专利名称：生物组织切片制作方法
技术领域：
本发明涉及一种生物组织切片制作的方法。
背景技术：
现有生物组织切片制作时，将生物组织标本固定在切片机的载物台上面，固定的方式主要有低温冻结固定或石蜡包埋固定；工作时载物台不断来回运动，来回运动方向与载物台表面所在的平面基本平行，载物台每进行一趟来回运动后还自动步进一小段距离，步进运动的方向与来回运动的方向垂直，从而带动组织标本相对于静止的刀具来回运动和步进运动，将组织标本逐步切成切片。这种方法适合应用于对所得切片各层组织间的界面平整度要求不高的情况，例如应用在医院进行病理诊断时，因为医院病理诊断主要是观察生物标本是否存在病变细胞或观察细胞病变的程度，一般不必要求待检的生物组织标本具有特定方向或特定角度的切面。
但当医学上研究形状扁平且具有层状结构的组织标本(如皮肤或粘膜等)时，经常希望切面垂直于标本各层组织间的界面，使所得切片各层组织间的界面平直，特别是希望切片中的目标细胞或目标组织层可以在显微镜下方便快捷地挖取出来，这种情况下，传统生物组织切片制作方法的缺点便显现出来，因为1、如果将该组织标本展平并平铺在载物台上，则该扁平组织标本平铺伸展的方向将与载物台来回运动的方向基本平行，所得到切面将与组织标本各层间的界面基本平行，得到的切面在理论上很可能只是组织标本的某一层，而无法得到与组织标本各层间界面垂直的理想切面；2、如果将该标本以自然、随机的形态固定于载物台上，则所得切面各层组织间的界线将会褶皱、不平直，更不利于在显微镜下将切片中的目标细胞或目标组织层方便直捷地挖取出来。
发明内容
本发明的目的是要提供一种生物组织切片制作方法，它适合应用于形状扁平且具有层状结构的生物组织标本，能使切面垂直于组织标本各层间的界面，所得切片各层间的界面平直，便于在显微镜下将切片中的目标细胞或目标组织层方便快捷地挖取出来。
为实现以上目的，本发明的生物组织切片制作方法包括以下主要步骤A、取出形状扁平且具有层状结构的组织标本，将其拉伸展平并固定在一个倒T形非金属支架的竖板上，将倒T形非金属支架的底板平放并固定在切片机的载物台上，使非金属支架的竖板位于刀具刀锋的正前方，并使非金属支架的竖板所在平面与载物台工作时来回运动方向的夹角小于30°；B、驱动切片机的载物台运动，载物台带动非金属支架和组织标本相对于刀具运动，刀具同时将组织标本连同非金属支架的竖板逐步切成切片。上述所谓“倒T形非金属支架”，是指由竖板和底板构成的非金属支架，其中竖板和底板互相垂直并连为一体，形成倒T字形(即“”形)。所谓“工作时载物台来回运动方向”，对于滑动式切片机而言，是指工作时载物台来回运动的直线轨迹的方向；对于旋切式切片机而言，是指工作时载物台每一趟来回运动中一个单程的起点和终点之间连线的方向。
较好的是上述A步骤中，组织标本可以采用冻结的方式固定在非金属支架的竖板上。
更好的是在上述B步骤之后，组织标本和非金属支架竖板被切出来的切片停留在刀具侧面上方，此后，采用载玻片将组织标本的切片黏附起来，将组织标本的切片随同载玻片移开，而非金属支架竖板的切片仍留在刀具上方，由此实现组织标本切片与非金属支架竖板切片的分离。
上述A步骤中，组织标本也可以采用石蜡包埋的方式固定在非金属支架的竖板上。
上述A步骤中，非金属支架的竖板所在平面最好与载物台工作时来回运动的方向平行。
非金属支架可以为塑料支架。
非金属支架也可以为有机玻璃支架。
上述切片机可以为滑动式切片机。这样工作时载物台来回运动的轨迹为直线段。
上述切片机可以为旋切式切片机。这样工作时载物台来回运动的轨迹为弧线段(近似为直线段)。
