本发明涉及微生物除臭技术领域，尤其涉及一种公厕微生物除臭剂制备方法及使用方法。
背景技术：
公厕作为一个城市公共设施的重要组成部分，因其特殊用途往往成为人们对一个城市的第一印象，是一个城市面貌和人居环境的体现。近年来，在“厕所革命”这一民生领域的行动下，全国公厕硬件设施环境有所改善，但因为公厕的特殊用途在人流量大的情况下还是会出现臭味弥漫的情况。而且公厕化粪池一直以来靠自然菌种腐化，处理能力弱，时间一长会出现如厕纸等纤维物漂浮结块堵塞管道，出现返味现象，各大城市污水管道井口臭味弥漫，严重影响人们对一个城市的观感。现有的处理方法是定期请人对化粪池进行清掏，但清掏出来的漂浮物又成为了难处理的恶臭固废物。因此公厕内空气除臭和化粪池清理成为大家研究的一个重要课题。
目前，市场上已有除臭剂主要有植物除臭剂和化学除臭剂，其中，植物除臭剂提取工艺复杂，生产成本较高；化学除臭剂除成本高外，还可能造成二次污染。利用微生物作为除臭剂是一个世界性的趋势，也是我国环保领域的一项重大技术突破，其使用成本低，能从恶臭气体生产的源头上对气体进行吞噬及分解，有标本兼治的除臭效果。但是目前国内市场上的微生物除臭剂虽然能在不同程度上缓解恶臭固废物的恶臭，但效果仍有待提升，且生产工艺亦较为繁琐。
因此，实有必要提供一种新的公厕微生物除臭剂制备方法及使用方法解决上述技术问题。
技术实现要素：
本发明的目的是克服上述技术问题，提供一种有效去除恶臭且能有效处理恶臭固废物的公厕微生物除臭剂制备方法及使用方法。
本发明提供一种公厕微生物除臭剂制备方法，所述制备方法包括：
通过平板培养基采集菌样，并在平板培养基中加入0.05w/v吲哚和粪臭素进行微生物富集和驯化后分离得到酿酒酵母菌菌种、短乳杆菌菌种以及枯草芽孢杆菌菌种；
先对酿酒酵母培养基以121℃灭菌20min，再将酿酒酵母菌菌种接种到酿酒酵母培养基中进行培养，以30℃～32℃、180rpm培养24h，其中酿酒酵母培养基为：酵母膏0.5wt％、氮含量40％的玉米浆1.5wt％、玉米粉0.5wt％、蔗糖3wt％，(nh4)3po4·3h2o0.1wt％、氯化钠0.5％wt、碳酸钠0.2wt％，其余为水；先对短乳杆菌培养基以121℃灭菌20min，再将短乳杆菌菌种接种到短乳杆菌培养基中进行培养，以34℃～36℃静置培养32h，其中短乳杆菌培养基为：酵母膏1wt％、蛋白胨0.5wt％、氮含量40％的玉米浆2wt％、醋酸钠0.5wt％、柠檬酸二铵0.2wt％、葡萄糖1.5wt％、硫酸镁0.06wt％、硫酸锰0.03wt％，其余为水；先对枯草芽孢杆菌培养基以121℃灭菌20min，再将枯草芽孢杆菌菌种接种到枯草芽孢杆菌培养基中进行培养，以34℃～36℃、180rpm培养18h，其中枯草芽孢杆菌培养基为：麦麸6wt％、氮含量40％的玉米浆2wt％、氯化钠0.5％、碳酸钠0.2wt％、纤维质粉1wt％、葡萄糖0.3wt％，其余为水；
种子罐培养基和发酵罐培养基均为：糖蜜10wt％，氮含量40％的玉米浆1wt％、麦麸7wt％、硫酸铵0.5wt％，硫酸镁0.05wt％、磷酸氢二钾0.2wt％、碳酸钠0.2wt％，ph值6.0～6.5；
种子罐培养基温度冷却至34℃～36℃时接入占种子罐培养基总体积2％的芽孢杆菌种子液、2％的酿酒酵母种子液和1％的短乳杆菌种子液，搅拌速度180～220r/min，通气量0.3-0.4:1v/v，罐压0.03～0.04mpa，发酵9h-10h后芽孢杆菌菌体90％以上成单体，种子罐培养基ph为5.5-6时形成种子罐种子液并转发酵罐；
发酵罐培养基温度冷却至34℃～36℃时接入种子罐种子液，搅拌速度180～220r/min，通气量0.3-0.4:1v/v，罐压0.03～0.04mpa，以35℃发酵8h后，发酵过程中调节ph为5.5～6，缺氧培养22h-24h，当芽孢杆菌含菌量1×109～2×109cfu/ml，酿酒酵母菌含菌量8×108～1.5×109cfu/ml，短乳杆菌含菌量4×109～5×109cfu/ml时，通过压滤得到虑液即制备得到公厕微生物除臭剂。
优选的，种子罐培养基和发酵罐培养基装罐总体积均不超过70％，且均在发酵罐中以121℃灭菌30min。
优选的，发酵罐发酵过程中以10wt％碳酸钠补料调节ph为5.5～6。
优选的，通过板框压滤得到虑液即制备得到公厕微生物除臭剂。
