专利名称：一种快速测定肉制品中山梨酸钾和苯甲酸钠含量的方法
技术领域：
本发明涉及食品中山梨酸钾和苯甲酸钠含量的测定方法；具体涉及一种基于近红外光谱的快速测定肉泥中山梨酸钾、苯甲酸钠含量及鉴别山梨酸钾中是否含有苯甲酸钠的方法。
背景技术：
为了抑制肉制品中微生物的生长和繁殖、延长肉制品的保质期，需要在肉制品中加入一定量的山梨酸钾和苯甲酸钠。我国对山梨酸钾和苯甲酸钠的使用有着严格规定，国家食品添加剂使用卫生标准(GB/T2760-200;3)规定了各类食品中苯甲酸和山梨酸的使用限量GB2760-19961食品添加剂使用卫生标准，肉制品可以添加一定量的山梨酸钾，而苯甲酸钠不得添加。FAO、WHO及不同的国家也都制定了相应要求凌关庭.食品添加剂手册 [M]，北京，化学工业出版社，1999，1702-7181。因此对于肉制品中山梨酸钾建立快速准确的定量分析方法和苯甲酸钠的定性分析方法很有必要。国内外有关食品中苯甲酸和山梨酸检测方法的报道已经很多，常用的山梨酸钾定量和苯甲酸钠定性分析的方法有紫外分光光度R. Nilda, S. M. M. Sobrero, C. H. Goicoechea. Anal Bioanal Chem. 376 (2003) 126.、 薄层法S. H. Khan, Μ. P. Murawski, J. Sheama, J. Chromatogr· A 17 (1994) 855.、气相色谱法Τ A. Kokya, K Farhadi, A Μ. Kalhori. Food Anal Methods. 14(2011) 150.、液相色谱法H.M.Pylypiw，M J. Grether, Chromatogr Α. 883(2000)299.等，且这些方法大多是针对酱油、饮料、果酱、酱菜、蜜饯等食品。目前国内和国际关于食品中山梨酸钾和苯甲酸钠的测定是采用气相和高效液相色谱法State Bureau for Quality Supervision, Inspection and Quarantine(1996)Method for determining sorbic and benzoic acids in food :gas chromatography(National Standard of the People' s Republic of China GB/T 5009.26). Standards Press of China, Beijing ；State Bureau for Quality Supervision, Inspection and Quarantine(1996)Method for determining sorbic and benzoic acids in food :high-performance liquid chromatography(National Standard of the People' s Republic of China GB/T 5009. 29). Standards Press of China, Beijing ；AOAC(1995)Method 983. 16 :benzoic acid and sorbic acid in food. Association of Official Analytical Chemists，Gaithersburg，MD的检测方法，上述检测方法存在着测试前处理条件要求苛刻、易损坏测定仪器、测试时间长等缺点。
发明内容
发明目的针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种快速测定肉制品中山梨酸钾和苯甲酸钠含量的方法。使该方法具有简单、快速和定量结果准确度高等优点ο技术方案为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为一种快速测定肉制品中山梨酸钾和苯甲酸钠含量的方法，包括以下步骤
