测定鸭脚树叶碱含量的高效液相色谱方法

专利名称：测定鸭脚树叶碱含量的高效液相色谱方法
技术领域：
本发明涉及一种色谱分析方法，具体是一种测定鸭脚树叶碱(Picrinine)含量的高效液相色谱(HPLC)方法，属于药物分析技术领域。
背景技术：
灯台树Alstonia Scholaris(L.)R.Bro.，也称鸭脚树、糖胶树等，为夹竹桃科鸡骨常山属植物，高大长绿乔木，生于海拔850米以下的丘陵山地、疏林。国内分布于云南、广西、福建等，国外分布于印度、斯里兰卡、缅甸、泰国、越南、菲律宾等，资源丰富。
在云南省内，灯台树是多民族使用的天然药物，其根、茎、皮、叶均可入药应用。汉族称“理肺散”，是治疗呼吸系统疾病的有效药物；傣族称“买担别”，主治肺热咳嗽痰多，腮腺、颌下淋巴结肿痛；拉祜族、佤族等均用叶代茶饮治支气管炎、咳嗽、哮喘等。
经过长期的应用，来自灯台树的药材已为《云南省药品标准》、《中国药典》收载。利用灯台树药材为原料，已开发了灯台叶颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、口服液等制剂产品。
对于灯台树的化学研究，朱伟明在其博士论文“五种药用植物资源化学的初步研究”(中国科学院昆明植物研究所，2001年)中进行了比较全面的文献综述，结果表明①灯台树各部位(根、茎、皮、叶)均含有生物碱，在结构上多属吲哚类生物碱；②生物碱是灯台树重要的有效成分；③鸭脚树叶碱(picrinine)是灯台树各部位普遍含有，且含量最高的生物碱成分。鸭脚树叶碱的化学结构式见图1。
在药物质量分析方面，《云南省药品标准》对灯台叶药材仅用简单的生物碱沉淀反应进行鉴别，无含量测定项目。在制剂产品中，卫生部颁中药标准灯台叶片(WS-10280)采用酸碱滴定法测生物碱，并折算为指标成分鸭脚树叶碱含量，但测定方法的专属性差，已经不能适应中药现代化的技术要求。
高效液相色谱(HPLC)适用于复杂成分分析，目前已成为中药质量分析的主流方法，得到广泛应用。公开号为CN 1818636A，申请人为朱光荣的中国专利申请采用HPLC方法测定鸭脚树叶碱含量来控制药材及制剂的质量。其确定的主要条件为用2％氨水为提取溶剂，提取液用氯仿萃取；HPLC流动相用盐酸水溶液(浓盐酸1→100)-乙腈(80∶20)，检测波长232nm。
经过本发明人系统的研究，结果表明，上述专利申请所确定的主要技术条件存在严重缺陷，难以实际应用于灯台叶药材及其制剂的质量分析。为准确地分析测定灯台树药材及其制剂中主要生物碱成分鸭脚树叶碱(picrinine)的含量，更好地控制药品质量，保障临床用药安全有效，需要有一种新的测定灯台树药材及其制剂中鸭脚树叶碱含量的高效液相色谱方法，发明内容本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种能准确地分析测定鸭脚树叶碱含量的高效液相色谱方法，可以用于测定灯台树药材(根、枝、皮、叶)、制剂(颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、口服液)中鸭脚树叶碱含量，也可用于测定其他材料中含有的鸭脚树叶碱含量。
本发明方法的特征是液相色谱条件为色谱柱以碳十八烷基键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇或乙腈与稀三乙胺或二乙胺水溶液组成的混合溶剂，检测波长287nm。柱温可以为30～40℃，流速可以为0.5～5ml/min，进样体积可以为10～20μl。柱温最佳为35℃，流速最佳为1ml/min。
当流动相为甲醇与稀三乙胺或稀二乙胺水溶液组成的混合溶剂时，其组成的体积比可以为甲醇∶稀三乙胺或稀二乙胺水溶液等于40∶60～60∶40，稀三乙胺或稀二乙胺水溶液含三乙胺或二乙胺的浓度可以为0.01％～0.015％。作为最优化条件，混合溶剂组成的体积比为甲醇∶稀三乙胺或稀二乙胺水溶液等于50∶50。
当流动相为乙腈与稀三乙胺或稀二乙胺水溶液组成的混合溶剂，其组成的体积比为乙腈∶稀三乙胺或稀二乙胺水溶液等于25∶75～30∶70，稀三乙胺或稀二乙胺水溶液含三乙胺或稀二乙胺的浓度为0.01％～0.015％。
通过以下的试验研究对本发明进行进一步说明。
1、鸭脚树叶碱(picrinine)的制备(1)提取分离鸭脚木碱灯台树药材粉碎后用95％乙醇回流提取，回收溶剂；浸膏加水搅散后用浓氨水调pH为9，氯仿萃取，回收溶剂，得总生物碱。
生物碱部分经氧化铝柱色谱，用环己烷-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱(100∶5～100∶100)，用薄层色谱检查后合并含鸭脚木碱的流份，再用硅胶柱色谱多次分离，以氯仿-丙酮混合溶剂梯度洗脱(100∶0～100∶30)，结合重结晶制备，得到鸭脚木碱，HPLC检查纯度约95％。
(2)纯化鸭脚木碱上述鸭脚木碱纯度未达中药质量标准用对照品要求(98％以上)，进一步用葡聚糖凝胶LH-20柱色谱纯化，以甲醇为洗脱溶剂，合并仅含有鸭脚木碱的流份，回收溶剂至小体积，放置过夜，析出无色针晶，HPLC检查其纯度为99.94％，即为鸭脚木碱对照品。图2为鸭脚树叶碱对照品的HPLC图谱。
(3)化学结构鉴定无色针状晶体，易溶于甲醇、氯仿、丙酮，可溶于乙酸乙酯、乙醇，不溶于水和石油醚，但可溶于稀盐酸及稀硫酸溶液。熔点222～224℃。旋光度为[a]D-48(c 0.21，CHCl3，25℃测定)。
红外光谱IRv(KBr)cm-13430、3391(vs，NH)，3009-2866(s，C-H)，1724(s，C＝O)，1610、1481、1465(s，C＝C)，1203-1167(s，C-O及C-N)，提示其结构属生物碱类化合物。
紫外光谱UVλ(CH3OH)nm有三个主要吸收峰，分别为205，235.5，287.5，提示该化合物结构中有双键和取代的苯环。
质谱正离子FAB MS m/z338[M]+，239+。其中m/z 338的峰为分子离子峰，质谱数据结合NMR光谱数据分析，其对应化合物的分子式应为C20H22N2O3。
核磁共振谱经过测试，其1H NMR及13C NMR(CDCl3，ppm)数据如表一及表二。参照文献报道(朱维明五种药用植物资源化学的初步研究.博士学位论文，中科院昆明植物所，2001年)，其结构确证为鸭脚树叶碱(picrinine)。
表一 鸭脚树叶碱的1H NMR数据及归属

