基于IGFBP-7的先兆子痫预测的制作方法

基于igfbp
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7的先兆子痫预测
1.本发明涉及一种用于评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的方法，所述方法包括如下步骤：确定来自受试者的样本中生物标记物igfbp
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7（胰岛素样生长因子结合蛋白7）的量，以及将确定的生物标记物的量与参考进行比较。此外，本发明涉及在妊娠受试者的样本中生物标记物igfbp
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7或至少一种与igfbp
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7特异性结合的检测试剂的体外使用，用于评估所述受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。本发明还包括一种被适配为实施本发明的方法的设备。
2.高血压疾病代表最常见的妊娠医学并发症，影响约6％至8％的妊娠（report of the national high blood pressure education program working group on high blood pressure in pregnancy. am j obstet gynecol. 2000;183(1):s1
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s22）。妊娠并发症一方面与妊娠妇女的妊娠相关死亡率相关联，并且另一方面也与新生儿的发病率和死亡率增加相关联。在39岁以上年龄的妊娠妇女中，每10万活产中14.5的比率的产妇死亡率甚至更为频繁。
3.妊娠高血压疾病可分类为1）先兆子痫；2）（任何原因的）慢性高血压；3）叠加有先兆子痫的慢性高血压；以及4）妊娠高血压（acog task force on hypertension in pregnancy.obstet gynecol 2013;122:1122
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31）。临床管理通常包括：先兆子痫和慢性高血压情况下的血压控制，重度高血压或伴有子痫发作（eclamptic fit）的重度高血压情况下的癫痫预防，叠加有先兆子痫的慢性高血压情况下的较早分娩（34周vs 37周），以及妊娠高血压情况下强化产后监测（nice（2011）nice clinical guideline 107: hypertension in pregnancy）。
4.先兆子痫是妊娠期间最重要的高血压疾病，与母亲和胎儿/新生儿的死亡率和发病率有关（duley 2009, semin perinatol: 33: 130
–
37）。
5.先兆子痫通常定义为妊娠相关或诱发的高血压。它的表征是高血压和蛋白尿。也在医学标准教科书和各种临床学会的指南（nice（2011）nice clinical guideline 107: hypertension in pregnancy）中找到详细信息。
6.目前，除了分娩以外，没有其他方法治愈先兆子痫。先兆子痫的严重程度可能从轻度到危及生命。轻度形式的先兆子痫可通过卧床休息和经常监测来治疗。对于中度至重度病例，推荐住院治疗，并开具防止癫痫发作的血压药或抗惊厥药。如果病症变得危及母亲或婴儿的生命，则终止妊娠，并早产分娩婴儿。
7.根据目前的指南，先兆子痫的诊断是基于妊娠妇女妊娠第20周后新发的高血压和蛋白尿。先前血压正常的妇女，在妊娠第20周后两次至少间隔4小时均大于或等于140 mmhg收缩压或大于或等于90 mmhg舒张压的血压被视为高血压。对于妊娠期间新发高血压的妇女，可靠地检测显著的蛋白尿是最重要的，因为它区分患先兆子痫的妊娠妇女和患妊娠高血压的妊娠妇女，并且这为将来的监测和管理奠定了基础。显著的蛋白尿在国际上被定义为24小时时段内尿液排泄300毫克以上的蛋白质，并且这被包括在先兆子痫的定义中（nice（2011）nice clinical guideline 107: hypertension in pregnancy）。
8.蛋白尿的确定可通过24小时尿液收集，蛋白质/肌酐比率计算或浸渍片读数来实
现。（executive summary: hypertension in pregnancy, american college of obstetricians and gynecologist, obstet gynecol 2013;122:1122
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31）。
9.蛋白尿的确定通常利用尿液蛋白浸渍片来完成，因为该方法允许快速测量蛋白尿。然而，它常常充满不正确的结果，并且因此是确定肾功能不全的非常不准确的方法。此外，由于定性确定的易变性，不建议将此方法用于诊断用途，并且仅在无法使用其他定量方法的情况下才应使用此方法（acog task force，2013）。尤其是在患有高血压问题的妇女中，较高的不正确的尿液浸渍片结果发生率较高。令人担忧的是，高达66％的尿液浸渍片阴性的高血压妇女被发现患有显著的蛋白尿。”（north r. classification and diagnosis of preeclampsia. in preeclampsia: etiology and clinical practice, pages 250
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251）。
10.确定尿液中蛋白质的更准确方法是24小时尿液测量（通常每24小时尿液收集量大于或等于300 mg，以诊断先兆子痫）或计算蛋白质肌酐比率（通常大于或等于0.3，每次测量以mg/dl计）。但是，这些方法也具有某些缺点。例如，它们更耗时，并且在某些情况下也容易出错。bouzari等发现患有先兆子痫的患者的蛋白尿（由24小时尿液测量结果确定）与妊娠的不良结果相关。但是，它不足以成为先兆子痫的不良结果的预报因子（bouzari z, javadiankutenai m, darzi a, barat s.: clin exp obstet gynecol. 2014;41(2):163
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8）。zhang公开了这不是预测妊娠妇女中先兆子痫或hellp综合征发作的可靠生物标记物（zhang et al. prediction of adverse outcomes by common definitions of hypertension in pregnancy. obstet gynecol 2001; 97:261
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7）。同样，thangaratinam在系统评价中示出蛋白尿是先兆子痫的并发症的不良预测因子（thangaratinam et al. estimation of proteinuria as a predictor of complications of pre
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eclampsia: a systematic review. bmc medicine 2009;7:10）。
11.由于先兆子痫是围产期发病和死亡的主要原因之一，因此迫切需要生物标记物来预测该疾病。尤其是，鉴于严重的副作用和与之相关联的不良后果，对早发型先兆子痫的预测是重要的。此外，先兆子痫的预测对于预防性或治疗性干预研究的规划是决定性的（ohkuchi 2011，hypertension 58：859
‑
866）。另一方面，属于可以排除在一定时间窗口内先兆子痫的增加风险的危险组的患者将需要较少的特别护理，并且大多数情况下，可以接受不卧床治疗（门诊患者设定）。
