延长色谱柱使用寿命的清洗方法
【专利摘要】本发明提出了一种延长色谱柱使用寿命的清洗方法，该方法包括：利用磷酸，对所述色谱柱进行第一清洗；利用硝酸，对经过所述第一清洗的色谱柱进行第二清洗；以及利用有机溶剂，对经过所述第二清洗的色谱柱进行第三清洗。该方法能彻底清除色谱柱及管道中的残留样品，显著延长了色谱柱的使用寿命和利用率。
【专利说明】
延长色谱柱使用寿命的清洗方法
技术领域
[0001]本发明涉及延长色谱柱使用寿命的清洗方法。
【背景技术】
[0002]采用高效液相色谱仪检测样品中三聚氰胺的含量，由于样品品种较多，包括奶酪、冰淇淋、酸奶、液奶及其各种原料，并且样品成分复杂，检测后样品的残留成分对液相色谱仪管路以及色谱柱的污染较大，按照现有的清洗仪器的方法，不能将色谱仪的色谱柱及管路中的杂质彻底清洗干净，从而导致检测结果经常出现峰拖尾或前沿现象，导致色谱柱使用寿命的降低，进而加大了更换色谱柱的频次，化验室每隔一到两个月就得更换一次色谱柱，色谱柱价格昂贵，化验室耗材费用高昂。
[0003]因此，高效液相色谱仪的清洗方法有待进一步开发和改进。
【发明内容】
[0004]本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明提出了一种能彻底清除色谱柱中样品残留的方法，色谱柱的使用寿命大大延长。
[0005]在本发明的第一方面，本发明提出了一种延长色谱柱使用寿命的清洗方法。根据本发明的实施例，所述方法包括:利用磷酸，对所述色谱柱进行第一清洗;利用硝酸，对经过所述第一清洗的色谱柱进行第二清洗；以及利用有机溶剂，对经过所述第二清洗的色谱柱进行第三清洗。本发明实施例提出的清洗方法能够彻底清除色谱柱及管路中的样品残留，色谱柱的使用寿命显著延长，如发明人所在化验室自从采用本发明实施例的方法，平均一年仅需更换I根色谱柱。
[0006]根据本发明的实施例，上述延长色谱柱使用寿命的清洗方法还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一:
[0007]根据本发明的实施例，所述第一清洗采用20?50体积％的磷酸进行至少I小时。20?50体积％的磷酸可有效溶解色谱柱中的残留样品，清洗时间可根据流速进行相应调整，清洗时间和流速相匹配可有效清洗色谱柱中的残留样品，但清洗时间应至少保证在I小时以上，以保证对残留样品有效清洗。
[0008]根据本发明的实施例，所述第二清洗采用5?10体积％的硝酸进行至少I小时。5?10体积％的硝酸可进一步有效溶解色谱柱中没有被磷酸溶解的残留样品，并在管道内部形成均匀光滑的氧化膜，防止硝酸对管道的过渡腐蚀，起到有效和恰当的保护作用。清洗时间至少在I小时以上，可保证对色谱柱中残留样品的进一步彻底清洗。根据本发明的实施例，清洗时间可根据流速进行相应调整，清洗时间和流速相匹配可进一步彻底清洗色谱柱中的残留样品。
[0009]根据本发明的实施例，所述有机溶剂包括选自甲醇和乙腈的至少之一。本发明实施例的方法最后采用甲醇或乙腈对色谱柱进行清洗，清洗后的色谱柱及其管路中充满甲醇或乙腈保存待用，因此，有机溶剂采用甲醇或乙腈的至少之一，可简化清洗步骤，在经过前面所述的磷酸和硝酸的依次清洗后，使用性质温和的甲醇或乙腈可有效保护色谱柱，防止色谱柱被过渡腐蚀，进一步延长色谱柱的使用寿命。
[0010]根据本发明的实施例，在进行所述第一清洗之前，进一步包括:采用超纯水对所述色谱柱进行预清洗至少20分钟。超纯水预清洗至少20分钟可预先将色谱柱及管路中的较易被冲洗掉的样品残留冲洗掉，进而进一步加大磷酸或硝酸与色谱柱中残留样品的接触面积，进而对色谱柱的清洗更加彻底。
[0011 ]根据本发明的实施例，在进行所述第一清洗之后和所述第二清洗之前，进一步包括:采用超纯水对所述色谱柱进行清洗至少20分钟，以便去除所述色谱柱中残留的所述磷酸。根据本发明的实施例，超纯水对所述色谱柱进行清洗至少20分钟，从色谱仪管道中流出的水检测为中性，是对色谱柱中残留磷酸冲洗干净的指示。采用超纯水冲洗色谱柱中的残留磷酸，有利于后续硝酸对色谱柱中残留样品的进一步有效冲洗和溶解。
[0012]根据本发明的实施例，在进行所述第二清洗之后和所述第三清洗之前，进一步包括:采用超纯水对所述色谱柱进行清洗至少20分钟，以便去除所述色谱柱中残留的所述硝酸。根据本发明的实施例，超纯水对所述色谱柱进行清洗至少20分钟，从色谱仪管道中流出的水检测为中性，是对色谱柱中残留硝酸冲洗干净的指示。采用超纯水冲洗色谱柱中的残留硝酸，避免了残留硝酸在色谱柱保存过程中对色谱柱的过渡腐蚀，进而进一步提高了色谱柱的使用寿命。
