本发明创造属于生物化学检测技术领域，尤其是涉及一种氰化物快速检测用显色试纸及其制备及检测方法。
背景技术：
近年，氰化物检测的新方法主要有色谱法、循环伏安法、蒸馏法、纳米金基底sers技术、分光光度法等，这些方法虽然存在着准确度高的优点，但也存在着需要相应的检测设备，操作复杂繁琐、检测周期长、检测成本高、不方便携带的缺点，不适合对样品的大量筛查。
而目前存在的试剂盒比色法及试纸法虽然相较于上述方法更加便捷，但仍存在着许多问题，如灵敏度差、检测范围窄、配套试剂多、试纸在检测过程中由于浸泡在样品液中而使反应试剂及反应产物脱落，造成样品液染色及试纸表面显色不均一、所用试剂为苦味酸，苦味酸易制爆，存在安全隐患、保存时间短等问题，此外，虽然检测时长有了一定的缩短，但仍需要20到30min左右，成本上则每次试验费用也在0.7元左右。
技术实现要素：
有鉴于此，为了解决上述问题，本发明创造提出了一种灵敏度高、检测范围宽、检测成本低、检测时间短、操作便捷、保质期长、不需要使用易燃易爆危险品试剂、有效避免试纸上的反应试剂及产物脱落的氰化物快速检测用显色试纸；
本发明创造还提供了一种制备成本低、简单快捷、可批量生产的氰化物快速检测用显色试纸的制备方法；
本发明创造还提供了一种操作简单便捷、检测时间短、反应灵敏、无需其他设备的氰化物快速检测用显色试纸的检测方法；
本发明创造还提供了一种检测效率高的包括氰化物快速检测用显示试纸的试剂盒，所述试剂盒中存放有配套的处理样品液的试剂，使用者无需再单独准备辅助试剂，提高检测效率。
为达到上述目的，本发明创造的技术方案是这样实现的：
一种氰化物快速检测用显色试纸，包括氰化物检测层，所述氰化物检测层由按重量份计的如下组分组成：
进一步的，所述显色试纸还包括试纸基片及设置于所述试纸基片上的检测基层；所述检测基层上涂覆有所述氰化物检测层。
进一步的，所述试纸基片的长度为6～10cm，宽度为0.5～1cm，厚度为0.02～0.05cm；所述检测基层的长度为0.5～1cm，宽度为0.5～1cm。
进一步的，所述试纸基片为pvc材质；所述检测基层为3mm滤纸或定性滤纸或吸水纸，所述检测基层设置于所述试纸基片上端面的至少一端上。
一种氰化物快速检测用显色试纸的制备方法，包括以下步骤：
(1)配制质量浓度为氢氧化钠3～12g/l、异烟酸8～15g/l、曲拉通x-1001～5g/l、巴比妥酸3～15g/l、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物30～90g/l的混合溶液作为试纸浸泡液，溶剂为纯水；
(2)将所述检测基层从所述试纸浸泡液中匀速浸过，取出后悬挂沥水，送入40～60℃干燥箱内烘干40～45min；
(3)将干燥后的浸渍有氰化物检测层的检测基层裁切成条状物，将检测基层粘贴到所述试纸基片上压紧，裁切成型后得到所述显色试纸。
一种氰化物快速检测用显色试纸的检测方法，包括以下步骤：
(1)样品液的处理：向样品液中加入磷酸二氢钾，待磷酸二氢钾溶解后加入由质量浓度为3～15g/l的氯胺t及2～7g/l的甘油组成的混合溶液，摇匀得到溶液a；
(2)将所述显色试纸设有氰化物检测层的一端放入溶液a中静置片刻后取出；
(3)观察所述显色试纸的氰化物检测层端的颜色变化，与比色卡进行比色，最接近的色阶指示的数值即为样品液中氰化物的含量。
一种氰化物快速检测用试剂盒，包括所述显色试纸，还包括试剂a、试剂b及比色卡；所述试剂a为磷酸二氢钾，所述试剂b为由质量浓度为3～15g/l的氯胺t及2～7g/l的甘油组成的混合溶液。
本发明创造是基于国标hj484-2009“水质氰化物的测定容量法和分光光度法”研发的，检测原理为：加入磷酸二氢钾后，样品液呈弱酸性，在弱酸性条件下，样品液中的氰化物与氯胺t作用生成氯化氰，放入显色试纸后，氯化氢与异烟酸反应，经水解而成戊烯二醛，最后，再与巴比妥酸作用生成粉红色化合物。颜色的深浅与氰化物的含量成正相关，因此，显色试纸的颜色反应随食品中氰化物含量的增多而加深，在不同浓度的范围内，可以用肉眼将颜色分辨出来，然后与比色卡比对计算食品中氰化物的含量。
相对于现有技术，本发明创造所述的氰化物快速检测用显色试纸具有以下优势：
(1)本发明创造所述的显色试纸是基于国标hj484-2009“水质氰化物的测定容量法和分光光度法”研发的，采用异烟酸、氢氧化钠、巴比妥酸作为反应试剂，经过前处理后的样品液中的氰化物与异烟酸反应，经水解成戊烯二醛，再与巴比妥酸作用生成粉红色化合物，整个检测过程不使用苦味酸等易燃易爆危险品试剂，且反应时间短，显色试纸浸入待测液后反应1min即可取出进行比色，操作过程简单快捷，检测成本低廉，单次样品检测成本在0.1元左右；
