一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法与流程

1.本发明属于药品成分检测技术领域，具体地说，涉及一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法。


背景技术：

2.小儿止咳糖浆的主要组成部分包括甘草流浸膏、桔梗、橙皮酊、氯化铵。辅料为蔗糖和苯甲酸钠。具有祛痰，镇咳的效果，用于小儿感冒引起的咳嗽。
3.在进行小儿止咳糖浆中甘草酸的含量测定时，自动积分样品的实验图谱中，样品的主成分峰与杂质峰分离不开，均采用调整斜率的方法来实现分离。然而，调整斜率的方法并不精准，且会增加工作量，计算费时费力，对于精细化检测来说，误差较大。


技术实现要素：

4.针对现有技术中上述的不足，本发明的目的在于提供了一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，该方法通过降低流动相中有机相的比例，延长样品的出峰时间，从而使样品图谱中主峰前的杂质峰与主峰分离，操作简单，精准率和稳定性高。
5.为了达到上述目的，本发明采用的解决方案是：
6.一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，其特征在于：包括： (1)对照品溶液的制备：取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成含有甘草酸的对照品溶液，密封保存；(2)供试品溶液的制备：用内容量移液管精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，用流动相冲洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3)液相色谱分离条件：分离色谱柱的理论板数：不低于2000；填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶；流动相：甲醇-0.2mol/l 醋酸铵溶液-冰醋酸(59：41：1)；检测波长：250nm。
7.本发明提供的一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法的有益效果是：
8.本发明提供的该种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，通过降低流动相中有机相的比例，延长样品的出峰时间，从而使样品图谱中主峰前的杂质峰与主峰分离，操作简单，精准率和稳定性高。
附图说明
9.图1是本发明实施例1的对照品溶液的出峰图；
10.图2是本发明实验例1的供试品溶液的出峰图；
11.图3是本发明对比例1的对照品溶液的出峰图；
12.图4是本发明对比例1的供试品溶液的出峰图；
13.图5是本发明对比例2的供试品溶液的出峰图；
14.图6是本发明对比例3的供试品溶液的出峰图；
15.图7是本发明实施例2的对照品溶液的出峰图；
16.图8是本发明实施例2的批号为180706试品溶液的出峰图；
17.图9是本发明实施例2的批号为180707试品溶液的出峰图；
18.图10是本发明实施例2的批号为180708试品溶液的出峰图。
具体实施方式
19.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
20.下面对本发明实施例提供的一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法进行具体说明。
21.本发明提供了一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，包括： (1)对照品溶液的制备：取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成含有甘草酸的对照品溶液，在本实施例中，对照品溶液中每 1ml含甘草酸39.18μg，密封保存；(2)供试品溶液的制备：用内容量移液管精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，用流动相冲洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3)液相色谱分离条件：在本实施例中，采用岛津lc-20at高效液相色谱仪，色谱柱的柱径为4.6mm，柱长为150mm，分离色谱柱的理论板数：不低于2000；填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶；流动相：甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(59：41：1)；检测波长：250nm，柱温为室温；(5)小儿止咳糖浆中甘草酸含量的计算：采用常规方法即可，包括将供试品的液相色谱图通过与对照品的液相色谱图和保留时间相比较来确认，按标准曲线法以峰面积计算小儿止咳糖浆中甘草酸的含量。
22.以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
23.实施例1
24.本实施例提供了一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，包括：(1)对照品溶液的制备：取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成含有甘草酸的对照品溶液，对照品溶液中每1ml含甘草酸 39.18μg，密封保存；(2)供试品溶液的制备：用内容量移液管精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，用流动相冲洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3) 液相色谱分离条件：采用岛津lc-20at高效液相色谱仪，色谱柱的柱径为4.6mm，柱长为150mm，分离色谱柱的理论板数：不低于2000；填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶；流动相：甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(59：41：1)；检测波长：250nm，柱温为室温。
25.对比例1