本发明具有以下优点和效果1.本发明方法将非金属支架的竖板直立于刀具刀锋的正前方，并使倒T形非金属支架的竖板所在平面与载物台来回运动方向基本平行，扁平组织标本摊平并固定在非金属支架的竖板上，这样，刀刃前锋线相对运动(以组织标本为参照物)所形成的轨迹面大致垂直于组织标本各层间的界面，能使切面垂直于组织标本各层间的界面，所得切片各层间的界面平直，层次分明地展示出组织标本的解剖结构，也便于在显微镜下将切片中的目标细胞或目标组织层方便快捷地挖取出来。
2、本发明将组织标本连同非金属支架竖板一同切出的方法，是前所未有的创新方法(假如按传统思维，将非金属支架的竖板当成砧板，则非金属支架的竖板将会被横立在刀具的前方，这样会造成以下缺点①、刀锋与组织标本接触面积大，切削力作用点分散，切削时阻力大，刀具对非金属支架所产生的推力也大；②、在载物台每一个来回运动行程中，大部分行程处于空载的状态，只有在某一瞬间，组织标本突然接触到刀锋，非金属支架在受刀具突然撞击后容易倾倒；③、组织标本被切成长条形的切片后，长条形的切片只能停留在刀具刀刃边缘线附近上方，容易掉落，不易收集)。而本发明方法将非金属支架的竖板纵向直立在刀具的前方，具有以下优点①、切削过程平稳，刀锋切削力作用点集中，切削时阻力小，反过来，非金属支架在切削过程中受到的推力也较小，非金属支架稳当；②、切削过程中，所得切片不会横向地停留在刀具刀刃边缘线附近上方，而会逐渐向刀具纵深方向推进，当被切成长条形的切片后，该长条形切片停放在刀具侧面上方的方向将与刀刃边缘线垂直，停放稳当，便于下一步切片的收集工作。
3、对于组织标本采用冻结的方式固定在非金属支架竖板上的方式而言，由于组织标本和非金属支架变形程度不同，而且一部分切削力会分解成为横向的推力，在各种材料和力学因素综合作用下，使两者在切削过程中黏结力逐渐变弱，加上两者在被切成长条形切片后接触面积很小，会使两者一同停留在刀具侧面上方时，黏结力变得很薄弱，因此可以采用载玻片黏附、收集组织标本切片，由于组织标本切片与载玻片之间存在黏结力，而非金属支架切片与载玻片之间不存在黏结力，因此组织标本切片将随同载玻片被移开，这样很巧妙、简单易行地实现组织标本切片与非金属支架切片的最终分离，更进一步体现出本发明的创造性。
图1是本发明第一个具体实施例中使用的倒T形非金属支架的形状结构示意图。
图2是图1中倒T形非金属支架的侧视图。
图3是本发明第一个具体实施例的一种工作状态示意图。
图4是图3中组织标本和非金属支架的位置关系示意图。
图5是本发明第一个具体实施例的另一种工作状态示意图。
具体实施例方式
实施例一该方法应用于制作形状扁平且具有三层结构(即图4中41层、42层、43层)的组织标本切片，包括以下主要步骤A、取出具有层状结构的扁平组织标本4，利用自身的黏结力将其初步粘附在一个倒T形塑料支架1的竖板12上，并拉伸展平；将倒T形塑料支架的底板11平放并粘固在切片机的载物台2上，使塑料支架的竖板12位于刀具3刀锋的正前方，使塑料支架的竖板12所在平面与载物台3工作时来回运动方向(即图3中箭头方向)基本平行，如图3所示；将扁平组织标本4冷冻，使其进一步冻结固定在塑料支架的竖板12上；B、驱动切片机的载物台3来回运动，载物台3带动塑料支架1和组织标本4相对于刀具3来回运动，如图3中箭头所示，刀刃前锋线ab相对运动(以组织标本为参照物)所形成的轨迹面大致垂直于生物组织标本各层间的界面，刀具3同时将组织标本4连同塑料支架的竖板12逐步切成切片(其中一次分切过程的分切线轨迹如图4中虚线所示。每分切一次，载物台2就向上移动一定距离，该距离就是每次切削的厚度，这与传统方法一样)；C、组织标本切片44和塑料支架竖板切片124停留在刀具侧面上方，长条形切片停放在刀具侧面上方的方向将与刀刃前锋线ab垂直(图5所示)，接着采用载玻片将组织标本的切片黏附起来，组织标本的切片44随同载玻片被移开，而塑料支架竖板的切片124仍留在刀具上方，由此实现组织标本的切片与非金属支架竖板的切片分离。上述所谓“倒T形的非金属支架”，是指由竖板12和底板11构成的塑料支架，其中竖板和底板互相垂直并连为一体，形成倒T字形(即“”形)，如图1、图2所示。
