专利名称：一种治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物的检测方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物的检测方法，特别是涉及一种用于治疗急、慢性前列腺炎的胶囊剂(前列平胶囊)的检测方法。
背景技术：
治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物(前列平胶囊)由败酱草、丹参、赤芍、桃仁、红花、泽兰、石韦、乳香、没药九味中药材组成，具有协同作用，符合中药组方原则，达到标本兼治的目的。该制剂结合中西医对急、慢性前列腺炎发病机理的认识，吸收了经典古方之精华，具有清热利湿，化瘀止痛之功效。在全国各地医院临床应用治疗湿热瘀阻所致的急、慢性前列腺炎的过程中，已证明具有显著的临床疗效，深得广大医务工作者和患者的信任。在现有的前列平胶囊的检测方法中，只对药物组合物中的丹参、赤芍进行TLC鉴另IJ。为进一步控制该产品的质量，需要建立新的检测方法，对该产品的质量控制方法进行完善，从而更进一步保证该产品的质量和疗效。
发明内容
本发明的目的是，提供一种治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物的检测方法。本发明的目的是采用如下技术方案来实现的。一种治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物的检测方法，所述中药组合物由败酱草、丹参、赤芍、桃仁、红花、泽兰、石韦、乳香、没药制成，所述检测方法包括采用薄层色谱法鉴定乳香，采用高效液相色谱检测丹参中的丹酚酸B。优选地，所述薄层色谱鉴定乳香的条件如下采用体积比为15-20 1-5，优选为17 3的环己烷-乙酸乙酯作为展开剂；采用加热显色，显色剂为3% -8% (w/v)的香草醛浓硫酸溶液，加热温度为80-120°C，优选为105°C，至斑点清晰即可。在优选的实施方案中，采用薄层色谱法鉴定所述中药组合物中的乳香包括如下步骤I)供试品溶液的制备取中药组合物，加60%乙醇10ml，超声10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；2)对照品溶液的制备取乳香O. 4g，加60%乙醇10ml，超声10分钟，滤过，滤液作为对照品溶液；3)阴性对照溶液的制备按中药组合物的处方比例和工艺制备不含乳香的阴性对照样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液；4)鉴定吸取上述溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(17 3)为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。在供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。结果显示，上述鉴定方法阴性无干扰，样品重性形良好，可以作为鉴别前列平胶囊中乳香的依据。优选地，所述高效液相色谱检测丹参中的丹酚酸B的色谱条件如下采用十八烷基硅烷键合硅胶的填充剂，柱温为30°C ；采用体积比为30 10 I 59的甲醇-乙腈-甲酸-水为流动相，流速为Iml/min ;以及采用286nm的检测波长。在优选的实施方案中，采用高效液相色谱法检测丹参中的丹酚酸B包括如下步骤I)对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得；2)供试品溶液的制备取中药组合物，研细，取O. 34g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，加热回流I小时，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。3)测定以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温30°C，以体积比为30 10 I 59的甲醇-乙腈-甲酸-水为流动相，流速为lml/min，分别精密吸取上述两种溶液各20 μ I，注入液相色谱仪，在286nm检测波长下测定，即得；理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。在进一步优选的实施方案中，所述治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物的检测方法，包括采用薄层色谱法分别鉴定丹参、赤芍和乳香，以及采用高效液相色谱检测丹参中的丹酚酸B。
优选地，所述中药组合物中各原料药的重量份数如下败酱草60-90份、丹参20-30份、赤芍20-30份、桃仁20-30份、红花20-30份、泽兰20-30份、石韦20-30份、乳香4-6份、没药4-6份。优选地，所述中药组合物中各原料药的重量份数如下败酱草70. 2份、丹参23. 4份、赤芍23. 4份、桃仁23. 4份、红花23. 4份、泽兰23. 4份、石韦23. 4份、乳香4. 7份、没药4. 7 份。优选地，所述中药组合物为胶囊剂。在本发明提供的方法检测的中药组合物中，丹参为处方中的主药，丹酚酸B为其中含量较高的成分。中药组合物胶囊(前列平胶囊)的功能主治为清热利湿，化瘀止痛，用于治疗急、慢性前列腺炎。文献报道丹酚酸B有明显扩张血管充血的作用，具有活血化瘀作用，为制剂中的活性成分。为了更好地控制制剂质量，本发明对丹酚酸B的含量进行了测定。经过方法学考察证明本法灵敏度高，重复性好，回收率良好，且阴性对照无干扰。整个试验过程可操作性强，可以作为控制相关药物内在质量的指标之一。与现有技术相比，本发明至少存在以下有益效果1、本发明增加了乳香的薄层色谱测定，此方法阴性无干扰，样品重性形良好，可以作为鉴别前列平胶囊中乳香的依据。2、本发明增加了丹酚酸B的液相色谱检测方法，试验过程可操作性强，经过方法学考察证明本法灵敏度高，重复性好，回收率良好，且阴性对照无干扰，可以作为控制本品内在质量的指标之一。
