通过照护点药物动力学曲线分析进行治疗药物监测和投配的方法与组合物的制作方法

通过照护点药物动力学曲线分析进行治疗药物监测和投配的方法与组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了用于采用照护点或服务点自采样进行药物动力学曲线分析并且允许基于所述药物动力学曲线进行剂量调整的方法和试剂盒。
【专利说明】通过照护点药物动力学曲线分析进行治疗药物监测和投配 的方法与组合物
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本PCT申请要求以下美国临时申请的优先权：2011年5月30日提交的第61 / 491，268号、2011年8月3日提交的第61 / 514, 488号、2011年8月24日提交的第61 / 526, 950号、2011年9月11日提交的第61 / 533, 250号、2012年1月3日提交的第61 / 577, 008号、2012年3月3日提交的第61 / 606, 371号、2012年3月25日提交的第61 / 615, 312号以及2012年4月19日提交的第61 / 635, 730号，各美国临时申请是以全文引 用的方式并入本文中。
[0003] 发明背景
[0004] 个性化医疗在其用于利用治疗剂对个别患者进行定制治疗时具有以下分量：优化 投与所述患者的药物剂量的药物动力学（PK)分量和使治疗模式与所述患者相匹配的药效 学（PD)分量。治疗模式需要了解作用机制和抗性机制。预后性、预测性和/或诊断性生物 标记物的惊人增长证明，ro生物标记物的鉴别已成为大量研究工作的焦点。然而，经常忽 视PK分量。现在，对PK的不完全了解正阻碍着ro生物标记物测试发挥它的全部潜力。
[0005] 治疗药物监测（TDM)具有通过改善药物递送以及允许正确应用生物标记物测试 来改革治疗剂的潜力。广泛地相信可预测反应的生物标记物的鉴别将允许仅对会有回应的 那些人进行靶向治疗并且分出不会回应治疗的那些人。然而，不管疾病对药物如何敏感，如 果患有疾病的个体没有接收足够的药物，那么所述个体就不会回应。这就是将会期待TDM 能补充并且推进当前关于生物标记物发现的努力的原因所在。
[0006] 然而，典型地，个性化投配已经成为了一种不顾成败的方法。仅向医师提供关于对 患者进行投配的总体指导，而大部分剂量调整留待对患者进行主观观测。医师的案头参考 书总结了在研究文献中发现的通过实验确定的合理药物剂量范围。这些范围比较宽，并且 对所有患者都指定相同的剂量。探究剂量调整的科学研究和出版物并不适合于使剂量与个 别患者匹配。相反，它们基于在最坏情况下整个群体的特征，或者在最好情况下仅患者的子 集的特征的平均情况提供较宽剂量范围。
[0007] 多次研究认识到，考虑到药物反应的个体间差异，需要发现新的方法。过去几十年 的研究已鉴别了影响药疗的临床效果的许多因素。已经发现年龄、性别、种族、体重、肥胖、 伴随发病率、饮食以及药物-药物相互作用都会影响药物的药物动力学和药效学。儿科群 体、妇女、少数民族以及年长者与他们的男性白种人同伴相比往往需要不同的投配日程。
[0008] 因为大量可能互相作用的变量会影响个体对治疗的反应，所以面临着最小化副作 用并且最佳化药物性能这一任务的医师当前必须依靠试错法来改善指定个体的处方剂量。 使用主观和客观方法来识别不利症状并且实施治疗过程中所必需的改变。普通的监测方法 是临床观察，它包括由观察疾病的生理学体征和症状的医师进行个别咨询和密切的个人监 督。这种方法易于出错、耗费时间、昂贵、非常主观而且会过度增加医生-患者接触时间。此 夕卜，患者因暴露于高药物浓度而承担着不必要的毒性风险，或因药物浓度不足而接收次最 佳或无效的治疗浓度。
[0009] 因此，需要利用治疗药物监测对个体进行投配的经过改善的方法。
[0010] 发明概述
[0011] 在某些实施方案中，本发明提供了一种对经过药物治疗的个体进行治疗药物监测 的方法。所述方法包括使用在适于构建药物动力学曲线的时间点获自所述个体的至少两份 样品中的药物浓度来构建所述药物在所述个体中的药物动力学曲线。所述样品是在照护点 或使用点通过采样或自采样而收集在照护点装置或使用点装置上，各装置能够定量所述药 物；或收集在适合于在由实验室定量所述药物之前存储所述至少两份样品的基质上。所述 药物动力学曲线包括适合于指导对所述个体投配所述药物的药物动力学参数。
[0012] 所述样品是在照护点或服务点通过例如自采样加以收集。可以将样品应用到侧 流装置上以便定量所述药物，并且将结果传送到医师或医师代理人以供药物动力学分析。 在其他实施方案中，所述样品是在照护点或服务点通过例如自采样收集在合适的存储基质 上，例如滤纸，随后将所述样品递送到实验室以便定量和分析。
[0013] 在某些实施方案中，由照护点或使用点在不同的时间通过自采样从个体收集的样 品是由实验室获得。所述实验室随后测试所述样品以定量所关注的药物，并且基于结果构 建药物动力学曲线。药物动力学曲线的结果可以任选地随增加所述个体的药物剂量以便提 高效力或减少剂量以便降低毒性风险的建议一起提供。
[0014] 在另一个方面，它提供一种试剂盒，所述试剂盒用于使用药物动力学曲线对经过 药物治疗的个体进行治疗药物监测。有利的是，所述试剂盒可以用来执行根据权利要求1 所述的方法。所述试剂盒包含多个能够对所述至少两份样品中的药物进行定量的照护点装 置或使用点装置，或适合于在由实验室定量之前存储所述样品的基质。
[0015] 附图简述
[0016] 图1是展示丸式静脉内施用的PK曲线和经口施用药物的PK曲线的图。
[0017] 图2是展示AUC随3小时或24小时内施用的紫杉酚剂量变化的图。
[0018] 图3是展示AUC随两种不同的紫杉醇制剂的剂量变化的图。
[0019] 图4是展示AUC随两种不同的紫杉醇制剂的剂量变化的图。
[0020] 图5是展示AUC随两种不同的紫杉醇制剂的剂量变化的图。
[0021] 图6是展示在开始输注两种不同的紫杉醇制剂之后0到72小时平均紫杉醇浓度 随时间变化的图。
[0022] 图7是呈现研究结果的一系列图，这些图展示Abraxane药物动力学参数Vz (图 7A)、AUCinf (图 7B)、Cmax (图 7C)、CL (图 7D)以及 ?\ / 2 (图 7E)在接收 Abraxane 的群体内 的变化性。
[0023] 图8是呈现研究结果的一系列图，这些图展示FSH药物动力学参数Cmax(图8A)、 AUC (图8B)、CL (图8C)以及?\ / 2 (图8D)在接收150IU FSH的群体内的变化性。
[0024] 图9是呈现研究结果的一系列图，这些图展示FSH药物动力学参数Cmax(图9Α)、 AUC (图9B)、CL (图9C)以及?\ / 2 (图9D)在接收300IU FSH的群体内的变化性。
[0025] 图10展示假定丸式施用时单指数ΡΚ曲线的曲线图。
[0026] 图11展示以两个指数为特征的ΡΚ曲线。
[0027] 图12展示原型紫杉醇侧流测定。
[0028] 图13展示使用共焦光度扫描仪得到的hCG定量侧流的结果。
[0029] 图14使用耦接照相机的图像分析程序得到的FSH定量侧流。
[0030] 图15纳米金定量FSH侧流信号的稳定性。
[0031] 图16LH(黄体化激素）的定量照护点侧流测定。尿液LH测定（范围=5-1，700IU / L);血清/血浆LH测定（范围=1-1，700IU / L);血液LH测定（范围=5-1，700IU / L)。
[0032] 图17FSH(卵泡刺激激素）的定量照护点测定。尿液FSH测定（范围=6-1，500IU / L);血清/血浆FSH测定（范围=5-10, 000IU / L);血液FSH测定（范围=5-10, 000IU / L)。
[0033] 图18hCG(人绒毛膜促性腺激素）的定量照护点测定。尿液hCG测定（范 围=5-10, 000IU / L);血清hCG测定（范围=1-10, 000IU / L);血液hCG测定（范围 =20-10, 000IU / L)。
