂肪、维他命)，这些营养基质，可确保这些微生物菌群形成一个互利共生，共栖生存的稳定的微生物生态系。

前步骤共栖混合培养菌群再以28℃、转速200rpm、光照强度为1000lux的光照下，连续培养7天。此步骤为第一次放大(first amplification)。

前步骤共栖混合培养菌群再加入5％糖蜜、0.4％尿素及0.15％磷酸二氢钾后，温度控制于28℃并以发酵槽连续发酵5天，即可得CBM复合益生菌液。此步骤为第二次放大(second amplification)。

载体用沸石制备

HCl-NaOH改性方法：将沸石以蒸馏水洗净并烘干，再将沸石浸泡在5％HCl中2小时。以蒸馏水洗至pH值为中性并烘干，最后 再将沸石浸泡在5％NaOH中2小时，以蒸馏水洗至pH值为中性并烘干备用。

新型固定化复合底泥净化剂以沸石为微生物固定化主基质、并添加缓释增氧剂和活性炭。沸石先后经过热改性增大比表面积和孔隙率、有机改性提高对阴离子的吸附能力。沸石经改性后其架状结构内部充满了微孔和通道，能为微生物群落提供巨大的生物附着表面积，内部的孔洞还具有筛选分子的作用，并可以选择优势微生物种群和帮助它们繁衍。为了使底泥中存在微氧条件，还可采用缓释增氧剂过氧化钙。其有效含量80％，理论增氧量0.22O₂mg/mg，并可产生1.38mg/mg碱度。本专利从本土底泥中进行菌株的筛选，富集扩大培养光合细菌、枯草芽孢杆菌、硝化反硝化细菌等8大类20多种菌株以共栖方式至制备复合益生菌(CBM)。固定化复合底质净化剂制成颗粒状、含水率15％，平均密度2.6。

载体用藻胶制备

以10％聚乙烯醇(PVA)和2％海藻酸钠(sodium alginate)为基本载体加水至100克，于80℃加热至PVA完全溶解后加入2克改性沸石粉，于121℃、1.5大气压力(atm)进行灭菌20分钟，放置冷却至常温。加入10％离心后的菌泥，将混合物倒入50mL针筒中，慢慢滴入含有2％氯化钙(CaCl₂)的硼酸饱和溶液中在4℃下固定化形成直径3毫米(mm)的小球，固定时间为24小时，取出后以生理蒸馏水冲洗2至3次即可备用。

实施例1改性沸石表面比较

本实验将改性后的沸石以扫描式电子显微镜(SEM)拍摄表面比较未改性沸石的表面，实验结果表示改性后的沸石表面有被强酸强碱侵蚀的痕迹，表面明显的延伸展开，孔洞孔径变大，说明经过改性后的沸石表面积会增大，进而增加氨氮的吸附能力(第1图)。有研究指出在氢氧化钠改性的过程中会使沸石的表面积与总孔容比减少，表示沸石表面孔洞的孔径也会增加，有利于那离子进行取代，进而提高沸石对于氨氮的吸附能力(朱丰华等，2010)，孙兴滨等人利用改性后的沸石研究其除磷的能力，研究结果表示未改性沸石表面呈不规则，孔 洞空隙较小，虽然表面布满了孔道，但是大部分孔道被其他物质所堵塞，改性后沸石的表面层次变得鲜明，表面的孔隙变大，形成一种珊瑚状的表面结构，这样的表面结构增加了沸石表面的表面积，也提高了沸石的吸附能力(孙兴滨等，2010)。

朗模等温吸附方程式(Langmuir isotherm)

$q_e=\frac{q_m{K}_{L}C}{1+K_{L}C}$

之中，方程式中q_e为达到吸附平衡时单位吸附剂吸附量(mg/g)，C为吸附质的平衡浓度，q_m为吸附剂饱和吸附量(mg/g)，K_L则为常数。将Langmuir equation取倒数：