12.多普勒超声检查已被应用于识别子宫灌注异常的患者，并已提出那些显现被多普勒超声检查识别的异常灌注的患者有出现先兆子痫、子痫和/或hellp综合征的风险（stepan 2007，hypertension，49：818
‑
824 ; stepan 2008，am j obstet gynecol 198：175.e1
‑
1）。但是，多普勒超声检查的缺点是需要非常专业的医学从业者来实施和评估结果。
13.已经提出血管生成因子及其对抗物是先兆子痫的指标。特别是，已报告了在患有先兆子痫的患者中胎盘生长因子（plgf）和可溶性fsm样酪氨酸激酶1（sflt
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1）发生了改变。sflt
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1和plgf在妊娠不同时间点的个体比率已分别与先兆子痫的风险相关（kusanovic 2009, j of maternal
‑ꢀ
fetal and neonatal medicine 22(11): 1021
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1038）。wo 2013/068475公开了一种基于sflt
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1和plgf的第一和第二比率来诊断妊娠受试者是否在短时间段内具有出现先兆子痫的风险的方法。
14.igfbp
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7（胰岛素样生长因子结合蛋白7）是一种30 kda模块化糖蛋白，已知由内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞和上皮细胞分泌（ono, y., et al., biochem biophys res comm 202 (1994) 1490
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1496）。它已被描述为各种病症的诊断或预后标记物。例如，已经将其描述为癌症的生物标记物，并且提出使用抗igfbp
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7抗体作为检测包括肿瘤血管生成在内的肿瘤疾病的诊断工具（wo 2010/043037）。wo2008/089994公开了igfbp
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7在心力衰竭评估中的用途。尿液igfbp
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7与timp
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2的组合已被证明是预测心脏手术后早期急性肾损伤（aki）以及预测肾脏恢复的灵敏且特异的生物标记物（meersch et al. plos one. 2014 mar 27; 9(3)）。ep2666872a1公开了用于肾损伤和肾衰竭的诊断和预后的各种标记物。公开的标记物之一是igfbp
‑
7。
15.wo2017/148854公开了一种用于在妊娠受试者中诊断先兆子痫或先兆子痫相关病症（诸如子痫、hellp综合征）的方法。该文件没有公开妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的评估。相反，该文件着重于识别已经出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的受试者。
16.迫切需要开发新的基于生物标记物的方法来评估出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险，并因此尽早识别风险受试者。特别地，迫切需要在受试者出现先兆子痫或先兆子痫相关病症之前识别风险受试者。早期识别将允许早期开始采取目的为应对该风险的适当患者管理措施。因此，需要一种可靠且灵敏的生物标记物来评估所述风险。
17.可以将本发明所基于的技术问题视为提供满足上述需要的手段和方法。该技术问题通过权利要求书和下文中表征的实施例来解决。
18.在本发明的研究背景下发现，对来自妊娠受试者的样本中igfbp
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7的量的测量允许快速且可靠地预测先兆子痫或先兆子痫相关病症（例如子痫，或hellp综合征）。
19.因此，本发明涉及一种用于评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的方法，所述方法包括以下步骤：（a）确定来自受试者的样本中生物标记物igfbp
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7（胰岛素样生长因子结合蛋白7）的量，和（b）将确定的生物标记物的量与参考进行比较。
20.在本发明的实施例中，通过实施进一步的步骤（c）来评估先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险，所述进一步的步骤（c）是评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。所述评估应基于在步骤（b）中实施的比较的结果。
21.本发明的方法优选是体外方法。而且，除了上面明确提到的那些步骤之外，它还可以包括其他步骤。例如，进一步的步骤可以涉及样本预处理或对该方法所获得的结果的评估。本发明的方法还可以用于监测受试者、确认受试者和对受试者进行细分类。该方法可以手动实施或通过自动化来辅助。优选地，步骤（a）、（b）和/或（c）可以全部或部分地通过自动化来辅助，例如，通过用于步骤（a）中的确定的合适的机器人和感官装备或步骤（b）中的计算机实现的计算来辅助。
22.根据本发明，应评估妊娠受试者中先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。先兆子痫或先兆子痫相关病症在本领域中是众所周知的。
23.如本文所使用的，术语“先兆子痫”是指以高血压和蛋白尿表征的医学病症。先兆子痫发生在妊娠女性受试者中，并且在这种情况下的高血压也被称为妊娠诱发的高血压。
优选地，通过两次140mmhg（收缩压）和/或90mmhg（舒张压）或更高的血压测量来识别出妊娠诱发的高血压存在于受试者中，其中所述两次测量间隔至少6小时做出。可以通过在24小时尿液样本中300 mg蛋白质或更多来识别存在蛋白尿。另外，蛋白尿可以通过蛋白质浸渍片分析（如果≥2+）（如果单次尿液样本中存在≥30mg/dl蛋白质的话）来识别，或通过在单次尿液中蛋白质/肌酐比率≥30mg/mmol蛋白质/肌酐来识别。
24.根据本发明的先兆子痫可以是轻度形式或重度形式的先兆子痫。术语“轻度先兆子痫”和“重度先兆子痫”在本领域中是众所周知的。术语“轻度先兆子痫”优选地是指两次间隔至少6小时出现蛋白尿和高血压（特别是血压≥140/ 90 mmhg的高血压），但没有证据表明妊娠第20周之前血压正常的妇女的终端器官损伤。术语“重度先兆子痫”是指具有以下症状中的至少一种的先兆子痫：两次间隔至少6小时收缩血压为160 mmhg或更高或者舒张血压为110 mmhg或更高、在24小时的收集中蛋白尿大于5 g、或在间隔至少4小时收集的2个随机尿液样本中超过3+、少尿（尤其是24小时内尿液少于400 ml）、持续性头痛、上腹痛和/或肝功能损伤、以及血小板减少。
25.在本发明的情况中实施的研究表明，既可以评估早发型先兆子痫的风险，也可以评估晚发型先兆子痫的风险。特别地，受试者患有早发型先兆子痫的风险的评估是有利的，因为与通常相对较轻的晚发型先兆子痫相比，其通常伴有更严重的副作用和不良结果。
26.因此，在实施例中，本发明的方法包括对受试者患有早发型先兆子痫的风险的评估。早发型先兆子痫发生在妊娠的大约第20周至大约第34周之间。因此，设想在妊娠的大约第20周至大约第34周之间获得样本。
27.因此，在另一个实施例中，本发明的方法包括对受试者患有晚发型先兆子痫的风险的评估。妊娠第34周后发生晚发型先兆子痫。因此，设想在妊娠的第34周后获得样本。
28.先兆子痫相关病症优选地选自子痫和hellp综合征。