[0034] 图19是Abraxane和Taxol (药物动力学群体）的估计紫杉醇血液药物动力学变 量的总结。
[0035] 发明详述
[0036] 本发明涉及多种方法，通过这些方法可以使用在投配后的不同时间点获得的样品 构建药物在接收药物的个体中的药物动力学曲线。用于构建所述药物动力学曲线的数据是 从在照护点或使用点收集的样品获得。有利的是，所述样品可以通过自采样来获得。在某 些实施方案中，所述样品可以递送到照护点装置以定量所述药物，并且将如此获得的结果 报告给医师或他的代理人。可选地，使用适合于收集和存储所述样品直到被实验室接收并 分析的基质或容器来收集所述样品。适合于收集和存储所述样品的基质的实例包括但不限 于市售生物采样滤纸系统，如 Whatman3MM、GF / CM30、GF / QA30、S&S903、GB002、GB003 * GB004。可利用若干种类用于血液样本收集的揩吸材料，例如S&S903纤维素（得自于木材 或棉花）滤纸和Whatman玻璃纤维滤纸。将血斑放在所述滤纸的一个或多个指定区域中， 使其干燥，并且然后随测试申请表一起邮寄给实验室。这种收集方法具有避免需要在医生 办公室或诊所收集样品的优势。因而，患者可以在0到72小时期间便利地收集多份样品， 从而相当节约成本和时间。这种方式的优势在于提高效率和减少将分析结果传输到治疗医 师的延迟，医师可以使用所述信息根据需要来调整治疗，并且联络所述患者以传达新的治 疗方案。
[0037] 在本发明之前，药物动力学指导性投配的潜在价值尚未得以利用，部分是因方收 集个别药物动力学曲线所需的样品不够便利并且过于昂贵，因为样品收集典型地需要多达 72小时的较长医院停留时间。对于典型药物PK研究而言，药物动力学研究局限于第I阶段 研究，其中关于几个患者的PK / ro形成了在整个群体中使用药物的基础。为了补偿，通常 在药物开发的第III阶段期间进行群体PK研究；然而，由于相同的限制，这些研究是根据稀 疏采样程序进行。由于与稀疏采样相关的不精确性，仅能获得群体PK的近似值。在完整的 药物动力学测试中，需要在48到72小时的时期内收集至少12个数据点以充分表征每一个 特定患者的PK参数。此举不可能对加入第III阶段的每个患者进行（或甚至对第II阶段 试验也那样）。针对C max，在施用药物之后立即获得用来评价药物水平的血液样品典型地不 成问题。然而，在随后的时间点获得血液样品用来定义"清除率"和"稳态浓度"非常困难， 因为拐点是治疗之后4到24小时。患者返回医院进行更多血液操作往往是比较麻烦或繁 重的，并且就成本和服务而言，整夜护理患者将会是比较昂贵的。
[0038] 通过LC / MS将5-FU投配在稳态水平优化的第3阶段多中心随机化研究 (N=208)证明了药物动力学指导的投配对于效力和毒性二者的益处（Gamelin，E，Delva，R， Jacob, J.等，''Individual fluorouracil dose adjustment based on pharmacokinetic follow-up compared with conventional dosage ：Results of a multicenter randomized trial of patients with metastatic colorectal cancer，'，J Clin Oncol. 13 ： 2099-2105,2008.)。一半患者是基于体表面积（BSA)来投配5-FU。另一半最初是基于BSA 进行投配，随后基于测量患者血浆中的化学疗法的实际浓度的血液测试来调整循环剂量。 主要终点是肿瘤反应；次要终点是治疗耐受性。所述研究的结论为：1)剂量调整组的反应 速率相对于BSA组几乎加倍（33. 6%相对于18. 3% )，具有统计显著性；2)具有个性化5-FU 剂量管理的患者的两年总体存活率提高了 48%，其中BSA分组中22个月相对于16个月的 中位数存活率有所提高。残存率数据倾向于显著性；3)发现具有个性化剂量调整的患者中 的III / IV级5-FU相关毒性显著较低；4)发现58%的患者剂量不足（亚治疗且较低的有 效药物浓度）并且上调他们的剂量；以及5)发现17%剂量过高（增加了严重副作用的风 险）并且下调他们的剂量。然而，大部分静脉内施用的药物并非为了以24小时的长期输注 来实现稳态。可选地，他们以单次短期输注（30分钟到3小时）的形式投配，从而不能维持 长期持续稳态血液药物浓度。
[0039] 药物PK的特征在于药物被吸收到身体的不同代谢区中--一般通过血液、组织， 然后是目标器官。它的特征还在于药物通过药物的主动新陈代谢从身体中清除，或被肝 和/或肾清除。血药浓度相对于时间的曲线描述了个体如何处理药物。通常被接受的描 述药物暴露的参数为曲线下面积（AUC)或有效药物浓度的时间或毒性药物浓度的时间。一 般接受各药物存在单一通用PK曲线。然而，这是不正确的，因为调查PK文献将显示任何 特定药物的PK曲线都存在较宽范围的变化。这大概是由于个体在吸收和清除方面的变化 性。事实上，两条完全不同的曲线可以具有相似的AUC值。因此，为了完全开发TDM指导 的投配，将针对各患者产生完全个性化的PK曲线以便可进行剂量优化，并且可以使用如 Phoenix(WinNonlin)等常规PK程序估计通过改变投配频率或持续时间所实现的剂量调 整。使用任一个单一 PK参数进行剂量调整都将忽视可获得的PK数据的价值并且不会同样 有效。所以，充分个性化的PK曲线将用于指导剂量调整，并且与如AUC等单一 PK参数相比， 将允许进行更精确的剂量调整。
[0040] 在某些实施方案中，这个问题的解决方案是开发一种可以使用由单次手指刺破得 到的血液来进行的侧流测试。理想地，所述测试包括将单次刺破血液应用到侧流装置，该装 置随后给出读数，该读数经由Wifi /互联网发送给主治医师。在某些实施方案中，可以通过 患者跨越0到24小时、0到36小时、0到48小时或0到72小时的时期在至少2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11或12个指定时间点亲自进行测试来获得有意思的PK数据。
[0041] 需要可用于更容易检测小分子分析物并且检测低浓度分析物的改进型测定。另 夕卜，需要改进对分析物（包括小分子分析物）的测量，以便定制药物方案以维持药物效力， 同时减少个别患者中不希望有的副作用。此外，需要可用于照护点以测量生物学和/或临 床相关分析物以便减少获得样品与获得测定结果之间的延迟的方法和设备。
[0042] 通过本文所描述的本发明监测的药物可以是希望在化学、物理、酶学或光学分析 中加以检测和/或测量的任何特定物质或组分。所述分析物包括但不限于治疗剂和/或药 理学药剂（例如茶碱、抗HIV药物、锂、抗癫痫药、环孢菌素、化学治疗剂）。在优选实施方案 中，所述分析物是所关注的生理学分析物或具有生理作用的化学物质，例如药物或药理学 药剂。术语药物和药理学药剂可互换使用并且可包括具有治疗效果的任何分子，包括小分 子和生物学物质。
[0043] 在某些实施方案中，欲监测的药物可以包括但不限于化学疗法、生育能力治疗剂、 抗病毒剂以及抗微生物剂。
[0044] 在某些优选实施方案中，本发明的方法是用于监测由于所接收的特定疗法的PK 变化性而将会受益于剂量调整的患者。
[0045] 可以使用本发明的方法来监测的化学治疗剂包括但不限于紫杉醇、多烯紫杉 醇、吉西他滨以及5-氟尿嘧啶。所述方法可以用来监测不同的紫杉醇制剂，包括例如 Abraxane、Taxol 或 Genexol，或 Nanoxel，或 Zyotag，或 Tocosol，或其他制剂。这些制剂包 括但不限于白蛋白缀合紫杉醇、聚合物胶束紫杉醇、紫杉醇的聚合纳米粒子制剂、基于维生 素 E的紫杉醇乳剂、聚谷氨酸紫杉醇，以及当前在开发中或尚有待开发的制剂，如脂质分散 紫杉醇、靶向紫杉醇纳米粒子（基于白蛋白以及基于PEG)以及多孔紫杉醇纳米粒子。
[0046] 可以监测的生育能力治疗剂包括例如FSH、LH、hCG、GnRH激动剂/拮抗剂、雌二醇 等。
