专利名称：萃取叶绿素和检测叶绿素浓度的方法
萃取叶绿素和检测叶绿素浓度的方法
技术领域：
本发明涉及一种萃取叶绿素的方法，还涉及一种检测叶绿素浓度的方法。背景技术：
叶绿素是光合作用膜中的绿色色素，它是光合作用中捕获光的主要成分。叶绿素共有a、b、c、d和e等几种。凡进行光合作用时释放氧气的植物均含有叶绿素a ；叶绿素b 存在于高等植物、绿藻和眼虫藻中；叶绿素c存在于硅藻、鞭毛藻和褐藻中，叶绿素d存在于红藻。高等植物叶子本体中的叶绿素主要有叶绿素a和叶绿素b两种。叶绿素a的分子结构由4个吡咯环通过4个甲烯基连接形成环状结构，称为卟啉。卟啉环中央结合着1个镁原子，并有一环戊酮(V)，在环IV上的丙酸被叶绿醇酯化、皂化后形成钾盐具水溶性。它们不溶于水，而溶于有机溶剂，如乙醇、丙酮、乙醚、氯仿等，所以可利用有机溶剂来萃取植物体中的叶绿素。
发明内容本发明的目的是提供一种萃取和检测叶绿素的方法。本发明实施例提供一种萃取叶绿素的方法，所述方法包括如下步骤步骤一将植物叶子本体粉碎；步骤二 通过有机溶剂萃取叶绿素；步骤三将萃取好叶绿素的液体，由滤纸过滤，然后利用浓缩机浓缩液体；步骤四收集浓缩好的液体。优选地，在所述步骤一中，将植物叶子本体粉碎大小为0. 7毫米。优选地，在所述步骤一中，粉碎植物叶子本体之前，先将植物叶子本体先低温保存，并且进行晒干以蒸发植物叶子本体内的水份。优选地，在所述步骤一的植物叶子本体粉碎过程中，加入液态氮与植物叶子本体
一起粉碎。优选地，所述有机溶剂包括乙醇、丙酮、二甲基甲酰胺及二甲基亚砜中的一种或多种。优选地，在所述步骤二中，将萃取液置于暗室环境中完成，并利用离心机进行萃取。优选地，在所述步骤三中，所述滤纸为选自定性滤纸、定量滤纸、有机溶剂定量滤纸及玻璃纤维滤纸中的一种或多种。优选地，在所述步骤三中，控制过滤程序的时间，使得在M小时内完成过滤程序。优选地，在所述步骤四中，将收集好的浓缩液体放置于冷藏柜保存。优选地，在所述步骤四中，将冷藏柜的温度设为4摄氏度。本发明实施例还提供一种检测叶绿素浓度的方法，包括如下步骤利用可见光光谱仪检测萃取液中叶绿素特性吸收峰的强度。
优选地，由吸收峰的强度利用已知公式分别计算叶绿素a浓度、叶绿素b浓度及叶绿素总浓度。
包括附图以提供对于本发明的进一步理解，且附图并入本说明书中并且构成本说明书的一部份。
本发明之示范性实施例。在诸图中图1是自然界中的几种叶绿素种类列表图；图2是本发明较佳实施例中植物叶子本体保存的流程图；图3是本发明较佳实施例中萃取和检测叶绿素的流程图；图4是三种有机溶液吸收光谱对比图；以及图5是不同有机溶液中叶绿素浓度计算结果图。
具体实施方式下面结合附图和实施例对本发明实施例进行详细说明。图1是自然界中的几种叶绿素种类列表图。叶绿素是存在植物、藻类和蓝藻类中的光合色素，其中色素为二氢卟吩(Chlorin)。一般在生活中所常见的植物普遍存在叶绿素 a和叶绿素b，在本发明实施例中，选定陆生植物为萃取对象，具体步骤如下所述。图2是本发明较佳实施例中植物叶子本体保存的流程图。如图2所示，植物叶子本体摘除后，先用低温的方式做保鲜的工作，最后将植物叶子本体晒干以将多余的水分蒸发。图3是本发明较佳实施例中萃取叶绿素的流程图。如图3所示，在步骤一 Sl中，进行植物叶子本体的粉碎动作。首先获取植物叶子本体并进行图2所示的预处理。用液态氮浸泡经过步骤一处理后的植物叶子本体，然后利用粉碎机将植物叶子本体磨成大小为0. 7 毫米(mm)的细粉末。萃取分析前的细粉末需放置于黑暗且低温的条件下储藏。粉碎机可采用一般食品用的果汁机及制粉机，但是在粉碎的过程中会有温度的问题，影响到实验，所以在实验的粉碎过程中加入液态氮与植物叶子本体一起粉碎。在步骤二 S2中，进行叶绿素的溶液萃取动作。在萃取叶绿素的过程中，可使用以下溶液的一种或多种乙醇、丙酮、二甲基二酰胺(DMF)及二甲亚砜(DMSO)，将上述的各种溶液分别加入磨成的细粉末，然后利用离心机萃取叶绿素，在萃取时，实验条件优选为暗室。乙醇及丙酮这二种溶液较容易挥发，在实验上非常方便，二甲基二酰胺及二甲亚砜对人体伤害较大，在做二甲基二酰胺及二甲亚砜萃取时需注意挥发的气体，所以需要额外的设备，使溶液气体排出，主要利用真空烘箱以及排气柜，利用排气柜将挥发之气体排出。如果需要加速挥发气体，也可利用真空烘箱，用加热及抽真空的方式，加速气体排出。在步骤三S3中，进行叶绿素的过滤、浓缩动作。将萃取好的液体，优选在M小时内，以过滤器将植物叶子本体细粉末滤除，主要经由滤纸滤除不要的部分。不同的滤纸有不同的效果，大致可分为定性滤纸、定量滤纸、有机溶液定量滤纸及玻璃纤维滤纸。可根据不同的需要挑选滤纸。滤除好的液体，可以利用浓缩机，将液体浓缩，但注意要避免过度抽干。在步骤四S4中，进行保存动作。滤除好的溶液需放置在冷藏柜中，最佳温度为4