29.子痫是一种威胁生命的疾病，其由出现强直性阵挛性癫痫发作或昏迷病症表征。与重度先兆子痫相关联的症状是24小时内少于500 ml的少尿、大脑或视觉障碍、肺水肿或紫绀、上腹或右上腹疼痛、肝功能损伤、血小板减少。
30.术语“hellp综合征”在本领域中是众所周知的。hellp综合征是威胁生命的产科并发症，通常被认为是先兆子痫的并发症。hellp综合征通常发生在妊娠晚期期间。hellp综合征与高风险的不良后果（诸如肾衰竭、荚膜下肝血肿、子痫复发或甚至死亡）相关联。“hellp”是该综合征的三个主要特征的缩写：溶血、肝酶升高和血小板计数低。hellp综合征可能由于患者之间症状的易变性而难以诊断（通常，患者除了一般的腹痛外没有其他症状），并且早期诊断是降低发病率的关键。如果不及时治疗，患者可能会由于肝破裂/出血或脑水肿而重病或死亡。在可能患有hellp综合征的患者中，执行一系列血液测试：全血细胞计数、凝血操作盘（coagulation panel）、肝酶、电解质和肾功能研究。通常，确定血纤蛋白降解产物（fdp）水平，该水平可能提高。乳酸脱氢酶是溶血的标记物，并且升高（> 600 u /升）。
31.根据本发明，应评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。因此，应当预测妊娠受试者出现先兆子痫或先兆子痫相关病症（即将来患有先兆子痫或先兆子痫相关病症）的风险。因此，对出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的预测不是指对患者当前患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的诊断，而是指患者将来出现先兆子痫或
先兆子痫相关病症的风险。因此，设想待测试的受试者不会患有待预测的病症，特别是在已经获得测试样本的时间点。
32.优选地，本文所使用的术语“预测风险”或“评估风险”是指评估受试者将患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的概率。特别地，预测在特定时间窗口内的风险/概率，例如。在三天、一周、两周、三周、四周或六周内。因此，应评估受试者是否有短期风险。例如，短期风险是在大约一周至大约四周的时段内出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。另外，设想短期风险是在大约一周至大约两周的时段内出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
33.在本发明的优选实施例中，预测窗口是一周的时段。因此，评估受试者是否有在一周内出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。在本发明的另一个优选实施例中，预测窗口是两周的时段。在本发明的另一个优选实施例中，预测窗口是三周的时段。在本发明的另一个优选实施例中，预测窗口是四周的时段。因此，评估受试者是否有在四周内出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。优选地，根据已经获得待测试样本的时间点来计算预测窗口。
34.如本领域技术人员将理解的，这种预测/评估通常不旨在针对100％的受试者是正确的。表达“预测风险”通常要求能够以适当且正确的方式对受试者的统计学显著部分做出预测/评估。本领域技术人员可以无需进一步费力地使用各种众所周知的统计评估工具（例如，置信区间的确定、p值确定、学生氏t
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检验、mann
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whitney检验等）来确定一部分是否在统计学上显著。详细信息在dowdy和wearden的statistics for research, john wiley & sons, new york 1983中找到。优选的置信区间为至少90％、至少95％、至少97％、至少98％或至少99％。p值优选为0.1、0.05、0.01、0.005或0.0001。优选地，本发明所设想的概率允许对于给定的同期组群或人群的受试者的至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的预测将是正确的。
35.同样，表达“预测风险”通常要求：对于受试者的某个部分（例如，同期组群研究中的同期组群），如本文其他地方所阐述的那样，在阴性预测值情况下评估是正确的。可以通过诸如本发明的方法之类的测试利用汇总统计来诊断未来某个时间窗口中出现或不出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险，汇总统计描述所述测试相对于虚假阳性/阴性和真实阳性/阴性评估的性能。
36.较高的阴性预测值表示由诊断测试做出的阴性评估具有高置信度水平。阴性预测值可以表达为真实阴性结果的数量除以真实阴性结果和虚假阴性结果的总和（即诊断测试确定的所有阴性结果）。原则上，可以根据诊断测试的灵敏度和特异性以及某个同期组群中疾病或病症的患病率来计算阴性预测值。具体而言，阴性预测值为[（特异性）（1
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患病率）]/[（特异性）（1
‑
患病率）+（1
‑
灵敏度）（患病率）]。可以从同期组群研究中获得患病率预测，而病例对照研究则可以得出测试的灵敏度和/或特异性。特别地，通过本发明的方法建立的预测的阴性预测值应为至少约80％，至少约85％，至少约90％，更优选至少约92％，并且，最优选地，至少约94％。前述的阴性预测值例如适用于一周的预测窗口。
[0037]
阳性预测值（ppv）是实际出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的呈阳性测试的受试者的百分比。阳性预测值（ppv）优选为至少约20％，更优选为至少约27％。前述的阴性预测值例如适用于四周的预测窗口。
[0038]
根据本发明，将测试受试者分配到有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的
受试者组中，或分配到没有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者组中。根据本发明提到的有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者优选表示该受试者具有升高的风险（在预测窗口内）。优选地，与同期群组的妊娠受试者中的平均风险相比，所述风险升高。因此，短语“有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险”是指妊娠受试者与没有出现先兆子痫的风险的妊娠受试者相比，在统计学上具有显著增加的可能性将来在预后时间窗口内将出现先兆子痫先兆子痫相关病症。
[0039]
如果受试者没有出现根据本发明提及的先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险，则优选地，出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险（在预测窗口内）降低。优选地，与同期群组的受试者中的平均风险相比，所述风险降低。
[0040]
如本文所提到的，“受试者”优选是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于家养动物（例如牛、绵羊、猫、狗和马）、灵长类动物（例如人类和非人类灵长类动物，诸如猴子）、兔子和啮齿动物（例如小鼠和大鼠）。优选地，所述受试者是人类受试者，即女性人类妊娠受试者。所述受试者优选在妊娠第19周之后。在实施例中，妊娠受试者在妊娠的大约第20周和大约第40周之间，特别是在妊娠的大约第24周和大约第40周之间。在另一个实施例中，妊娠受试者在妊娠的大约第20周和第34周之间，诸如在妊娠的大约第24周和第34周之间。在另一个实施例中，妊娠受试者在妊娠的大约第34周和大约第40周之间。
[0041]
