本发明涉及一种采用密度法测定纯药物注射液中间产品中药物相对含量的方法，属于药品检验领域。
背景技术：
：本发明提供一种采用密度法测定纯药物注射液中间产品中药物相对含量的方法。以往的中间产品检验方法为高效液相色谱法，但此方法具有检验时间相对较长，成本高，对人员的检验功底考验较强等缺点。为了能快速而准确的对药品纯物质注射液中间产品相对含量进行测定，经过一系列的实验，发明人终于首次发明出将密度法应用于测定药品纯物质注射液中间产品相对含量中，提供了一种采用密度法测定纯药物注射液中间产品中药物相对含量的方法。该方法使得测定的准确度高、简单快捷、无对照品不需要提前准备、节省人力物力，人员经过简单的培训即可操作。技术实现要素：本发明的目的在于克服上述现有技术中的不足，提供一种采用密度法测定纯药物注射液中间产品中药物相对含量的方法，首次将密度法应用于测定药品纯物质注射液中间产品相对含量中，以解决检验费用过高偏差大耗时长的问题。为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：提供一种采用密度法测定纯药物注射液中间产品中药物相对含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备待测纯药物注射液中间产品中的纯药物的标准梯度溶液，所述的标准梯度溶液为相当于注射液中间产品的标示含量50％-150％的溶液；(2)测定步骤(1)得到的各溶液的密度；(3)根据步骤(1)中所述相对含量以及步骤(2)中所测得的密度数据，构建相对含量与密度的曲线方程；(4)测定待测纯药物注射液中间产品的密度；(5)将所测得的数据代入步骤(3)中得到的所述曲线方程，得出待测纯药物注射液中间产品中纯药物的相对含量。优选的，所述步骤(2)中的密度测定是在25℃进行的。优选的，构建所述曲线方程时的判断标准为：相关系数不小于0.998。优选的，密度的测量操作包括以下步骤：(1)首先准备密度仪，将温度调至规定数值后，并进行空气及溶剂的校验；(2)校验通过后，用注射器抽取待测物并注入所述密度仪内，待所述密度仪内U型管注满样品；(3)待样品稳定后，开始测量密度，经多次测量后求出密度平均值，即得测量结果。优选的，所述的纯药物注射液中间产品为丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品或奥拉西坦注射液中间产品。相较于现有技术，本发明的有益效果在于：1)作为改进，本发明将密度法应用于测定药品纯物质注射液中间产品相对含量，使其可在任意具有平面的地方进行检验，不再受环境限制。2)作为另一种改进，本发明简单快捷，省略了样品的稀释、配制流动相的过程，大大减少了检验时长，一批产品检验含量所需时间不超过10分钟，与高效液相法比较，测定时间节约了十几倍。3)作为另一种改进，本发明节省了大量的检验资金，只需要一台可控温密度仪，无需后续试剂、对照品的花销，比高效液相法比较省去了对照品所带来的实验偏差。4)作为另一种改进，本发明在测定时的极其稳定，测定偏差与高效液相法做同步对比在0.3％以内，从而保证了药品纯物质注射液含量的准确度。5)作为另一种改进，本发明在测定时无需配制化学试剂，环保节能。综上所述，本发明提供了一种采用密度法测定纯药物注射液中间产品中药物相对含量的方法，首次将密度法应用于测定药品纯物质注射液中间产品相对含量中，具有简单快速、简单快捷、无对照品、不需要提前准备工作、节省人力物力等优点，人员经过简单的培训即可操作，与高效液相法比较，没有了繁琐的操作界面与实际操作，只需对人员进行半小时的培训即可授权检验，车间生产人员完全可自行检验，省去了送检的过程。适合各大医药企业，值得推广。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。实施例1丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品含量的测定以丙氨酰谷氨酰胺注射液为例：确定丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品含量所用纯化水、试剂和仪器均符合GMP标准要求。主要检验仪器已完成仪器验证。计量仪器、仪表经校验合格，所需玻璃仪器、实验仪器均制定清洁方法。用于检验丙氨酰谷氨酰胺注射液的质量标准、SOP、SMP等软件均以获得批准并执行。(1)构建丙氨酰谷氨酰胺相对含量与密度的曲线方程检测方法：根据丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品的标示含量(丙氨酰谷氨酰胺5g，加注射用水25ml)，分别精密称取丙氨酰谷氨酰胺，加水溶解至25ml容量瓶中，制成相当于丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品的标示含量的90％，95％，100％，105％，110％的溶液；分别在25℃测定这些溶液的密度，密度的测量操作包括以下步骤：(1)首先准备密度仪，将温度调至规定数值后，并进行空气及溶剂的校验；(2)校验通过后，用注射器抽取待测物并注入所述密度仪内，待所述密度仪内U型管注满样品；(3)待样品稳定后，开始测量密度，经多次测量后求出密度平均值，即得测量结果。结果数据如表1所示，根据测量结果构建相对含量与密度的曲线方程，判断标准：相关系数(r)不小于0.998。表1.