$\frac{1}{q_e}=\frac{1}{q_m}+\frac{1}{q_m{K}_{L}C}$

以1/q_e对1/C作图，从截距与斜率得到吸附剂的饱和吸附量q_m＝17.89mg/g、吸附常数K_L＝3.42L/mol。

Langmuir等温吸附模式的线性回归R Spuare值高，代表改性丝光沸石对于氨氮的吸附模式，符合Langmuir等温吸附模式，吸附常数K_L愈高代表吸附剂吸附能力愈高(第2图)。Englert等人对天然智力沸石(主要成分为斜法沸石以及丝光沸石)的特性及其对氨氮的吸附能力做研究，研究结果表示天然智利沸石表表面积为177m²/g，对氨氮离子交换容量为1.02m_eq/g，在对氨氮吸附能力的研究结果则说明天然智利沸石对氨氮的吸附速率相当快，吸附容量可以达0.68m_eq/g，且吸附模式可与Langmuir吸附模式相符(Englert and Rubio,2005)。

实施例2表面吸附固定化CBM复合微生物沸石处理污水分析

利用改性的丝光沸石及复合型生物催化剂对氨氮模拟废水处理比较两者与不投加沸石的控制组进行氨氮吸附能力的比较，实验结果显示复合型生物催化剂的氨氮吸附能力明显比改性后丝光沸石的氨氮吸附能力强。且由实验结果得知沸石的氨氮去除率可达52％，复合生物催化剂的氨氮去除率可达63％(第3图)。

CBM包埋固定化生物催化剂处理淡水废水。氨氮淡水模拟废水添加CBM包埋固定化生物催化剂，NH⁴⁺原浓度为4.5ppm，添加量为5g/L，控制组不添加，每日检测NH⁴⁺浓度，进行3重复连续七日，结果显示CBM有显著降解水中氨离子的能力，且功效可延续7天以上(第4图A)。亚硝酸淡水废水添加CBM包埋固定化生物催化剂，NO^2-原浓度为0.4ppm，添加量为5g/L，控制组不添加，每日检测NO^2-浓度，进行3重复连续七日，结果显示CBM有显著降解水中亚硝酸离子的能力，且功效可延续7天以上(第4图B)。

CBM包埋固定化生物催化剂处理海水废水。氨氮海水废水添加CBM包埋固定化生物催化剂，NH⁴⁺原浓度为4.5ppm，添加量为5g/L，控制组不添加，每日检测NH⁴⁺浓度，进行3重复连续7日，结果显示CBM有显著降解水中氨离子的能力，且功效可延续7天以上(第5图A)。亚硝酸海水模拟废水添加CBM包埋固定化生物催化剂，NO^2-原浓度为0.4ppm，添加量为5g/L，控制组不添加，每日检测NO^2-浓度，进行3重复连续7日，结果显示CBM有显著降解水中亚硝酸离子的能力，且功效可延续7天以上(第5图B)。

CBM包埋固定化生物催化剂处理海水养殖污水。氨氮海水养殖污水添加CBM包埋固定化生物催化剂，NH⁴⁺原浓度为1.38ppm，添加量为5g/L，控制组不添加，每日检测NH⁴⁺浓度，进行3重复连续15日，结果显示CBM有显著降解水中氨离子的能力，且功效可延续15天以上(第6图A)。亚硝酸海水模拟废水添加CBM包埋固定化生物催化剂，NO^2-原浓度为0.73ppm，添加量为5g/L，控制组不添加，每日检测NO2-浓度，进行3重复连续15日，结果显示CBM有显著降解水中亚硝酸离子的能力，且功效可延续15天以上(第6图B)。

海水养殖污水添加CBM包埋固定化生物催化剂，COD原浓度为2.54ppm，添加量为5g/L，控制组不添加，每日检测COD浓度，进行3重复连续15日，结果显示CBM有显著降解水中COD的能力，且功效可延续15天以上(第6图C)。海水模拟废水添加CBM包埋固定化生物催化剂，硫化物(sulfide)原浓度为41ppb，添加量为5g/L，控制组不添加，每日检测硫化物浓度，进行3重复连续15日，结果 显示CBM有显著降解水中硫化物的能力，且功效可延续15天以上(第6图D)。