(2)本发明创造所述的显色试纸的氰化物检测层含有曲拉通x-100及甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物，曲拉通x-100为非离子表面活性剂，具有乳化，分散，润湿，防腐的作用，使显色试纸上的反应试剂均匀的分散于滤纸孔隙中，同时具有防腐作用，有效延长显色试纸的保质期；甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物具有粘合性，聚结性，促进反应试剂稳定的粘附于滤纸上，显色试纸浸泡于样品液中时，显色试纸上的反应试剂流失少，既可以使反应试剂与样品液中的物质进行充分反应，又可以有效避免显色试纸上的反应试剂及反应产物脱落，确保显色均匀一致，因此与普通的试纸相比具有灵敏度高、对反应试剂吸附效果好、保质期长的优点；
(3)本发明创造所述的显色试纸主要用于检测酒样、罐头食品，检测范围宽，为0.5-10mg/l(以hcn计)，符合检测需求(gb2757-2012蒸馏酒及其配制酒中氰化物(以hcn计)≤8.0mg/l(按100％酒精度折算)，db13/151-92河北地方标准规定杏仁罐头中氰化物含量(以hcn计)≤5.0mg/kg)。
相对于现有技术，本发明创造所述的氰化物快速检测用显色试纸的制备方法具有以下优势：制备工艺简单、生产周期短、制造成本低廉、可批量生产。
相对于现有技术，本发明创造所述的氰化物快速检测用显色试纸的检测方法，具有以下优势：
(1)样品液的前处理步骤简单高效，有效缩短检测时长，磷酸二氢钾的加入提供了弱酸性环境，而氯胺t则能够将样品液中的氰化物充分氧化成氯化氢，为后续与显色试纸反应做好准备，确保检测结果的准确度高；
(2)采用本发明创造所述的显色试纸进行检测时，操作方便，只需要将显色试纸设有氰化物检测层的一端放入处理后的样品液中，静置1min左右即可取出进行对比观察，整个检测时间可缩短至5min内。
本发明创造所述的包括氰化物快速检测用显示试纸的试剂盒，具有以下优势：将所述显色试纸独立包装放置于试剂盒中，便于携带，试剂盒中还存放有试验中用到的其他试剂及比色卡，使用者无需单独准备，方便使用者的使用，进一步提高检测试验的便捷性。
附图说明
图1为本发明创造所述的显色试纸的结构示意图。
附图标记说明：
1-试纸基片；2-检测基层；3-氰化物检测层。
具体实施方式
除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明创造所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下面结合实施例及附图来详细说明本发明创造。
如图1所示，为本发明创造所述的氰化物快速检测用显色试纸的结构示意图，包括试纸基片1、设置于试纸基片1上的检测基层2及涂覆于检测基层2上的氰化物检测层3；试纸基片1的长度为6～10cm，宽度为0.5～1cm，厚度为0.02～0.05cm，检测基层2的长度为0.5～1cm，宽度为0.5～1cm；试纸基片为pvc材质，检测基层2为3mm滤纸或定性滤纸或吸水纸，检测基层2设置于试纸基片1上端面的至少一端上；其中，氰化物检测层3由按重量份计的如下组分组成：氢氧化钠3～12份、异烟酸8～15份、曲拉通x-1001～5份、巴比妥酸3～15份及甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物30～90份；
本发明创造所述显色试纸对液体食品的检测：
(1)取5ml的待测液于10ml离心管中，加入1耳勺的磷酸二氢钾，将离心管盖好盖，摇动使磷酸二氢钾完全溶解；
(2)向离心管中滴加1滴由质量浓度为3～15g/l的氯胺t及2～7g/l的甘油组成的混合溶液，盖好盖，摇匀得到溶液a；
(3)将显色试纸的氰化物检测层端浸入溶液a中，等待1min后，取出，观察显色试纸颜色变化，与比色卡比较，概略定量。
本发明创造所述显色试纸对固体食品的检测：
(1)称取15g固体样品，剪碎后放入洁净容器中，加入15ml蒸馏水或纯净水，搅拌均匀浸泡10min后，取上清液作为待测液；
(2)后续步骤与对液体食品的检测步骤相同。
实施例1
1.1显色试纸及显色试纸的制备
1)配制质量浓度为氢氧化钠3g/l、异烟酸15g/l、曲拉通x-1003g/l、巴比妥酸3g/l、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物60g/l的混合溶液作为试纸浸泡液，溶剂为纯水；
2)将配制好的试纸浸泡液倒入专用搪瓷盘中，将3mm滤纸从试纸浸泡液中匀速浸过，取出后悬挂沥水，送入50℃干燥箱内烘干40～45min；
3)将干燥好的3mm滤纸裁切成宽度为0.6cm的条状物，将裁切好的3mm滤纸粘贴到30×8cm的试纸基片上压紧，裁切成8×0.6cm条状物即得所述显色试纸。
