载片室的制作方法

本发明涉及载片室（slidechamber），即，提供附接到显微镜检验载片以用于分析生物标本的池（well）的装置。

背景技术：

在免疫荧光分析中，结合到一种或多种抗原识别部分（比如抗体）的荧光染料用于靶细胞的特异性检测和隔离。为此，已开发了大量抗体、荧光染料、流式细胞仪、流式分选仪和荧光显微镜。

一种免疫荧光分析技术利用对荧光信号的相继消除和对同一个生物标本的重新染色，因此允许检测生物标本上的多个靶（抗原），从而导致与使用同时标记和检测的标准程序相比高得多的复用（multiplexing）潜力。例如，us7741045b2、ep0810428b1或de10143757公开了通过结合的荧光部分的光或化学破坏来消除荧光信号。

染色和脱色过程要求装置以如下的方式来保持或支撑生物标本：光学成像是可能的，并且流体试剂可被引入到生物标本中或被抽出。例如，wo2018001767a1公开了一种多级一次性筒，其被构造成在透明支撑件上接受生物样品并且设置有多个流体池或贮藏部以保持多种流体试剂。

另一方面，针对生物标本的大多数染色实验（比如病理学检查）是在数十年来已知的标准显微镜检验载片上执行的。因此，已开发了包括用于流体试剂的池或贮藏部的许多装置，这些池或贮藏部附接到标准显微镜检验载片。例如，在ep0014007a1、ep0210071b1、ep1222462b1、gb2127577a、us3883398和de2157150中公开了所谓的“带室的载片”。本文中所公开的装置包括塑料结构，该塑料结构提供通过机械器件（比如夹子或夹具）胶合抑或附接到显微镜检验载片的贮藏部或池。

然而，已知的带室的载片遭受泄漏和/或在仅与样品一起使用之后不能拆开以存储显微镜检验载片。因此，需要带室的载片，其能够容易地组装/拆开而没有泄漏的危险。

技术实现要素：

本发明的目的是一种载片室，其包括顶部构件（10）、流体密封件（20）、透明封闭构件（30）和基部构件（40），其中，顶部构件（10）设置有至少一个（1）检查室（11）和多个开口（12），所述多个开口定位于检查室（11）外部的盖构件的两侧处；并且

基部构件（40）设置有与顶部构件的开口（12）互补的互连器件（41），其中，

基部构件（40）的互连器件（41）和顶部构件（10）的开口（12）被构造成通过侧向移动而彼此机械地互锁，由此使顶部构件（10）压靠透明封闭构件（30），优选地以不透水的方式。

本发明的另外的目的是一种用于在如权利要求中所限定的载片室中准备至少一种生物组织以进行光学检查的过程，其特征在于：将所述至少一种生物组织放置在透明封闭构件（30）上；利用交错的流体密封件（20）将顶部构件（10）和透明封闭构件（30）进行组合；附接基部构件（40），使得基部构件（40）的互连器件（41）被插入到顶部构件（10）的开口（12）中；以及通过使顶部构件（10）优选地以不透水的方式贴靠透明封闭构件（30）侧向移动来封闭载片室。

附图说明

参考以下附图描述各种示例性细节，其中：

图1是载片室的分解透视图；

图2是已组装的载片室的侧视图；

图3至图8示出了载片室的封闭机构，即，互连器件（41）和开口（12）如何通过使基部构件（40）贴靠顶部构件（10）侧向移动而通过器件（42a）和（42b）而彼此机械地互锁。

应理解，附图不一定按比例绘制，并且相似的附图标记可指代相似的特征。

具体实施方式

如本文中所公开的载片室尤其对在湿润条件下（即，在流体的存在下）光学检查位于一个或多个检查室（11）内部的至少一种生物组织有用。术语“光学检查”是指在生物学或医学中已知的涉及生物样品和包含至少一种反应物的流体的任何检查方法。该术语包括可见光显微镜检查、荧光显微镜检查以及用或不用抗体结合染料的染色。由于根据本发明的载片室可包括一个（1）或多个（比如2个、4个或甚至8个）检查室并且流体能够容易地被引入和从其去除，因此本发明的载片室能够在多重染色和脱色过程中使用，例如，如在us7741045b2、ep0810428b1、de10143757、ep3037821a1、ep2725359b1或wo2017144338a1中所公开的。应注意，术语“样品”、“生物组织”或“生物样品”在下文中作为同义词使用。

在执行检查之后，本发明的载片室可被拆开，使得位于透明封闭构件（30）上的样品能够被取回并且可选地存储以供进一步检查。因此，互连器件（41）和开口（12）被构造成通过使基部构件（40）贴靠顶部构件（10）侧向移动而彼此机械地脱开。

对于光学检查被流体覆盖或至少润湿的样品而言，重要的是以不透水的方式组装载片室的各部分（构件）。这要求在将顶部构件（10）和透明封闭构件（30）进行组合的流体密封件（20）上有足够的压力。

为此，优选地，基部构件（40）的互连器件（41）和顶部构件（10）的开口（12）被构造为卡口式接头。如图3至图8中所示，基部构件（40）的互连器件（41）和顶部构件（10）的开口（12）设置有被构造成彼此机械地互连的器件。此类器件能够是例如一个或多个凹口以及对应的鼻部（42a）和（42b）或类似的沟槽与弹簧设计。

