本发明属于药物分析检测领域,具体涉及一种班布特罗中有关物质的检测分离方法。
背景技术:
班布特罗(bambuterol),化学名是5-[2-(叔丁基氨基)-1-羟乙基]-1,3-亚苯双二甲基氨基甲酸酯,是一种长效β2受体激动剂。cas号:81732-65-2,结构式如下所示:
其由瑞士astra公司在1989年研制开发的新一代支气管扩张药,是治疗哮喘、肺气肿和支气管炎的主要药物之一。此外,还可作为胆道口和胆道括约肌的平滑肌松弛剂,用于解除胆石绞痛、胆囊运动障碍和吗啡成瘾发作等。其作为支气管解痉抗哮喘药具有作用时间长,且副作用非常微弱,对心脏和消化系统没有明显的影响,与以前的化合物相比具有明显的优越性。
班布特罗为盐酸班布特罗通氯化氢气体成盐之前的中间体,后续的溶解、成盐、精制工序对叔丁胺的含量没有影响,因此通过对班布特罗中叔丁胺的残留进行控制可以达到控制盐酸班布特罗叔丁胺残留的目的。根据毒理学研究数据将其限度浓度定为100ppm。在班布特罗合成工艺中需用到有机溶剂叔丁胺,叔丁胺具有高毒性,吸入、摄入或经皮肤吸收可能致死,对眼睛、皮肤、粘膜和呼吸道有强烈的刺激作用,对人体健康造成一定危害,为确保其安全性,需控制叔丁胺残留溶剂的含量,其结构式如下所示:
目前,关于班布特罗中叔丁胺残留溶剂的研究,还没有相关国内外文献报道,各国质量标准也未规定叔丁胺残留溶剂的检测方法,因此开发一种操作简便,灵敏度高,重复性好和稳定度高的测定班布特罗中叔丁胺残留溶剂的方法很有必要。
技术实现要素:
本申请的主要目的是提供一种班布特罗中有关物质的检测分离方法。
本申请采用了以下技术方案:
一种班布特罗中有关物质的检测分离方法,该方法包括,用气相色谱法检测分离班布特罗中的有关物质,所使用的气相色谱柱为db-624或db-1,气相色谱柱的升温程序为:
(1)起始温度为35~50℃,保持6~10min;
(2)然后以15~20℃/min的速度升温至150~200℃;
班布特罗中的有关物质是残留溶剂叔丁胺。
优选的,气相色谱柱的进样口温度为210~230℃。
优选的,气相色谱柱的分流比为2:1~)(20:1),更优选的,为8:1。
残留溶剂叔丁胺的含量是按照外标法以峰面积进行计算的,所述外标法是按照如下公式进行计算的:有关物质含量(%)=c对*a样*v样/(a对*m样)*100%,其中,c对为对照品的浓度,a样为供试品的峰面积,v样为供试品的稀释体积,a对为对照品的峰面积,m样为供试品的质量。
该方法包括以下一项或者多项特征:
(ⅰ)色谱柱的规格为30m×0.32mm×1.8μm或或30m×0.32mm×3μm,
(ⅱ)进样量为1μl,
(ⅲ)载气为氮气,
(ⅳ)检测器为氢火焰离子化检测器(fid),温度为200~270℃,
(ⅴ)流速为0.8~1.2ml/min。
本申请另一个较为优选的技术方案为:
一种班布特罗中叔丁胺的检测分离方法,用气相色谱法检测分离班布特罗中的叔丁胺,所使用的气相色谱柱为db-1,其规格为(30m*0.32mm*3um),所使用的检测器为氢火焰离子化检测器(fid),温度为240℃,设置气相色谱柱的升温程序为:
(1)起始温度为40℃,保持6min;
(2)然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持2min;
(3)再以30℃/min的速度升温至200℃,保持8min,目的是老化色谱柱。
气相色谱柱的进样口温度为220℃,分流比为8:1。
具备的制备步骤如下:
(1)对照品溶液配制:精密称取叔丁胺适量,用稀释液稀释成每1ml含叔丁胺0.02mg,作为对照品溶液。
(2)供试品溶液配制:精密称取1.0g供试品置5ml容量瓶中,用稀释液稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
(3)空白溶液:稀释液即为空白溶液。
(4)气相色谱条件:色谱柱固定相为100%甲基聚硅氧烷,以fid检测器监测,以惰性气体为载气,调节进样口温度、检测器温度和柱温,采用上述的升温程序进行升温,以直接进样的方式进样。
(5)取空白溶液、对照品和供试品溶液各1μl,分别注入气相色谱仪,记录色谱图。按外标法计算叔丁胺含量。
优选的,稀释液可以选甲醇、dmso、甲苯、乙酸乙酯,更优选的,为乙酸乙酯。
由于采用以上技术方案,本申请的有益效果在于:
1.我方的技术方案分析时间控制在25min之内,能够快速的得到结果,且本方法操作简单,可有效的检测并分离班布特罗中的叔丁胺,且有着杂质与相邻峰达到基线分离,峰形和重现性好的优点;
