专利名称：青柏洁身洗液中苦参碱含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种苦参碱(C15H24N2O)含量测定方法，特别涉及青柏洁身洗液中的有效成分——苦参碱的测定方法。
背景技术：
青柏洁身洗液为一种中成药的妇科外用洗液，现收载于《国家中成药标准汇编中成药地方标准上升国家标准部分外科妇科分册》(国家药品监督管理局，2002)第339～342页，处方由下列药物组成苦参120g、黄连80g、黄柏120g、花椒40g、蛇床子120g、黄芪120g、何首乌120g、地肤子120g、大青叶120g、赤芍120g、当归120g、月桂醇硫酸钠4g、苯甲酸2g，制法为将以上十一味药材，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.20～1.25(50℃)的清膏，加入乙醇，使含醇量达70％，静置48小时，滤过，回收乙醇，加水至规定量，再加入月桂醇硫酸钠、苯甲酸使溶解，静置24小时，滤过，即得。青柏洁身洗液中的有效成分为苦参碱，在青柏洁身洗液现行标准的含量测定项中，对苦参碱含量测定是采用薄层色谱法对苦参碱进行扫描的方法，由于薄层色谱法操作过程繁琐，受薄层板、操作人员、仪器等因素影响太大，所以其重现性差，很难达到准确测定其中苦参碱的含量的目的，从而造成青柏洁身洗液质量可控性差。
发明内容
本发明的目的是针对上述技术中存在的不足之处，提供一种采用高效液相色谱法测定青柏洁身洗液中苦参碱(C15H24N2O)的方法。
该发明提供的高效液相色谱法测定青柏洁身洗液中苦参碱方法，其中色谱条件为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温15～52℃；以甲醇-水(水中含0.5～5％四氢呋喃及0.01～1％氨水)(0.5～1.5∶0.5～1.5)为流动相；流速0.5～2ml/min，检测波长202～280nm。
其中对照品溶液制备方法为精密称取苦参碱对照品适量，加甲醇配制成0.01～0.1mg/ml的溶液，即得。
其中供试品溶液制备方法为精密量取供试品5～20ml，加浓氨试液0.25～1ml，用氯仿振摇提取3次以上，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加少量氯仿(约5ml)溶解，装入碱性氧化铝柱(80～200目，1～5g)，氯仿-甲醇(2～10∶0～2)溶液10～50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
其中测定方法为分别精密吸取对照品溶液5～40μl，供试品溶液5～40μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。其计算方法为每毫升含苦参碱量＝样品峰面积/对照品峰面积×对照品浓度×样品稀释倍数。
采本发明的方法与现行检测方法薄层扫描法相比，具有快速、准确、重复性好的优点。它不受仪器、人员操作等因素影响，误差很小，结果可信。
具体实施例方式色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温42℃；以甲醇-水(含3％四氢呋喃，0.03％氨水)(1∶1)为流动相；流速0.9ml/min，检测波长220nm。理论塔板数按苦参碱计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加甲醇配制成0.02mg/ml的溶液，即得。
供试品溶液的制备 精密量取本品10ml，加浓氨试液0.5ml，用氯仿振摇提取4次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加少量氯仿(约5ml)溶解，装入碱性氧化铝柱(100目，3g)，氯仿∶甲醇(9∶1)20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。其计算方法为每毫升含苦参碱量＝样品峰面积/对照品峰面积×对照品浓度×50ml/10ml。
本品每1ml含苦参以苦参碱(C15H24N2O)计，不得少于0.12mg。
权利要求
1.青柏洁身洗液中苦参碱含量的测定方法，其特征在于包括下列步骤A、制备对照品溶液精密称取苦参碱对照品适量，加甲醇配制成0.01～0.1mg/ml的溶液；B、制备供试品溶液精密量取供试品5～20ml，加浓氨试液0.25～1ml，用氯仿振摇提取3次以上，每次15～20ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加约5ml氯仿溶解，装入1～5g、80～200目的碱性氧化铝柱，用2～10份氯仿0～2份甲醇溶液10～50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得。C、别精密吸取对照品溶液5～40μl，供试品溶液5～40μl，注入液相色谱仪，测定，计算得出结果。
2.根据权利要求1所述的青柏洁身洗液中苦参碱含量的测定方法，其特征在于其色谱条件为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温15～52℃；以0.5～1.5份甲醇-0.5～1.5份水为流动相；流速0.5～2ml/min，检测波长202～280nm。
3.根据权利要求2所述的青柏洁身洗液中苦参碱含量的测定方法，其特征在于所述水中含0.5～5％四氢呋喃及0.01～1％氨水。
4.根据权利要求1所述的青柏洁身洗液中苦参碱含量的测定方法，其特征在于所述苦参碱含量的计算方法为每ml含苦参碱量等于样品峰面积与对照品峰面积之比乘以对照品浓度再乘以样品稀释倍数。
全文摘要
本发明涉及一种青柏洁身洗液中苦参碱的测定方法，包括下列步骤制备对照品溶液精密称取苦参碱对照品适量，加甲醇配制成0.01～0.1mg/ml的溶液；制备供试品溶液精密量取本品5～20ml，加浓氨试液0.25～1ml，用氯仿振摇提取3次以上，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加少量氯仿(约5ml)溶解，装入碱性氧化铝柱(80～200目，1～5g)，氯仿－甲醇(2～10∶0～2)10～50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得，分别精密吸取对照品溶液5～40μl，供试品溶液5～40μl，注入液相色谱仪，测定，计算得出结果。采本发明具有快速、准确、重复性好的优点。它不受仪器、人员操作等因素影响，误差很小，结果可信度高。
文档编号G01N30/86GK101046467SQ200610060119
公开日2007年10月3日 申请日期2006年3月30日 优先权日2006年3月30日
发明者易八贤 申请人:国药控股深圳中药有限公司