在本发明的实施例中，待测试的妊娠受试者患有高血压。在这个情况中，高血压被定义为两次独立测量的血压为140 mmhg（收缩压）和/或90 mmhg（舒张压）或更高，其中所述两次测量至少间隔6小时做出。在实施例中，高血压是新发高血压。因此，设想妊娠受试者在妊娠之前应当未患有高血压。
[0042]
在本发明的实施例中，受试者显示以下症状中的一种或多种：新发的血压升高、先前存在的高血压的加重、新发的尿液中蛋白质、先前存在的蛋白尿加重、上腹痛、过度水肿/严重肿胀（脸、手、脚）、头痛、视力障碍、体重突然增加（诸如，妊娠晚期超过1kg/周）、血小板低、肝转氨酶升高、宫内生长受限（或怀疑宫内生长受限）、妊娠中期平均搏动指数> 95％情况下多普勒超声检查检测到异常子宫灌注、以及双侧子宫动脉切迹。
[0043]
此外，设想该受试者是年龄大于40岁的妊娠受试者和/或第一次妊娠中的妊娠受试者，具有先兆子痫家族史（例如，母亲或姐妹中患有先兆子痫）的妊娠受试者，在先前的妊娠中有先兆子痫先前病史的妊娠受试者，首次接触时体重指数等于或大于35 kg /m
²
的妊娠受试者，或具有多胎妊娠或先前患有血管疾病（诸如高血压或糖尿病）的妊娠受试者，例如如nice（national institute for health and care excellence, antenatal care guideline cg62, march 2008）中所述的。
[0044]
在本发明方法的另一个实施例中，待测试的受试者是表面健康的妊娠受试者。在另一个实施例中，测试受试者可以是未患有蛋白尿的妊娠受试者。在另一个实施例中，测试受试者可以是未患有高血压的妊娠受试者。对于此类受试者，本发明的方法可以用于常规筛选方法中。
[0045]
术语“样本”是指体液样本，分离细胞的样本或来自组织或器官的样本。体液样本可以通过众所周知的技术获得，并且包括如下各项的样本：血液、血浆、血清、尿液、淋巴液、痰、腹水或任何其他人体分泌物或其衍生物。优选的体液样本是尿液、血液、血清或血浆。可以通过例如活检从任何组织或器官获得组织或器官样本。可以通过诸如离心或细胞分选之
类的分离技术从体液或组织或器官获得分离细胞。例如，可以从表达或产生生物标记物的那些细胞、组织或器官获得细胞、组织或器官样本。样本可以冷冻、保鲜、固定（例如福尔马林固定）、离心和/或包埋（例如石蜡包埋）等。当然，在评估样本中标记物的量之前，细胞样本可以经受各种众所周知的收集后制备和存储技术（例如，核酸和/或蛋白质提取、固定、存储、冷冻、超滤、浓缩、蒸发、离心等）。
[0046]
此外，设想血液样本是干血斑样本。可以通过把血滴施加到吸收性滤纸上来获得干血斑样本。允许血液完全浸透纸张，并风干几个小时。可能已经通过刺血针从待测试的受试者（例如从手指）抽取了血液。
[0047]
在优选实施例中，样本是血液（即全血）、血清或血浆样本。血清是允许血液凝结后获得的全血的液体部分。为了获得血清，通过离心去除凝块并收集上清液。血浆是血液的无细胞液部分。为了获得血浆样本，将全血收集在抗凝剂处理过的试管中（例如，柠檬酸盐处理过的或edta处理过的试管中）。通过离心从样本去除细胞，并获得上清液（即血浆样本）。
[0048]
根据本发明，应确定胰岛素样生长因子结合蛋白7（＝ igfbp
‑
7）的量。优选地，确定igfbp
‑
7多肽的量。igfbp
‑
7是一种30 kda模块化糖蛋白，已知由内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞和上皮细胞分泌（ono, y., et al., biochem biophys res comm 202 (1994) 1490
‑
1496）。优选地，术语
“ꢀ
igfbp
‑
7”是指人类igfbp
‑
7。蛋白质的序列在本领域中是众所周知的，并且例如可经由uni
‑
prot（q16270，ibp7_human）或经由genbank（np_001240764.1）进行访问。生物标记物igfbp
‑
7的详细定义例如提供于wo 2008/089994中，该文献通过引用整体并入本文。igfbp
‑
7有两种异构体，即异构体1和2，它们是通过二者择一的剪接产生的。在本发明的实施例中，确定两种异构体的总量（对于序列，参见uniprot数据库条目（q16270
‑
1和q16270
‑
2））。
[0049]
如本文所使用的，术语“量”涵盖本文提及的生物标记物的绝对量、所述生物标记物的相对量或浓度以及与之相关或可从其得出的任何值或参数。这样的值或参数包括来自通过直接测量从所述肽获得的所有特定物理或化学性质的强度信号值，例如质谱或nmr谱中的强度值。此外，涵盖了通过本说明书中其他地方指定的间接测量获得的所有值或参数，例如，响应于从特异性结合的配体获得的肽或强度信号而从生物读出系统确定的响应量。要理解，还可以通过所有标准数学运算来获得与前述量或参数相关的值。
[0050]
如本文所提到的，术语“确定”生物标记物的量是指生物标记物的定量，例如采用本文其他地方所述的合适的检测方法来确定样本中生物标记物的水平。
[0051]
在实施例中，通过如下方式来确定生物标记物的量：使样本与特异性结合到生物标记物的试剂接触，从而在该试剂与所述生物标记物之间形成复合物，检测所形成的复合物的量，并由此确定所述生物标记物的量。
[0052]
可以使用本领域通常已知的方法来检测本文所提到的生物标记物。检测方法通常包括定量样本中生物标记物的量的方法（定量方法）。技术人员通常已知以下哪种方法适合定性和/或定量检测生物标记物。可以使用蛋白质印迹法（westerns）和免疫测定法（比如可商购获得的elisa、ria、基于荧光和发光的免疫测定法）方便地测定样本中的例如蛋白质。用于检测生物标记物的其他合适方法包括确定特定于肽或多肽的物理或化学性质，诸如其精确的分子量或nmr谱。所述方法包括例如生物传感器、与免疫测定法耦合的光学设备、生物芯片、分析设备（诸如质谱仪、nmr分析仪或色谱设备）。此外，各方法包括基于微型板
elisa的方法、全自动或机器人免疫测定法（例如在elecsys
tm
分析仪上可用）、cba（酶促钴结合测定法，例如在roche
‑
hitachi
tm
分析仪上可用）和乳胶凝集测定法（例如在roche
‑
hitachi
tm
分析仪上可用）。
[0053]
对于本文所提到的生物标记物蛋白质的检测，使用这种测定形式的多种免疫测定技术是可用的，参见例如美国专利号4,016,043、4,424,279和4,018,653。这些包括非竞争性类型的单点和两点或“三明治”测定法，以及传统的竞争性结合测定法。这些测定法还包括标记抗体与靶生物标记物的直接结合。三明治测定法是最有用的免疫测定法之一。
[0054]
采用电化学发光标记的方法是众所周知的。这样的方法利用特殊金属复合物通过氧化实现激发态的能力，它们从该激发态分解为基态，发出电化学发光。请参见richter, m.m., chem. rev.104（2004）3003
‑
3036进行回顾。
[0055]
在实施例中，用于确定生物标记物的量的检测抗体（或其抗原结合片段）是被钌基化（ruthenylated）或铱基化（iridinylated）的。因此，抗体（或其抗原结合片段）应包括钌标记。在实施例中，所述钌标记是联吡啶
‑
钌（ii）复合物。或抗体（或其抗原结合片段）应包括铱标记。在实施例中，所述铱标记是在wo 2012/107419中所公开的复合物。
[0056]
确定多肽（诸如igfbp
‑
7）的量可优选包括以下步骤：（a）使多肽与特异性结合所述多肽的试剂接触，（b）（可选地）去除未结合的试剂，（c）确定被结合的结合剂（即在步骤（a）中形成的试剂的复合物）的量。根据优选实施例，所述接触，可选地去除和确定的步骤可以由分析仪单元执行。根据一些实施例，所述步骤可以由所述系统的单个分析仪单元或彼此可操作地通信的多于一个分析仪单元来执行。例如，根据特定实施例，本文公开的所述系统可以包括：第一分析仪单元，用于执行接触和可选地移除的所述步骤；以及第二分析仪单元，通过运输单元（例如，机器人手臂）可操作地连接到所述第一分析仪单元，第二分析仪单元执行确定的所述步骤。
[0057]
特异性地结合生物标记物的试剂（在本文中也称为“结合剂”）可以与标记共价或非共价耦合，以允许检测和测量被结合的试剂。标记可以通过直接或间接方法来完成。直接标记涉及将标记直接（共价或非共价地）耦合至结合剂。间接标记涉及第二结合剂与第一结合剂的结合（共价或非共价地）。第二结合剂应特异性地结合到第一结合剂。所述第二结合剂可以与合适的标记耦合和/或是与第二结合剂结合的第三结合剂的靶（受体）。合适的第二和更高阶结合剂可以包括抗体、第二抗体和众所周知的结合系统，诸如链霉亲和素