曲线方程构建结果数据(2)确定测定方法的专属性检测方法：以纯化水作为溶剂，另取丙氨酰谷氨酰胺适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每ml中约含丙氨酰谷氨酰胺0.2g的溶液，分别测定水及丙氨酰谷氨酰胺溶液在25℃的密度。方程式：Y＝1546.1X-1543。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判定标准：将空白溶剂的密度带入曲线方程，所计算得到的相对含量应小于用供试品溶液密度计算得到的相对含量的3.0％。表2.专属性结果数据(3)确定测定方法的准确度(回收率)检测方法：精密称取丙氨酰谷氨酰胺4.5g，5.0g，5.5g各3份(相当于标示含量的90％，100％，110％)，加水溶解至25ml容量瓶中，即分别制成0.18g/ml，0.2g/ml，0.22g/ml的溶液(共9份)。在25℃分别测定供试品溶液的密度，根据方程式计算相对含量，并计算回收率。方程式：Y＝1546.1X-1543。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判定标准：回收率应在98.0％-102.0％之间，RSD≤2.0％。表3.准确度(回收率)结果数据(4)确定测定方法的重复性检测方法：取丙氨酰谷氨酰胺供试品，加水配制成含丙氨酰谷氨酰胺0.2g/ml的溶液，作为供试品溶液(相当于标示含量的100％)，在25℃测定供试品溶液的密度6次，根据方程式分别计算供试品溶液的相对含量。方程式：Y＝1546.1X-1543。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判定标准：测得6次结果的RSD应≤2.0％。表4.重复性结果数据(5)确定测定方法的中间精密度检测方法：取同一批次丙氨酰谷氨酰胺注射液，分别由两名检验人员在不同日期、各平行检测2次(2×2)。方程式：Y＝1546.1X-1543。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判定标准：计算四个检验结果之间的RSD应≤2.0％。表5.精密度结果数据(6)确定测定方法的线性与范围检测方法：精密称取丙氨酰谷氨酰胺15.0g，加水溶解并稀释成50ml，再精密量取5.4ml，6.0ml，6.7ml，7.4ml，8.0ml(相当于标示含量的81.0％，90.0％，100.5％，111.％，120％)，置于10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。在25℃分别测定各溶液密度，并代入方程式求得含量。以样品密度和相对含量做直线回归，得线性方程。方程式：Y＝1546.1X-1543。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判断标准：相关系数(r)应≥0.998。表6.线性范围结果数据相当于标示量81％90％100.50％111％120％样品密度(g/cm3)1.05041.05621.06321.06981.0756相对含量(％)81.0289.99100.10111.02119.99(7)确定测定方法的耐用性检测方法：精密称取丙氨酰谷氨酰胺5.0g，加水溶于25ml量瓶中，作为供试品溶液。将其分别与0、2、4、8小时在25℃测定溶液密度，带入曲线方程式求出丙氨酰谷氨酰胺相对含量。方程式：Y＝1546.1X-1543。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判断标准：将放置后测得的相对含量与0小时的相对含量分别作差，如其差值小于0小时相对含量的1.0％，则判定溶液在此时间稳定。表7.耐用性结果数据对比例高效液相法与密度法应用于检验丙氨酰谷氨酰胺注射液测得含量的对比取本公司生产的丙氨酰谷氨酰胺注射液成品3批，用本发明建立的中间产品含量密度法及成品高效液相检测方法分别测定含量，比较两种方法测得结果的相对偏差，两种结果的相对偏差应≤2.0％。表8.对比结果数据样品样品1样品2样品3密度法测得结果102.4％103.0％102.7％高效液相法测得结果101.8％102.6％102.9％两组结果的相对偏差0.29％0.19％0.10％实施例2奥拉西坦注射液中间产品含量的测定以奥拉西坦注射液为例：确定奥拉西坦注射液中间产品含量所用纯化水、试剂和仪器均符合GMP标准要求。主要检验仪器已完成仪器验证。计量仪器、仪表经校验合格，所需玻璃仪器、实验仪器均制定清洁方法。用于检验奥拉西坦注射液的质量标准、SOP、SMP等软件均以获得批准并执行。(1)构建奥拉西坦注射液相对含量与密度的曲线方程检测方法：根据奥拉西坦注射液中间产品的标示含量(奥拉西坦15g，加注射用水50ml)，在精密量取5.4ml，6.0ml，6.7ml，7.4ml，8.0ml(相当于丙氨酰谷氨酰胺注射液中间产品的标示含量的81％，90％，100.5％，111％，120％的溶液)，置于10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别在25℃测定这些溶液的密度，密度的测量操作包括以下步骤：(1)首先准备密度仪，将温度调至规定数值后，并进行空气及溶剂的校验；(2)校验通过后，用注射器抽取待测物并注入所述密度仪内，待所述密度仪内U型管注满样品；(3)待样品稳定后，开始测量密度，经多次测量后求出密度平均值，即得测量结果。结果数据如表9所示，根据测量结果构建相对含量与密度的曲线方程，判断标准：相关系数(r)不小于0.998。