实施例二该方法包括以下主要步骤A、将具有层状结构的扁平组织标本摊平在倒T形的有机玻璃支架的竖板上，用石蜡包埋，使有机玻璃支架的底板平放并固定在旋切式切片机的载物台上，使有机玻璃支架的竖板位于刀具刀锋的正前方，并使有机玻璃支架的竖板所在平面与载物台每一趟来回运动起点和终点之间连线的方向相交成约30°的夹角；B、驱动切片机的载物台运动，载物台带动有机玻璃支架和组织标本相对于刀具运动，刀具将组织标本连同塑料支架的竖板逐步切成切片；C、将B步骤所得的切片放入热水，组织标本切片与有机玻璃切片分离，有机玻璃切片沉入水底，组织切片漂浮在水面，用载玻片将组织切片捞起并黏附，然后烘干。
权利要求
1.一种生物组织切片制作方法，包括以下主要步骤A、取出形状扁平且具有层状结构的组织标本，将其拉伸展平并固定在一个倒T形非金属支架的竖板上，使倒T形非金属支架的底板平放并固定在切片机的载物台上，使非金属支架的竖板位于刀具刀锋的正前方，并使非金属支架的竖板所在平面与载物台工作时来回运动方向的夹角小于30°；B、驱动切片机的载物台运动，载物台带动非金属支架和组织标本相对于刀具运动，刀具同时将组织标本连同非金属支架的竖板逐步切成切片。
2.根据权利要求1的生物组织切片制作方法，其特征在于上述A步骤中，组织标本采用冻结的方式固定在非金属支架的竖板上。
3.根据权利要求2的生物组织切片制作方法，其特征在于在上述B步骤之后，组织标本和非金属支架竖板被切出来的切片停留在刀具侧面上方，此后，采用载玻片将组织标本的切片黏附起来，将组织标本的切片随同载玻片移开，而非金属支架竖板的切片仍留在刀具上方，由此实现组织标本的切片与非金属支架竖板的切片分离。
4.根据权利要求1的生物组织切片制作方法，其特征在于上述A步骤中，组织标本采用石蜡包埋的方式固定在非金属支架的竖板上。
5.根据权利要求1至4任何一项的生物组织切片制作方法，其特征在于上述A步骤中，非金属支架的竖板所在平面与载物台工作时来回运动的方向平行。
6.根据权利要求1至4任何一项的生物组织切片制作方法，其特征在于非金属支架为塑料支架。
7.根据权利要求1至4任何一项的生物组织切片制作方法，其特征在于非金属支架为有机玻璃支架。
8.根据权利要求1至4任何一项的生物组织切片制作方法，其特征在于切片机为滑动式切片机。
9.根据权利要求1至4任何一项的生物组织切片制作方法，其特征在于切片机为旋切式切片机。
10.根据权利要求1至3任何一项的生物组织切片制作方法，其特征在于非金属支架的底板采用粘固的方式固定在切片机的载物台上。
全文摘要
一种生物组织切片制作方法，包括以下主要步骤A.将组织标本展平并固定在倒T形非金属支架竖板上，将支架底板平放并固定在载物台上，使支架竖板位于刀具正前方，并使支架竖板所在平面与载物台来回运动方向基本平行；B.切片机刀具同时将组织标本连同非金属支架的竖板逐步切成切片。本发明能使切面垂直于组织标本各层间的界面，所得切片各层间的界面平直，便于在显微镜下将切片中的目标细胞或目标组织层方便快捷地挖取出来。
文档编号G01N1/04GK1687735SQ20051003441
公开日2005年10月26日 申请日期2005年4月23日 优先权日2005年4月23日
发明者胡盛平 申请人:胡盛平