‑
生物素系统（vector laboratories公司）。结合剂或底物也可以用本领域已知的一种或多种标签进行“标记”。这样的标签然后可以是更高阶结合剂的靶。合适的标签包括生物素、地高辛素、his标签、谷胱甘肽
‑
s
‑
转移酶、flag、gfp、myc标签、a型流感病毒血凝素（ha）、麦芽糖结合蛋白等。在肽或多肽的情况下，所述标签优选处于n端和/或c端。合适的标记是可通过合适的检测方法检测到的任何标记。典型的标记包括金颗粒、乳胶珠、9,10
‑
二氢化吖啶酯、鲁米诺、钌复合物、铱复合物、酶活性标记、放射性标记、磁性标记（“例如磁性珠”，包括顺磁性和超顺磁性标记）和荧光标记。酶活性标记包括例如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β
‑
半乳糖苷酶、萤光素酶及其衍生物。用于检测的合适底物包括二氨基联苯胺（dab）、3,3'
‑
5,5'
‑
四甲基联苯胺、nbt
‑
bcip（4
‑
硝基蓝四唑氯化物和5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基磷酸盐，可从roche diagnostics作为现成的储备溶液获得）、cdp
‑
star
™
（amersham bio
‑
sciences）、ecf
™
（amersham biosciences）。合适的酶
‑
底物组合可以产生有色反应产物、荧光或化学发光，
这可以根据本领域已知的方法（例如，使用光敏膜或合适的相机系统）来确定。至于确定酶促反应，以上给出的准则类似地适用。典型的荧光标记包括荧光蛋白质（诸如gfp及其衍生物）、cy3、cy5、德克萨斯红、荧光素和alexa染料（例如alexa 568）。可以例如从molecular probes（俄勒冈）获得其他荧光标记。也设想使用量子点作为荧光标记。放射性标记可以通过任何已知且适当的方法（例如光敏膜或磷光体成像仪）来检测。
[0058]
还可以优选地如下那样确定多肽的量：（a）使包括如本文其它地方所述的多肽的结合剂的固体支持物与包括所述肽或多肽的样本接触，和（b）确定与支持物结合的肽或多肽的量。用于制造支持物的材料在本领域中是众所周知的，并且尤其包括可商购的柱材料、聚苯乙烯珠、乳胶珠、磁性珠、胶体金属颗粒、玻璃和/或硅片和表面、硝化纤维素条、膜、片、duracytes、反应盘的孔和壁、塑料管等。
[0059]
在另一方面，在测量形成的复合物的量之前，从在结合剂和一种标记物之间形成的复合物中去除所述样本。因此，一方面，结合剂可以固定在固体支持物上。另一方面，可通过施加洗涤溶液从固体支持物上形成的复合物中去除所述样本。
[0060]“三明治测定法”是涵盖三明治测定技术的多种变体的最有用和最常用的测定法之一。简而言之，在典型的测定法中，将未标记（捕获）的结合剂固定或可以固定在固体基物上，并使待测试的样本与捕获结合剂接触。在适当的温育时段后，在足以允许形成结合剂
‑
生物标记物复合物的一段时间内，然后添加并温育第二（检测）结合剂，该第二结合剂被标记有能够产生可检测信号的报告分子，从而留出足够的时间用于形成结合剂
‑
生物标记物
‑
标记的结合剂的另一种复合物。可选地，任何未反应的材料可以被洗掉。通过观察由结合至检测结合剂的报告分子产生的信号来确定生物标记物的存在。通过对可见信号的简单观察，结果可以是定性的，或者可以通过与包含已知量的生物标记物的对照样本进行比较来对结果进行定量。
[0061]
典型的三明治测定法的温育步骤可以根据需要和情况而变化。此类变化包括例如同时温育，其中将两种或更多种结合剂和生物标记物共同温育。例如，将要分析的样本和经标记的结合剂二者同时添加到固定的捕获结合剂。也可以首先温育待分析的样本和经标记的结合剂，并且然后添加结合至固相或能够结合至固相的抗体。
[0062]
特异性结合剂和生物标记物之间形成的复合物应与样本中存在的生物标记物的量成比例。将理解的是，要应用的结合剂的特异性和/或灵敏度定义了样本中所包括的至少一种能够被特异性结合的标记物的比例程度。在本文的其他地方也找到关于可以如何实施测量的进一步细节。形成的复合物的量应被转化为生物标记物的量，以反映样本中确实存在的量。
[0063]
术语“结合剂”、“特异性结合剂”、“分析物特异性结合剂”、“检测试剂”和“与生物标记物特异性结合的试剂”在本文中可互换地使用。优选地，其涉及包括特异性结合对应的生物标记物的结合部分的试剂。“结合剂”或“试剂”的示例是核酸探针、核酸引物、dna分子、rna分子、适体、抗体、抗体片段、肽、肽核酸（pna）或化合物。优选的试剂是抗体或其抗原结合片段，其特异性地结合到待确定的生物标记物。本文中的术语“抗体”被最广义地使用，并且涵盖各种抗体结构，包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体（例如，双特异性抗体）和抗体片段，只要它们表现出所期望的抗原
‑
结合活性（即其抗原结合片段）。优选地，抗体是多克隆抗体。更优选地，抗体是单克隆抗体。
[0064]
术语“特异性结合”或“特异性地结合”是指结合反应，其中结合对分子在它们不显著结合到其他分子的情况下表现出彼此结合。当将蛋白质或肽称为生物标记物时，术语“特异性结合”或“特异性地结合”是指结合反应，其中结合剂以至少10
‑7m的亲和力结合到对应的生物标记物。术语“特异性结合”或“特异性地结合”优选是指针对其靶分子的亲和力至少为10
‑8m，或者甚至更优选为至少10
‑9m。术语“特异性的”或“特异性地”用于表示样本中存在的其他分子不显著结合到对靶分子具有特异性的结合剂。
[0065]
如本文所使用的，术语“比较”是指将来自受试者的样本中的生物标记物的量与本说明书中其他地方指定的生物标记物的参考量进行比较。应当理解，如本文所使用的，比较通常是指对应参数或值的比较，例如，将绝对量与绝对参考量进行比较，而将浓度与参考浓度进行比较，或将从样本中的生物标记物获得的强度信号与从参考样本中获得的相同类型的强度信号进行比较。可以手动或计算机辅助实施所述比较。因此，可以由计算设备实施所述比较。可以例如将在来自受试者的样本中确定或检测到的生物标记物的量的值与参考量相互比较，并且可以通过计算机程序执行比较的算法来自动实施所述比较。实施所述评估的计算机程序将以合适的输出格式提供期望的评估。对于计算机辅助的比较，可以通过计算机程序将所确定的量的值与存储在数据库中的对应于合适参考的值进行比较。该计算机程序可以进一步评估比较的结果，即以合适的输出格式自动提供期望的评估。对于计算机辅助的比较，可以通过计算机程序将所确定的量的值与存储在数据库中的对应于合适参考的值进行比较。该计算机程序可以进一步评估所述比较的结果，即以合适的输出格式自动提供期望的评估。
[0066]
根据本发明，应当将生物标记物igfbp
‑
7的量与参考进行比较。参考优选为参考量。如本文所使用的，术语“参考量”是指允许将受试者分配至以下各项之一中的量：（i）患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的受试者组或（ii）未患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的受试者组。可以与测试样本一起（即同时）或随后从待分析的参考样本确定合适的参考量。
[0067]
原则上，通过应用标准的统计方法，基于给定生物标记物的平均值或均值，可以为上面指定的同期群组的受试者计算参考量。特别地，诸如旨在诊断或不诊断事件的方法之类的测试的准确性最好通过其接收者操作特性（roc）来描述（尤其参见zweig 1993, clin. chem. 39:561
‑
577）。roc图是在观察到的整个数据范围内通过不断改变决策阈值而得到的所有灵敏度与特异性对的绘图。预后方法的临床表现取决于其准确性，即其把受试者正确分配到特定预后的能力。roc绘图通过绘制适合于进行区分的整个阈值范围的灵敏度与1
‑
特异性来表示两个分布之间的重叠。在y轴上是灵敏度或真实阳性分数，它被定义为真实阳性测试结果的数量与真实阳性测试结果的数量和虚假阴性测试结果的数量的乘积的比率。在疾病或病症存在的情况下，这也被称为阳性。它仅从受影响的子组计算得出。在x轴上是虚假阳性分数或1
‑
特异性，其被定义为虚假阳性结果的数量与真实阴性结果的数量和虚假阳性结果的数量的乘积的比率。它是特异性的指标，并且完全从未受影响的子组计算得出。由于通过使用来自两个不同子组的测试结果完全分别地计算了真实和虚假阳性分数，因此roc绘图与该事件在该同期群组中的患病率无关。roc绘图上的每个点代表与特定决策阈值相对应的灵敏度/1