本发明能够有效控制前列平胶囊的质量，使前列平胶囊质量达到稳定、可控、高效及安全，是对产品的投料要求及原料的质量控制严格，克服现有技术的不足，提高产品的质量、疗效、生物利用度，更好的满足医疗的需要。该检测方法能够有效控制前列平胶囊的质量，使前列平胶囊质量达到稳定、可控、高效及安全，从而更好地满足医疗需要。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图1是实施例2的薄层色谱鉴定图，其中，1、2表示乳香对照药材；3、4表示两批样品；5、6表不阴性对照样品。图2是实施例3中测定10批样品的色谱图。图3是实施例3中专属性试验的色谱图。图4是实施例3中的标准曲线图。图5是实施例3中精密度试验的色谱图。图6是实施例3中稳定性试验的色谱图。图7是实施例3中重复性试验的色谱图。图8是实施例3中回收率试验的色谱图。
具体实施例方式以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。实施例1本实施例提供适用于本发明提供的方法检测的治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物的处方及其制备方法。处方如下败酱草702g 丹参234g 赤芍234g桃仁234g 红花234g 泽兰234g石韦234g 乳香47g 没药47g制备方法如下按处方量取以上九味，取乳香、没药粉碎成细粉，备用。丹参、赤芍粉碎成粗粉，加乙醇提取二次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1. 32 1. 36 (600C )的稠膏，其余败酱草等五味及醇提后的药渣加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 32 1. 36 (600C )的稠膏，加入上述细粉及清膏，混匀，制成颗粒，干燥，装入胶囊，即得。所制备的胶囊剂，内容物为棕红色至棕褐色的颗粒及粉末；气香，味哭、微酸。所述中药组合物还可以以前列平胶囊的商品名直接购自西安千禾药业有限责任公司。实施例2本实施例提供了采用薄层色谱鉴定前列平胶囊中的乳香。1、试验条件双槽展开缸(上海信谊药业有限公司)；硅胶G (薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度0.3_。其余试剂均为分析纯。2、样品的制备取实施例1所制前列平胶囊10粒的内容物，加60%乙醇10ml，超声10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。取乳香O. 4g，加60% (v/v)乙醇10ml，超声10分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取按处方比例和工艺制备的不含没药的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。3、鉴定吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(17 3)为展开剂,展开,取出，晾干。喷以5% (w/v, g/ml)香草醒硫酸溶液,热风吹至斑点显色清晰。三批供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。而阴性样品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，未显相同颜色的斑点，阴性无干扰。结果如图1所示，表明方中其它药味不影响乳香的检出，因此，可以作为鉴别前列平胶囊中乳香的依据。在薄层色谱鉴定乳香的预实验中，发明人对制备样品的溶剂进行了筛选。经试验，用水、无水乙醇及20% (v/v),40% (v/v),80% (v/v)的乙醇溶液作为制备样品的溶剂，其提取效果明显不如以60% (v/v)乙醇作为溶剂的提取效果。此外，通过比较不同体积比的环己烷-乙酸乙酯展开剂，发现当环己烷-乙酸乙酯的体积比为17 3时，可以得到更好的分离，且分离的灵敏度较高，无斑点干扰。实施例3本实施例提供了采用液相色谱法检测前列平胶囊成份丹参中的丹酚酸B的含量。1、色谱条件与系统适用性试验以十八烧基娃烧键合 娃胶为填充剂(生产厂家Agilent Technologies,规格4.6X250mm);以甲醇-乙腈-甲酸-水(30 10 I 59)为流动相；检测波长286nm，柱温30°C,流速lml/min。理论板数按丹酹酸B峰计算应不低于2000。2、对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得。3、供试品溶液的制备取前列平胶囊的内容物，研细，取O. 34g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75% (v/v)甲醇50ml，称定重量，加热回流I小时，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。4、测定分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μ 1，注入液相色谱仪，测定。对10批样品制备的供试品溶液的测定色谱图结果见图2，含量测定结果如表I所示。表110批样品含量测定结果
