专利名称：一种一点红药材的鉴别方法
技术领域：
本发明主要内容是一点红的鉴别方法，具体为利用高效液相色谱指纹图谱来鉴别一点红药材的方法。
背景技术：
一点红是我国南方地区习用的传统中草药，为菊科植物一点红[Emiliasonchifolia(L.)DC]的干燥全草。别名有羊蹄草、叶下红、乳汁草、野苦草、红花细辛、小蒲公英、七十二枝花、紫背指丁、牛尾膝，野芥兰，假芥兰。分布于海拔330 2000m的山坡、田问、路旁。功能主治清热解毒、散瘀消肿。用于上呼吸道感染，口腔溃疡，肺炎，乳腺炎，肠炎，外伤感染，急性结膜炎，急性扁桃体炎，肺炎，胆囊炎，传染性肝炎，钩端螺旋体病，菌痢，尿路感染，疮疔痈肿，湿疹，跌打损伤。异槲皮苷为一点红药材中含量最高的黄酮类成分，结构稳定，不易降解，并具有降血压、抗炎等活性。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。在此基础上，如果进一步开展谱效学研究，可使中药质量与其药效真正结合起来，有助于阐明中药作用机理。总之，中药指纹图谱的研究和建立，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。综上所述，在目前国内外关于一点红的质量控制方法较为少见，因此建立一种新型的，高效的，安全的质量控制方法是十分必要的，本发明有效地克服了现有技术的不足，提高了一点红的质量控制标准，建立了制剂中检测方法，保证了一点红的质量标准水平。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用高效液相色谱指纹图谱来鉴别一点红药材的方法，并可将一点红指纹图谱作为一点红药材质量控制及真伪鉴别的指标之一。本发明包括以下步骤建立一点红的标准指纹图谱，方法如下参照物溶液的制备取异槲皮苷对照品3mg，精密称定，置IOml容量瓶中，用适量50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇均，滤液用0. 45 y m微孔滤膜过滤；取样注入高效液相色谱仪，记录色谱图，异槲皮苷的色谱图与样品图谱中5号峰保留时间一致，作为参照峰；一点红药材标准品溶液的制备取一点红药材的粉末约3. Og置具塞锥形瓶中，精密称定，加入50%甲醇50ml,超声提取60min,用50%甲醇补足损失的重量,用0. 45 y m微孔滤膜过滤，即得；色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；检测波长273nm ;流动相乙腈(A)-O. 4%冰乙酸(B)，梯度洗脱，体积比为
权利要求
1.一种一点红药材的鉴别方法，包括以下步骤 (1)建立一点红的标准指纹图谱，方法如下 a.参照物溶液的制备取异槲皮苷对照品3mg，精密称定，置IOml容量瓶中，用适量50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇均，滤液用O. 45μπι微孔滤膜过滤；取样注入高效液相色谱仪，记录色谱图，异槲皮苷的色谱图与样品图谱中5号峰保留时间一致，作为参照峰； b.一点红药材标准品溶液的制备取一点红药材的粉末约3. Og置具塞锥形瓶中，精密称定，加入50%甲醇50ml,超声提取60min,用50%甲醇补足损失的重量,用O. 45 μ m微孔滤膜过滤，即得； c.色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；检测波长273nm;流动相乙腈(A)-0.4%冰乙酸(B)，梯度洗脱，体积比:0-5min，A为5%;15min，A升至15%；35min,A 升至 25% ；65min, A 升至 50% ；70min, A 升至 85% ；75min, A 升至 95% ；75-80min, A 保持95% ； d.测定方法精密吸取一点红药材标准品溶液及对照品溶液，分别注入液相色谱仪，制定一点红的标准指纹图谱； 所述一点红标准指纹图谱中，共有峰有18个，其中超过总峰面积10%的指纹峰有3个，以异槲皮苷的色谱峰的相对保留时间和相对峰面积为1，计算其他峰的相对保留时间和相对峰面积，上述3个指纹峰分别是5号峰平均相对保留时间为I,相对峰面积为I ;13号峰平均相对保留时间为I. 8334，相对峰面积为O. 2410-0. 7134 ；14号峰的平均相对保留时间为I. 8639，相对峰面积为O. 2019-0. 5426 ； (2)以上述相同的方法测定待测一点红样品指纹图谱； (3)将待测一点红样品指纹图谱与一点红标准指纹图谱对比，筛选符合一点红标准指纹图谱的一点红药材。
2.如权利要求I所述的一点红药材鉴别方法，其特征在于，所述18个共有峰的相对保留时间的相对标准偏差RSD均小于2%，其中I号峰的平均相对保留时间为O. 1695，相对标准偏差RSD为O. 46% ;其中2号峰的平均RT为O. 1796，RSD为O. 96% ;其中3号峰的平均RT为O. 1976，RSD为I. 28% ;其中4号峰的平均RT为O. 7723，RSD为O. 38% ;其中5号峰的平均RT为1，RSD为O ;其中6号峰的平均RT为I. 0536，RSD为O. 19% ;其中7号峰的平均RT为I. 1649，RSD为O. 12% ;其中8号峰的平均RT为I. 2072，RSD为O. 12% ;其中9号峰的平均RT为I. 4759，RSD为O. 14% ;其中10号峰的平均RT为I. 6438，RSD为O. 15% ；其中11号峰的平均RT为I. 6689，RSD为O. 13%;其中12号峰的平均RT为I. 7941，RSD为O.14%;其中13号峰的平均RT为I. 8325，RSD为O. 17%;其中14号峰的平均RT为1.8631，RSD为O. 14% ;其中15号峰的平均RT为I. 9167，RSD为O. 13% ;其中16号峰的平均RT为2.0464，RSD为O. 11% ;其中17号峰的平均RT为2. 0958，RSD为O. 12% ;其中18号峰的平均 RT 为 2. 4307，RSD 为 O. 10%。
全文摘要
本发明主要的内容是通过建立一点红药材的HPLC指纹图谱，并将其用于药材的鉴别，该方法保证了一点红药材的质量检测标准的准确性和先进性，可作为质量控制的重要指标。
文档编号G01N30/02GK102798673SQ20121024659
公开日2012年11月28日 申请日期2012年7月17日 优先权日2012年7月17日
发明者王立升, 史新, 庞赛, 蒋敏捷 申请人:广西大学