‑
特异性对。具有完美区分（两个结果分布中没有重叠）的测试的roc绘图穿过左上角，其中真实阳性分数是1.0或100％（完美灵敏度），而虚假阳性分数为0（完美特
异性）。没有区分的测试（针对两组的结果分布相同）的理论绘图是从左下角到右上角的45
°
对角线。大多数绘图落在这两个极端之间。如果roc绘图完全落在45
°
对角线以下，则这通过将针对“阳性”的准则从“大于”翻转为“小于”或者反之来轻松解决。定性地，绘图越靠近左上角，则测试的整体准确性越高。根据期望的置信区间，可以从roc曲线得出阈值，从而允许分别利用灵敏度和特异性的适当平衡来诊断给定事件。因此，可以生成用于本发明的前述方法的参考，即阈值，该阈值允许在同期群组的妊娠受试者之中区分有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者或没有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者，优选地，这通过针对如上所述的所述同期组群建立roc并从中得出阈值量来实现。根据诊断方法所期望的灵敏度和特异性，roc绘图允许得出合适的阈值。将理解的是，期望最佳的灵敏度以去除有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者（即，排除），而设想最佳特异性用于受试者被评估为有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险（即，纳入）。
[0068]
在某些实施例中，术语“参考量”在本文中是指预定值。所述预定值应允许区分有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者和没有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者。
[0069]
在本发明的实施例中，参考量应允许排除例如在四周的预测窗口内患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。低于该参考量的igfbp
‑
7的量通常指示没有例如在四周的预测窗口内患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者。
[0070]
在本发明的实施例中，参考量应允许纳入例如在一周的预测窗口内患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。高于该参考量的igfbp
‑
7的量通常指示有在一周的预测窗口内患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者。
[0071]
以下内容作为诊断算法适用。
[0072]
优选地，测试受试者的样本中igfbp
‑
7的量等于或高于参考量指示该受试者有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。还优选地，样本中igfbp
‑
7的量低于参考量指示受试者没有患有先兆子痫和/或先兆子痫相关病症的风险。
[0073]
在实施例中，参考量从已知没有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的妊娠受试者或一组妊娠受试者得出。优选地，参考量从与待测试受试者处于相同妊娠阶段（例如，三个月、月或周）的妊娠受试者或一组妊娠受试者得出。优选地，测试受试者样本中生物标记物igfbp
‑
7的量与参考量相比降低或与参考量相同指示受试者没有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0074]
在实施例中，参考量从已知有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的妊娠受试者或一组妊娠受试者得出。优选地，参考量从与待测试受试者处于相同妊娠阶段（例如，三个月、月或周）的妊娠受试者或一组妊娠受试者得出。优选地，测试受试者样本中生物标记物igfbp
‑
7的量与参考量相比增加或与参考量相同指示受试者有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0075]
如本文所使用的，“参考”通常是指代表如下内容的参考量或值：用于以至少约80％，至少约85％，至少约90％，更优选地至少约92％，或最优选地至少约94％的阴性预测值做出预测的截止值。在实施例中，所述预测是在一周的窗口时段内做出的。
[0076]
另外，本文所使用的“参考”可以指代代表如下内容的参考量或值：用于以至少约20％，更优选地至少约27％或最优选地至少约27％的阳性预测值做出预测的截止值。在实
施例中，所述预测是在四周的窗口时段内做出的。
[0077]
在实施例中，参考量在约90至110ng/ml的范围内，特别是在90至105ng/ml内。
[0078]
在实施例中，参考量是约100至105ng/ml的量，诸如102至105ng/ml的量，例如 104 ng/ml。这样的量将例如允许纳入所述风险。因此，高于该参考量的igfbp
‑
7的量指示受试者有例如在一周的时段内患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0079]
在另一个实施例中，参考量是约95至99.9ng/ml的量，诸如96至97ng/ml的量，例如97 ng/ml。这样的量将例如允许排除所述风险。因此，低于该参考量的igfbp
‑
7的量指示受试者没有例如在四周的时段内患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0080]
因此，还设想使用允许纳入所述风险的参考量和/或用于排除风险的参考量。
[0081]
在本发明的方法的另一优选实施例中，所述方法还包括基于由本发明的方法做出的评估来推荐或发起患者管理措施。
[0082]
如本文中所使用的，术语“推荐”是指针对患者管理措施或其组合建立可以应用于受试者或不可以应用于受试者的建议。然而，在一个特定实施例中，应理解，该术语不包括应用实际管理措施。如本文所使用的，患者管理措施是指可应用于患有先兆子痫的受试者以便治愈、避免或处置健康状况的所有措施。例如，患者管理措施包括监测的程度（例如，密切、定期或弱监测）、住院或不卧床维护、应用药物治疗或不进行药物治疗或生活方式推荐。优选地，如果受试者被评估为有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险，则所述患者管理措施选自以下措施的组：密切监测、住院、降血压剂的施用和生活方式推荐。优选地，如果所述受试者被评估为没有出现先兆子痫的风险，则所述患者管理措施是不卧床监测。
[0083]
在实施例中，降血压剂选自由甲基多巴、拉贝洛尔和硝苯地平组成的组。
[0084]
而且，本发明设想了在妊娠受试者的样本中生物标记物igfbp
‑
7或至少一种与igfbp
‑
7特异性结合的检测试剂在体外的使用，用于评估所述受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。术语“检测试剂”已经在本文其他地方定义。在实施例中，所述检测试剂是与igfbp
‑
7特异性结合的抗体或其抗原结合片段。
[0085]
上文给出的定义和解释加以必要的变更适用于本发明的以下实施例。
[0086]
本发明还涉及一种用于区分有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的妊娠受试者和没有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的妊娠受试者的方法，所述方法包括以下步骤（a）确定来自受试者的样本中生物标记物igfbp
‑
7（胰岛素样生长因子结合蛋白7）的量，和（b）将确定的生物标记物的量与参考进行比较。
[0087]
前述方法可以进一步包括步骤c）：基于比较步骤b）的结果，区分有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的妊娠受试者和没有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的妊娠受试者。
