黄连花的薄层鉴别方法与流程

本发明涉及一种黄连花的薄层鉴别方法，属于中药分析技术领域。

背景技术：

黄连花(lysimachiadavuricaledeb.)系毛茛科植物黄连(coptischinensisfranch.)、三角叶黄连(c.deltoideac.y.chengethsiao)或云连(c.teetawall.)所开的花，文献报道，其含有丰富的对人体有用的氨基酸及矿物质元素。黄连作为一种传统中药材,具有很强的抗菌泻火能力,现代医学研究表明还具有降血糖、降血脂、抗血小板凝聚等二十余种功能。花作为植物营养成分富积部位,开发利用黄连花具有重要的经济价值和社会价值。薄层鉴别有助于黄连花的质量控制。目前，药典和各省中药材标准均没有黄连花薄层鉴别方法的记载。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供黄连花的薄层鉴别方法。

本发明提供的黄连花的薄层鉴别方法包括如下步骤：

(1)取待鉴定的黄连花，烘干后粉粹，取0.25g黄连花粉末于锥形瓶中，加无水甲醇25ml，超声30min，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

(2)取盐酸小檗碱，配制成浓度为800ug/ml的溶液，作为对照品溶液；

(3)吸取供试品溶液和对照品溶液分别点于同一薄层板上，以体积比为5:3:2的60℃～90℃石油醚-三氯甲烷-甲醇为展开剂展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，与对照品色谱相比，在rf值为0.93±0.02的相应位置，显相同颜色的斑点，同时供试品色谱还在rf值为0.35±0.05和0.77±0.05的位置出现斑点。

进一步地，步骤(3)中展开温度为29℃，展开距离为9.0cm，点样量为10μl。

本发明鉴别方法有助于黄连花的质量控制，为制定黄连花的质量标准提供了科学依据，为黄连花的可持续利用和开发奠定了基础。

附图说明

图1为供试品与对照品的薄层鉴别色谱图，其中a为盐酸小檗碱对照品，1～6依次为20180310-1-1、20180310-2-1、20180310-3-1、20180310-4-1、20180310-5-1,20180316-6-1黄连花供试品。

图2为采用不同薄层板的供试品薄层色谱图，其中左边的板为硅胶h薄层板，右边的板为硅胶g薄层板，1～6依次为20180310-1-1、20180310-2-1、20180310-3-1、20180310-4-1、20180310-5-1,20180316-6-1黄连花供试品。

图3为不同温度条件下展开的供试品薄层色谱图，其中左边为6℃，右边为29℃，1～6依次为20180310-1-1、20180310-2-1、20180310-3-1、20180310-4-1、20180310-5-1,20180316-6-1黄连花供试品。

图4为不同点样量条件下的供试品薄层色谱图，其中左边为10μl点样量，中间为20μl点样量，右边为27μl点样量，1～6依次为20180310-1-1、20180310-2-1、20180310-3-1、20180310-4-1、20180310-5-1,20180316-6-1黄连花供试品。

图5为不同展开距离条件下的供试品薄层色谱图，其中左边的展开距离7.7cm，中间为8.3cm，右边为9cm，，1～6依次为20180310-1-1、20180310-2-1、20180310-3-1、20180310-4-1、20180310-5-1,20180316-6-1黄连花供试品。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明做进一步详细说明，但本发明的保护范围不局限于此。

a、仪器：bj-150型高速多功能粉碎机，2号药典筛，薄层玻璃板(100mx200m)，hs-3120超声波清洗器，fa2004分析电子天平(上海良平仪器仪表有限公司)，101-1-s型电热鼓风干燥箱(成都雅源科技有限公司)，uv-8三用紫外分析仪(无锡科达仪器厂)，硅胶g薄层板(青岛海洋化工厂)、硅胶h薄层板(青岛海洋化工厂)、微量注射器，锥形瓶，内径0.5mm长100mm毛细玻璃管(华西医科大学仪器厂生产)，20cm×10cm层析缸(竖式)，温度计，漏斗，滤纸。

b、试剂：无水甲醇，甲醇，石油醚(60-90℃)，三氯甲烷，氨水，羧甲基纤维素钠(实验试剂，成都市科龙化工试剂场)，，盐酸小檗碱中药化学对照品(四川维克奇生物科技有限公司)，其余试剂均为分析纯。

c、样品来源编号

实施例1

(1)供试品溶液的制备：取待鉴定的黄连花，60℃恒温烘干后粉粹，取0.25g黄连花粉末于锥形瓶中，加无水甲醇25ml，超声30min，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱，配制成浓度为800ug/ml的溶液，作为对照品溶液；

(3)薄层色谱条件、展开方式及检视

薄层板：硅胶g薄层板；

展开剂：石油醚(60℃～90℃)-三氯甲烷-甲醇(5:3:2)；

点样量：10μl；

展开距离：9.0cm；

展开温度：29℃；

展开方式：双槽展开缸，竖式(20cm×10mm)；上行展开，先用氨水预饱和30min,弃去氨水，展开，取出，晾干；

检视：置365nm紫外灯下检视；

结果：供试品色谱中，与对照品色谱相比，在rf值为0.91～0.95的相应位置，显相同颜色的斑点，同时供试品色谱还在rf值为0.30～0.37和0.72～0.82的位置上显与上述斑点颜色相同的斑点。

实施例2薄层条件的筛选

本实施例所采用的供试品溶液与实施例1相同。

(1)不同薄层板考察

分别吸取供试品溶液点于硅胶h薄层板和硅胶g薄层板上，按实施例1的薄层色谱条件及展开方式展开，置365nm紫外灯下检视，薄层色谱图如图2所示，结果显示，样品在硅胶h薄层板上展开效果不好，斑点分离效果较差，相比之下，在硅胶g薄层板上的展开效果更为理想，斑点较为清晰。

(2)展开温度考察

吸取供试品溶液分别点于两个相同的硅胶g薄层板上(生产厂家及生产批次相同)，按实施例1的薄层色谱条件和展开方式展开，仅将展开温度分别设为6℃和29℃，置365nm紫外灯下检视，薄层色谱图如图3所示，结果显示，展开温度为29℃时斑点更圆整清晰。

(3)点样量考察

吸取供试品溶液分别点于三个相同的硅胶g薄层板上(生产厂家及生产批次相同)，按实施例1的薄层色谱条件和展开方式展开，仅将点样量分别设为10μl、20μl、27μl，置365nm紫外灯下检视，薄层色谱图如图4所示，结果显示，点样量为10μl时，斑点清晰且不拖尾，点样量越多，拖尾越明显。

(4)展开距离考察

吸取供试品溶液分别点于三个相同的硅胶g薄层板上(生产厂家及生产批次相同)，按实施例1的薄层色谱条件和展开方式展开，仅将展开距离分别设为7.7cm、8.3cm、9.0cm，置365nm紫外灯下检视，薄层色谱图如图5所示，结果显示，展开距离为7cm左右时，出现4个点，随着展开距离的增大，其中一个成分不稳定的斑点便不明显了，展开距离为9cm时三个斑点更清晰。