表二 鸭脚树叶碱的13C NMR数据及归属

2、灯台树药材及其制剂供试溶液的制备(1)灯台树药材供试溶液的制备生物碱溶解性的一般规律是生物碱易溶于有机溶剂及酸水，不溶于水及碱水；生物碱盐易溶于水，不溶于有机溶剂。因此，从药材中提取生物碱不宜用水为溶剂，而应该用有机溶剂提取。不同提取方法测定比较见表三，其中实验1是朱光荣在其专利申请(公开号CN 1818636A)中确定的方法。
结果表明，甲醇对植物组织有较强渗透力，对目标化合物有很好的溶解性，因此提取效果最好；水或2％氨水对植物组织有很强的渗透力，但对目标化合物难溶解，因而提取效果不好；丙酮和氯仿对目标化合物有很好的溶解性，但对植物组织的渗透力差，故提取不完全，效果亦不好。由此确定，灯台树药材供试液的制备方法为取药材，粉碎，加甲醇回流提取，滤过，即得。
表三 灯台树药材的提取方法比较

根据生物碱溶解性一般规律，结合上述实验研究结果表明，朱光荣在专利申请(公开号CN 1818636A)所确定的“以pH＝9氨水提取”的技术条件存在严重缺陷，不能完全提取药材中的生物碱成分，后期测定结果也就不能反映药材的真实情况，难以准确的应用于灯台叶药材的质量分析工作。
(2)灯台树制剂供试溶液的制备灯台树制剂产品是以浸膏加辅料制成，根据一般经验，含量测定可用水溶散制剂后调节pH值，再以氯仿萃取生物碱。筛选适当的萃取条件以保证萃取完全、操作可行是要点，主要影响因素是pH值的调节方法和程度，试验结果如表四。
表四 灯台树制剂的提取方法比较