4摄氏度。滤除好的溶液应尽快完成叶绿素a及叶绿素b的检测，无法立即检测时，可将溶液放置于零下20摄氏度暗冷藏，最长可保存14天；放置于零下70摄氏度暗冷藏，最长可保存三个月。可利用可见光光谱仪来检测用不同溶液中萃取的叶绿素a、叶绿素b波长的吸收强度。图4是三种溶液吸收光谱对比图，图5是不同有机溶液中叶绿素浓度计算结果图。其中a为DMF溶液，b为丙酮溶液，c为DMSO溶液。由图可知，对于从菠菜中提取的叶绿素而言，662nm附近为叶绿素a的特性吸收峰值，455nm为叶绿素b特性吸收峰值，利用已知公式分别可计算叶绿素a浓度、叶绿素b浓度与叶绿素总浓度，DMF溶液在三种溶液中萃取叶绿素的浓度含量最大，叶绿素萃取率最高。本发明的实施例主要针对电池前置作业的部分，萃取制造电池时需要用到的叶绿素，但利用叶绿素制成电池后，可以利用仪器检测，作用后电池中叶绿素变化。例如，PH/ ORP (氧化还原电位)值的量测，检测电池使用的过程中，是否产生有毒物质化合物。以上仅为本发明的优选实施案例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种萃取叶绿素的方法，其特征在干，所述方法包括如下步骤步骤ー将植物叶子本体粉碎；步骤ニ 通过有机溶剂萃取叶绿素；步骤三将萃取好叶绿素的液体，由滤纸过滤，然后利用浓缩机浓缩液体；步骤四收集浓缩好的液体。
2.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，在所述步骤一中，将植物叶子本体粉碎大小为0. 7毫米。
3.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，在所述步骤一中，粉碎植物叶子本体之前，先将植物叶子本体先低温保存，并且进行晒干以蒸发植物叶子本体内的水份。
4.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，在所述步骤一的植物叶子本体粉碎过程中，加入液态氮与植物叶子本体一起粉碎。
5.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，所述有机溶剂包括乙醇、丙酮、ニ甲基甲酰胺及ニ甲基亚砜中的ー种或多种。
6.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，在所述步骤ニ中，将萃取液置于暗室环境中完成，并利用离心机进行萃取。
7.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，在所述步骤三中，所述滤纸为选自定性滤纸、定量滤纸、有机溶剂定量滤纸及玻璃纤维滤纸中的ー种或多种。
8.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，在所述步骤三中，控制过滤程序的时间，使得在M小时内完成过滤程序。
9.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，在所述步骤四中，将收集好的浓缩液体放置于冷藏柜保存。
10.根据权利要求1所述的萃取叶绿素的方法，其特征在干，在所述步骤四中，将冷藏柜的温度设为4摄氏度。
11.一种检测叶绿素浓度的方法，其特征在干，所述方法包括如下步骤利用可见光光谱仪检测萃取液中叶绿素特性吸收峰的強度。
12.根据权利要求11所述的检测叶绿素浓度的方法，其特征在干，由吸收峰的強度利用已知公式分别计算叶绿素a浓度、叶绿素b浓度及叶绿素总浓度。
全文摘要
一种萃取叶绿素的方法，该方法包括如下步骤步骤一将植物叶子本体粉碎；步骤二通过有机溶剂萃取叶绿素；步骤三将萃取好叶绿素的液体，由滤纸过滤，然后利用浓缩机浓缩液体；步骤四收集浓缩好的液体；本发明还提供一种检测叶绿素浓度的方法。
文档编号B01D11/02GK102532146SQ20101058526
公开日2012年7月4日 申请日期2010年12月13日 优先权日2010年12月13日
发明者廖重宾 申请人:依诺特生物能量控股公司