清洁类产品对附着于皮肤上的PM2.5清洁力的测试方法与流程

本发明涉及清洁类产品对皮肤的清洁力测试方法。更具体地说，本发明涉及清洁类产品对附着于皮肤上的小颗粒物尤其是PM2.5的清洁力测试方法。
背景技术：
：霾也称灰霾(烟霞)，指空气中的灰尘、硫酸、硝酸、有机碳氢化合物等粒子使大气混浊，视野模糊并导致能见度恶化，这种现象常见于城市。中国不少地区将雾并入霾一起作为灾害性天气现象进行预警预报，统称为“雾霾天气”。中国的很多城市都出现过或轻或重的雾霾天气。岳常丽等的“空气细颗粒物(PM2.5)及其致病性的研究现状”(《临床与实验病理学杂志》第25卷第4期，2009年8月)介绍了PM2.5的来源及理化性质及其致病机理。它会引起呼吸系统、循环系统和中枢神经系统的疾病2014年9月15日发表于《医学美学美容(财智)》杂志上的“PM2.5时代应对皮肤“城市病””一文介绍了PM2.5对皮肤的危害：-当PM2.5进入皮肤表层时，细菌引发炎症和痘痘，重金属诱发敏感，俗称红脸。例如PM2.5中的硫酸盐在大气中经日光照射，容易对皮肤有刺激和腐蚀作用，造成皮肤过敏；硝酸盐可与环境中的其它污染物结合，刺激皮肤、粘膜，甚至诱发皮肤白斑病；-当PM2.5进入皮肤基底层，其中的氧化物和重金属等会让皮肤呈现暗黄、黑沉，俗称黑脸。毛孔是PM2.5进入肌肤的主要途径，PM2.5通过毛孔进入皮肤会干扰毛孔、皮脂腺导管、皮脂腺和毛囊的正常新陈代谢，诱发毛孔堵塞，皮脂腺导管角化异常，皮脂分泌过多，毛囊受损等；-当PM2.5进入皮肤真皮层时，氧化物会氧化胶原蛋白和弹性蛋白，出现褶皱、松弛，俗称老脸。如同毛衣会粘附环境中的一些可见的灰尘，环境污染物附着在皮肤上会对皮肤产生很多潜在的刺激和伤害。氮氧化合物会引起自由基反应和炎症反应，使细胞外基质和细胞膜损伤，加速皮肤的衰老。显然，PM2.5对皮肤的影响是一个渐变的过程。较短时间(例如24小时)处于PM2.5空气污染时皮肤不会产生显著的反映。对1000多名中国女性的调查结果显示.超过95％的女性担心空气污染会影响肌肤健康。减少PM2.5对皮肤损伤的一种方法是用清洁类产品对裸露的皮肤进行清洗。例如，刘思言的“PM2.5注意皮肤清洁”(《时尚北京》，2013年第4期)提到“想要肌肤保持白皙的第一步，自然是深层洁面，恢复毛孔清洁”并建议采用按压式洁面产品，如洗面奶等等。目前市面上有许许多多不同厂家生产的清洁类产品，光洗面奶就有数十种。但是目前还没有一种可靠的方法来判断其对PM2.5的清洁效果。测定皮肤颜色是皮肤领域的常规方法。例如程英等的“皮肤颜色客观评估方法的比较”(《临床皮肤科杂志》，2005年第34卷第7期)比较了两种常用的皮肤颜色仪器测量方法，包括使用三刺激值色度计(ChromameterCR200，购自日本大阪的Minolta)和窄谱反射分光光度计(MexameterMX16和MX18，购自德国科隆Courage+KhazakaElectronic公司)。结果表明测试的重复性相当好。职蕾蕾等的中国专利申请CN105427306A公开了一种皮肤光泽度的图像分析方法和装置，它包括在相同的光源条件下采集受试者皮肤的数字图像、计算像素的频率分布、设置高光部分的提取条件并计算根据该提取条件所提取的高光部分的像素占比作为皮肤光泽度的指标。