专利名称：一种测定食品或蔬菜中草酸含量的方法
技术领域：
本发明涉及一种草酸含量测定方法，具体说是一种利用顶空气相色谱测定食品和蔬菜中草酸含量的方法，属于食品分析检测领域。
背景技术：
草酸也称为乙二酸，是最简单的有机二元酸之一。它广泛存在于自然界中，特别是动植物组织中，主要是以游离态(草酸钾和草酸钠)和草酸钙结晶的形式存在。在我们日常食用的很多食品和蔬菜中富含草酸，例如菠菜、苋菜、芹菜、豆类、巧克力、草莓、葡萄及茶等。从环境毒理学和食品营养学的角度看，草酸是一种环境毒素和抗营养因子。草酸在人体内不容易被氧化分解，经代谢作用后形成的产物属于酸性物质，可导致人体内酸碱度失去平衡，过多食用还会中毒。长期食用草酸含量高的蔬菜容易引发关节炎、低血钙、膀 胱结石和肾结石等疾病。鉴于草酸能对人体产生一定的危害，不少研究者试图建立快速、准确、低成本测定食品和蔬菜中草酸含量的方法。目前草酸的测定方法主要有滴定法、比色法、色谱分析法和酶法等，这些方法各有利弊。其中，滴定法至今仍是食品分析中的一种经典方法，但其灵敏度较低、操作较繁琐且耗时。比色法灵敏度高且廉价，但操作繁琐且重复性较差。色谱分析法包括高效液相色谱和离子色谱两种，其操作简便、快捷、灵敏度高且重复性好，但测定过程中其它物质干扰较严重。酶法检测草酸简便快速，灵敏度高，选择性好，但检测成本较高。因此建立一种更为简便、成本低廉、快速、准确测定食品和蔬菜中草酸含量的方法具有现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种测定食品和蔬菜中草酸含量的方法，克服目前分析食品和蔬菜中草酸含量的方法所存在的弊端。本发明的测定原理是基于在酸性条件下草酸根与溴酸钠发生化学反应产生二氧化碳，然后采用顶空-气相色谱法测定产生的二氧化碳量，从而计算得到样品中草酸的含量。根据该方法可以实现快速测定，操作简单且易掌握，其分析结果准确度高，具有一定的实用性。本发明是通过以下技术方案实现的，具体包括以下步骤
一种测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，包括如下步骤
(1)配制标准溶液称取适量的草酸钠于容量瓶中，加去离子水定容至容量瓶刻度得到草酸钠标准溶液；
(2)建立标准曲线采用顶空进样器，在多个不同顶空样品瓶中均分别加入相同体积的溴酸钠水溶液和相同体积的硫酸水溶液，并密封样品瓶，然后依次往不同顶空样品瓶中加入不同量的所述草酸钠标准溶液，将准备好的顶空样品瓶放置于样品台上，然后进行顶空-气相色谱检测，根据气相色谱信号峰面积与加入草酸根的量之间的对应关系得到一条标准曲线；
(3)样品预处理将待测样品研磨成均浆或粉末，然后加入盐酸在加热条件下进行抽提，冷却后用去离子水定容，取适量定容后的溶液进行离心，其上层澄清液用O. 22 μ m滤膜过滤得到预处理后样品；
(4)样品检测取适量预处理后样品，将其用顶空进样器加入至已密封的且装有溴酸钠溶液和硫酸溶液的顶空样品瓶中，将准备好的顶空样品瓶放置于样品台上，然后进行顶空-气相色谱检测，记录下样品的气相色谱峰面积；
(5)结果计算将步骤(4)所得气相色谱峰面积与步骤(2)标准曲线进行比较，通过计算得到样品中草酸的含量。进一步优化的，所述容量瓶为IOOOmL容量瓶。进一步优化的，步骤(I)中所述草酸钠标准溶液的浓度为O. 0Γ0. 05mol/L。进一步优化的，步骤(2)中所述加入的溴酸钠水溶液浓度为O. 5^1. 5mol/L,体积为1. 0 3. OmL，硫酸水溶液浓度为1. 0 2. Omol/L，体积为1. 0 2. OmL。进一步优化的，步骤(2)中所述加入的草酸标准溶液的体积为0. (To. 6mL。进一步优化的，步骤(2)和(4)中所述的顶空进样器的操作条件为进样器加热炉温度5(T80°C ;顶空瓶在烘箱中的平衡时间5. (Γ20. Omin。进一步优化的，步骤(2)和(4)中气相色谱的操作条件为柱温为4(T70°C ;载气为高纯氮气，其流速为3. (Γ3. 5mL/min ;检测器为热导检测器(T⑶)，检测器温度为200 250。。。进一步优化的，步骤(3)中所述盐酸浓度为1. (Γ3. Omol/L，预处理温度为8(Tl00°C，反应时间为2(T60min，离心转速为500(Tl0000r/min，离心时间为l(T30min。进一步优化的，步骤(4)中所述适量预处理后样品的体积为0. 5^2. OmL。进一步优化的，上述测定食品或蔬菜中草酸含量的方法具体包括步骤
Cl)配制标准溶液准确称取6. 7 g (精确至0. OOOlg)草酸钠于IOOOmL容量瓶中，力口去离子水定容至刻度得到草酸钠标准溶液；
(2)建立标准曲线在一系列的顶空样品瓶分别加入ImL浓度为0.5mol/L的溴酸钠溶液和ImL浓度为lmol/L硫酸溶液，并密封样品瓶，然后往不同顶空样品瓶中依次加入O、
0.1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6mL的草酸钠标准溶液,将准备好的顶空样品瓶放置于样品台上，然后进行顶空-气相色谱检测，所得气相色谱信号峰面积与加入草酸根的量之间能得到一条标准曲线；