表9.曲线方程构建结果数据(2)确定测定方法的专属性检测方法：以纯化水作为溶剂，另取奥拉西坦适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每ml中约含奥拉西坦0.2g的溶液，分别测定水及奥拉西坦溶液在25℃的密度。将空白溶剂的密度带入曲线方程，所得含量应小于用供试品溶液密度测得含量的3.0％。方程式：Y＝(X—0.9974)÷0.0539。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于奥拉西坦注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判定标准：将空白溶剂的密度带入曲线方程，所计算得到的相对含量应小于用供试品溶液密度计算得到的相对含量的3.0％。表10.专属性结果数据(3)确定测定方法的准确度(回收率)检测方法：精密称取奥拉西坦4.0g，5.0g，6.0g各3份(相当于标示含量的80％，100％，120％)，加水溶解至25ml容量瓶中，即分别制成0.16g/ml，0.2g/ml，0.24g/ml的溶液(共9份)。在25℃分别测定供试品溶液的密度，根据方程式计算相对含量，并计算回收率。方程式：Y＝(X—0.9974)÷0.0539。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于奥拉西坦注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判定标准：回收率应在98.0％-102.0％之间，RSD≤2.0％。表11.准确度(回收率)结果数据(4)确定测定方法的重复性检测方法：取奥拉西坦供试品，加水配制成含奥拉西坦0.2g/ml的溶液，作为供试品溶液(相当于标示含量的100％)，在25℃测定供试品溶液的密度6次，根据方程式分别计算供试品溶液的相对含量。方程式：Y＝(X—0.9974)÷0.0539。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于奥拉西坦注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判定标准：测得6次结果的RSD应≤2.0％。表12.重复性结果数据(5)确定测定方法的中间精密度检测方法：取同一批次奥拉西坦注射液，分别由两名检验人员在不同日期、各平行检测2次(2×2)。方程式：Y＝(X—0.9974)÷0.0539。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于奥拉西坦注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判定标准：计算四个检验结果之间的RSD应≤2.0％。表13.精密度结果数据(6)确定测定方法的线性与范围检测方法：精密称取奥拉西坦15.0g，加水溶解并稀释成50ml，再精密量取5.4ml，6.0ml，6.7ml，7.4ml，8.0ml(相当于标示含量的81.0％，90.0％，100.5％，111.％，120％)，置于10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。在25℃分别测定各溶液密度，并代入方程式求得含量。以样品密度和相对含量做直线回归，得线性方程。方程式：Y＝(X—0.9974)÷0.0539。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于奥拉西坦注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判断标准：相关系数(r)应≥0.998。表14.线性范围结果数据相当于标示量81％90％100.5％111％120％样品密度(g/cm3)1.04191.04681.05251.05841.0636相对含量(％)82.691.6102.3113.2122.9(7)确定测定方法的耐用性检测方法：精密称取奥拉西坦5.0g，加水溶于25ml量瓶中，作为供试品溶液。将其分别与0、2、4、8小时在25℃测定溶液密度，带入曲线方程式求出奥拉西坦相对含量。方程式：Y＝(X—0.9974)÷0.0539。其中，X为测量密度平均值，Y为相当于奥拉西坦注射液中间产品标示含量的百分数(相对含量)。判断标准：将放置后测得的相对含量与0小时的相对含量分别作差，如其差值小于0小时相对含量的1.0％，则判定溶液在此时间稳定。表15.耐用性结果数据(8)对比例高效液相法与密度法应用于检验奥拉西坦注射液测得含量的对比取本公司生产的奥拉西坦注射液成品3批，用本发明建立的中间产品含量密度法及成品高效液相检测方法分别测定含量，比较两种方法测得结果的相对偏差，两种结果的相对偏差应≤2.0％。表16.对比结果数据样品样品1样品2样品3密度法测得结果98.6％100.5％98.8％高效液相法测得结果98.0％100.4％98.3％两组结果的相对偏差0.31％0.05％0.25％综上所述可知，本发明首次将密度法应用于药品纯物质注射液中间产品检验中，提供了一种采用密度法测定纯药物注射液中间产品中药物相对含量的方法，具有相对简单准确、耗时少，环保无污染等优点，且优于现有技术中的检验方法，因此本发明值得推广。当前第1页1 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