专利名称：一种白术药材的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种白术药材的检测方法，具体地，是采用HPLC指纹图谱进行检测的方法。
背景技术：
白术，为菊科植物(Atractylodes macrocephala Koidz.)的干燥根莖，其味苦、甘，性温，归脾、胃经，具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的功效。白术是中医常用药材，但是，目前药典对白术的鉴定中，仅涉及性状、薄层等简单鉴定方法，并不能为白术药材提供一个直观的真伪鉴别方法。当前，高效液相技术是中药质量检测中较为常用的定量、定性检测方法，可以直观地分析药材的真伪。目前，研究人员也将该技术应用到了白术药材的检验中，如何宏生等，采用甲醇-水(70 3)为流动相，对白术药材及炮制品的质量进行检测(何宏生，等，高效液相色谱法测定白术饮片及其炮制品中白术内酯I含量，医药导报，2011年30卷5期)。但该方法中，仅用于测定药材中的白术内酯I。虽然白术内酯为白术的抗炎有效成分，但该单一成分的含量并不能完全代表白术药材的质量差异。为了更好的监控白术药材的质量，黎琼红等，还对白术药材的指纹图谱进行了研究，以乙腈-水梯度洗脱(45%-100%乙腈)，建立的指纹图谱中标定了 24个共有特征峰(黎琼红，等，白术药材的指纹图谱研究，中草药，2007年38卷6期)。现有方法中，多是使用有机溶剂(如甲醇)提取白术药材制备供试品溶液进行测定的。然而，白术在使用过程中多以水煎为主，水为溶剂时，更容易对药材完全浸润，水煎液中提取得到的化学成分比纯有机溶剂提取时更为完全，因此，对白术水煎液进行质量检测，更有利于说明白术药材的质量优劣。但是，由于水煎液中成分更为复杂，在液相检测时，常常会导致各种化学成分分离度不高；同时，水煎液中的某些成分，如糖类等，也会对基线产生较大影响，导致基线不稳，色谱效果不佳。目前，还未见将白术药材水煎后进行HPLC指纹图谱分析的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种白术药材的检测方法。本发明提供了一种白术药材的检测方法，该方法是采用HPLC指纹图谱进行检测，其操作步骤如下(I)取白术药材，加水煎煮后，取水提液，干燥，再用甲醇或乙醇提取后，制备供试品溶液(2)取白术内酯III，制备参照物溶液；(3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液注入液相色谱仪，以乙腈-水系统为流动相进行洗脱，在紫外下进行检测，其液相条件如下色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂；检测波长为248±5nm ;梯度洗脱条件如
权利要求
1.一种白术药材的检测方法，其特征在于该方法是采用HPLC指纹图谱进行检测，其操作步骤如下 (1)取白术药材，加水煎煮后，取水提液，干燥，再用甲醇或乙醇提取后，制备供试品溶液 (2)取白术内酯III，制备参照物溶液； (3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液注入液相色谱仪，以乙腈-水系统为流动相进行洗脱，在紫外下进行检测，其液相条件如下 色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂；检测波长为248±5nm ;梯度洗脱条件如下 时间/min_乙腈比例/%0-15 2-1515-25 15-4025-40 40-5340-50 53-7050-70 7070-80 70-100_80-100_100_
2.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于检测波长为248nm。
3.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于检测温度为30±2°C;流速为I.Oml/min0
4.根据权利要求I所述的检测方法，其特征在于色谱柱为Diamonsil钻石C18，250mm X 4. 6mm X 5 u m。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的检测方法，其特征在于步骤(I)的具体操作如下 精密称取白术药材，加药材重量16-24倍水，煎煮2-3次，每次0. 5-1. 5h，提取液浓缩、干燥后，加入药材8-12倍w/v甲醇超声提取15-30min,过滤,浓缩,定容,作为供试品溶液。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于每毫升供试品溶液相当于0.3-0. 5g白术药材。
7.根据权利要求1-4任意一项所述的检测方法，其特征在于步骤(2)中，选用甲醇制备参照物溶液。
8.根据权利要求1-7任意一项所述的检测方法，其特征在于所述HPLC指纹图谱中，有12个共有特征峰；以白术内酯III的色谱峰的保留时间为I计算其他峰的相对保留时间1号峰的相对保留时间为0. 52±0. 02 ；2号峰的相对保留时间为0. 63±0. 01 ；3号峰的相对保留时间为0. 66±0. 01 ；4号峰的相对保留时间为0. 78±0. 01 ；5号峰的相对保留时间为0. 80±0. 005 ；6号峰的相对保留时间为0. 82±0. 01 ；8号峰的相对保留时间为I. 10±0. 01 ；9号峰的相对保留时间为I. 125±0. 004 ；10号峰的相对保留时间为I. 135±0. 004 ；11号峰的相对保留时间为I. 145±0. 005 ；12号峰的相对保留时间为I.23±0. 01。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于所述指纹图谱如图2所示。
全文摘要
本发明公开了一种检测白术药材质量的方法，该方法是采用HPLC指纹图谱进行检测，操作步骤如下(1)制备供试品溶液；(2)制备参照物溶液；(3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液注入液相色谱仪，以乙腈-水系统为流动相进行洗脱，在248±5nm下进行检测。本发明中，将白术药材水煎后，再应用HPLC指纹图谱技术进行检测，更能够真实反映白术的药材质量，并且，本发明中通过对流动相等色谱条件的特定选择，使得色谱图基线平稳、便于积分，特征峰分离度良好，不同药材间相似度高，表明本发明方法能够有效用于对白术的质量监控，为白术药材的用药安全提供了保障。
文档编号G01N30/12GK102680631SQ20121016459
公开日2012年9月19日 申请日期2012年5月24日 优先权日2012年5月24日
发明者彭腾, 李鸿翔, 杨菁, 袁海梅, 贺钢民, 邓赟, 黎豫川 申请人:成都中医药大学