烟用接装纸前处理方法及测定烟用接装纸中糖精钠的方法与流程

本发明属于检测分析领域，具体涉及一种对烟用接装纸前处理的方法，还涉及一种测定烟用接装纸中糖精钠含量的方法。

背景技术：

甜味剂属于常用食品添加剂，主要作用是赋予甜味、改善食品品质。随着食品工业的发展，对绿色和安全食品的追求不断增加，确保食品安全成为重点。目前，食品工业对绿色和安全等有严格要求，检测分析食品的甜味剂含量为要求之一。各国对糖精钠、甜蜜素等甜味剂均采取严格的限制使用政策，制定了大量标准，已成为国际贸易和国内生产考察的重点。

与传统的食品包装材料相比，纸质包装材料有很多优点，故纸质包装材料的占比逐年稳定增长。为了改善口感、丰富特征香味，一些食品厂家将甜味剂添加至纸质包装材料中，以保证甜味剂不易挥发或衰减，例如烟草行业将甜味剂添加至常用的烟用接装纸中。现有的甜味剂测定方法包括离子色谱法、液相色谱法、液相色谱串联质谱法、气相色谱法和气相色谱串联质谱法等，但这些方法均无法快速、准确地测定烟用接装纸中的甜味剂含量。

技术实现要素：

本发明目的之一在于提供一种对烟用接装纸前处理的方法，采用一定比例的水-甲醇混合液浸提烟用接装纸，提取物经离心处理收集上清液，上清液与溴甲酚绿溶液反应后用于检测；此基础上，本发明又一目的在于提供一种测定烟用接装纸中糖精钠含量的方法，通过采用紫外分光光度计检测前处理方法所得的反应产物，可快速、准确地测定烟用接装纸中的糖精钠含量。

为实现上述目的，本发明第一方面涉及一种对烟用接装纸前处理的方法，包括如下步骤：

采用水-甲醇混合液浸提烟用接装纸样品，分离出提取液；其中，水-甲醇混合液中水与甲醇的体积比为2:3～10:3(优选为1:1～3:1，例如3:1、8:3、7:3、3:2、1:1、1:1.3)，每克样品采用60～300ml(例如80ml、100ml、110ml、120ml、130ml、150ml、170ml、200ml、230ml、250ml、280ml)水-甲醇混合液；

将提取液以500～3000rpm(例如1000rpm、2000rpm、2500rpm)的转速离心处理1～10分钟(例如2、3、4、5、6、8分钟)，收集上清液；

将上清液与溴甲酚绿溶液反应；其中，上清液与溴甲酚绿的比例为100l:(0.01～0.3)mol，例如100l:0.1mol、100l:0.02mol、100l:0.04mol。

本发明第一方面的一些实施方式中，在超声条件下浸提。

本发明第一方面的一些实施方式中，超声功率为1300～2000w，例如1500w。

本发明第一方面的一些实施方式中，超声频率为40～60hz，例如50hz。

本发明第一方面的一些实施方式中，浸提5分钟以上。

本发明第一方面的一些实施方式中，浸提5～100分钟，优选浸提5～60分钟，例如10分钟、20分钟、30分钟。

本发明第一方面的一些实施方式中，溴甲酚绿溶液的浓度为10～200μm，例如20μm、30μm、50μm、70μm、80μm、100μm、120μm、150μm、170μm。

本发明第一方面的一些实施方式中，溴甲酚绿溶液采用的溶剂为水，优选为超纯水。

本发明第二方面涉及一种测定烟用接装纸中糖精钠含量的方法，包括如下步骤：

按照本发明第一方面所述的方法对烟用接装纸样品前处理，得到反应产物；

采用紫外分光光度计检测反应产物，得到紫外分光光谱图；其中，紫外分光光度计的夹缝宽度为1～2nm(例如1nm)，吸收波长检测范围300～800nm(优选350～700nm)；

根据紫外分光光谱图中的441nm或616nm吸收波长的吸光度数据计算烟用接装纸样品中的糖精钠含量。

本发明第二方面的一些实施方式中，采用外标法计算烟用接装纸样品中的糖精钠含量。

本发明第二方面的一些实施方式中，所述外标法采用的系列标准溶液通过如下的步骤配制：取不同浓度的糖精钠标准溶液分别与溴甲酚绿溶液反应；其中，糖精钠标准溶液与溴甲酚绿的比例等于本发明第一方面所述方法中的上清液与溴甲酚绿的比例；溴甲酚绿溶液如本发明第一方面中所述。

本发明第二方面的一些实施方式中，所述外标法采用的系列标准溶液的配制步骤中，糖精钠标准溶液与溴甲酚绿的比例为100l:(0.01～0.3)mol，例如100l:0.1mol、100l:0.02mol、100l:0.04mol。