优选地，基部构件（40）的互连器件（41）和开口（12）被构造成在封闭过程期间（即，在基部构件（40）贴靠顶部构件（10）侧向移动期间）在基部构件（40）和顶部构件（10）之间产生增加的压力（力）。

在第一变型中，通过向基部构件（40）的互连器件（41）和开口（12）提供倾斜形状，来实现在基部构件（40）和顶部构件（10）之间的增加的压力（力），如图3中所示。在另一个变型中，基部构件（40）的互连器件（41）抑或开口（12）设置有倾斜形状，如图7中所示。

在本发明的另外的实施例中，通过流体密封件（20）来提供基部构件（40）和顶部构件（10）之间的增加的压力（力），该流体密封件在封闭过程期间（即，在基部构件（40）贴靠顶部构件（10）侧向移动期间）被轻微压缩。在该实施例中，没有必要向基部构件（40）的互连器件（41）或开口（12）提供倾斜形状。该实施例在图8中示出。

在本发明的另外的实施例中，顶部构件（10）设置有用于流体密封件（20）的凹部。可仅在检查室的外周边周围或外周边处提供用于流体密封件（20）的凹部。在其变型中，如果使用多个检查室，则可在每个检查室的位置周围或位置处提供凹部和流体密封件（20）。当然，流体密封件（20）的形状决定了凹部的形状，并且优选地，流体密封件（20）密封住每个检查室，如例如图1中所示，并且凹部具有与密封件相同的形状。

流体密封件（20）和顶部构件（10）可设置有一个或多个安装器件，比如如图1中所示的突起（22）和凹部/通孔（13）。流体密封件（20）可由本领域已知的任何橡胶材料制造，比如硅橡胶。

在最佳情况下，将生物组织放置在一个检查室（即，检查室的区域）内，并且密封件大于样品。然而，可能发生的是，生物组织被放置在至少两个检查室内，即，要么由于样品的不良定位，要么如果样品对于一个检查室而言太大。在这种情况下，密封件仍应防止流体从一个检查室泄漏到另一个检查室和/或从检查室泄漏出来。换句话说，流体密封件不应太硬或太软。用于流体密封件（20）的优选材料具有20至50的肖氏a硬度。

为了透明封闭构件（30）（即，样品）的贴靠检查室的容易定位，顶部构件（10）优选地设置有用于保持透明封闭构件（30）的器件，如图1中由（14）所示。保持器可以是具有与透明封闭构件（30）的厚度至少相同的高度的壁或脊部，并且可被提供在顶部构件的所有边缘处。在优选的变型中，用于保持透明封闭构件（30）的器件被构造成允许透明封闭构件（30）在最终组装载片室之前贴靠顶部构件（10）移动。例如，如果透明封闭构件（30）是标准的显微镜载片玻璃，则用于保持透明封闭构件（30）的器件被构造成允许显微镜载片玻璃沿纵向方向侧向移动+-15mm。再次，此类移动或位置调整仅在组装载片室之前才是可能的，而当互连器件（41）和开口（12）机械地互锁时是不可能的。

为了辅助载片室的组装和拆开，顶部构件（10）可设置有至少一个握持件，例如如图1中用（14）所示。进一步地，由于许多显微镜载片玻璃在一端处具有可写区域（图1中的26）以用于信息的目的，因此顶部构件（10）可在一端处设置有至少一个透明区域（图1中的16），以允许在检查期间对显微镜载片玻璃的可写区域的可见性。

光学检查方法常常需要将包含适当反应物（比如染料）的流体添加到样品。因此，本发明的载片室设置有一个或多个检查室（如图1和图2中所示），所述检查室可由附接到顶部构件（10）的上表面或从顶部构件（10）的上表面显现的壁提供。通常，检查室具有0.1至5ml的容积。如果提供多于一个检查室，则它们可具有相同或不同的容积。

一般而言，“开放式”检查室是优选的。然而，在本发明的变型中，检查室设置有顶盖，该顶盖可选地具有至少一个孔口以允许输入和去除流体和辐射。

基部构件（40）和顶部构件（10）能够例如通过注射模制由pet、ps、pe、pp或cop制造。优选地，顶部构件（10）对于可见光和/或uv辐射透明并且具有低荧光背景，这能够通过使用cop进行制造来实现。

本发明的用途

根据本发明的载片室可用于生物学或医学的所有应用中，其中细胞或生物组织在湿润条件下经受光学检查。这包括显微镜检查、在显微镜检查期间细胞的原位培养、活细胞显微镜检查或超声显微镜检查，优选地涉及包括在生物样品上的染色、孵育、清洗和去除染色的过程。

尽管已结合上文概述的示例性实现方式描述了各种细节，但是在回顾前述公开内容时，各种替代方案、修改、变化、改进和/或实质同可变得显而易见，无论其是已知的还是当前未遇见的或当前可能未预见的。因此，上文所陈述的示例性实现方式旨在为说明性的而非限制性的。