2.我方采用毛细管气相色谱法检测叔丁胺的残留量,以乙酸乙酯为溶剂,可以完全溶解样品,且不受温度的影响,样品处理简单方便,直接进样检测溶剂残留,结果准确可靠。
3.我方的方案填补了此领域检测分离的空白,且在专属性、线性、检测限、定量限、精密度、准确度和耐用性等方法学考察方面,均符合定量测定要求。适用于工业化生产使用,为班布特罗的质量控制提供了良好的参考标准。
附图说明
图1是实施例1的标准品检测色谱图;
图2是实施例2的供试品检测色谱图;
图3是实施例3的供试品加标准品检测色谱图;
图4是实施例4的供试品加标准品检测色谱图;
图5是实施例5的供试品检测色谱图;
图6是实施例6的供试品检测色谱图;
图7是实施例6的供试品加标准品检测色谱图;
图8是实施例7的供试品加标准品检测色谱图。
具体实施方式
下面通过具体实施例和附图对本申请作进一步详细说明。以下实施例仅对本申请进行进一步说明,不应理解为对本申请的限制。
实施例1
一种检测班布特罗中有关物质的方法,有关物质是叔丁胺,检测的仪器和试剂如下:
试剂:叔丁胺,纯度99.5%,厂家:阿拉丁试剂;甲醇级别:ar,厂家:国药集团。
仪器:气相色谱仪,型号7890b,厂家agilent;电子分析天平,型号bsa224s-cw,厂家:赛多利斯。
检测班布特罗中叔丁胺检测分离方法采用气相色谱法。
气相色谱法的条件如下:
色谱柱:db-1(30m×0.32mm×3.0μm),进样口温度:220℃,检测器温度240℃,流速:1.2ml/min,进样量:1ul,分流比:2:1,载气:氮气,升温程序:起始温度40℃,保持6min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持2min,然后以30℃/min的速度升至200℃,保持8min。
具体的实施步骤如下:
(1)空白溶剂:甲醇;
(2)叔丁胺对照品贮备液:精密称取叔丁胺0.1059g,置于100ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度线,摇匀,备用。
(3)叔丁胺对照品溶液:精密量取对照品储备液1ml置50ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。
(4)班布特罗供试品溶液:称取供试品1.0273g置5ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。
(5)按照上述的气相色谱条件进行检测,记录色谱图。
测试结果见表1。
表1实施例1中班布特罗叔丁胺残留溶剂试验结果
检测结果如图1所示,根据表1可知,该条件下,叔丁胺峰为单峰,无干扰,且响应值比较大,理论塔板数符合要求,但是此时叔丁胺峰处于甲醇溶剂峰的拖尾处,对其响应值影响较大。
实施例2
一种检测班布特罗中有关物质的方法,有关物质是叔丁胺,检测的仪器和试剂如下:
试剂:叔丁胺,纯度99.5%,厂家:阿拉丁试剂;甲醇级别:ar,厂家国药集团
仪器:气相色谱仪,型号7890b,厂家agilent;电子分析天平,型号bsa224s-cw,厂家:赛多利斯。
检测班布特罗中叔丁胺检测分离方法采用气相色谱法。
气相色谱法的条件如下:
色谱柱:db-1(30m×0.32mm×3.0μm),进样口温度:220℃,检测器温度240℃,流速:0.9ml/min,进样量:1ul,分流比:6:1,载气:氮气,升温程序:起始温度40℃,保持6min,然后以20℃/min的速度升温至200℃,保持8min。
具体的实施步骤如下:
(1)空白溶剂:甲醇;
(2)叔丁胺对照品贮备液:精密称取叔丁胺0.1059g,置于100ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度线,摇匀,备用。
(3)叔丁胺对照品溶液:精密量取对照品储备液1ml置50ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。
(4)班布特罗供试品溶液:称取供试品1.0273g置5ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。
(5)按照上述的气相色谱条件进行检测,记录色谱图。
测试结果见表2
表2实施例2中班布特罗叔丁胺残留溶剂试验结果
检测结果如图2所示,根据表2可知,该条件下,空白溶剂对叔丁胺检出有干扰;叔丁胺峰峰形较尖锐,且分离度及理论塔板数均符合要求,叔丁胺峰处于甲醇溶剂峰拖尾处稍平缓的位置,对其峰面积还是稍有影响.