[0047] 可以监测的抗病毒/微生物剂包括而不限于蛋白酶抑制剂；反转录酶抑制剂，诸 如2'，3'-双脱氧肌苷（ddl)、2'，3'-双脱氧胞苷（ddC)或3'-叠氮基_2,3'-双 脱氧胸苷（AZT);抗真菌药物，例如还可以用于抗利什曼原虫化学疗法的伊曲康唑，或最常 用的抗利什曼原虫药，即含锑剂。
[0048] 另外，接收某些类别治疗剂的患者将受益于由于PK变化性而进行的剂量调整。这 些治疗剂类别的实例包括口服药剂、静脉内药剂以及肌肉内/阴道内/眼眶内药剂。
[0049] 口服药剂的PK曲线一般以缓慢吸收后血液浓度稳定下降为特征。Tmax和c max是描 述PK曲线以及生物利用率和稳态水平的重要参数。这些包括经常经口施用的抗病毒剂，以 及用于癌症的靶向疗法、抗高胆固醇血症剂、抗高血压剂等。
[0050] 对于静脉内药剂，包括小分子和生物学物质，Cmax作为毒性以及AUC的界定是非常 重要的。这些包括癌症疗法中所使用的大部分化学治疗剂和抗体药物缀合物（ADC)。这一 类别的PK曲线的特征在于Cmax在输注过程中快速增加达到稳态，并且然后在输注停止后快 速下降，并且此后缓慢衰减。
[0051] 对于经肌肉内/阴道内/眼眶内途径施用的药剂，包括生物学物质和小分子，稳 态浓度、吸收、终末?\ / 2是重要的参数。这类药物包括生育能力治疗时所使用的激素及其 他生物制剂，如依那西普、利妥昔单抗、瑞舒伐他汀、曲妥珠单抗、胰岛素、因子VIII、tPA、 up、抗体-药物缀合物等。这些药剂所展现的PK曲线为介于口服药剂与静脉内药剂之间的 中间值。治疗药物包括例如免疫抑制剂药疗，如环孢菌素、他克莫司（FK-506)、雷帕霉素以 及麦考酚酸酯。免疫抑制剂具有狭窄治疗指数以及高度患者间和患者内生物利用率变化 性。免疫抑制剂需要对患者的样品进行小心频繁的监测以便平衡防止移植排斥所需的免疫 抑制水平，同时避免过度免疫抑制的副作用，如毒性、感染以及罹患癌症的风险增加。这些 包括抗病毒剂，如抗HIV剂。实例为抗逆转录病毒药物，如蛋白酶或反转录酶抑制剂，例如 2'，3'-双脱氧肌苷（ddl)、2'，3'-双脱氧胞苷（ddC)或3'-叠氮基_2,3'-双脱 氧胸苷（AZT)。
[0052] 预计治疗药物监测对具有高度可变性PK的药物最有效。紫杉醇在患者暴露 方面的变化性超过十倍（Evans，W. Ε ' &Relling，Μ· V. Clinical pharmacokinetics-pharmacodynamics of anticancer drugs. Clin. Pharmacokinet. 16,327-336 (1989)； Freyer，G 等.Pharmacokinetic studies in cancer chemotherapy usefulness in clinical practice.Cancer Treat.Rev.23,153-169 (1997) ;Masson，E.&Zamboni， W.C. Pharmacokinetic optimisation of cancer chemotherapy ：effect on outcomes. Cl in. Pharmacokinet. 32, 324-343 (1997)。不同的患者相关因素可以影响药物的药物 动力学（PK)，例如器官功能、代谢酶的表达和活性、抗药性、体格大小、性别、年龄、伴发 病以及共同施用的其他药物。这些因素在化学疗法剂量确定中可能具有临床意义。紫 杉醇被肝脏清除到排泄物中（Sparreboom A，Scripture CD，Trieu V，Williams PJ， De T，Yang A，Beals B，Figg WD, Hawkins M，Desai N. Comparative preclinical and clinical pharmacokinetics of a cremophor-free， nanoparticle albumin-bound paclitaxel(ABI-007)and paclitaxel formulated in Cremophor(Taxol). Clin Cancer Res.11,4136-43(2005) ；Sparreboom A,van Tellingen 0,Nooijen WJ,Beijnen JH. Tissue distribution， metabolism and excretion of paclitaxel in mice.Anticancer Drugs. 7,78-86(1996));因此，肝损伤影响药物从循环中清除，而渗透性糖蛋白（Pgp)，也 称为抗多药物蛋白1 (MDR1)，它的状态影响药物在肠中清除和再吸收。肝清除另外受CYP因 素影响（Walle T. Assays of CYP2C8_and CYP3A4_mediated metabolism of taxolin vivo and in vitro. Methods Enzymol，272, 145-51(1996))。另外，存在其他因素，这些因素是使 用体表面积（BSA)作为剂量标准化因子所固有的（Baker，S.D.等.Role of body surface area in dosing of investigational anticancer agents in adults,1991-2001. J. Natl. Cancer Inst. 94,1883-1888(2002))。BSA自身受体重影响；紫杉醇AUC随体重增加而增加 是由于较重患者的总剂量增加。因此，白种人倾向于具有比亚洲人高的AUC。年龄的作用因 大部分患者是老年人而未得到充分分析。
[0053] 对于紫杉醇，在药物动力学方面存在较大个体间差异；对于AUCinf，平均CV 在 20 % 到 50 % 范围内（Sparreboom A，Scripture CD，Trieu V，Williams PJ，De T， Yang A，Beals B，Figg WD, Hawkins M，Desai N. Comparative preclinical and clinical pharmacokinetics of a cremophor-free， nanoparticle albumin-bound paclitaxel(ABI-007)and paclitaxel formulated in Cremophor(TaXol). Clin Cancer Res. 11,4136-43(2005) ；Nyman DW, Campbell KJ, Hersh E, Long K, Richardson K, Trieu V，Desai N，Hawkins MJ，Von Hoff DD. Phase I and pharmacokinetics trial of ABI-007, a novel nanoparticleformulation of paclitaxel in patients with advanced nonhematologic malignancies. J Clin Oncol.23,7785-93(2005) ;Yamada K， Yamamoto N，Yamada Y，Mukohara T，Minami H, Tamura T.Phase I and pharmacokinetic study of ABI-007,albumin-bound paclitaxel,administered every3weeks in Japanese patients with solid tumors. Jpn J ClinOncol. 