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(1)搅碎勻质肉制品标样100g，加入去离子水，超声震荡20min，抽滤，重复操作三次，浓缩滤液体积至20ml，先加入aiil 6mol. Γ1的盐酸溶液，混勻，再加入15ml无水乙醚萃取三次，收集乙醚相，旋转蒸发至无乙醚，加入25ml正己烷溶解，加入2. Og中性氧化铝， 超声震荡30min，抽滤，收集滤饼，近红外仪器收集其近红外光谱；其中，标样1共15份，山梨酸钾含量分别为 0. 005g. kg人0. Olg. kg-1、0. 015g. kg-1、0. 02g. kg-1、0. 025g. kg人0. 03g. kg"\0. 035g. kg"\0. 04g. kg"\0. 045g. kg"\0. 05g. kg"\0. 055g. kg"\0. 06g. kg"\0. 065g. kg-1、。· 07g. kg-1和0. 075g. kg-1 ；标样2有15份，其苯甲酸钠含量分别为0. 005g. kg-1、 0. Olg. kg"\0. 015g. kg"\0. 02g. kg人0. 025g. kg人0. 03g. kg"\0. 035g. kg"\0. 04g. kg-1、 0. 045g. kg-1、0. 05g. kg人 0. 055g. kg人 0. 06g. kg-1、0. 065g. kg-1、0. 07g. kg-1 和 0. 075g. kg-1 ；(2)采用MSC+平滑处理+—阶导数处理方法对标样1的原始红外谱图进行处理后，在区间5210. 72-4898. 31cm"1, 7011. 91-5268. 57cm"1范围内，使用偏最小二乘法建模 1，对山梨酸钾进行定量分析；在4119. 21-9881.46(3!^1的区间范围内，使用鉴别分析方法 (Discriminant Analysis)建模3，区分山梨酸钾中是否含有苯甲酸钠，对苯甲酸钠进行定性分析；先采用MSC方法对标样2原始红外谱图进行处理剔除一个低浓度样品后， 再采用一阶导数、二阶导数处理方法对标样2原始红外谱图进行处理后，在区间 8770. 67-8882. 52^1范围内，使用偏最小二乘法、主成分回归法、逐步多元线性回归法进行建模2，对苯甲酸钠进行定量分析；(3)待测样品处理方法同步骤(1)，将取得的光谱分别输入建模1、建模2和建模3 进行检测。有益效果与现有技术中的山梨酸钾和苯甲酸钠的检测方法相比，本发明中快速测定肉制品中山梨酸钾和苯甲酸钠含量的方法具有以下突出优点本发明是基于近红外光谱的快速测定肉制品中山梨酸钾、苯甲酸钠含量及鉴别山梨酸钾中是否含有苯甲酸钠的方法，主要步骤包括收集、酸化、萃取、吸附等，通过酸化的方法，将易溶于水的山梨酸钾、苯甲酸钠酸化为易溶于有机溶剂的山梨酸、苯甲酸，使用有机溶剂萃取后，再使用吸附剂进行吸附，提高近红外对测定物质的敏感性，收集光谱数据，进行处理和建模。与现有定量测定山梨酸钾和定性测定苯甲酸钠的方法相比，该测定方法简单、快速，定量结果准确度高。具有很好的实用性，能够产生很好的经济效益和社会效益。
图1是实施例1的山梨酸钾的定量分析所收集的样品近红外光谱图；图2是实施例2的苯甲酸钠的定量分析所收集的样品近红外光谱图；图3是实施例3定性分析肉制品中山梨酸钾中是否含有苯甲酸钠的结果图。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明做进一步的解释。实施例1山梨酸钾的定量分析取山梨酸钾含量在0-0. 075g. kg—1范围内的肉制品样品100g，搅碎勻质，加入去离子水，超声振荡器中震荡20min，抽滤，重复操作三次，使用旋转蒸发器将滤液浓缩体积至20ml，加入aiil 6mol. Γ1浓度的盐酸溶液，山梨酸钾酸化成为山梨酸，加入15ml无水乙醚萃取三次，收集乙醚相，使用旋转蒸发器旋转蒸发至无乙醚，25ml正己烷溶解，加入2. Og中性氧化铝(120°C干燥他后使用)，超声震荡器中超声震荡30min，抽滤，收集滤饼，近红外仪器收集其近红外光谱，如图1所示，其中样品共15个，其山梨酸钾含量分别为0. 005g. kg—1、 0. Olg. kg"\0. 015g. kg"\0. 02g. kg人0. 025g. kg人0. 03g. kg"\0. 035g. kg"\0. 04g. kg-1、 0. 