[0013]在本发明的第二方面，本发明提出了一种延长色谱柱使用寿命的清洗方法。根据本发明的实施例，所述方法包括:(I)采用超纯水对色谱柱进行预清洗20分钟，(2)采用30体积％磷酸对经过所述预清洗的色谱柱进行第一清洗3小时，(3)采用超纯水对经过所述第一清洗的色谱柱进行清洗20分钟，以便去除所述色谱柱中残留的磷酸，(4)采用5体积％硝酸对经过超纯水清洗的色谱柱进行第二清洗3小时，(5)采用超纯水对经过所述第二清洗的色谱柱进行再次清洗20分钟，以便去除所述色谱柱中残留的硝酸，以及(6)采用甲醇对经过超纯水再次清洗的色谱柱进行最后清洗。本发明实施例的清洗方法，可彻底清除色谱柱及管路中的残留样品，显著延长色谱柱的使用寿命。
【附图说明】
[0014]图1是根据本发明实施例的采用现有清洗方法清洗后的色谱柱的检测峰形图；
[0015]图2是根据本发明实施例的采用本发明的清洗方法清洗后的色谱柱的检测峰形图；
[0016]图3是根据本发明实施例的采用本发明的清洗方法清洗后的色谱柱检测三聚氰胺含量的结果图；以及
[0017]图4是根据本发明实施例的采用本发明的清洗方法清洗后的色谱柱检测三聚氰胺含量的另一结果图。
【具体实施方式】
[0018]下面详细描述本发明的实施例。下面通过描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
[0019]实施例1
[0020]在本实施例中，对清洗色谱柱的步骤进行详细描述:
[0021 ] I)超纯水清洗步骤:将栗关闭，输液管插入超纯水中，逆时针旋转栗阀，将色谱柱及管道系统中的气体排出，排气完毕后，拧紧栗阀，将栗打开，超纯水进入管道循环系统对色谱柱进行预清洗，清洗时间根据仪器自定，在本实施例中，发明人采用的清洗时间是20分钟。
[0022]2)30%磷酸溶液清洗步骤:将栗关闭，输液管插入30体积％的磷酸中，逆时针旋转栗阀，将色谱柱及管道系统中的气体排出，排气完毕后，拧紧栗阀，将栗打开，30%磷酸进入管道循环系统对色谱柱进行清洗，清洗时间根据仪器自定，在本实施例中，发明人采用的清洗时间是3小时。(备注:如小流速可设定时间为3小时以上，大流速可设定时间为I小时，但至少设定在I小时以上)。
[0023]3)超纯水清洗步骤:将栗关闭，输液管插入超纯水中，逆时针旋转栗阀，将色谱柱及管道系统中的气体排出，排气完毕后，拧紧栗阀，将栗打开，超纯水进入管道循环系统对色谱柱进行清洗，直到管道中流出的液体的pH呈中性。在本实施例中，清洗时间是20分钟，管道中流出的液体的pH呈中性。
[0024]4)5%硝酸溶液清洗步骤:将栗关闭，输液管插入5体积％的硝酸中，逆时针旋转栗阀，将色谱柱及管道系统中的气体排出，排气完毕后，拧紧栗阀，将栗打开，5%硝酸进入管道循环系统对色谱柱进行清洗，清洗时间根据仪器自定，在本实施例中，发明人采用的清洗时间是3小时。(备注:如小流速可设定时间为3小时以上，大流速可设定时间为I小时，但至少设定在I小时以上。)
[0025]5)超纯水清洗步骤:将栗关闭，输液管插入超纯水中，逆时针旋转栗阀，将色谱柱及管道系统中的气体排出，排气完毕后，拧紧栗阀，将栗打开，超纯水进入管道循环系统对色谱柱进行清洗，直到管道中流出的液体的pH呈中性。在本实施例中，清洗时间是20分钟，管道中流出的液体的pH呈中性。
[0026]6)有机溶剂清洗清洗步骤:将栗关闭，输液管插入100%甲醇中，逆时针旋转栗阀，将色谱柱及管道系统中的气体排出，排气完毕后，拧紧栗阀，将栗打开，100%甲醇进入管道循环系统对色谱柱进行清洗，100%甲醇充满色谱柱及管路保存备用。(备注:也可使用100%乙腈溶液清洗管路，最后是100%乙腈充满色谱柱及管路保存备用)。
[0027]实施例2
[0028]在本实施例中，发明人对采用本发明的清洗方法清洗后的色谱柱与采用现有清洗方法清洗后的色谱柱进行检测峰形分析，结果如图1和图2所示，其中，图1显示了采用现有清洗方法清洗后的色谱柱使用2个月后，柱效下降，标样峰面积出现拖尾现象，图2显示了采用本发明的清洗方法清洗后的色谱柱使用17个月后，检测标样峰面积正常。
[0029]实施例3
