专利名称：甘蓝中抗蚜威及其代谢物残留量的测定方法
技术领域：
本发明 属于农药残留量的测定技术领域，特别是涉及甘蓝中抗蚜威及其代谢物 (去甲基抗蚜威、去甲基甲酰胺基抗蚜威)的残留量测定方法。
背景技术：
甘蓝是人们经常且大量食用的十字花科蔬菜。日本科学家认为，甘蓝的防衰老、抗氧化的效果与芦笋、菜花同样处在较高的水平。甘蓝的营养价值与大白菜相差无几，其中维生素C的含量还要高出一倍左右。卷心菜能提高人体免疫力，预防感冒，在抗癌蔬菜中，甘蓝排在第五位。蚜虫是甘蓝种植中主要害虫之一，蚜虫繁殖快，多着生在甘蓝心叶及叶背皱缩处， 刺吸植物汁液，造成叶片卷曲变形，植株生长不良，包心不正常；此外蚜虫还传播多种病毒病，造成的为害远超过蚜害本身。抗蚜威，别名辟蚜雾，英文通用名称pirimicarb。具有触杀，熏蒸和叶面渗透作用，是选择性很强的杀蚜剂，只对蚜虫有高效，对有机磷产生抗性的蚜虫亦有效，对其他害虫无效，对捕食蚜虫或寄生在蚜虫体内的害虫天敌，如瓢虫、草蛉、步甲、烟蚜茧蜂等杀伤作用较小。是综合防治的理想药剂，适用于防治蔬菜、烟草、粮食作物上的蚜虫。由于抗蚜威高效、选择性强等优点，使得在甘蓝和其它蔬菜种植中得到了广泛和大量的应用，但也因此而造成了食品安全和生态环境污染等问题。农药残留联席会议(JMPR)对抗蚜威的残留定义为抗蚜威、去甲基抗蚜威 (demethyl pirimicarb)及去甲基甲酉先胺基抗虫牙威(demethyl formamido pirimicarb)之和，以抗蚜威表示。目前，国内外的方法大多是检测抗蚜威母体，也有同时检测抗蚜威和去甲基抗蚜威的报道，但是未见有同时检测抗蚜威、去甲基抗蚜威和去甲基甲酰胺基抗蚜威3 种化合物残留量的报道。
发明内容
为了评价抗蚜威在甘蓝上使用后的安全性，本发明建立了使用超高效液相-质谱 /质谱联用仪(UPLC/MS/MS)法测定甘蓝中抗蚜威及其代谢物(去甲基抗蚜威、去甲基甲酰胺基抗蚜威)的残留量测定方法。具体是使用有机溶剂提取乙腈和水提取甘蓝中抗蚜威及其代谢物，然后在提取液中加入饱和的氯化钠，通过液液分配分离出有机溶剂层，并利用旋转蒸发将分离出的有机溶剂层完全浓缩至干并定容，最后采用超高效液相色谱_串联质谱 (UPLC/MS/MS)检测。为实现上述目的，本发明提供如下的技术方案
一种甘蓝中抗蚜威及其代谢物残留量的测定方法，其特征在于按如下的步骤进行 (1)建立标准曲线
用本测定方法的前处理方法处理的不含有抗蚜威及其代谢物的甘蓝空白溶液，配制抗蚜威及其代谢物混合标准工作溶液系列浓度5、2. 5,0. 5,0. 1,0. 025和0. 01 μ g/mL，分别进样5 μ L，以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做标准曲线。(2)前处理
称样IOg (精确到0. Olg)，加20mL水和30mL乙腈振荡30min,过滤至分液漏斗，再加 20mL乙腈洗涤残渣，洗涤液过滤至分液漏斗中，加IOg氯化钠振摇2min，静置5min，待分层后弃去下层水相，取上层乙腈相减压浓缩至干，加2mL甲醇，涡旋Imin，过0. 22 μ m滤膜，转移至进样小瓶待测； (3)仪器条件
色谱系统:Waters Acquity Ultra Performance LC ；
色谱柱:Acquity BEH C18(2. 1 mmX50 mm, 1. 7 μ m)；柱温 30°C；进样量 5 μ L ；流动相 乙腈/水的体积比为50/50 ；流速0. 2 mL/min，运行3 min ； 质谱系统:ffaters Quattro Premier XE ；
离子源ESI(正离子模式)；毛细管电压3.0 KV;离子源温度110°C ；脱溶剂气温度 400°C ；锥孔反吹气流量50 L/h;脱溶剂气流量500 L/h ；检测方式为多反应监测扫描模式
权利要求
1. 一种甘蓝中抗蚜威及其代谢物残留量的测定方法，其特征在于按如下的步骤进行(1)建立标准曲线用本测定方法的前处理方法处理的不含有抗蚜威及其代谢物的甘蓝空白溶液，配制抗蚜威及其代谢物混合标准工作溶液系列浓度5、2. 5,0. 5,0. 1,0. 025和0. 01 μ g/mL，分别进样5 μ L，以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做标准曲线；(2)前处理称样IOg (精确到0. Olg),加20mL水和30mL乙腈振荡30min,过滤至分液漏斗，再加 20mL乙腈洗涤残渣，洗涤液过滤至分液漏斗中，加IOg氯化钠振摇2min，静置5min，待分层后弃去下层水相，取上层乙腈相减压浓缩至干，加2mL甲醇，涡旋Imin，过0. 22 μ m滤膜，转移至进样小瓶待测；(3)仪器条件色谱系统:Waters Acquity Ultra Performance LC ；色谱柱:Acquity BEH C18(2. 1 mmX50 mm, 1. 7 μ m)；柱温 30°C；进样量 5 μ L ；流动相 乙腈/水的体积比为50/50 ；流速0. 2 mL/min，运行3 min ；质谱系统:ffaters Quattro Premier XE ；离子源ESI(正离子模式)；毛细管电压3.0 KV;离子源温度110°C ；脱溶剂气温度 400°C ；锥孔反吹气流量50 L/h;脱溶剂气流量500 L/h ；检测方式为多反应监测扫描模式
全文摘要
本发明公开了一种甘蓝中抗蚜威及其代谢物残留量的测定方法。它是称样10g(精确到0.01g)，加20mL水和30mL乙腈振荡30min，过滤至分液漏斗，再加20mL乙腈洗涤残渣，洗涤液过滤至分液漏斗中，加10g氯化钠振摇2min，静置5min，待分层后弃去下层水相，取上层乙腈相减压浓缩至干，加2mL甲醇，涡旋1min，过0.22μm滤膜，转移至进样小瓶；最后采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC/MS/MS)检测。本发明公开的甘蓝中抗蚜威及其代谢物残留量的测定方法为首次建立，具有速度快、成本低、准确度、稳定性和可靠性高的特点。
文档编号G01N30/14GK102221595SQ20111015644
公开日2011年10月19日 申请日期2011年6月13日 优先权日2011年6月13日
发明者邵辉 申请人:天津市农业科学院中心实验室