本发明还提供一种公厕微生物除臭剂使用方法，其将本发明所述的公厕微生物除臭剂用水稀释30倍活化菌种后，以喷10s停喷30min的频率进行喷洒。
优选的，所述使用方法还包括以每天每平方米3l的量进行喷洒。
与相关技术相比，本发明的公厕微生物除臭剂制备方法及使用方法，制备得到的公厕微生物除臭剂包含短乳杆菌、酿酒酵母菌、产纤维素酶芽孢杆菌，喷洒于公厕空气中利用酸性菌液吸收空气中的臭气，利用微生物代谢分解臭气中的氨气和硫化氢等臭味分子，转化为不易挥发的有机物从而达到除臭的目的，同时菌种随水流进入化粪池，改善公厕化粪池内菌种群落组成加速固化物腐化，芽孢杆菌产纤维素酶能有效的分解化粪池中的纤维素，降低市政工作压力，从而有效去除恶臭且能有效处理恶臭固废物，而且用于公厕除臭时氨气的去除率达81.8％，对硫化氢的去除率达70.0％，对粪臭素的去除率达79.2％。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面结合实施例对本发明进行更全面的描述。虽然给出了本发明的较佳的实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
本发明提供一种公厕微生物除臭剂制备方法，所述制备方法包括：
通过平板培养基采集菌样，并在平板培养基中加入0.05w/v吲哚和粪臭素进行微生物富集和驯化后分离得到酿酒酵母菌菌种、短乳杆菌菌种以及枯草芽孢杆菌菌种；
先对酿酒酵母培养基以121℃灭菌20min，再将酿酒酵母菌菌种接种到酿酒酵母培养基中进行培养，以30℃～32℃、180rpm培养24h，其中酿酒酵母培养基为：酵母膏0.5wt％、氮含量40％的玉米浆1.5wt％、玉米粉0.5wt％、蔗糖3wt％，(nh4)3po4·3h2o0.1wt％、氯化钠0.5％wt、碳酸钠0.2wt％，其余为水；先对短乳杆菌培养基以121℃灭菌20min，再将短乳杆菌菌种接种到短乳杆菌培养基中进行培养，以34℃～36℃静置培养32h，其中短乳杆菌培养基为：酵母膏1wt％、蛋白胨0.5wt％、氮含量40％的玉米浆2wt％、醋酸钠0.5wt％、柠檬酸二铵0.2wt％、葡萄糖1.5wt％、硫酸镁0.06wt％、硫酸锰0.03wt％，其余为水；先对枯草芽孢杆菌培养基以121℃灭菌20min，再将枯草芽孢杆菌菌种接种到枯草芽孢杆菌培养基中进行培养，以34℃～36℃、180rpm培养18h，其中枯草芽孢杆菌培养基为：麦麸6wt％、氮含量40％的玉米浆2wt％、氯化钠0.5％、碳酸钠0.2wt％、纤维质粉1wt％、葡萄糖0.3wt％，其余为水；
种子罐培养基和发酵罐培养基均为：糖蜜10wt％，氮含量40％的玉米浆1wt％、麦麸7wt％、硫酸铵0.5wt％，硫酸镁0.05wt％、磷酸氢二钾0.2wt％、碳酸钠0.2wt％，ph值6.0～6.5；
种子罐培养基温度冷却至34℃～36℃时接入占种子罐培养基总体积2％的芽孢杆菌种子液、2％的酿酒酵母种子液和1％的短乳杆菌种子液，搅拌速度180～220r/min，通气量0.3-0.4:1v/v，罐压0.03～0.04mpa，发酵9h-10h后芽孢杆菌菌体90％以上成单体，种子罐培养基ph为5.5-6时形成种子罐种子液并转发酵罐；
发酵罐培养基温度冷却至34℃～36℃时接入种子罐种子液，搅拌速度180～220r/min，通气量0.3-0.4:1v/v，罐压0.03～0.04mpa，以35℃发酵8h后，发酵过程中调节ph为5.5～6，缺氧培养22h-24h，当芽孢杆菌含菌量1×109～2×109cfu/ml，酿酒酵母菌含菌量8×108～1.5×109cfu/ml，短乳杆菌含菌量4×109～5×109cfu/ml时，通过压滤得到虑液即制备得到公厕微生物除臭剂。
本实施方式中，种子罐培养基和发酵罐培养基装罐总体积均不超过70％，且均在发酵罐中以121℃灭菌30min。
本实施方式中，发酵罐发酵过程中以10wt％碳酸钠补料调节ph为5.5～6。
本实施方式中，通过板框压滤得到虑液即制备得到公厕微生物除臭剂。
本发明还提供一种公厕微生物除臭剂使用方法，其将本发明所述的公厕微生物除臭剂用水稀释30倍活化菌种后，以喷10s停喷30min的频率进行喷洒。
具体的，所述使用方法还包括以每天每平方米3l的量进行喷洒。