虽然现有技术提到PM2.5会让皮肤暗沉，但是这种变化是长期累积的效果，很难用通过常规的皮肤颜色测定或者皮肤光泽度测定反映PM2.5对皮肤的短期影响。因此，本领域需要一种清洁类产品对附着于皮肤上的PM2.5清洁力的测试方法，它具有步骤简单、快速并且成本低廉的优点。技术实现要素：本发明提供一种清洁类产品对附着于皮肤上的PM2.5清洁力的测试方法，它具有步骤简单、快速并且成本低廉的优点。因此，本发明的一个方面是提供一种清洁类产品对附着于皮肤上的PM2.5清洁力的测试方法，它包括如下步骤：-收集空气中的污染物，制备成悬浮液；-测定要受试的人体皮肤区的色度a0，将上述悬浮液涂覆在所述人体皮肤区，形成涂覆区域，并测定涂覆区的色度a1；和-用所述清洁类产品清洁所述涂覆区，并测定经清洁的涂覆区的色度a2；-用下式计算清洁力η：η＝(a1-a2)/(a1-a0)。本发明的另一部分是提供测定人体皮肤色度的方法在测试清洁类产品对附着于皮肤上的PM2.5清洁力中的用途。附图说明下面结合附图进一步说明本发明。附图中：图1a-图1c是本发明的一个较好实例中涂抹PM2.5前(图1a)、涂抹PM2.5后(图1b)及清洁后(图1c)对应的皮肤毛孔镜图片；图2a-图2c是本发明的一个较好实例中涂抹PM2.5前(图2a)、涂抹PM2.5后(图2b)及清洁后(图2c)对应的照相图片。具体实施方式本发明提供一种清洁类产品对附着于皮肤上的PM2.5清洁力的测试方法。适用于本发明测试方法的清洁类产品无特别的限制，只要它具有清洁作用即可。例如，它可以是洗面奶、沐浴露、肥皂、具有清洁功能的面膜、清水等等。本发明方法包括收集空气中的污染物，制备成悬浮液的步骤。本发明收集空气中的污染物或者颗粒物的方法无特别的限制，可以是本领域已知的常规方法。在本发明的一个实例中，根据国家环保标准HJ93-2013用市售的采样器采集PM10和PM2.5颗粒物。在本发明的另一个实例中，采用购自丹东百特仪器有限公司的BTPM-AS1智能环境空气颗粒物采样器采集PM2.5颗粒物。采集的时间无特别的限制，取决于采集时的大气状况等等。在本发明的一个实例中，采集的时间为10-30小时，较好为12-28小时，更好15-20小时。本发明制备颗粒物悬浮液的方法无特别的限制，可以是本领域已知的常规方法。在本发明的一个实例中，将采样器滤膜剪成小长条，置于烧杯中，超声振荡清洗，浓缩后得到所需的悬浮液。在本发明的另一个实例中，将采样器滤膜剪成小长条，置于烧杯中用醇浸没，超声波震荡，倾出上清液，再加醇，继续超声波震荡，倾出上清液与前一次上清液合并。滤过，平均倒入多个离心管离心，每支离心管保留底部PM2.5沉积及小部分清液共5ml，其余上清液去除，即为PM2.5悬浮液。在本发明的一个实例中，所述PM2.5悬浮液中颗粒物占50-95质量％，较好占60-90重量％，更好占70-85重量％。由于PM2.5悬浮在空气中看不见也摸不着，因此很难对它在皮肤上的沉积进行定量分析。本发明通过采样装置收集空气中的PM2.5，并将其制备成悬浮液后涂抹在人体皮肤上，然后再用清洁类产品对其进行清洗，通过涂抹前后、清洗前后皮肤的色度变化来评估清洁类产品对PM2.5的清洁力，从而实现对PM2.5清洁力的定量评价与比较。因此，本发明方法包括测定要受试的人体皮肤区的色度a0，将上述悬浮液涂覆在所述人体皮肤区，形成涂覆区域，并测定涂覆区的色度a1的步骤。