本发明第二方面的一些实施方式中，所述外标法包括：

采用紫外分光光度计检测系列标准溶液(操作条件与检测反应产物时一致)，以系列标准溶液中的糖精钠与溴甲酚绿缔合物的含量(以糖精钠含量计)为自变量，以441nm或616nm吸收波长的吸光度数据为因变量进行回归分析，得到标准工作曲线；

相应地，将反应产物紫外分光光谱图中441nm或616nm的吸光度数据代入标准工作曲线计算，得到反应产物中糖精钠与溴甲酚绿缔合物的含量(以糖精钠含量计)，进一步计算出烟用接装纸样品中的糖精钠含量。

本发明第二方面的一些实施方式中，紫外分光光度计采用1.0cm石英比色皿。

本发明第二方面的一些实施方式中，紫外分光光度计为perkinelmerlambda35紫外分光光度计。

本发明中，烟用接装纸为本领域常用的烟用纸张，符合行业标准yc171-2014《烟用接装纸》的规定。

本发明取得的有益效果：

本发明方法能快速、准确地测定烟用接装纸中的糖精钠含量。

附图说明

为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中

图1为实施例1中的标准工作曲线；

图2为实施例1中烟用接装纸样品1#～3#的紫外分光光谱图；

图3为实施例3中的标准工作曲线。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本发明及其应用或使用的任何限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

(1)系列标准溶液的配制：

取糖精钠标准品，加入超纯水配制浓度8.0mg/ml的储备液；取0.0ml、0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml的储备液，加入不同的100ml容量瓶中，以超纯水定容，得到糖精钠浓度分别为0.000mg/ml、0.008mg/ml、0.016mg/ml、0.024mg/ml、0.032mg/ml、0.04mg/ml的系列溶液，精确移取各溶液100μl加入至不同的2ml的50μm溴甲酚绿(bcg)指示剂(溴甲酚绿水溶液)中，摇匀，得到系列标准溶液。

(2)供试品溶液的制备：

称取0.1g(精确到0.0001g)的烟用接装纸样品置于50ml三角锥瓶中，加入10ml的水-甲醇混合液(水与甲醇的体积比为7:3)，在超声条件下萃取10min，超声功率为1500w，超声频率为50hz；取5ml萃取液放入离心管中，以2000r/min转速离心2min，精确移取上层清液100μl加入至2ml的50μm溴甲酚绿(bcg)指示剂(溴甲酚绿水溶液)中，摇匀，得到供试品溶液。

(3)检测：

将系列标准溶液、供试品溶液分别装入1.0cm石英比色皿中，采用紫外分光光度计(perkinelmerlambda35)测定，操作条件为：狭缝宽度1nm，波长检测范围350～700nm，空白对照为超纯水。

以系列标准溶液中的糖精钠与溴甲酚绿缔合物的浓度(以糖精钠浓度计)为自变量，616nm波长的吸光度为因变量进行回归分析，如图1所示，所得标准工作曲线为：y＝0.40828+b1*x+b2*x²，b1＝4.02763，b2＝111.84738(r2为0.99923)。

将供试品溶液在616nm波长的吸光度代入标准工作曲线中计算，得到供试品溶液中的糖精钠与溴甲酚绿缔合物的浓度(以糖精钠浓度计)，进一步计算出烟用接装纸样品中的糖精钠含量。

按照上述方法测定烟用接装纸样品1#～3#中的糖精钠含量，平行测定5次，结果见表1。烟用接装纸样品的紫外分光光谱图如图2所示。

表1烟用接装纸样品1#～3#的糖精钠含量测定结果

由表1可知，本发明方法平行测定的偏差较小，说明本发明方法的重复性好。

实施例2

(1)系列标准溶液的配制：

取糖精钠标准品，加入超纯水配制浓度8.0mg/ml的储备液；取0.0ml、0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml的储备液，加入不同的100ml容量瓶中，以超纯水溶剂定容，得到糖精钠浓度分别为0.000mg/ml、0.008mg/ml、0.016mg/ml、0.024mg/ml、0.032mg/ml、0.04mg/ml的系列溶液，精确移取各溶液200μl加入至不同的2ml的20μm溴甲酚绿(bcg)指示剂(溴甲酚绿水溶液)中，摇匀，得到系列标准溶液。

(2)供试品溶液的制备：

称取0.2g(精确到0.0001g)的烟用接装纸样品置于50ml三角锥瓶中，加入20ml的水-甲醇混合液(水与甲醇的体积比为6:4)，在超声添加下萃取20min，超声功率为1500w，超声频率为50hz；取5ml萃取液放入离心管中，以2000r/min转速离心2min，精确移取上层清液200μl加入至2ml的20μm溴甲酚绿(bcg)指示剂(溴甲酚绿水溶液)中，摇匀，得到供试品溶液。