实施例3
一种检测班布特罗中有关物质的方法,有关物质是叔丁胺,检测的仪器和试剂如下:
试剂:叔丁胺,纯度99.5%,厂家:阿拉丁试剂;甲醇级别:ar,厂家:国药集团
仪器:气相色谱仪,型号7890b,厂家agilent;电子分析天平,型号bsa224s-cw,厂家:赛多利斯。
检测班布特罗中叔丁胺检测分离方法采用气相色谱法。
气相色谱法的条件如下:
色谱柱:db-1(30m×0.32mm×3.0μm),进样口温度:220℃,检测器温度240℃,流速:0.9ml/min,进样量:1ul,分流比:6:1,载气:氮气,升温程序:起始温度50℃,保持6min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持2min,然后以30℃/min的速度升至200℃,保持8min。
具体的实施步骤如下:
(1)空白溶剂:甲醇;
(2)叔丁胺对照品贮备液:精密称取叔丁胺0.1059g,置于100ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度线,摇匀,备用。
(3)叔丁胺对照品溶液:精密量取对照品储备液1ml置50ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。
(4)班布特罗供试品溶液:称取供试品1.0273g置5ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。
(5)供试品加对照品溶液:称取供试品1.0094g置5ml容量瓶中,用叔丁胺对照品溶液稀释至刻度。
(6)按照上述的气相色谱条件进行检测,记录色谱图。
测试结果见表3。
表3实施例3中班布特罗叔丁胺残留溶剂试验结果
检测结果如图3所示,根据表3可知,该条件下,叔丁胺对照品峰为单峰,峰形较好,响应值也比较大,且分离度及理论塔板数均符合要求,但叔丁胺峰处于甲醇溶剂峰拖尾处,对其响应值影响较大。
实施例4
一种检测班布特罗中有关物质的方法,有关物质是叔丁胺,检测的仪器和试剂如下:
试剂:叔丁胺,纯度99.5%,厂家:阿拉丁试剂;甲醇级别:ar,厂家国药集团
仪器:气相色谱仪,型号7890b,厂家agilent;电子分析天平,型号bsa224s-cw,厂家:赛多利斯。
检测班布特罗中叔丁胺检测分离方法采用气相色谱法。
气相色谱法的条件如下:
色谱柱:db-1(30m×0.32mm×3.0μm),进样口温度:220℃,检测器温度240℃,流速:0.9ml/min,进样量:1ul,分流比:6:1,载气:氮气,升温程序:起始温度35℃,保持6min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持2min,然后以30℃/min的速度升至200℃,保持8min。
具体的实施步骤如下:
(1)空白溶剂:甲醇;
(2)叔丁胺对照品贮备液:精密称取叔丁胺0.1059g,置于100ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度线,摇匀,备用。
(3)叔丁胺对照品溶液:精密量取对照品储备液1ml置50ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。
(4)班布特罗供试品溶液:称取供试品1.0273g置5ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度。
(5)供试品加对照品溶液:称取供试品1.0094置5ml的容量瓶中,用叔丁胺对照品溶液稀释至刻度。
(6)按照上述的气相色谱条件进行检测,记录色谱图。
测试结果见表4。
表4实施例4中班布特罗叔丁胺残留溶剂试验结果
检测结果如图4所示,根据表4可知,该条件下,叔丁胺对照品峰为单峰,峰形较好,响应值也比较大,且分离度及理论塔板数均符合要求,但叔丁胺峰处于甲醇溶剂峰拖尾处,对其响应值影响较大。
实施例5
一种检测班布特罗中有关物质的方法,有关物质是叔丁胺,检测的仪器和试剂如下:
试剂:叔丁胺,纯度99.5%,厂家:阿拉丁试剂;甲苯级别:ar,厂家国药集团
仪器:气相色谱仪,型号7890b,厂家agilent;电子分析天平,型号bsa224s-cw,厂家:赛多利斯。
检测班布特罗中叔丁胺检测分离方法采用气相色谱法。
气相色谱法的条件如下:
色谱柱:db-1(30m×0.32mm×3.0μm),进样口温度:220℃,检测器温度240℃,流速:0.9ml/min,进样量:1ul,分流比:8:1,载气:氮气,升温程序:起始温度40℃,保持6,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持2min,然后以30℃/min的速度升至200℃,保持8min。
具体的实施步骤如下:
