空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A试剂盒的应用及检测方法与流程

文档序号:27012439发布日期:2021-10-20 00:55阅读:来源:国知局

技术特征:
1.血清淀粉样蛋白a检测试剂盒在空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白a中的应用,其特征在于,所述血清淀粉样蛋白a试剂盒包括:酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述酶标记物的原料组分包括过氧化物酶标记的saa检测抗体,所述发光标记物的原料组分包括9,10

二氢吖啶标记的saa捕获抗体;所述酶标记物的原料组分还包括0.05m磷酸盐缓冲液;所述酶标记物的制备方法包括:称取5mg hrp溶解于1ml蒸馏水中,之后加入0.2ml新配的0.1m过碘酸钠溶液,室温下避光搅拌20min,将上述溶液装入透析袋中,对1mm ph4.4的醋酸钠缓冲液透析,4℃过夜;加入20μl 0.2m ph 9.5碳酸盐缓冲液,然后立即加入1mg抗saa单克隆抗体室温避光轻轻搅拌2h,加新配的4mg/ml硼氢化钠液,混匀,于4℃放置2h,将上述液装入透析袋中,对0.15m ph 7.4pbs透析,4℃过夜;取出透析物,加适量甘油后置于

20℃冰箱保存;所述发光标记物的原料组分还包括0.05mtris缓冲液;所述发光标记物的制备方法包括:将发光底物acridan用500μl的dmf溶解;吸取溶解的acridan 41.3μl,加入0.05m硼酸钠缓冲液708.7μl,再加入250μl抗saa单克隆抗体,翻转混匀4~5次,室温静置30min;将标记反应管置于摇床上,于2~8℃下混合过夜,取出加入适量甘油后置于

20℃冰箱保存。3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述校准品还包括不同浓度saa抗原的校准品和校准品稀释液;所述校准品稀释液的制备方法包括:称取磷酸二氢钾14.1g,nahpo
·
2ho 3.0g,加超纯水溶解,proclin

300 0.5~1ml,混匀后,加超纯水定容至1000ml,得到校准品稀释液,2~8℃储存备用;所述校准品的制备方法包括:校准品的浓度为0、15ng/ml、45ng/ml、135ng/ml、400ng/ml、800ng/ml,用上述校准品稀释液将纯化saa稀释至相应浓度,2~8℃储存备用。4.根据权利要求1~3任一项所述的应用,其特征在于,采用所述检测试剂盒在空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白a时,包括步骤:s1:分别加入25μl标准品、25μl过氧化物酶标记的saa检测抗体和25μl发光标记物至化学发光反应管;s2:于37℃恒温箱反应15min;s3:分别加入5μl辅助剂至化学发光反应管,震荡混匀,静置1~2min;之后分别加入触发剂75μl,震荡混匀,立即检测,读取信号值;s4:对校准品的浓度和发光值进行logistic四参数拟合,通过样本发光值计算样本浓度。

技术总结
本发明涉及一种空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法。试剂盒包括:酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品;其中,校准品包括不同浓度SAA抗原的校准品和0.1M磷酸盐稀释液;酶标记物包括过氧化物酶标记的SAA检测抗体和0.05M磷酸盐缓冲液;发光标记物包括9,10


技术研发人员:奚伟红 史兵伟 廖鸳鸯 朱丹丹
受保护的技术使用者:无锡壹闪生物科技有限公司
技术研发日:2018.09.25
技术公布日:2021/10/19
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