对比结果表明，制剂溶液用2％的氨水调pH＝7，萃取时不乳化，操作容易，萃取彻底。由此，确定制剂产品供试品溶液制备方法为取制剂，加水振摇溶散，以2％氨水调pH＝7，置分液漏斗中以氯仿萃取，氯仿液蒸干，残渣用甲醇溶解即得。
3、高效液相色谱条件(1)色谱柱选择确定考虑到应用普遍性，选用HPLC测定最常用的碳十八烷基键合硅胶柱进行试验。比较了Phenomenex公司Luna C-18柱、Merck公司STAR RP-18柱、Agilent公司XDB-C18柱等，均有较好分离效果，因此确定选用以碳十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱。
(2)检测方法及检测波长确定鸭脚树叶碱具紫外吸收，可用紫外检测器检测。鸭脚树叶碱分别溶于甲醇、HPLC流动相测定紫外光谱，数据见表五。结果显示有三个吸收峰，209.0nm的峰靠近末端且随溶剂变化大，不宜选作检测波长；235.5、287.0nm的峰分离度均较好，且不随溶剂变化，均可用于检测。对比这二个波长检测的HPLC图谱，以287nm波长图谱中的干扰峰较小，因此确定用紫外检测法，检测波长287nm。
表五 鸭脚树叶碱的紫外光谱数据

(3)流动相的选择确定鸭脚树叶碱结构复杂，选择合适的流动相以得到良好的分离效果是分析方法的关键。基于一般的公知事实和工作经验，在HPLC分析中调节流动相的酸碱性，采用的酸主要是稀磷酸、稀硫酸、乙酸、甲酸；采用的碱主要是二乙胺、三乙胺、稀氨水。
朱光荣在专利申请(公开号CN 1818636A)中确定“HPLC流动相用盐酸水溶液(浓盐酸1→100)-乙腈(80∶20)”。该流动相难以应用于实际工作，一是液相色谱仪的连接管道、色谱柱体等均为不锈钢材料，不能耐受稀盐酸溶液腐蚀；二是酸性太强(pH小于1)，容易导致碳十八烷基键合硅胶填料的降解。
根据理化性质和经验，我们选择甲醇-水、乙腈-水(均可调节酸碱)溶剂系统对比筛选。色谱柱用Luna C-18柱(Φ4.6×150mm，5μm，使用pH范围为1.5～10)；流速1.0ml/min；柱温35℃；检测波长287nm。对比研究数据及其分析结果见表六。
表六 流动相对比筛选试验评价结果


用优选的最佳条件实验8[甲醇-0.012％三乙胺(50∶50)]、实验14[乙腈-0.01％二乙胺(25∶75)]进行分析测试，结果如表七。
结果表明流动相以甲醇-稀有机胺类(三乙胺，二乙胺)组成的混合溶剂具有最好分离效果；稀有机胺溶液的适宜浓度为0.01％～0.015％；甲醇和稀有机胺溶液的体积组成比在60∶40～40∶60之间均可，优化的比例是50∶50见附图4和5，分别为灯台树药材、制剂的HPLC图谱。
其次，以乙腈-稀有机胺类(三乙胺，二乙胺)组成的混合溶剂也可用于分析，稀有机胺溶液的适宜浓度为0.01％～0.015％；乙腈和稀有机胺溶液的体积组成比例在25∶75～30∶70之间均可。
表七 优选最佳流动相分析药材及制剂的结果

(4)测定的专属性研究①对照品加入在灯台树及其制剂的供试液中，混入对照品溶液进样测定，和供试液色谱对照，无新的吸收峰出现，鸭脚树叶碱吸收峰相对面积增大。②三维扫描以二极管阵列检测器(DAD)，扫描样品色谱中和对照品峰相同位置的吸收峰，峰纯度950以上，紫外光谱和对照品一致。以上试验证明测定的吸收峰对应的物质是鸭脚树叶碱，该含量测定方法具有高度的专属性。
4、测定方法考察确定(1)稳定性试验对照品、供试品溶液于放置后不同时间测定，结果表明对照品溶液至少在72h内稳定(峰面积RSD＝0.98％，n＝7)，供试品溶液至少在48h内稳定(峰面积RSD＝1.02％，n＝5)，可满足含量测定需求。
表八 稳定性试验数据