权利要求
1.一种治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物的检测方法，所述中药组合物由败酱草、丹参、赤芍、桃仁、红花、泽兰、石韦、乳香、没药制成，所述检测方法包括采用薄层色谱法测定乳香，采用高效液相色谱法检测丹参中的丹酚酸B。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述薄层色谱测定乳香的条件如下展开剂为体积比为15-20 1-5，优选为17 3的环己烷-乙酸乙酯；显色剂为3-8% (w/v)的香草醛浓硫酸溶液；加热显色的温度为80-120°C，优选为105°C。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述薄层色谱测定乳香的方法包括以下步骤.1)供试品溶液的制备取中药组合物，加60%乙醇10ml，超声10分钟，滤过，即得；.2)对照品溶液的制备取乳香0.4g，加60%乙醇10ml，超声10分钟，滤过，即得；.3)阴性对照溶液的制备按中药组合物的处方比例和工艺制备不含乳香的阴性对照样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液；.4)测定吸取上述溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为17 3 的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；再喷以显色剂5% (w/v)的香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。
4.根据权利要1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测丹参中的丹酚酸B的色谱条件如下填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；柱温为30℃；流动相为体积比为30 10 1 59的甲醇-乙腈-甲酸-水；流速为lml/min ；检测波长为286nm ；按丹酚酸B峰计算理论板数应不低于2000。
5.根据权利要1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测丹参中的丹酚酸B的方法包括以下步骤.1)对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每1ml含 40μg的溶液，即得；.2)供试品溶液的制备取中药组合物，研细，取0.34g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，加热回流I小时，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，用O. 45 μ m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。.3)测定以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温30°C，以体积比为3010 1 59 的甲醇-乙腈-甲酸-水为流动相，流速为lml/min，分别精密吸取上述两种溶液各20 μ 1， 注入液相色谱仪，在286nm检测波长下测定。
6.根据权利要1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括采用薄层色谱法测定丹参和赤芍的步骤。
7.根据权利要1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述中药组合物中各原料药的重量份数如下败酱草60-90份、丹参20-30份、赤芍20-30份、桃仁20-30份、红花20-30份、泽兰.20-30份、石韦20-30份、乳香4-6份、没药4-6份。
8.根据权利要1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述中药组合物中各原料药的重量份数如下败酱草70. 2份、丹参23. 4份、赤芍23. 4份、桃仁23. 4份、红花23. 4份、泽兰23.4份、 石韦23. 4份、乳香4. 7份、没药4. 7份。
全文摘要
本发明提供一种治疗急、慢性前列腺炎的中药组合物的检测方法。本发明提供的方法包括采用薄层色谱法鉴定乳香，采用高效液相色谱检测丹参中的丹酚酸B。经过方法学考察证明本发明提供的方法灵敏度高，重复性好，回收率良好，且阴性对照无干扰。整个试验过程可操作性强，可以作为控制相关药物内在质量的指标之一。
文档编号G01N30/02GK103048416SQ20111031131
公开日2013年4月17日 申请日期2011年10月14日 优先权日2011年10月14日
发明者胡小虎, 王锁刚, 张琼 申请人:西安千禾药业有限责任公司