40 :404-11(2010) ；Gardner ER，Dahut WL, Scripture CD， Jones J， Aragon-Ching JB， Desai N， Hawkins MJ， Sparreboom A， Figg WD. Randomized crossover pharmacokinetic study of solvent-based paclitaxel and nab-paclitaxel. Clin Cancer Res. 14 :4200-5(2008) ；Stinchcombe TE, Socinski MA, Walko CM, 0' Neil BH, Collichio FA, Ivanova A, Mu H, Hawkins MJ, Goldberg RM, Lindley C, Claire Dees E.Phase I and pharmacokinetic trial of carboplatin and albumin-bound paclitaxel, ABI-007(Abraxane)on three treatment schedules in patients with solid tumors. Cancer ChemotherPharmacol. 60 :759-66 (2007)) 〇 不完全 了解这种较大差异的原因并且因此无法控制。肝损伤和肥胖已被鉴别为影响因素；然而， 其他未知的因素仍有待界定。观看紫杉醇PK，显而易见投配批准剂量的患者发生剂量不足 或剂量过度的机会较高（Mielke S. Individualized pharmacotherapy with paclitaxel. Curr Opin Oncol. 19,586-9(2007))。
[0054] 高度可变性紫杉醇PK对它的治疗应用不具有显著影响。在比较lOOmg / m2的紫 杉醇剂量与125mg / m2紫杉醇剂量的两次研究中，剂量较高的群组比剂量较低的群组表 现更好（Blum 几 ，Savin MA，Edelman G，Pippen JE，Robert NJ，Geister BV，Kirby RL， Clawson A,0/ Shaughnessy JA. Phase II study of weekly albumin-bound paclitaxel for patients with metastatic breast cancer heavily pretreated with taxanes. Clin Breast Cancer7 :850-6(2007) ；Von Hoff DD,Ramanathan RK,Borad MJ,Laheru DA, Smith LS, Wood TE, Kom RL, Desai N, Trieu V, Iglesias JL, Zhang H, Soon-Shiong P, Shi T, Rajeshkumar NV, Maitra A,Hidalgo M. Gemcitabine Plus nab-Paclitaxel Is an Active Regimen in Patients With Advanced Pancreatic Cancer ：A Phase I / IITrial. J ClinOncol. 29 :4548-54(2011))。考虑到紫杉醇PK的高变化性，鉴别剂量不足的患者并 且将他们移到较高剂量非常可能会导致药物暴露增加超过25%。鉴于上文，紫杉醇的TDM 很可能是有益的。
[0055] 本发明的方法将适用于监测以相对较高频率的治疗抗性为特征的疾病，如癌症和 HIV。这些病状的治疗将通过频繁监测药物浓度连同抗性测试来增强。所以，已开发出监测 在患者体内循环的HIV病毒体群体的表型变化的方法（例如W097 / 27480)。其他表型测 定包括 Witvrouw(W001 / 57245)、Virologic(W097 / 27319)以及 Bioalliance(W002 / 38792)所描述的那些。Antivirogram. RTM. (W097 / 27480)估计病毒群体与'野生型' 菌株相比的药物敏感性。在这个测试服务中，在体外测定抑制50%病毒生长的药物浓度 (IC50)。患者血液样品中的病毒的IC50相对于"野生型"病毒的IC50的比率为该患者体 内的病毒的药物敏感性的倍数变化。
[0056] 最小血浆浓度或低谷浓度在治疗疾病或病状过程中可能是关键的，其中对药物标 靶进行调节以克服药效。这后一种现象的实例在如病毒感染等疾病中发现，如HIV、细菌感 染以及癌症。例如，药物的存在对HIV蛋白酶产生突变压力而逃脱药物疗法，并且不足抑制 剂浓度会促进此种逃脱。患者体内的药物浓度的测定和使用这个值确定低谷浓度在获得足 以产生治疗有效浓度的剂量方面可能是重要的。
[0057] 本发明方法的一个方面是测定药物在个体中的药理学参数，包括低谷水平（Ct)、 最大浓度（C max)、曲线下面积（AUC)、清除速度等。这些参数可以输入群体药物动力学模型 中，并且可以计算药物动力学变量，如Ct、C max以及AUC(W002 / 23186)。这些药理学变量可 以用于例如估计某一剂量的潜在毒性、药物暴露时间（例如在放射性化学物质的情况下） 或最小浓度。
[0058] 为了获得有效治疗，如通过例如低谷浓度或AUC确定的个体的药物暴露必须超过 某一水平。这一水平是由病毒群体的性质决定。药物暴露（低谷水平、AUC、其他）相对于抗 药性（抗性倍数、IC50、IC90等）的比率可预测疗法的成功性。这个比率可以表达为IQ(抑 制商）（IQ=Ct / IC50)。这个IQ值可以进一步标准化以便获得针对蛋白结合加以调整的 值（标准化IQ，NIQ)。获得这个调整值的一种方法是确定参考菌株（S卩，参考实验室HIV菌 株）的群体平均Ct和活性成分IC50。这后两个值的商产生（Ct / IC50)参考。标准化IQ 由以下商提供：[(Ct / IC50)]患者/ [(Ct / IC50)]参考。
[0059] 根据本发明，"生物样品"包括来源于生物体（即，人类或动物）的任何样品，其任 选地包含活性成分。生物样品包括但不限于血液、血清、血浆、唾液、脑脊髓液、精液、乳腺导 管灌洗液以及毛发。在某些优选实施方案中，样品是血液。生物样品另外包括从培养烧瓶、 孔及其他类型容器获得的样品。生物样品可以包含一种或多种活性成分。
[0060] 活性成分可以包括任何化合物，包括化学物质、药物、抗体、配体、反义化合物、适 配体、核糖酶、肽、非天然肽、蛋白质、PNA(肽核酸）以及核酸或包括至少一种化合物的组合 物。活性成分另外包含所施用的化合物和它们的代谢物。代谢物可以在生理学条件下产生。 如本发明中所使用，活性成分的水平意指所述活性成分在所述样品中的量或浓度。生物样 品中所存在的活性成分可以不同于参考物中的活性成分。在这些情形下，生物样品的抑制 效能等于得自于参考标准曲线的活性成分的量或浓度。所述量可以表达为例如g、ml、mol。 所述浓度可以表达为例如ml / ml、g / 1、Μ等等。
[0061] 使用至少两个数据点构建的药物动力学曲线将用于产生ΡΚ参数，所述ΡΚ参数可 用于指导剂量调整。所述参数包括：AUCinf、Tmax、Cmax、高于阈值的时间、?\ / 2、Vd、CL、Vss、 乂2、1'_、\、指数、1等。这些包括得自于非房室？1(分析和房室？1(分析的参数（基于生理 学或不基于生理学）。这些ΡΚ参数是实际ΡΚ曲线的导数，并且可能需要一个或多个以便 足以进行剂量调整。参数或数量的测定将在药物的临床开发过程中由程序测定。基于个体 的ΡΚ曲线，可以调整剂量以降低毒性和/或提高指定药物的效力。例如，与紫杉醇治疗相 关的中性粒细胞减少跟高于50ηΜ紫杉醇的时间有关。所以，这个参数可用于指导剂量调整 以降低个体罹患中性粒细胞减少的风险。同样，药物暴露的量度（如AUC)可用于指导剂量 调整以提高效力。ΡΚ参数和ΡΚ曲线的复杂性将在临床试验后确定，从而将响应与ΡΚ曲线 和它的参数相比较。使用多变量分析、逻辑回归、神经网络以及其他合适的统计分析，将得 到适当界定的调整参数以促进剂量调整。
[0062] 可在具体药物的预期中位数内进行剂量调整。例如，可以调整剂量以实现在所需 目标值的5 %、10 %、15 %或20 %内的水平。在药物的有效剂量是已知的并且还对患者具 有可变性的情况下，将剂量调整为治疗商以在不产生毒性的情况下维持足够高的治疗有效 性。在一些情况下，这是不可能的。