(2)检测限和线性关系确定取鸭脚树碱适量，用流动相制成1mg/ml储备液，不断稀释后测定最低检测限为30ng(信号/噪声＝3)，测定方法灵敏。在分别取储备液稀释为不同浓度，测定，进样量和峰面积的关系见表九。
在进样量0.1μg～14μg范围内，鸭脚树叶碱峰面积和进样量呈良好线性关系。回归方程截距(1202)为吸收系数(227514)的0.53％，回归线几乎过原点，为简化计算方法，可用外标一点法定量，见图3，鸭脚树叶碱测定标准曲线。
表九 检测限和线性关系数据及回归方程

(3)重现性试验取同一批号灯台树药材(20051001)，灯台叶颗粒(20060204)，同时称取6份，照供试液制备方法平行制备供试溶液，测定鸭脚树叶碱的含量，数据见表十。药材六次测定含量的RSD＝1.88％，制剂灯台叶颗粒六次测定含量的RSD＝1.32％，测定方法重现性良好。
表十 方法学考察----重现性试验

(4)加样回收试验取已知含量灯台叶颗粒(20060204，0.107mg/g)，共9份，精密称定，分别分为三组。取适量鸭脚树叶碱对照品，以甲醇制成0.22mg/ml的溶液，分别按照相当于样品中鸭脚树叶碱含量的80％、100％、120％，加入到三组样品中。照供试液制备方法提取，测定含量，数据见表十一。结果表明，测定方法平均回收率为98.6％，RSD＝1.43％(n＝9)。加入的对照品能准确、重现的回收，测定方法准确可靠。
表十一 方法学考察----加样回收试验数据

5、分析方法耐用性试验(1)流速变化对测定结果的影响保持色谱柱、柱温、检测波长、流动相不变。流速设定为0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min，分别进行测定，数据见表十二。结果表明流速改变达到±20％时，仍可准确测定样品中灯台树叶碱的含量。
表十二 方法耐用性试验----流速变化对测定结果的影响

(2)检测波长偏移对测定结果的影响保持色谱柱、柱温、流动相、流速不变。检测波长设定为284nm、287nm、290nm，分别测定，数据见表十三。结果表明在检测波长偏移达到±3nm时，仍可准确测定样品中灯台树叶碱的含量。
表十三 耐用性试验----检测波长偏移对测定结果的影响

(3)流动相比例改变对测定结果的影响保持色谱柱、柱温、检测波长、流速不变。适当改变流动相的组成比例进行试验，数据见十四。结果表明流动相比例改变达到±3％的情况下，仍可准确测定样品中灯台树叶碱的含量。
表十四 耐用性试验----流动相比例改变对测定结果的影响

(4)不同色谱柱测定结果的比较保持柱温、检测波长、流动相、流速不变。换用不同色谱柱进行测定及系统评价分析，数据见表十五。结果表明该分析方法在不同的色谱柱上，均有较好的峰形和分离效果，用不同的色谱柱，均可准确测定样品中灯台树叶碱的含量。比较的色谱柱有以下三种Luna C-18柱Phenomenex公司，规格Φ4.6mm×150mm，使用pH范围1.5～10，柱子序列号339618-40。
Purospher Star C-18柱Merck公司，规格Φ4.6mm×150mm，使用pH范围1.5～11.5，柱子序列号147565。
Zorbax C-18柱Agilent公司，规格Φ4.6mm×150mm，使用pH范围1～12，规格Φ4.6mm×150mm，柱子序列号USKH009350。
表十五 耐用性试验----不同色谱柱测定结果的比较