本发明用于测定人体皮肤色度的方法无特别的限制，可以是本领域已知的常规方法。在本发明的一个实例中，使用购自日本大阪Minolta的三刺激值色度计(ChromameterCR200)测定色度a0、a1和a2。在本发明的另一个实例中，使用购自德国科隆Courage+KhazakaElectronic公司的窄谱反射分光光度计(MexameterMX16或MX18)测定色度a0、a1和a2。在本发明再一个实例中，使用购自日本Konica的MinoltaCM-700d测定色度a0、a1和a2。涂覆区的面积和涂覆量无特别的限制，可以参照《化妆品卫生规范》(2007)中关于“防晒化妆品防晒指数(SPF值)测定方法”中规定的涂覆面积和小一千倍的涂抹量。在本发明的一个实例中，涂覆面积为1-20cm2，较好5-15cm2，更好8-10cm2。在本发明的一个实例中，涂抹量为1-10μl/cm2，较好为2-8μl/cm2，更好为4-6μl/cm2。在本发明的一个实例中，所述涂抹量中的体积单位μl是用如下方法确定其“浓度”的：将采样器滤膜剪成约3cm×1cm的小长条约30片，置于烧杯中，80ml乙醇浸没，超声波震荡约30分钟，倾出上清液，再加60ml乙醇，继续超声波震荡约30分钟，倾出上清液与前一次上清液合并。将所述上清液经4层纱布滤过，平均倒入4个50ml旋盖离心管，以10000转/分钟离心20分钟，每支离心管保留底部PM2.5沉积及部分清液共5ml，其余上清液去除，摇匀合并4支离心管PM2.5沉积液5ml，即为PM2.5悬浮液。对受试人员的要求可参照《化妆品卫生规范》(2007)中关于“防晒化妆品防晒指数(SPF值)测定方法”中的规定。即18～60岁男或女健康志愿受试者，受试部位的皮肤应无色素沉着、炎症、瘢痕、色素痣、多毛等。本发明方法还包括用下式计算清洁力η：η＝(a1-a2)/(a1-a0)。本发明方法在皮肤上涂抹一定浓度的PM2.5后，涂抹部位的皮肤色度相对于未涂抹部位色度明显变暗，而用清洁类产品将PM2.5清洗后该部位的色度恢复到接近涂抹前的色度，因此可以根据清洁前后皮肤色差ΔE来评估清洁类产品对PM2.5的清洁力。图1是是本发明的一个较好实例中涂抹PM2.5前、涂抹PM2.5后及清洁后对应的皮肤毛孔镜图片。比较上述图片可见，清洁后皮肤的颜色接近未涂抹PM2.5时皮肤的颜色。图2是本发明的一个较好实例中涂抹PM2.5前、涂抹PM2.5后及清洁后对应的照相图片。由所述照相图片同样可见，清洁后皮肤的颜色接近未涂抹PM2.5时皮肤的颜色。下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。实施例1.制备PM2.5悬浮液a)PM2.5的收集：室外雨棚下，在配套PM2.5切割器的大气颗粒采集器(BTPM-AS1智能环境空气颗粒物采样器，购自丹东百特仪器有限公司)上，将混合纤维素滤膜(A4纸大小)用镊子放入洁净采样夹内的滤网上，开机采集总时间约24小时。b)PM2.5的洗脱：取下收集有PM2.5大气污染物的滤膜，剪成约3cm×1cm的小长条约30片，置于烧杯中，80ml乙醇浸没，超声波震荡约30分钟，倾出上清液，再加60ml乙醇，继续超声波震荡约30分钟，倾出上清液与前一次上清液合并。