26.本对比例提供了一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，包括：(1)对照品溶液的制备：取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成含有甘草酸的对照品溶液，对照品溶液中每1ml含甘草酸 39.18μg，密封保存；(2)供试品溶液的制备：用内容量移液管精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，用流动相冲洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3) 液相色谱分离条件：采用岛津lc-20at高效液相色谱仪，色谱柱的柱径为4.6mm，柱长为150mm，分离色谱柱的理论板数：不低于2000；填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶；流动相：甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(65：35：1)；检测波长：250nm，柱温为室温。
27.对比例2
28.本对比例提供了一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，包括：(1)对照品溶液的制备：取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成含有甘草酸的对照品溶液，对照品溶液中每1ml含甘草酸 39.18μg，密封保存；(2)供试品溶液的制备：用内容量移液管精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，用流动相冲洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3) 液相色谱分离条件：采用岛津lc-20at高效液相色谱仪，色谱柱的柱径为4.6mm，柱长为150mm，分离色谱柱的理论板数：不低于2000；填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶；流动相：甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(60：40：1)；检测波长：250nm，柱温为室温。
29.对比例3
30.本对比例提供了一种小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，包括：(1)对照品溶液的制备：取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成含有甘草酸的对照品溶液，对照品溶液中每1ml含甘草酸39.18μg，密封保存；(2)供试品溶液的制备：用内容量移液管精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，用流动相冲洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3) 液相色谱分离条件：采用岛津lc-20at高效液相色谱仪，色谱柱的柱径为4.6mm，柱长为150mm，分离色谱柱的理论板数：不低于2000；填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶；流动相：甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(58：42：1)；检测波长：250nm，柱温为室温。
31.实验例1杂质峰与主峰分离
32.采用实施例1和对比例1-3的方法测定小儿止咳糖浆中甘草酸含量，结果见图1-图6。
33.请参阅图1和2，实施例1中，流动相为甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(59：41：1)，供试品图谱中杂质峰与主成分峰能分离，分离度能够达到1.5以上，对照品和供试品主成分峰出峰时间稳定；
34.请参阅图3和4，对比例1中，流动相为甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(65：35：1)，供试品图谱中杂质峰与主成分峰没有完全分离，必须通过修改斜率的方式将峰积出来；
35.请参阅图5，对比例2中，流动相为甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液
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冰醋酸(60：40：1)，供试品图谱中杂质峰与主成分峰能分离，但是分离度只有1.398(不符合系统性试验要求)；
36.请参阅图6，对比例3中，流动相为甲醇-0.2mol/l醋酸铵溶液
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冰醋酸(58：42：1)，供试品图谱中杂质峰与主成分峰能分离，分离度能够达到1.5以上。但是时间较长。
37.实验例2杂质峰与主峰分离后的稳定性
38.为确定小儿止咳糖浆主成分峰出峰时间是否稳定，流动相甲醇
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0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(59：41：1)，选取3批小儿止咳糖浆 (批号为180706、180707、180708)在另外一台高效液相色谱仪上连续进样，观察对照品与样品的主峰的出峰时间是否稳定：(1)使用仪器信息：名称：高效液相色谱仪(安捷伦)；仪器编号：j01087；泵型号：deab810513；检测器型号：deabb07202；工作站：agilent 1260；(2)设置柱温为28℃，其他条件与实施例1相同，实验结果见图7-10。
39.请参阅图7-10，实验结果表明，在不同的设备上，流动相为甲醇
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0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(59：41：1)时，供试品图谱中杂质峰与主成分峰能分离，且对照品与供试品的
主成分峰的出峰时间稳定。
40.因此，在小儿止咳糖浆甘草酸含量测定中，流动相采用甲醇
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0.2mol/l醋酸铵溶液-冰醋酸(59：41：1)时供试品图谱中杂质峰与主成分峰能达到完全分离，且对照品与供试品的主成分峰的出峰时间稳定，并且符合《中国药典》2015年版第四部附录0512中规定，即调整流动相比例时，当小比例组分的百分比例x小于等于33％时允许改变范围为0.7x-1.3x；当x大于33％时，允许改变范围为 x-10％-x+10％。
41.综上所述，采用本发明提供的小儿止咳糖浆中甘草酸含量测定的方法，该方法通过降低流动相中有机相的比例，延长样品的出峰时间，从而使样品图谱中主峰前的杂质峰与主峰分离，操作简单，精准率和稳定性高。
42.以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。