实施例一
通过平板培养基采集菌样，并在平板培养基中加入0.05w/v吲哚和粪臭素进行微生物富集和驯化后分离得到酿酒酵母菌菌种、短乳杆菌菌种以及枯草芽孢杆菌菌种。
配置好酿酒酵母培养基、短乳杆菌培养基以及枯草芽孢杆菌培养基后置于灭菌锅中121℃灭菌20min，待培养基冷却后，将酿酒酵母菌种接种于酿酒酵母培养基中，以30℃～32℃、180rpm培养24h；将短乳杆菌菌种接种于短乳杆菌培养基中密封后，置于培养箱中以34℃～36℃静置培养32h；将枯草芽孢杆菌菌种接种于枯草芽孢杆菌培养基中，以34℃～36℃、180rpm培养18h；
其中酿酒酵母培养基为：酵母膏0.5wt％、氮含量40％的玉米浆1.5wt％、玉米粉0.5wt％、蔗糖3wt％、(nh4)3po4·3h2o0.1wt％、氯化钠0.5wt％、碳酸钠0.2wt％，其余为水。
其中短乳杆菌培养基为：酵母膏1wt％、蛋白胨0.5wt％、氮含量40％的玉米浆2wt％、醋酸钠0.5wt％、柠檬酸二铵0.2wt％、葡萄糖1.5wt％，硫酸镁0.06wt％、硫酸锰0.03wt％，其余为水。
其中枯草芽孢杆菌培养基为：麦麸6wt％、氮含量40％的玉米浆2wt％、氯化钠0.5％、碳酸钠0.2wt％、纤维质粉1wt％、葡萄糖0.3wt％，其余为水。
种子罐培养基和发酵罐培养基的制备：糖蜜10wt％，氮含量的40％玉米浆1wt％、麦麸7wt％、硫酸铵0.5wt％，硫酸镁0.05wt％、磷酸氢二钾0.2wt％、碳酸钠0.2wt％；ph值6.0～6.5，装罐总体积不超过70％，在发酵罐中121℃灭菌30min；
种子罐的培养：待种子罐培养基温度冷却至34℃～36℃时接入占种子罐培养基总体积2％的芽孢杆菌种子液、2％的酿酒酵母种子液和1的％短乳杆菌种子液，搅拌速度180～220r/min，通气量0.3-0.4:1v/v，罐压0.03～0.04mpa，发酵9h-10h后芽孢杆菌菌体90％以上成单体，染色均匀，种子罐培养基ph5.5-6，制得种子液，转发酵罐；
发酵罐培养：待发酵罐培养基温度冷却至34℃～36℃时接入种子罐种子液，搅拌速度180～220r/min，通气量0.3-0.4:1v/v，罐压0.03～0.04mpa，在35℃温度环境下发酵8h后，以10wt％碳酸钠连续补料调节ph在5.5～6，缺氧培养22h-24h，当芽孢杆菌含菌量1×109cfu/ml，酿酒酵母菌含菌量1×109cfu/ml，短乳杆菌含菌量5×109cfu/ml时，经板框压滤后得到虑液，即制备得到公厕微生物除臭剂。
将公厕微生物除臭剂用于公厕除臭，试验加施用水做对照，公厕微生物除臭剂用水稀释30倍后，用全自动定时喷雾除臭设备以喷10s停喷30min的频率，以每天每平米3l量均匀喷洒于公厕上方空间中。喷施时气温28℃～30℃，在喷施24h后，根据无组织废气：hj/t55-2000《大气污染物无组织排放监测技术导则》进行采样，用亚甲基蓝分光光度法《水和废气监测分析方法》(第四版增补版)检测硫化氢，用纳氏试剂分光光度法hj533-2009检测氨气，用潜艇舱室空气45种组分检测方法吲哚、粪臭素含量的测定气相色谱法gjb533.30-1988检测吲哚、粪臭素浓度，除臭检测结果见下表。
利用本发明除臭剂，其对氨气的去除率达81.8％，对硫化氢的去除率达70.0％对粪臭素的去除率达79.2％。连续施用90天后二级化粪池井口粪便硬块消失。
与相关技术相比，本发明的公厕微生物除臭剂制备方法及使用方法，制备得到的公厕微生物除臭剂包含短乳杆菌、酿酒酵母菌、产纤维素酶芽孢杆菌，喷洒于公厕空气中利用酸性菌液吸收空气中的臭气，利用微生物代谢分解臭气中的氨气和硫化氢等臭味分子，转化为不易挥发的有机物从而达到除臭的目的，同时菌种随水流进入化粪池，改善公厕化粪池内菌种群落组成加速固化物腐化，芽孢杆菌产纤维素酶能有效的分解化粪池中的纤维素，降低市政工作压力，从而有效去除恶臭且能有效处理恶臭固废物，而且用于公厕除臭时氨气的去除率达81.8％，对硫化氢的去除率达70.0％，对粪臭素的去除率达79.2％。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其它相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。