c)PM2.5悬浮液的制备：将上清液经4层纱布滤过，平均倒入4个50ml旋盖离心管，以10000转/分钟离心20分钟，每支离心管保留底部PM2.5沉积及部分清液共5ml，其余上清液去除，摇匀合并4支离心管PM2.5沉积液5ml，即为PM2.5悬浮液，其固含量为85重量％左右。实施例1对手臂部位进行描点：用KonicaMinoltaCM-700d测量并记录描点部位皮肤Lab值，测量条件设置如下：测量面积为MAV；镜面反射光成分模式为SCI；色空间为Lab；观察角为10度；光源为D65。并用毛孔镜对描点部位皮肤进行拍照(图1a)，对所测部位用普通相机进行拍照(图2a)。在描点部位涂抹上面制得的PM2.5悬浮液，涂抹量为5μl/cm2，待涂抹部位干燥后测量并记录涂抹部位皮肤Lab值，在邻近的区域进行三次测量(由于涂抹的为悬浮液，在皮肤上分布不太均匀)，并用毛孔镜对涂抹部位进行拍照(图1b)，对所测部位用普通相机进行拍照(图2b)。30分钟后用流水冲洗1分钟，洗去PM2.5，待冲洗区域干燥后再次测量并记录Lab值，并用毛孔镜对涂抹部位进行拍照(图1c),对所测部位用普通相机进行拍照(图2c)。根据测量Lab值，计算涂抹前后色差ΔE1＝(a1-a0)以及清洗前后色差ΔE2(a1-a2),并计算η值，结果前者为7.35±1.06；后者为5.41±0.77(X±SD，n＝8)；η值为0.736。实施例2本实施例采用实施例1中的方法来批量评估一组受试者在涂抹PM2.5后再使用太极泥黑泥和清水清洁后其皮肤色度变化情况，比较太极泥黑泥和清水对PM2.5清洁力的强弱。志愿者选取：选取8名22～36岁健康女性受试者，手前臂部位无明显疤痕、色素沉着并要求受试者肤色较白；描点及分组：对手前臂部位进行描点和分组，每组描点面积为2×2cm2，实验共分3组：空白对照(不涂抹PM2.5)、清水(涂抹上述PM2.5悬浮液并用水洗去)、太极泥黑泥(涂抹上述PM2.5悬浮液并用黑泥敷5～10min，再洗去)；测量及计算：按照实施例1中步骤对各个部位及时间点进行Lab值的测量，即涂抹30分钟后清水组用清水冲洗，太极泥黑泥(购自上海家化联合股份有限公司佰草集品牌)组用太极泥黑泥涂抹后等10分钟再清洗。根据测量Lab值，计算涂抹前后色差ΔE1以及清洗前后色差ΔE2。结果如下表所示：表1.涂抹前后及清洁器前后皮肤色差ΔE(X±SD，n＝8)L涂抹前后色差ΔE1清洁前后色差ΔE2η值空白0.72±0.520.72±0.321.0清水7.40±1.15*5.39±0.75*0.728太极泥黑泥7.24±1.60*6.21±1.25*▲0.858*代表相对于空白有显著性差异▲代表相对于清水有显著性差异P<0.05表示差异有统计学意义由表1可知涂抹PM2.5前后皮肤色差ΔE1与空白对照组比有显著性差异，说明涂抹PM2.5后其皮肤色度发生明显的改变，且清水组和太极泥黑泥组之间在涂抹PM2.5前后色差ΔE1无明显差别，说明对于两组来说涂抹PM2.5带来的色差基本一致；而采用清水和太极泥黑泥清洁后，清洁前后色差ΔE2，与空白组有显著性差异，且太极泥黑泥组对应的色差ΔE2比清水组大，表明清水和太极泥黑泥都有清洁PM2.5的功效，且太极泥黑泥的功效优于清水，由此该方法可以检测出清洁类产品对PM2.5的清洁力，并且能够区分不同的清洁类产品对PM2.5清洁力的大小。当前第1页1 2 3