(3)样品预处理准确称取样品，将其研磨成均浆或粉末，然后加入浓度为2mol/L的盐酸溶液在8(Tl00°C下抽提2(T30min，冷却后用去离子水定容至IOOmL,取20mL定容后的溶液经500(T8000r/min离心l(T20min，其上层澄清液用0. 22 μ m滤膜过滤得到预处理样品。(4)样品检测准确量取0. 5^2. OmL预处理样品，将其用进样器加入至已密封的，且装有ImL浓度为0. 5mol/L的溴酸钠溶液和ImL浓度为lmol/L硫酸溶液的顶空样品瓶中，将准备好的顶空样品瓶放置于样品台上，然后进行顶空-气相色谱检测，记录下样品的气相色谱峰面积。(5)结果计算将步骤(4)所得峰面积与步骤(2)标准曲线进行比较，通过计算得到样品中草酸的含量。进一步优化的，步骤(5)中所述草酸含量的计算公式为
权利要求
1.一种测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于，包括如下步骤 (1)配制标准溶液称取适量的草酸钠于容量瓶中，加去离子水定容至容量瓶刻度得到草酸钠标准溶液； (2)建立标准曲线采用顶空进样器，在多个不同顶空样品瓶中均分别加入相同体积的溴酸钠水溶液和相同体积的硫酸水溶液，并密封样品瓶，然后依次往不同顶空样品瓶中加入不同量的所述草酸钠标准溶液，将准备好的顶空样品瓶放置于样品台上，然后进行顶空-气相色谱检测，根据气相色谱信号峰面积与加入草酸根的量之间的对应关系得到一条标准曲线； (3)样品预处理将待测样品研磨成均浆或粉末，然后加入盐酸在加热条件下进行抽提，冷却后用去离子水定容，取适量定容后的溶液进行离心，其上层澄清液用O. 22 μ m滤膜过滤得到预处理后样品； (4)样品检测取适量预处理后样品，将其用顶空进样器加入至已密封的且装有溴酸钠溶液和硫酸溶液的顶空样品瓶中，将准备好的顶空样品瓶放置于样品台上，然后进行顶空-气相色谱检测，记录下样品的气相色谱峰面积； (5)结果计算将步骤(4)所得气相色谱峰面积与步骤(2)标准曲线进行比较，通过计算得到样品中草酸的含量。
2.根据权利要求1所述的测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于所述容量瓶为IOOOmL容量瓶。
3.根据权利要求1所述的测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步骤(I)中所述草酸钠标准溶液的浓度为O. 0Γ0. 05mol/L。
4.根据权利要求1所述的测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步骤(2)中所述加入的溴酸钠水溶液浓度为O. 5^1. 5mol/L，体积为1. (Γ3. OmL，硫酸水溶液浓度为1.0 2. OmoI/L,体积为1. 0 2. OmL。
5.根据权利要求1所述的测定分析方法，其特征在于步骤(2)中所述加入的草酸标准溶液的体积为O. (TO. 6mL。
6.根据权利要求1所述的测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步骤(2)和(4)中所述的顶空进样器的操作条件为进样器加热炉温度5(T80°C ;顶空瓶在烘箱中的平衡时间5. 0 20· Omin。
7.根据权利要求1所述的测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步骤(2)和(4)中气相色谱的操作条件为柱温为4(T70°C ;载气为高纯氮气，其流速为3. (Γ3. 5mL/min ;检测器为热导检测器(T⑶)，检测器温度为20(T25(TC。
8.根据权利要求1所述的测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步骤(3)中所述盐酸浓度为1. (Γ3. OmoI/L,预处理温度为8(Tl00°C，反应时间为2(T60min，离心转速为 500(Tl0000r/min，离心时间为 10 30min。
9.根据权利要求1所述的测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步骤(4)中所述适量预处理后样品的体积为O. 5^2. OmL。
10.根据权利要求1所述的测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步骤(5)中所述草酸含量的计算公式为
全文摘要
本发明涉及一种测定食品或蔬菜中草酸含量的方法，具体涉及一种利用顶空气相色谱法快速测定食品或蔬菜中草酸含量的方法。其步骤为(1)配制标准溶液；(2)建立标准曲线；(3)进行样品预处理；(4)采用顶空-气相色谱进行检测；(5)结果计算。本方法的有益效果在于，采用了上述方法测定食品或蔬菜中草酸的含量，具有操作简便快捷，检测灵敏度高，测定结果准确，抗干扰能力强等优点。
文档编号G01N30/02GK103018359SQ20121050274
公开日2013年4月3日 申请日期2012年11月30日 优先权日2012年11月30日
发明者李海龙 申请人:华南理工大学