045g. kg-1、0. 05g. kg人 0. 055g. kg人 0. 06g. kg-1、0. 065g. kg-1、0. 07g. kg-1 禾口 0. 075g. kg-1, 每个样品的重量均为2. 0g。采用多元散射校正(multiplicativescatter correction，MSC)，MSC+平滑处理 (SG(7，3))，MSC+SG(7，3) +—阶导数(First Derivative)处理方法对原始红外谱图进行处理后，在区间 5210. 72-4898. 31cm"1, 7011. 91-5268. 57cm"1 范围内，使用偏最小二乘法(PLS) 建模。结果如表1所示。表1.原始近红外谱图进行不同方法处理后使用PLS建模的结果
权利要求
1.一种快速测定肉制品中山梨酸钾和苯甲酸钠含量的方法，其特征在于，包括以下步骤(1)搅碎勻质肉制品标样100g，加入去离子水，超声震荡20min，抽滤，重复操作三次， 浓缩滤液体积至20ml，先加入aiil 6mol.厂1的盐酸溶液，混勻，再加入15ml无水乙醚萃取三次，收集乙醚相，旋转蒸发至无乙醚，加入25ml正己烷溶解，加入2. Og中性氧化铝，超声震荡30min，抽滤，收集滤饼，近红外仪器收集其近红外光谱；其中，标样1有15份，山梨酸钾含量分别为 0.005 g. kg人0.01 g. kg"\0. 015 g. kg人0. 02 g. kg-1、0. 025 g. kg人0. 03 g. kg人 0· 035 g. kg-1、0· 04 g. kg-1、0· 045 g. kg-1、0· 05 g. kg人 0. 055 g. kg-1、0. 06 g. kg人 0. 065 g. kg-1、。· 07 g. kg-1和0. 075 g. kg-1 ；标样2有15份，其苯甲酸钠含量分别为0. 005 g.kg-1、0.01 g. kg"\0. 015 g.kg-1、0.02 g. kg人0· 025 g. kg-1、0· 03 g. kg-1、0. 035 g. kg人 0. 04 g. kg人0.045 g. kg"\0. 05 g. kg人0. 055 g. kg-1、0. 06 g. kg人0. 065 g. kg-1、0. 07 g. kg—1 和 0. 075 g. kg—1 ；(2)采用MSC+平滑处理+—阶导数处理方法对标样1的原始红外谱图进行处理后，在区间5210. 72-4898. 31cm"1, 7011. 91-5268. 57 cnT1范围内，使用偏最小二乘法建模1，对山梨酸钾定量分析；在4119. 21-9881. 46CHT1的区间范围内，使用鉴别分析方法建模3，区分山梨酸钾中是否含有苯甲酸钠，对苯甲酸钠进行定性分析；先采用MSC方法对标样2原始红外谱图进行处理剔除一个低浓度样品后，再采用一阶导数、二阶导数处理方法对标样2原始红外谱图进行处理后，在区间8770. 67-8882. 52^1 范围内，使用偏最小二乘法、主成分回归法、逐步多元线性回归法进行建模2，对苯甲酸钠进行定量分析；(3)待测样品处理方法同步骤(1)，将取得的光谱分别输入建模1、建模2和建模3进行检测。
2.根据权利要求1所述的快速测定肉制品中山梨酸钾和苯甲酸钠含量的方法，其特征在于待测样品中山梨酸钾含量为0-0. 075g. kg—1，苯甲酸钠含量为0-0. 075g. kg—1。
全文摘要
本发明公开了一种快速测定肉制品中山梨酸钾和苯甲酸钠含量的方法，包括收集、酸化、萃取、吸附等步骤，通过酸化的方法，将易溶于水的山梨酸钾、苯甲酸钠酸化为易溶于有机溶剂的山梨酸、苯甲酸，使用有机溶剂萃取后，再使用吸附剂进行吸附，提高近红外对测定物质的敏感性，收集光谱数据，进行处理和建模。与现有定量测定山梨酸钾和定性测定苯甲酸钠的方法相比，该测定方法简单、快速，定量结果准确度高，具有很好的实用性，能够产生很好的经济效益和社会效益。
文档编号G01N21/35GK102445429SQ20111027975
公开日2012年5月9日 申请日期2011年9月20日 优先权日2011年9月20日
发明者倪超, 刘 英, 汪源浩, 赵茂程 申请人:南京林业大学