1.2上述1.1所得的显色试纸的检出限的测定
取多份酒精含量56％vol的白酒阴性样品，其中一份作为空白样品，其它几份分别加入不同量的氰化物标准溶液，加入量及实验结果见表1
表1
根据表1的实验结果，使用本发明所述的显色试纸检测白酒中的氰化物含量，在氰化物加入量为0.5mg/l时，可以观察到明显的颜色变化。因此将该实验的检出限定为0.5mg/l，其后随着氰化物含量的增加试纸颜色也在逐渐加深。
1.3上述1.1所得的显色试纸的检测准确性验证
对浓香型白酒、清香型白酒、米香型白酒各3批次样品及样品加标(向样品中加入氰化物标准溶液)进行测定，同时用gb5009.36-2016第一法进行对比实验，结果见表2
表2
从表2可以看出，本显色试纸检测结果与gb5009.36-2016第一法检测结果符合，与加标值也符合。
1.4上述1.1所得的显色试纸特异性的检测
向具有不同浓度氰离子的水溶液中加入其他干扰离子(甲醛、乙醇、no2-、no3-、scn-、cl-、s2-、so42-、mg2+、na+、cu2+、fe3+、pb2+、cd2+、cr6+、mn2+、k+)，加入干扰物的浓度为30umol/l，用所述显色试纸进行检测，检测结果见表3
表3
从表3可以看出，上述甲醛、乙醇、no2-、no3-、scn-、cl-、s2-、so42-、mg2+、na+、cu2+、fe3+、pb2+、cd2+、cr6+、mn2+、k+对本显色试纸的检测无干扰。
实施例2
2.1显色试纸及显色试纸的制备
1)配制质量浓度为氢氧化钠8g/l、异烟酸12g/l、曲拉通x-1001g/l、巴比妥酸10g/l、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物30g/l的混合溶液作为试纸浸泡液，溶剂为纯水；
2)和3)同实施例1。
上述2.1所得的显色试纸的检出限的测定、检测准确性验证、特异性的检测结果与实施例1基本相同，在此不做赘述。
实施例3
3.1显色试纸及显色试纸的制备
1)配制质量浓度为氢氧化钠12g/l、异烟酸8g/l、曲拉通x-1005g/l、巴比妥酸15g/l、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物90g/l的混合溶液作为试纸浸泡液，溶剂为纯水；
2)和3)同实施例1。
上述3.1所得的显色试纸的检出限的测定、检测准确性验证、特异性的检测结果与实施例1基本相同，在此不做赘述。
实施例4
4.1显色试纸及显色试纸的制备
1)配制质量浓度为氢氧化钠12g/l、异烟酸12g/l、曲拉通x-1003g/l、巴比妥酸10g/l、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物50g/l的混合溶液作为试纸浸泡液，溶剂为纯水；
2)和3)同实施例1。
上述4.1所得的显色试纸的检出限的测定、检测准确性验证、特异性的检测结果与实施例1基本相同，在此不做赘述。
对比例1
本对比例中的试纸浸泡液与实施例1中试纸浸泡液相比，缺少甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物，其余组分不变；采用与实施例1中1.12)和3)相同方法生产试纸，得到对比例1的试纸。
采用对比例1的试纸对实施例1中1.3所述的米香型白酒1#/2#/3#三个样品加标8mg/l氰化物进行检测，结果表明当对比例1的试纸浸泡至30秒左右时，溶液出现浅粉色，1min后取出对比例1的试纸，对比例1的试纸显色介于色卡1-2之间，与gb5009.36-2016的检测结果差距较大(检测数据分别在7.98/8.16/8.23),而采用实施例1所述显色试纸得到的结果则在5-10之间，说明甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物的加入能够使反应试剂流失的更少，既可以使反应试剂与样品液中的物质进行充分反应，又可以有效避免显色试纸上的反应试剂及反应产物脱落，从而能够更为准确地对氰化物进行检测。
对比例2
本对比例中的试纸浸泡液与实施例1中试纸浸泡液相比，缺少曲拉通x-100，其余组分不变；采用与实施例1中1.12)和3)相同方法生产试纸，得到对比例2的试纸。
采用对比例2的试纸对实施例1中1.3所述的清香型白酒1#/2#/3#三个样品加标4mg/l氰化物进行检测，结果表明1min后对比例2的试纸取出，对比例2的试纸显色不均匀，中间部分略深，而采用实施例1所述显色试纸则得到均匀的显色，说明添加曲拉通x-100后的能够使反应试剂更好的分散于滤纸孔隙中，从而能够使显色均一，更有利于与色卡的比对判断。
以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。