[0063] 使用药物动力学曲线来指导投配将通过增加剂量不足的患者的剂量和降低剂量 过度的患者的剂量来降低投配的不可预测性、增加效力以及降低毒性。剂量不足和剂量过 度的患者是通过ΡΚ曲线和它的相关参数界定。
[0064] 合适的药物测试装置或方法的非限制性实例包括用于测定样品中的分析物浓度 的侧流装置，其包括提供侧流试纸条以用于测量所述分析物。可以测试的分析物的实例包 括治疗药物、药物代谢物以及激素。将样品施用到侧流试纸条导致样品中的分析物的一部 分与侧流试纸条的组分结合，从而产生与所述样品中的分析物浓度成比例的可检测信号。
[0065] 可选地，可通过任何合适的测定对个体提交到实验室的样品进行定量，所述测定 包括但不限于所述领域中目前已知的那些，如ELISA、液相色谱-质谱（LC-MS)、薄层色谱 (TLC)、高效液相色谱（HPLC)以及质谱（MS)或在中心实验室用于药物监测的已被充分说明 的其他传统测定。样品可以是在手指刺破后收集于合适的基质上并且作为干血斑形式存储 的全血，它被运送或以其他方式递送到实验室以供测试。采样可以用毛细管和/或设计用 于将精确且少量的血液递送到干血斑卡的装置来进行。 实施例：
[0066] 实施例1.理论PK曲线示于图1中。如图1中所示，PK曲线具有两个主分量，即 刚施用之后曲线的吸收部分和最大血液浓度（C max)之后曲线的衰减/清除部分。这个主题 从丸式施用情况下的即时Cmax到经口施用情况下的延迟C max变化。介于之间的是静脉内输 注、鼻内、颊内、肌肉内、腹膜内等。PK曲线的三个主要特征为：Cmax(最大血液浓度）、平均滞 留时间（MRT)以及AUC(曲线下面积）。AUC常用于指示血液暴露。然而，具有相同AUC的 两条曲线，如图1中所描绘，可以具有很不一样的曲线。静脉内丸式投配展现较高初始血液 浓度，如由C max=剂量/血液容量所定义。口服投配由于延迟吸收而展现较长的药物滞留时 间。药物开发在正常情况下依赖于定义如何以最佳方式递送药物以得到极大活性和最小毒 性的实验。令人惊讶的是，治疗药物监测（TDM)仅依赖于单一 PK参数或单一血液浓度测定 值。本发明建议全体PK数据（PK曲线分析）都应用于治疗药物监测，因为影响药物吸收或 药物清除的因素是尚无法预计的个人特征。直接测定个人PK曲线应为个性化投配的工具。 [0067] 实施例2.为了证明仅改变药物摄入量将改变PK曲线，我们使用Taxol的公开 药物动力学资料研究了以3小时输注速率和24小时较慢输注速率投配的Taxol的PK曲 线（Ohtsu T, Sasaki Y, Tamura T, Miyata YNakanomyo H, Nishiwaki YSaijo N. (1995) Clinical pharmacokinetics and pharmacodynamics of paclitaxel :a3_hour infusion versus a24_hour infusion. Clin Cancer Res. 1 :599-606. ；Wiemik PH, Schwartz EL, Einzig A,Strauman JJ,Lipton RB,Dutcher JP. (1987)Phase I trial of taxol given as a24~hour infusion every21days ：responses observed in metastatic melanoma. J Clin Oncol. 5 :1232-9. ;Tamura T，Sasaki Y，Eguchi K，Shinkai T，Ohe Y Nishio M，Kunikane H， Arioka H， Karato A， Omatsu H 等，(1994)Phase I and pharmacokinetic study of paclitaxel by24_hour intravenous infusion. Jpn J Cancer Res. 85 ： 1057-62. ；Tamura T，Sasaki Y Nishiwaki Y Saijo N. (1995)Phase I study of paclitaxel by three-hour infusion ：hypotension just after infusion is one ofthe major dose-limiting toxicities. Jpn J Cancer Res. 86:1203-9.)。在仅改变输注时间的情况下以相同剂量投 配的紫杉醇得到完全不同的AUC(图2)。与24小时输注相比，3小时输注得到较高AUC或 药物暴露。改变吸收效率一它会以与缩短输注时间相同的方式影响曲线一显示强烈影响如 PK曲线分析所定义的药物暴露。这就强化了以下原理：PK曲线具有高度变化性并且受已知 因患者而异的参数影响。这些包括吸收效率、血液外和组织内分布速率以及蛋白结合特征 等。如AUC等单一因素无法定义药物暴露。
[0068] 实施例3.为了证明组织分布速率增加且因此血液中药物累积速率降低会改变PK 曲线，我们研究了 Abraxane相对于Taxol的PK曲线。如图3中所示，与配制为Taxol的紫 杉醇（Cremophor EL)相比，配制为Abraxane的紫杉醇（ABI-007)展现较低AUC。在较快吸 收/输注（30分钟输注Abraxane相对于3小、时输注Taxol)的情况下未观察到AUC增加。 FDA在2005年批准Abraxane? (白蛋白缀合型紫杉醇，Abraxis BioSciences)用于转移 性乳癌。已知Abraxane制剂产生较快组织穿透，已知这种性质因个体而异，取决于它们的 紫杉醇结合蛋白的水平等。这再次例证使用全体PK数据的PK曲线分析更适合于治疗药物 监测。我们发现如Genexol (图4)和Nanoxel (图5)等其他不含Cremophor的制剂也是一 样。Genexol-PM? (甲氧基-PEG-聚（D，L_丙交酯）紫杉酚；Samyang，Korea)在南朝鲜已 批准用于转移性乳癌，而第II阶段在美国用于胰腺癌。
[0069] 实施例4.比较AbraxaneMBI-OO?)和Taxol的PK曲线清楚地显示需要PK曲 线分析来预计反应和调整剂量。如上文所述，Abraxane PK曲线不同于Taxol PK曲线，其 中在相同剂量下AUC高于Taxol。图6展示平均紫杉醇浓度相对于开始输注Abraxane或 Taxol之后0到72小时的时间。当Abraxane以260mg / m2投配且Taxol是以175mg / m2投配时，他们展现几乎相同的PK参数（表I)。Abraxane和Taxol的PK曲线在这 个剂量浓度下非常相似（Sparreboom A，Scripture CD，Trieu V，Williams PJ，De T， Yang A， Beals B， Figg WD, Hawkins M， Desai N. (2005)Comparative preclinical and clinical pharmacokinetics of a cremophor-free， nanoparticle albumin-bound paclitaxel(ABI-007)and paclitaxel formulated in Cremophor(Taxol). Clin Cancer Res. 11 :4136-43.);但是，ABI-007与标准紫杉醇相比显示显著更高的反应速率（分别为 33%相对于19%;P=. 001)和显著更长的肿瘤进展时间（分别为23.0周相对于16. 9周；危 险比=0.75 ;Ρ=0· 006) (Gradishar WJ，Tjulandin S，Davidson N，Shaw H，Desai N，BharP， Hawkins M,0/ ShaughnessyJ. (2005)Phase III trial of nanoparticle albumin-bound paclitaxel compared with polyethylated castor oil-based paclitaxel in women with breast cancer. J Clin Oncol. 23 :7794-803.)。这就强化了需要 PK 曲线或全体 PK 数据用来评估药物剂量的效力。