上述结果表明，该分析方法具有较好的耐用性①能适用于不同厂牌的C-18色谱柱，均有较好的峰形和分离效果。②能适应流动相组成比例在±3％范围内的改变。③能适应流速在±20％范围内的改变。④可宽容检测波长在±3nm范围内的偏移。
(5)分析方法在不同厂家液相色谱仪器上的验证上述研究在岛津LC-10AvP高效液相色谱仪上完成，为进一步验证该分析方法的耐用性，再选择现使用较多的Agilent1100、Waters1525液相色谱仪，进行了该分析方法在不同厂家液相色谱仪器上的验证测定。仪器条件分别为①岛津LC-10AvP；②Agilent1100；③Waters1525。测定数据见表十六。
结果表明，该方法在不同厂牌的高效液相色谱仪上测定结果具有一致性，对分析仪器具有较广泛的适应性，耐用性好。
表十六 耐用性试验----不同厂家PLC仪测定结果比较

测定方法取鸭脚树叶碱适量，精密称定，以HPLC流动相溶解制成每1ml含有10μg～100μg的对照品溶液。按照上述研究确定的方法，制备灯台树药材，及其制剂的供试溶液。精密吸取对照品溶液、供试溶液，注入液相色谱仪(HPLC)，测定，即得。


图1为鸭脚树叶碱的化学结构式。
图2为鸭脚树叶碱对照品的HPLC图谱。
图3为鸭脚树叶碱测定标准曲线。
图4为灯台树药材的HPLC图谱。
图5为灯台树制剂的HPLC图谱。
本发明的有益效果和技术进步在于①经过系统的比较研究，建立了一种测定鸭脚树叶碱含量的高效液相色谱方法，既可用于测定灯台树药材(根、茎、皮、叶)、制剂(颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、口服液)中鸭脚树叶碱的含量，也可用于测定其他材料中含有的鸭脚树叶碱含量。
②分析方法具有分离效果好，测定准确、灵敏，专属性强，测定快速等技术特点。灯台树药材、制剂中各成分吸收峰可在40分钟内全部流出色谱柱，完成分析工作。
本发明可直接应用于实际生产过程及产品的质量分析。
具体实施例方式
以下的具体实施例可进一步说明本发明及其应用，但并不构成对本发明权利要求所保护的范围的限制。
工作原理和过程供试液注入液相色谱仪，流动相载着鸭脚树叶碱等成分进入色谱柱，分离各成分，使它们依次到达检测器并被识别；检测器测定样品中鸭脚树叶碱峰的响应值，并根据响应值的大小和鸭脚树叶碱标样的比较来计算样品中鸭脚树叶碱的含量。
实施例1灯台树叶中鸭脚树叶碱的含量测定取灯台树叶，粉碎，过60目筛网，精密称取2g，置100ml圆底烧瓶中，准确加入甲醇50ml，称重，水浴回流提取1小时，放冷，以甲醇补足减失的重量，过滤，即得供试溶液。取鸭脚树叶碱适量，精密称定，以HPLC流动相溶解制成每1ml含有50μg的对照品溶液。
按照上述研究确定的方法(表六-实验8)，精密吸取对照品溶液、供试溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。不同产地的灯台树叶药材中鸭脚树叶碱含量测定的结果见表十七。
表十七 不同产地灯台树叶中鸭脚树叶碱含量测定结果

实施例2灯台树根中鸭脚树叶碱的含量测定方法同实施例1，测定的药用部位为灯台树的根，不同产地的灯台树根中鸭脚树叶碱含量测定的结果见表十八。
表十八 不同产地灯台树根药材中鸭脚树叶碱含量测定结果

实施例3灯台树枝中鸭脚树叶碱的含量测定方法同实施例1，测定的药用部位为灯台树的枝，不同产地的灯台树茎中鸭脚树叶碱含量测定的结果见表十九。
表十九 不同产地灯台树枝中鸭脚树叶碱含量测定结果

实施例4灯台树皮中鸭脚树叶碱的含量测定方法同实施例1，测定的药用部位为灯台树的皮，不同产地的灯台树皮中鸭脚树叶碱含量测定的结果见表二十。
表二十 不同产地灯台树皮中鸭脚树叶碱含量测定结果

实施例5用不同流动相测定灯台树叶中鸭脚树叶碱的含量方法同实施例1，分别选用上述表六中实验-6～7、9～14流动相组成进行测定，结果见表二十一(样品批号S-20051101叶)。
表二十一 用不同流动相测定灯台树叶中鸭脚树叶碱的含量