(3)检测：

将系列标准溶液、供试品溶液分别装入1.0cm石英比色皿中，采用紫外分光光度计(perkinelmerlambda35)测定，操作条件为：狭缝宽度1nm，波长检测范围350～700nm，空白对照为超纯水。

以系列标准溶液中的糖精钠与溴甲酚绿缔合物的浓度(以糖精钠浓度计)为自变量，616nm波长的吸光度为因变量进行回归分析，得到标准工作曲线。

将供试品溶液在616nm波长的吸光度代入标准工作曲线中计算，得到供试品溶液中的糖精钠与溴甲酚绿缔合物的浓度(以糖精钠浓度计)，进一步计算出烟用接装纸样品中的糖精钠含量。

按照上述方法测定烟用接装纸样品4#～6#中的糖精钠含量，平行测定5次，结果见表2。

表2烟用接装纸样品4#～6#的糖精钠含量测定结果

由表2可知，本发明方法平行测定的偏差较小，说明本发明方法的重复性好。

实施例3

(1)系列标准溶液的配制：

取糖精钠标准品，加入超纯水配制浓度8.0mg/ml的储备液；取0.0ml、0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml的储备液，加入不同的100ml容量瓶中，以超纯水定容，得到糖精钠浓度分别为0.000mg/ml、0.008mg/ml、0.016mg/ml、0.024mg/ml、0.032mg/ml、0.04mg/ml的系列溶液，精确移取各溶液500μl加入至不同的2ml的100μm溴甲酚绿(bcg)指示剂(溴甲酚绿水溶液)中，摇匀，得到系列标准溶液。

(2)供试品溶液的制备：

称取0.3g(精确到0.0001g)的烟用接装纸样品置于50ml三角锥瓶中，加入40ml的水-甲醇混合液(水与甲醇的体积比为5:5)，在超声添加下萃取30min，超声功率为1500w，超声频率为50hz；取5ml萃取液放入离心管中，以2000r/min转速离心2min，精确移取上层清液500μl加入至2ml的100μm溴甲酚绿(bcg)指示剂(溴甲酚绿水溶液)中，摇匀，得到供试品溶液。

(3)检测：

将系列标准溶液、供试品溶液分别装入1.0cm石英比色皿中，采用紫外分光光度计(perkinelmerlambda35)测定，操作条件为：狭缝宽度1nm，波长检测范围350～700nm，空白对照为超纯水。

以系列标准溶液中的糖精钠与溴甲酚绿缔合物的浓度(以糖精钠浓度计)为自变量，441nm波长的吸光度为因变量进行回归分析，如图3所示，所得标准工作曲线为：y＝0.76228-7.78221*x(r2为0.999)。

将供试品溶液在441nm波长的吸光度代入标准工作曲线中计算，得到供试品溶液中的糖精钠与溴甲酚绿缔合物的浓度(以糖精钠浓度计)，进一步计算出烟用接装纸样品中的糖精钠含量。

按照上述方法测定烟用接装纸样品7#～9#中的糖精钠含量，平行测定5次，结果见表3。

表3烟用接装纸样品7#～9#的糖精钠含量测定结果

由表3可知，本发明方法平行测定的偏差较小，说明本发明方法的重复性好。

测试例准确度的考察

(1)实施例1方法的准确度考察：

向实施例1的烟用接装纸样品1#～3#中分别加入三个标量的糖精钠标准品，得到多个加标样品；按照实施例1方法测定各加标样品中的糖精钠含量，然后以表1中烟用接装纸样品1#～3#平行测定的糖精钠含量的平均值为本底含量，计算加标回收率，结果如表4中所示。

表4纸张样品1#～3#的加标回收率结果

(2)实施例3方法的准确度考察：

向实施例3的烟用接装纸样品7#～9#中分别加入三个标量的糖精钠标准品，得到多个加标样品；按照实施例3方法测定各加标样品中的糖精钠含量，然后以表3中烟用接装纸样品7#～9#平行测定的糖精钠含量的平均值为本底含量，计算加标回收率，结果如表5中所示。

表5纸张样品7#～9#的加标回收率结果

由表4-5可知，本发明方法的加标回收率在97％～102％，符合检测要求，说明本发明方法的测定准确度高。

对比例

制备供试品溶液时，向装有烟用接装纸样品的三角锥形瓶中加入10ml水，在超声条件下萃取10min，超声功率为1500w，超声频率为50hz，其余与实施例1相同。按照这一方法仍测定烟用接装纸样品1#～3#的糖精钠含量，结果如表6所示(平行测5次)。

表6纸张样品1#～3#的糖精钠含量测定结果

由表6可知，对比例方法平行测定的rsd大于5％，偏差较大，说明对比例方法测定的重复性差；并且，对比例方法的测定结果与实施例1准确度高的测定结果相差较大，说明对比例方法测定的准确度较低。

显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。