(1)空白溶剂:甲苯;
(2)叔丁胺对照品贮备液:精密称取叔丁胺0.1034g,置于100ml容量瓶中,用甲苯溶解并稀释至刻度线,摇匀,备用。
(3)叔丁胺对照品溶液:精密量取对照品储备液1ml置50ml容量瓶中,加甲苯稀释至刻度。
(4)班布特罗供试品溶液:称取供试品1.0493g置5ml容量瓶中,加甲苯稀释至刻度。
(5)按照上述的气相色谱条件进行检测,记录色谱图。
测试结果见表5。
表5实施例5中班布特罗叔丁胺残留溶剂试验结果
检测结果如图5所示,根据表5可知,该条件下,空白对其有干扰,叔丁胺对照品峰为单峰,峰形较好,响应值也比较大,且分离度及理论塔板数均符合要求。
实施例6
一种检测班布特罗中有关物质的方法,有关物质是叔丁胺,检测的仪器和试剂如下:
试剂:叔丁胺,纯度99.5%,厂家:阿拉丁试剂;乙酸乙酯级别:ar,厂家国药集团
仪器:气相色谱仪,型号7890b,厂家agilent;电子分析天平,型号bsa224s-cw,厂家:赛多利斯。
检测班布特罗中叔丁胺检测分离方法采用气相色谱法。
气相色谱法的条件如下:
色谱柱:db-1(30m×0.32mm×3.0μm),进样口温度:220℃,检测器温度240℃,流速:0.9ml/min,进样量:1ul,分流比:8:1,载气:氮气,升温程序:起始温度40℃,保持6min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持2min,然后以30℃/min的速度升至200℃,保持8min。
具体的实施步骤如下:
(1)空白溶剂:乙酸乙酯;
(2)叔丁胺对照品贮备液:精密称取叔丁胺0.1034g,置于100ml容量瓶中,用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度线,摇匀,备用。
(3)叔丁胺对照品溶液:精密量取对照品储备液1ml置50ml容量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度。
(4)班布特罗供试品溶液:称取供试品1.0493g置5ml容量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度。
(5)按照上述的气相色谱条件进行检测,记录色谱图。
测试结果见表6。
表6实施例6中班布特罗叔丁胺残留溶剂试验结果
检测结果如图6~图7所示,根据表6可知,该条件下,空白处无干扰,叔丁胺对照品峰形尖锐,峰形也比较对称,分离度和理论塔板数都能达到要求,此方法比较好。
实施例7
一种检测班布特罗中有关物质的方法,有关物质是叔丁胺,检测的仪器和试剂如下:
试剂:叔丁胺,纯度99.5%,厂家:阿拉丁试剂;乙酸乙酯级别:ar,厂家国药集团
仪器:气相色谱仪,型号7890b,厂家agilent;电子分析天平,型号bsa224s-cw,厂家:赛多利斯。
检测班布特罗中叔丁胺检测分离方法采用气相色谱法。
气相色谱法的条件如下:
色谱柱:db-1(30m×0.32mm×3.0μm),进样口温度:220℃,检测器温度240℃,流速:0.9ml/min,进样量:1ul,分流比:2:1,载气:氮气,升温程序:起始温度40℃,保持6min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持2min,然后以30℃/min的速度升至200℃,保持8min。
具体的实施步骤如下:
(1)空白溶剂:乙酸乙酯;
(2)叔丁胺对照品贮备液:精密称取叔丁胺0.1034g,置于100ml容量瓶中,用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度线,摇匀,备用。
(3)叔丁胺对照品溶液:精密量取对照品储备液1ml置50ml容量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度。
(4)班布特罗供试品溶液:称取供试品1.0493g置5ml容量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度。
(5)按照上述的气相色谱条件进行检测,记录色谱图。
测试结果见表7。
表7实施例7中班布特罗叔丁胺残留溶剂试验结果
检测结果如图8所示,根据表7可知,该条件下,理论塔板数可以,峰面积响应值比较大,但其空白处有干扰,叔丁胺峰后面的杂质峰可能包含进去,造成峰形拖尾。
以上内容是结合具体的实施方式对本申请所作的进一步详细说明,不能认定本申请的具体实施只局限于这些说明。对于本申请所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本申请构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本申请的保护范围。