[0088]
同样，本发明设想了在妊娠受试者的样本中生物标记物igfbp
‑
7或至少一种与igfbp
‑
7特异性结合的检测试剂在体外的使用，用于区分有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的妊娠受试者和没有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的妊娠受试者。
[0089]
本发明还涉及一种用于评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的计算机实现的方法，所述方法包括：
（a）在处理单元处接收在来自妊娠受试者的样本中确定的igfbp
‑
7的量的值，（b）由所述处理单元将在步骤（a）中接收到的值与针对igfbp
‑
7的参考进行比较，以及（c）评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0090]
上述方法是计算机实现的方法。优选地，所述计算机实现的方法的所有步骤由计算机（或计算机网络）的一个或多个处理单元执行。因此，步骤（c）中的评估由处理单元实施。优选地，所述评估基于步骤（b）的结果。
[0091]
如本文其他地方所述的，步骤（a）中接收到的值应从对来自妊娠受试者的样本中igfbp
‑
7的量的确定中得出。优选地，该值是针对igfbp
‑
7浓度的值。该值通常通过将该值上载或发送到处理单元而将由处理单元接收。替代地，通过经由用户界面输入该值，处理单元可以接收该值。
[0092]
在前述方法的实施例中，步骤（b）中提到的所述参考是从存储器建立的。优选地，从存储器建立针对参考的值。
[0093]
在本发明的上述计算机实现的方法的实施例中，步骤c）中做出的评估的结果经由被配置为呈现结果的显示器提供。
[0094]
在本发明的上述计算机实现的方法的实施例中，该方法可以包括进一步的步骤：将关于在步骤c）中做出的评估的信息传输到个人的电子病历中。
[0095]
本发明还涉及计算机程序，该计算机程序包括计算机可执行指令，该计算机可执行指令用于当该程序在计算机或计算机网络上执行时执行根据本发明的用于评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的计算机实现的方法的步骤。通常，计算机程序具体地可以包含用于执行本文所公开的方法的步骤的计算机可执行指令。具体地，计算机程序可以存储在计算机可读数据载体上。
[0096]
本发明还设想了一种帮助评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的方法，所述方法包括以下步骤：（a）接收从所述妊娠受试者获得的样本，（b）确定所述样本中生物标记物igfbp
‑
7的量，和（c）向医师提供关于生物标记物igfbp
‑
7的确定的量的值的信息，从而帮助评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0097]
医师应是请求确定用于风险的预测的生物标记物igfbp
‑
7的医师，即医师是主治医师。所述医师应治疗妊娠受试者。前述方法应帮助主治医师评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0098]
在前述方法的实施例中，接收样本的步骤a）不包括从受试者抽取样本。相反，提供已经从受试者获得的样本（例如在主治医师的监督下）。例如，可以通过将样本递送至实验室来提供样本，该实验室实施所述样本中生物标记物igfbp
‑
7的量的确定。
[0099]
在确定所述量之后，将关于所确定的量的值的信息提供给医师。另外，可以提供关于参考量的值的信息。所提供的信息可以进一步包含妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的指示。
[0100]
本发明还涉及一种被适配为评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的设备，所述设备包括：
（a）分析单元，包括与生物标记物igfbp
‑
7特异性结合的至少一种检测试剂，所述单元被适配为确定妊娠受试者的样本中所述生物标记物的量；和（b）包括数据处理器的评估单元，所述评估单元已经实现了用于将所述量与参考进行比较的算法，从而评估妊娠受试者是否有出现先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0101]
本发明的方法可以通过前述设备来实现。因此，该设备应被适配为执行本发明的方法。如本文所使用的设备应至少包括前述单元。设备的各个单元彼此可操作地链接。如何以操作方式链接这些单元将取决于设备中包括的单元的类型。例如，在分析单元中应用了用于自动定量测量igfbp
‑
7的装置的情况下，可以通过评估单元（例如通过在作为数据处理器的计算机上运行的计算机程序）来处理由所述自动操作单元获得的数据，以促进诊断。在实施例中，数据处理器执行生物标记物的量与参考的比较。
[0102]
优选地，在这种情况下，这些单元包括在单个设备中。然而，分析单元和评估单元也可以在物理上分开。在这种情况下，可经由在单元之间允许数据传输的有线和无线连接来实现可操作的链接。无线连接可以使用无线局域网（wlan）或互联网。可以通过单元之间的光缆和非光缆连接来实现有线连接。用于有线连接的电缆优选地适合于高吞吐量数据传输。
[0103]
用于确定igfbp
‑
7的优选分析单元包括如本文中其他地方所述的特异性识别igfbp
‑
7的试剂，诸如抗体（或其抗原结合片段）以及使所述检测试剂与待测试样本接触的区域。可以将试剂固定在用于接触的区域上，或者可以在加载样本后将试剂施加到所述区域。优选地，分析单元应被适配为定量确定所述试剂和igfbp
‑
7的复合物的量。
[0104]
在本发明的设备的优选实施例中，所述存储的参考是预定值（如本文中其他地方所述）。优选地，生物标记物igfbp
‑
7的量高于参考量指示受试者有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。优选地，生物标记物igfbp
‑
7的量低于参考量指示受试者没有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险。
[0105]
在本发明的设备的另一优选实施例中，所述存储的参考是从已知没有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者或一组受试者得出的参考量，或从已知有患有先兆子痫或先兆子痫相关病症的风险的受试者或一组受试者得出的参考量。
[0106]
本说明书中引用的所有参考文献其全部公开内容和本说明书中具体提及的公开内容通过引用并入本文。
[0107]
附图示出：图1：由对照组（无pe =无先兆子痫；n = 354）和一周内pe（先兆子痫；n = 27）诊断组划分的妊娠妇女体内igfbp
‑
7水平[ng/ml]的箱线图。每个箱的底部和顶部边缘分别表示第一和第三四分位数，箱内的带表示中位数值，触须表示四分位数间距的1.5倍的值。与一周内未诊断为先兆子痫的妇女（无pe =对照组）相比，一周内诊断为先兆子痫的妊娠妇女（pe）体内血清igfbp
‑
7的均值增加。先兆子痫的诊断定义为妊娠第20周后新发高血压和蛋白尿。
[0108]
图2：由对照组（无pe =无先兆子痫；n = 328）和四周内pe（先兆子痫；n = 53）诊断组划分的妊娠妇女体内igfbp
‑
7水平[ng/ml]的箱线图。每个箱的底部和顶部边缘分别表示第一和第三四分位数，箱内的带表示中位数值，触须表示四分位数间距的1.5倍的值。与在四周内无新发先兆子痫的妇女（无pe =对照组）相比，四周内新发先兆子痫的妊娠妇女（pe）
体内血清igfbp
‑
7的均值增加。
[0109]
图3：由妊娠直到分娩期间（整体诊断）对照组（无pe =无先兆子痫；n = 305）和pe（先兆子痫；n = 76）诊断划分的妊娠妇女体内igfbp
‑
7水平[ng/ml]的箱线图。每个箱的底部和顶部边缘分别表示第一和第三四分位数，箱内的带表示中位数值，触须表示四分位数间距的1.5倍的值。与在妊娠期间未诊断为先兆子痫的妇女（无pe =对照组）相比，在妊娠期间诊断为先兆子痫的妊娠妇女（pe）体内血清igfbp
‑
7的均值增加。
[0110]