[0070] 表1 (图19)是Abraxane和Taxol的估计紫杉醇血液药物动力学变量的总结（药 物动力学群体）。
[0071] 实施例5.为了确定Abraxane PK是否具有足以受益于治疗药物监测的变化 性，我们使用关于Abraxane PK的所有公开文献进行了 PK分析。以下展示若干次研究 的 Abraxane PK 的曲线图（图 7) (Yamada K，Yamamoto N，Yamada Y，Mukohara T，Minami H， Tamura T. (2010)Phase I and pharmacokinetic study of ABI-007, albumin-bound paclitaxel,administered every3weeks in Japanese patients with solid tumors. Jpn J Clin Orncol. 40 :404-11. ;Gardner ER，Dahut WL，Scripture CD，Jones J，Aragon_Ching JB， Desai N， Hawkins MJ， Sparreboom A， Figg WD. (2008)Randomized crossover pharmacokinetic study of solvent-based paclitaxel and nab-paclitaxel. Clin Cancer Res. 14 :4200-5 ；Nyman DW, Campbell KJ，Hersh E，Long K，Richardson K， Trieu V，Desai N，Hawkins MJ，Von Hoff DD. (2005)Phase I and pharmacokinetics trial of ABI-007, a novel nanoparticle formnulation of paclitaxel in patients with advanced nonhematologic malignancies. J Clin Oncol. 23 :7785-93.)〇 所有 变量的范围分别为￥2、八加、（：_、0^以及1'1/2的平均值的209%、142%、458%、200%、 69%。相比之下，我们计算出5-FU AUC展现3.9到16.41的范围和9.05的平均值 或138%的变化性（￥(311〇11]\1，〇1^：[>0111'<1，？;!_叫116七？，&311^'六， <1011113眞，1'0^31^0， Bressolle F. (1999)Individual5-FU dose adaptation schedule using bimonthly pharmnacokinetically-modulated LV5-FU2regimen:a feasibility study in patients with advanced colorectal cancer. Anticancer Res. 19 :2229-35.) 0 因为 5-FU 已被 证明受益于治疗药物监测剂量调整（Gamelin，E，Delva，R，Jacob，J等，"Individual fluorouracil dose adjustment based on pharmacokinetic follow-up compared with conventional dosage ：Results of a multicenter randomized trial of patients with metastatic colorectal cancer". J Clin Oncol. 13 :2099_2105, 2008.)-尽管是使用得自 于单次采样而非得自于PK曲线分析的数据一所以，我们的分析强烈表明Abraxane投配将 受益于治疗药物监测，尤其是使用PK曲线进行剂量调整。预期Genexol-PM和Nanoxel会 具有相同的PK变化。Abraxane的变化性较宽相当令人惊讶。治疗药物监测的作用在于降 低这种变化性。尽管Abraxane和Taxol的PK曲线相似，但存在差异。然而，这些差异较小 并且可以被Abraxane / Taxol的PK的较大变化掩盖。
[0072] 实施例6.为了确定药疗是否用于辅助生殖，即FSH(卵泡刺激激素），我们使用关 于FSH PK已发表的文献进行了 PK分析。以下展示若干次研究的FSH PK的曲线图（图8 和 9) (Duijkers IJ，Klipping C，Boerrigter PJ，Machielsen CS，De Bie JJ, Voortman G(2002)，Single dose pharmacokinetics and effects on follicular growth and serum hormones of a long-acting recombinant FSH preparation(FSH-CTP) in healthy pituitary-suppressed females. Hum Reprod. 17 :1987-93. ；0ut HJ，Schnabel Pq， Rombout F， Geurts TB, Bosschaert MA, Coelingh Bennink HJ. (1996)A bioequivalence study of two urinary follicle stimulating hormone preparations ：Follegon and Metrodin. Hum Reprod. 11 :61-3.)。为了比较它与5-FU数据，我们使用变化性作为SD /平 均值。对于顶Follegon和Metrodin，AUC变化性分别计算为26. 08%和20. 57% ;对于sc Normegon、Follegon 以及 Metrodin，分别为 17. 72%、18. 42%、17. 69%。令人惊讶的是，这 个变化接近于 5-FU 的变化性 34.42% (Ychou M，Duffour J，Pinguet F，Kramar A，Joulia JM， Topart D， Bressolle F. (1999)Individual5-FU dose adaptation schedule using bimonthly pharmacokinetically-modulated LV5-FU2regimen ：a feasibility study in patients with advanced colorectal cancer. Anticancer Res. 19 :2229-35.) 〇 该分析表 明，针对FSH的治疗药物监测可能与5-FU的治疗药物监测同样有益。
[0073] 实施例7.确定为PK曲线分析所必需的最小数据点。
[0074] 对于单一可及池模型，在丸式注射量D到池中后，可以用以下这个方程中所示的 一般形式的指数方程的和来描述药物动力学数据rakoru τ1+···+αΤ/τηι。
[0075] 这就允许在定义指数之后定量PK变量。必须处理得自于充分药物动力学研究的 临床数据以便可定义指数（τ )。可以使用能够进行房室模型化的任何药物动力学程序来进 行定义指数的模型化。它们将包括如 WinNonlin、EquivTest、Kinetica、Phoenix/WinNonlin 以及PK Solutions等程序。在定义后，指数可用于使用n+1份样品产生完整PK曲线。如 以下（图10)所示（对于单指数而言，这将意指收集两个数据点以便它们撑起PK曲线），优 选下降部分前四分之一早期和下降部分后四分之一晚期的时间点。寻常PK曲线不会具有 至少两个指数。每一个额外指数需要两个额外数据点。数据点将必须位于下降部分前四分 之一和下降部分后四分之一，下降部分终止于两个分量相交处。这是必需的，因为指数仅能 沿着它的主要区段用两个数据点精确地模型化。因为指数1的第2个数据点与指数2的第 1个数据点重叠，所以仅需要3个数据点（或η+1)。这示于图11中。对于具有吸收阶段的 IV输注和其他施用模式，将必须把生物利用率和吸收速率输入这些指数顶部的方程式中。 那些也通过指数来调节并且可以用相同方式处理。