实施例3以新型CBM复合生物催化剂改善黑臭污水

CBM包埋固定化生物催化剂处理黑臭污水。河道底部黑臭污水添加CBM包埋固定化生物催化剂，添加固定化生物催化剂之实验结果与添加改性后丝光沸石对于污水中氨去除率的比较(第7图A)，以及添加固定化生物催化剂之实验结果与添加改性后丝光沸石对于污水中亚硝酸去除率的比较(第7图B)，各实验组包括三重复，实验数据以平均值与标准差表示。

河道底部黑臭污水添加CBM包埋固定化生物催化剂，添加固定化生物催化剂之实验结果与添加改性后丝光沸石对于污水中COD去除率的比较(第7图C)，以及添加固定化生物催化剂之实验结果与添加改性后丝光沸石对于污水中悬浮固态粒子去除率的比较(第7图D)，悬浮粒子单位为水质浊度(NTU,nephelometric turbidity unit)，各实验组包括三重复，实验数据以平均值与标准差表示。

河道底部黑臭污水添加CBM包埋固定化生物催化剂，添加固定化生物催化剂的实验结果与添加改性后丝光沸石对于污水中含磷分子去除率的比较(第7图E)，以及添加固定化生物催化剂的实验结果与添加改性后丝光沸石对于污水中含硫分子去除率的比较(第7图F)，各实验组包括三重复，实验数据以平均值与标准差表示。

实施例4水体与底泥同步原位生态修复应用

将固定复合有益微生物(CBM)的底质净化剂400-750g/m²，均匀撒播在河底。并设2台功率2.2KW提水式曝气机，曝气机每天运转8小时。17天后水体消除黑臭现象，从上游至下游，呈现暗灰色-灰黄色-黄绿色的渐变过程，透明度从上游水体的12cm左右提高到下游处45cm左右，并且呈现从上游到下游逐步提高的趋势。30天后，上游出现大量黄褐色上浮污泥。60天后底泥降解了45cm，上游漂浮褐色污泥逐渐减少。此时在水陆交界处种植0.3-0.5m沉水和挺水植物带，并补充投加250g/m²底质净化剂后进入水质维护期。

比较添加底质净化剂之后的河道水质，各项水污染因子于表1、表2所列如下：

表1

表2

CODcr:以重铬酸离子测定化学需氧量

BOD:生物需氧量，biological oxygen demand

没有投放底质净化剂，底泥呈黑色及有极强臭味。投放底质净化剂后3个月，底泥得到净化且没有臭味，河底污泥与悬浮物SS降低45-60公分。各项造成河水臭味的生物因子于表3所列如下：

表3

MPN:最大可能菌数，maximum probability number

MLSS:mixed liquor suspended solid

MLVSS:mixed liquor volatile suspended solid

实施例5复合微生物各菌种定量分析

为确认复合有益微生物(CBM)之中各菌种含量，以定量核酸聚合酶连锁反应(quantitative PCR)，定量分析复合有益微生物制剂中各个培养期(共存培养、第一次培养、第二次培养)各个菌种数量(copies)与比例。各培养期的定量汇整于第8图。

本技术特别适合于无法开展疏浚作业的场合。克服了费用昂贵、杂音过大、易散发臭味、难以处置问题等难题。采用复合底质净化剂能够对重金属和磷起到一定稳定、无害的作用。如铬和磷均能作为沉积物转入底泥而减少对上覆水体的释放。采用新型底质净化剂能够对严重污染的河道进行泥水一体化生态修复。该技术操作简单，对河道防洪无任何不利影响，运行过程中无额外费用。

上述多项功效，实属充分符合新颖性及进步性的法定发明专利要件，爰依法提出申请，恳请贵局核准本件发明专利申请案以励发明。