实施例6灯台叶片中鸭脚树叶碱的含量测定取灯台叶片20片，除去包衣，片芯研细过60目筛，精密称取2g，置100ml圆底烧瓶中，准确加入甲醇50ml，称重，水浴回流提取1小时，放冷，以甲醇补足减失的重量。滤过，取续滤液25ml蒸干，残渣加25ml水振摇溶散，以2％氨水调pH＝7，置分液漏斗中以50ml氯仿分三次萃取，合并氯仿液，蒸干，残渣用流动相溶解并定容至5ml量瓶中，摇匀，即得供试溶液。
按照上述研究确定的方法(表六-实验8)，精密吸取对照品溶液、供试溶液，注入液相色谱仪，测定。灯台叶片中鸭脚树叶碱含量测定的结果为0.128mg/g。
实施例7灯台叶颗粒中鸭脚树叶碱的含量测定取灯台叶颗粒5g，精密称定，加25ml水振摇溶化，加2％氨水调pH＝7，置分液漏斗中以50ml氯仿分三次萃取，合并氯仿液，蒸干，残渣用流动相溶解并转移至10ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。
精密吸取对照品溶液、供试溶液，注入液相色谱仪，测定。灯台叶片中鸭脚树叶碱含量测定的结果为0.149mg/g。
实施例8灯台叶胶囊中鸭脚树叶碱的含量测定取灯台叶胶囊内容物5g，以下测定操作同实施例7。灯台叶胶囊中鸭脚树叶碱含量测定的结果为0.117mg/g。
实施例9灯台叶煎膏中鸭脚树叶碱的含量测定取灯台叶煎膏5g，加25ml水溶化，以下测定操作同实施例7。灯台叶煎膏中鸭脚树叶碱含量测定的结果为0.153mg/g。
实施例10灯台叶口服液中鸭脚树叶碱的含量测定取灯台叶口服液10ml，加15ml稀释，以下测定操作同实施例7。灯台叶口服液中鸭脚树叶碱含量测定的结果为0.161mg/ml。
权利要求
1.一种测定鸭脚树叶碱含量的高效液相色谱方法，其特征是液相色谱条件为色谱柱以碳十八烷基键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇或乙腈与稀三乙胺或二乙胺水溶液组成的混合溶剂，检测波长287nm。
2.如权利要求1所说高效液相色谱方法，其特征是柱温为30～40℃，流速为0.5～5ml/min，进样体积为10～20μl。
3.如权利要求2所说高效液相色谱方法，其特征是柱温为35℃，流速为1ml/min。
4.如权利要求1所说高效液相色谱方法，其特征是流动相为甲醇与稀三乙胺或稀二乙胺水溶液组成的混合溶剂，组成的体积比为甲醇∶稀三乙胺或稀二乙胺水溶液等于40∶60～60∶40，稀三乙胺或稀二乙胺水溶液含三乙胺或二乙胺的浓度为0.01％～0.015％。
5.如权利要求4所说高效液相色谱方法，其特征是混合溶剂组成的体积比为甲醇∶稀三乙胺或稀二乙胺水溶液等于50∶50。
6.如权利要求1所说高效液相色谱方法，其特征是流动相为乙腈与稀三乙胺或稀二乙胺水溶液组成的混合溶剂，组成的体积比为乙腈∶稀三乙胺或稀二乙胺水溶液等于25∶75～30∶70，稀三乙胺或稀二乙胺水溶液含三乙胺或稀二乙胺的浓度为0.01％～0.015％。
全文摘要
测定鸭脚树叶碱含量的高效液相色谱方法，属药物分析技术领域。其特征是液相色谱条件为色谱柱以碳十八烷基键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇或乙腈与稀三乙胺或二乙胺水溶液组成的混合溶剂，检测波长287nm。本发明克服了已有避免了方法的缺陷，可直接应用于实际生产过程及产品的质量分析。既可用于测定灯台树药材(根、茎、皮、叶)、制剂(颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、口服液)中鸭脚树叶碱的含量，也可用于测定其他材料中含有的鸭脚树叶碱含量。该方法具有分离效果好，测定准确、灵敏，专属性强，测定快速等技术特点。灯台树药材、制剂中各成分吸收峰可在40分钟内全部流出色谱柱，完成分析工作。
文档编号G01N30/26GK1975412SQ20061016385
公开日2007年6月6日 申请日期2006年12月28日 优先权日2006年12月28日
发明者郭文, 孙赟, 朱丽萍, 龚云麒 申请人:昆明振华制药厂有限公司