图4：igfbp
‑
7的roc（接收者操作员特性，receiver operator characteristic）曲线，用于预测一周内的先兆子痫。血清igfbp
‑
7的roc曲线用于区分在一周内出现先兆子痫的妊娠妇女和在一周内未出现先兆子痫的妊娠妇女，该roc曲线导致曲线下面积（auc）为77.8％（95％置信区间为69.1
‑
86.5）。
[0111]
图5：igfbp
‑
7的roc（接收者操作员特性）曲线，用于预测四周内的先兆子痫。血清igfbp
‑
7的roc曲线用于区分四周内出现先兆子痫的妊娠妇女和四周内未出现先兆子痫的妊娠妇女，该roc曲线示出曲线下面积（auc）为78.7％（95％置信区间为72.6
‑
84.8）。
[0112]
示例将通过以下示例仅说明本发明。无论如何，不应以限制本发明范围的方式解释所述示例。
[0113]
示例1：通过确定母体血清或血浆中的igfbp
‑
7水平来预测妊娠妇女在一周内的先兆子痫已经开发了elecsys igfbp
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7免疫测定法，用于在cobas
®
平台（roche diagnostics）上对血清或血浆中的分析物igfbp
‑
7进行全自动定量。
[0114]
图1显示了由对照组（无pe =无先兆子痫；n = 354）和一周内pe（先兆子痫；n = 27）诊断组划分的妊娠妇女体内igfbp
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7水平[ng/ml]的箱线图。箱线图示出，与一周内未诊断为先兆子痫的妇女（无pe =对照组；平均igfbp
‑
7 = 95.24 ng/ml）相比，一周内诊断为先兆子痫的妊娠妇女（pe；平均igfbp
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7 = 110.90 ng/ml）体内血清igfbp
‑
7的均值增加。先兆子痫的诊断定义为妊娠第20周后新发高血压和蛋白尿。
[0115]
表1：由一周内对照组（无pe）和先兆子痫（pe）划分的母体血清igfbp
‑
7水平[ng/ml]。 最小qu.
‑
05qu.
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25中位数qu.
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75qu.
‑
95最大平均sdiqr总数n1周内无pe（n=354）44.7373.5383.7792.66102.01122.88269.7995.2421.2218.243541周内pe(n=27)77.5589.3699.51107.81120.66143.61174.22110.9019.1721.1527
[0116]
图4显示了igfbp
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7的roc（接收者操作员特性）曲线，用于预测一周内的先兆子痫。血清igfbp
‑
7的roc曲线用于区分在一周内出现先兆子痫的妊娠妇女和在一周内未出现先兆子痫的妊娠妇女，该roc曲线导致曲线下面积（auc）为77.8％（95％置信区间为69.1
‑
86.5）。
[0117]
表2：roc曲线/曲线下面积（auc）汇总表，用于预测一周内的先兆子痫。 auc下95%ci上95%ci一周内pe的预测77.8%69.1%86.5%
[0118]
表3示出使用igfbp
‑
7截止值104.1 ng/ml（在特异性至少80％情况下的最大灵敏度）用于排除一周内先兆子痫的阴性预测值（npv）为96.6％（95％ci 93.8
‑
98.4），其中灵敏度为63.0％并且特异性为80.2％/ml。
[0119]
表3：应用igfbp
‑
7截止值104.1 ng/ml，用于预测一周内先兆子痫的母体血清igfbp
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7的预测性能的汇总表。 估计值95%ci计数npv96.6%93.8;98.4284/294ppv19.5%11.8;29.417/87灵敏度63.0%42.4;80.617/27特异性80.2%75.7;84.2284/354
[0120]
示例2：通过确定母体血清或血浆中的igfbp
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7水平来预测四周内妊娠妇女的先兆子痫图2显示了由对照组（无pe =无先兆子痫；n = 328）和四周内pe（先兆子痫；n = 53）诊断组划分的妊娠妇女体内igfbp
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7水平[ng/ml]的箱线图。箱线图示出，与在一周内未诊断为先兆子痫的妇女（无pe =对照组；平均igfbp
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7 = 94.34 ng/ml）相比，在一周内诊断为先兆子痫的妊娠妇女（pe；平均igfbp
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7 = 108.75 ng/ml）体内血清igfbp
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7的均值增加。先兆子痫的诊断定义为妊娠第20周后新发高血压和蛋白尿。
[0121]
表4：由四周内对照组（无pe）和先兆子痫（pe）划分的母体血清igfbp
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7水平[ng/ml]。 最小qu.
‑
05qu.
‑
25中位数qu.
‑
75qu.
‑
95最大平均sdiqr总数n4周内无pe(n=328)44.7372.2283.5091.84100.33119.86269.7994.3421.5116.833284周内pe(n=53)77.5586.5098.71106.94120.34132.76174.22108.7516.4021.6353
[0122]
图5显示了igfbp
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7的roc（接收者操作员特性）曲线，用于预测四周内的先兆子痫。血清igfbp
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7的roc曲线用于区分四周内出现先兆子痫的妊娠妇女和四周内未出现先兆子痫的妊娠妇女，该roc曲线导致曲线下面积（auc）为78.7％（95％置信区间为72.6
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84.8）。
[0123]
表5：roc曲线/曲线下面积（auc）汇总表，用于预测四周内的先兆子痫。 auc下95%ci上95%ci四周内pe的预测78.7%72.6%84.8%
[0124]
表6示出使用igfbp
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7截止值97.6ng/ml（在灵敏度至少75％情况下的最大特异性）用于排除四周内先兆子痫的阴性预测值（npv）为94.4％（95％ci 90.7
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97.0），其中灵敏度为75.5％并且特异性为67.4％/ml。
[0125]
表6：应用igfbp
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7截止值97.6 ng/ml，用于预测四周内先兆子痫的母体血清igfbp
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7的预测性能的汇总表。 估计值95%ci计数npv94.4%90.7;97.0221/234ppv27.2%20.2;35.240/147灵敏度75.5%61.7;86.240/53特异性67.4%62.0;72.4221/328