[0076] 单指数ΡΚ曲线的典型曲线图，假定是丸式施用。两个数据点足以确定单指数ΡΚ 的ΡΚ曲线。起始浓度布置在100 %处，并且τ为100的缓慢衰减ΡΚ显示为顶部第一曲线， 而随后的曲线的τ逐渐降低。观察指数可以适当地布置数据点。第1个和第2个数据点 将布置在75到100和0到25血液药物浓度处。
[0077] 图11展示以两个指数为特征的ΡΚ曲线。曲线的早期部分（分布阶段）由指数1 控制，而曲线的稍后部分（清除阶段）由指数2控制。观察指数可以适当地布置数据点。对 于指数1，第1 / 2个数据点将布置在0到1小时和2到4小时；对于指数2,第1 / 2个数 据点将布置在2到4小时和29到39小时。
[0078] 实施例8.根据用于ΡΚ曲线分析的原型侧流测定检测紫杉醇。为了能够进行ΡΚ 曲线分析，我们开发了针对不同的分析物（其中之一为紫杉醇）的照护点测定。紫杉醇通 常用LC / MS / MS以1到5ng/ml的检测水平进行检测。还开发了具有相当检测水平的使 用针对紫杉醇的mAb的ELISA。这些ELISA测定尽管比LC / MS / MS方法简单但对于要求 抽血、将血液分离成血清并且由受过训练的人员按临床实验室中的微量滴定板形式进行测 试的现场应用而言仍不实用。我们的创新之处在于开发了一种可以接受手指刺破取血并且 由部署在照护点（家中、医生办公室或中心实验室）的读数器进行读数的侧流测定。容易 采样和测试与治疗过程中的多次采样相容，从而可获得详细药物动力学数据。
[0079] 通过将纤维素吸收垫（纤维素纤维样品垫17mmX100m CFSP001700(Millipore， Bedford，ΜΑ))和玻璃复合纤维（玻璃纤维复合垫8_X100m GFCP000800(Millipore， Bedford，ΜΑ))粘接到薄膜卡片（Hi-Flow Plus240 薄膜卡片 60m X 301mm HF240MC100(Millipore，Bedford，MA))上来构建测试用试纸条。用铡刀式切纸机切割所组 装的卡片以产生4mm试纸条。可就地利用的闸刀式切纸机为得自于A-Point Technologies Inc. (Gibbstown，NJ，USA)的 Index Cutter II。
[0080] 对紫杉醇-BSA(20 :1比率）和各mAb (以pi计）在lmg / ml下的mAb胶体结合 进行初始测试以确定阳性结合。图12中所示的实验指示紫杉醇-BSA /抗紫杉醇mAb-胶 体金结合对产生了充分信号。然而，当mAb在所述薄膜上形成斑点并且BSA-紫杉醇流过所 述薄膜时BSA-紫杉醇/抗紫杉醇mAb-胶体金配对的信号强得多（左图，图12)。如所示 (右图，图12)，当抗紫杉醇mAb固定在硝化纤维薄膜上并且紫杉醇-金结合物流过所述薄 膜时检测到强得多的信号。将紫杉醇与血清混合并且用纳米金粒子直接标记所述混合物。 检测极限有可能降到20ng / ml紫杉醇。
[0081] 实施例9.使用Qiagen侧流读数器进行定量侧流测定。本实施例展示可如何使用 适当读数器（如Qiagen所生产的那些）将侧流卡匣转变成定量照护点装置。
[0082] 使用常规hCG侧流卡匣构建hCG的定量照护点侧流测定，其中使用Qiagen侧流 读数器进行定量，所述侧流读数器经过配置以便将校准曲线嵌入2D条形码中，压印这些卡 匣，从而允许将所有定量过程上传到现场的读数器上，并且在照护点/使用点在不需要专 家技术支持的背景下进行定量。
[0083] 图13展示-hCG的定量侧流TDM的结果，hCG是一种常用于诱导排卵以辅助生殖的 激素。通过用于hCG的定量侧流装置对与浓度增加的hCG (从上到下=0到1694mIU / mL) 掺混的血清进行测试（图13A)。利用读数器扫描所述装置并且所述扫描示于图13B中。将 T和C的峰面积的比率相对于浓度绘图以确定校准曲线（图13C)。校准装置用于对未知的 hCG浓度进行定量，其中期望值与实验值之间具有优良一致性（图13D)。所有这些数据都 存储为可以用任何读数器读取的二维条形码以确定用于分析未知样品的参数。
[0084] 实施例10.使用由与装备有Evolution MP照相机的Olympus SXX16显微镜所捕 捉的图像耦合的图像分析仪ImagePro程序的定量侧流测定。本实施例显示任何图像分析 程序（如ImagePro)和任何照相机系统（包括移动电话照相机）的使用。只要图像的品质 足以比较测试系相对于对照系的强度，就有可能使用它来定量，所述定量可以在原地或远 处发生。开发了 FSH浓度增加的FSH侧流卡匣，并且通过ImagePro分析所捕捉的图像，并 且将测试相对于对照的强度比用来绘制强度相对于浓度的曲线图，所述曲线图显示出良好 定量倾向。所述测定在它的当前形式下由于钩状效应（即，在极端FSH浓度下信号减少） 而受到困扰。所述钩状效应相当重要并且正在开发避免它的手段。
[0085] 实施例11.稳定侧流装置信号以便日后在使用点/照护点或在集中实验室进行 定量，因为信号的稳定性允许在照护点进行开发之后将装置运送回集中实验室。
[0086] 在完成流动时（即15到20分钟）进行定量，并且监测到72小时以确保信号的稳 定性。为了将所述卡匣运送回中心测试实验室，信号稳定性是必需的。如以下所示，我们迄 今为止开发的所有定量测试都展现至少72小时的稳定性。在大部分情况下，稳定性持续数 周和数月。使用适当卡匣配置、缓冲条件以及样品体积大小来确保稳定性。在信号稳定后， 我们发现它将保持稳定至少若干个月。
[0087] 图15说明FSH定量纳米金侧流信号的稳定性。
[0088] 实施例12.构建hCG、LH以及FSH的定量照护点测定。IVF在每个起动周期具有 约22%的分娩率和接近于250, 000个孩子，其中26%的妊娠是双胞胎并且2. 5%是三胞胎。 IVF方案（以产生介于8与15个之间的卵母细胞为目标）是复杂、费时、昂贵的，并且可能 引起显著患者不适并且增加并发症的几率，尤其是卵巢过度刺激综合症（0HSS)。最经常用 于卵巢过度刺激的药物方案由以下各项组成：用于调节月经周期的类固醇避孕预处理；在 刺激前周期中用于抑制LH释放的GnRH激动剂模拟物；用于促进多个卵泡发育的几乎持续 2周的每日促性腺激素注射；以及用于诱导成熟卵母细胞排卵的丸式剂量的hCG。在许多国 家，药疗和监测费用重于IVF程序本身的成本。所以，重点从适度刺激转移到适度卵巢反应 通过基于初始患者特征（如年龄、体重以及卵巢储备特征）开发出更具个性化的治疗方案 而正在降低作废率和过度反应率。为了促进能降低药疗成本和由于过度药疗所致的0HSS 风险的个性化治疗方案，我们开发了广泛用于IVF的促性腺激素（即，FSH、LH以及hCG)的 照护点治疗药物监测。
[0089] 使用针对LH、FSH以及hCG的成对mAb构建侧流测定。使用反射仪光学读数器， 所述读数器利用具有较小的距离目标比的共焦光学器件。将得自于青春期前女性的血 清、尿液以及得自于女性供体的血液用作基质来混入标准物，并且因而产生这些实验的样 品。所使用的体积是每个卡匣40uL。对于hCG血液分析，所述体积降到每个卡匣30ul。使 用以下标准物：得自于Genway (San Diego, CA)的LH参考标准物（批次号A11072104)、 得自于Genway (San Diego, CA)的FSH参考标准物（批次号11-663-45941)以及得自于 AbdSerotec(Raleigh，NC)的 hCG 参考标准物（批次号 120811)。使用 GraphPad Prism(San Diego, CA)将数据绘图并分析。