[0030]在本实施例中，发明人使用采用本发明的清洗方法清洗后的色谱柱进行三聚氰胺的检测，检测方法依据国标GB6682-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》和TQM(T)72-1042-2《液相法检测与乳制品、饲料、原料中三聚氰胺残留量作业指导书》，检测结果如图3和图4所示。检测结果显示，使用本发明提出的清洗方法清洗后的色谱柱，标准品峰型以及加标样品目标峰峰型完全对称，对称因子均在要求范围内，检测结果符合国标。
[0031 ] 实施例4
[0032]在本实施例中，发明人对使用本发明的清洗方法后的色谱柱的更换频率进行了统计，发现:2013年3月发明人化验室一的WATRS2695/2489高效液相色谱仪使用本发明的方法进行清洗一次，直到2015年11月更换过2根色谱柱，而在此之前，没有采用本发明的清洗方法，每隔1-2月就要更换I根色谱柱;发明人化验室二 2013年3月-2015年11月共节约了8根色谱柱，节省了7840元；蒙牛太原、焦作、唐山检验处使用的WATRS2695/2489高效液相色谱仪耗材费用大幅降低，每个检验处能够节省3000-4000元。
[0033]综上，可以分析得出:使用本发明所提出的清洗方法后，色谱柱及管路内壁不会残留杂质，检测的标准样品图谱峰型正常，没有拖尾现象，色谱柱柱效高，显著延长了色谱柱的使用寿命及色谱柱的利用率，节约了色谱柱的使用成本，提高了整体工作效率。
[0034]在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
[0035]尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
【主权项】
1.一种延长色谱柱使用寿命的清洗方法，其特征在于，包括: 利用磷酸，对所述色谱柱进行第一清洗； 利用硝酸，对经过所述第一清洗的色谱柱进行第二清洗；以及 利用有机溶剂，对经过所述第二清洗的色谱柱进行第三清洗。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一清洗采用20?50体积％的磷酸进行至少I小时。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二清洗采用5?10体积％的硝酸进行至少I小时。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂包括选自甲醇和乙腈的至少之一O5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在进行所述第一清洗之前，进一步包括: 采用超纯水对所述色谱柱进行预清洗至少20分钟。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在进行所述第一清洗之后和所述第二清洗之前，进一步包括: 采用超纯水对所述色谱柱进行清洗至少20分钟，以便去除所述色谱柱中残留的所述磷酸。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在进行所述第二清洗之后和所述第三清洗之前，进一步包括: 采用超纯水对所述色谱柱进行清洗至少20分钟，以便去除所述色谱柱中残留的所述硝酸。8.一种延长色谱柱使用寿命的清洗方法，其特征在于，包括: (1)采用超纯水对色谱柱进行预清洗20分钟， (2)采用30体积％磷酸对经过所述预清洗的色谱柱进行第一清洗3小时， (3)采用超纯水对经过所述第一清洗的色谱柱进行清洗20分钟，以便去除所述色谱柱中残留的磷酸， (4)采用5体积％硝酸对经过超纯水清洗的色谱柱进行第二清洗3小时， (5)采用超纯水对经过所述第二清洗的色谱柱进行再次清洗20分钟，以便去除所述色谱柱中残留的硝酸，以及 (6)采用甲醇对经过超纯水再次清洗的色谱柱进行最后清洗。
【文档编号】B08B3/04GK105964606SQ201610259783
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年4月22日
【发明人】李婉贞, 苏倩
【申请人】内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司