[0090] 所描述的实施方案在所有方面都应仅被视为说明性的而非限制性的，并且本发明 的范围不限于以上描述。本领域的技术人员能认识到仍然可归入本发明范围内的改变、替 换、改进以及其他修改。
【权利要求】
1. 一种使用药物动力学曲线分析对经过药物治疗的个体进行治疗药物监测的方法，所 述方法包括： 使用在适于构建药物动力学曲线的时间点获自所述个体的至少两份样品中的药物浓 度来构建所述药物在所述个体中的药物动力学曲线，所述至少两份样品是在照护点或使用 点通过采样或自采样而收集在照护点装置或使用点装置上，各装置能够定量所述药物；或 收集在适合于在由实验室定量所述药物之前存储所述至少两份样品的基质上，所述药物动 力学曲线包括适合于指导对所述个体投配所述药物的药物动力学参数。
2. 根据权利要求1所述的方法，其中至少两份样品包括2到12份样品。
3. 根据权利要求1或2所述的方法，其中至少两份样品是在长达8小时、长达24小时、 长达48小时或长达72小时的时间段内收集。
4. 根据权利要求1到3中任一项所述的方法，其中所述药物动力学参数包括选自由以 下各项组成的群组的至少一个参数:AUC、AUC inf、Tmax、Cmax、高于阈值的时间、稳态浓度、吸收 率、清除率、分布率、终末/ 2或得自非房室PK或房室PK分析（包括基于生理学模型的房 室PK分析）的参数。
5. 根据权利要求1到4中任一项所述的方法，其进一步包括产生一份包括所述个体的 药物动力学曲线的报告。
6. 根据权利要求5所述的方法，其中所述报告包括基于所述个体的药物动力学曲线对 投配的建议。
7. 根据权利要求1到6中任一项所述的方法，其中基于一个或多个药物动力学参数指 示减少药物剂量以降低毒性风险。
8. 根据权利要求7所述的方法，其中基于高于阈值的时间指示减少药物剂量，其中所 述阈值是高于其时会出现毒性的药物浓度，或AUC、AUCinf、MRT、定义所述PK曲线的指数、 Vss、Vz或足以描述所述PK曲线的一组PK变量的组合中的一者或多者。
9. 根据权利要求1到6中任一项所述的方法，其中基于一个或多个药物动力学参数指 示药物剂量调整以提高效力。 1〇.根据权利要求9所述的方法，其中基于4此4此丨1^、1?1\定义所述？1(曲线的指数、 Vss、Vz或足以描述所述PK曲线的一组PK变量的组合中的一者或多者指示增加药物剂量。
11. 根据权利要求7到10中任一项所述的方法，其中将所述剂量调整到所需目标值的 5%到25%以内。
12. 根据权利要求1到11中任一项所述的方法，其中将所述至少两份样品各自施用于 所述照护点装置或所述使用点装置以测定所述药物的浓度，其中所述照护点装置或所述使 用点装置包括侧流试纸条，所述侧流试纸条的构造和组成使得将所述至少两份样品中的一 份或多份施用到所述侧流试纸条上会引起所述样品中的一部分药物与所述侧流试纸条的 组分结合，从而产生与所施用样品中的药物浓度成比例的可检测信号。
13. 根据权利要求1到11中任一项所述的方法，其中将至少两份样品施用于适合在由 实验室定量之前存储所述至少两份样品的基质。
14. 根据权利要求13所述的方法，其中将至少两份样品以干血斑的形式存储。
15. 根据权利要求13或14所述的方法，其中所述药物浓度是通过ELISA或LCMS来测 量。
16. 根据权利要求1到15中任一项所述的方法，其中所述药物选自化学治疗剂、生育能 力治疗剂以及抗病毒剂。
17. 根据权利要求16所述的方法，其中所述药物是化学治疗剂。
18. 根据权利要求16所述的方法，其中所述药物是紫杉烷。
19. 根据权利要求17所述的方法，其中所述药物是紫杉醇制剂。
20. 根据权利要求19所述的方法，其中所述紫杉醇制剂选自由以下各项组成的群组： 白蛋白缀合紫杉醇、聚合胶粒紫杉醇、紫杉醇的聚合纳米颗粒制剂、基于维生素 E的紫杉醇 乳剂、聚谷氨酸紫杉醇。
21. 根据权利要求16所述的方法，其中所述药物是生育能力治疗剂。
22. 根据权利要求21所述的方法，其中所述生育能力治疗剂选自由以下各项组成的群 组：FSH、LH 以及 hCG。
23. 根据权利要求16所述的方法，其中所述药物是抗病毒剂。
24. 根据权利要求23所述的方法，其中所述药物是抗HIV剂。
25. 根据权利要求23或24所述的方法，其中所述药物是抗逆转录病毒剂。
26. 根据权利要求1到25中任一项所述的方法，其中药物经配制以用于施用，所需求的 施用途径示例为但不限于口服施用、静脉内施用、肌肉内注射、阴道内施用、口腔内施用、眼 眶内施用、鼻内施用、经皮施用。
27. 根据权利要求26所述的方法，其中所述药物经配制以用于口服施用，并且所述药 物动力学参数包括C_和稳态水平中的至少一者。
28. 根据权利要求27所述的方法，其中所述药物选自：化学治疗剂、抗高胆固醇血症 齐?、抗高血压剂、抗微生物剂、抗真菌剂、抗线虫剂、免疫抑制剂、抗精神病药、促睡眠剂、麻 醉药、基于吗啡的止痛药。
29. 根据权利要求26所述的方法，其中所述药物是经配制以用于静脉内施用的小分 子，并且所述药物动力学参数包括Cmax和AUC中的至少一者。
30. 根据权利要求26所述的方法，其中所述药物是经配制以用于静脉内施用或肌肉内 注射的生物制剂，并且所述药物动力学参数包括稳态浓度、吸收以及终末?\ / 2中的至少一 者。
31. 根据权利要求30所述的方法，其中所述生物制剂是激素、抗体-药物缀合物，或者 抗体或抗体衍生物、生物学活性蛋白质或肽。
32. 根据权利要求12所述的方法，其中所述样品中的药物与所述侧流试纸条中以可检 测方式标记的分子竞争结合抗体或配体。
33. 根据权利要求12所述的方法，其中所述药物与固定在所述侧流试纸条的限定区域 中的分子竞争结合以可检测方式标记的抗体或配体。
34. 根据权利要求12、32或33中任一项所述的方法，其进一步包括检测所述侧流试纸 条的可检测信号并且将所述信号与所述样品中的所述分析物的浓度相关联。
35. 根据权利要求12、13、32或33中任一项所述的方法，其中所述样品是全血。
36. 根据权利要求12、32或33中任一项所述的方法，其中所述侧流试纸条包含两种或 更多种对所述药物具有不同的亲合力的不同抗体。
37. 根据权利要求12、32、33或36中任一项所述的方法，其中所述药物选自由小分子和 生物制剂组成的群组的治疗药物。
38. 根据权利要求37所述的方法，其中所述分析物是小分子。
39. 根据权利要求38所述的方法，其中所述小分子是化学治疗剂或抗病毒剂。
40. 根据权利要求39所述的方法，其中所述小分子是化学治疗剂。
41. 根据权利要求40所述的方法，其中所述化学治疗剂是紫杉醇。
42. 根据权利要求39所述的方法，其中所述小分子是抗病毒剂。
43. 根据权利要求42所述的方法，其中所述小分子是抗逆转录病毒剂。
44. 根据权利要求36所述的方法，其中所述生物制剂是激素或抗体。
45. 根据权利要求44所述的方法，其中所述激素选自由以下各项组成的群组：FSH、LH、 hCG、催乳激素、TSH以及胰岛素。
46. 根据权利要求45所述的方法，其中所述激素是包含促性腺激素的生物制剂。
47. 根据权利要求44所述的方法，其中所述生物制剂进一步包含细胞毒素部分。
48. 根据权利要求37所述的方法，其中所述生物制剂是与治疗部分缀合的抗体。
49. 一种使用药物动力学曲线分析对以药物治疗的个体进行治疗药物监测的试剂盒， 所述试剂盒用于根据权利要求1所述的方法，所述试剂盒包含： 多个能够对所述至少两份样品中的药物进行定量的照护点装置或使用点装置，或适合 于在由实验室定量之前存储所述至少两份样品的基质。
50. 根据权利要求49所述的试剂盒，其进一步包括关于收集所述至少两份样品的说明 书。
【文档编号】G01N33/00GK104160274SQ201280038476
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2012年5月30日 优先权日:2011年5月30日
【发明者】武永·恩戈·特里优 申请人:奥德特里克公司