一种定量检测全段甲状旁腺激素的试剂盒及检测方法与流程

1.本技术涉及体外诊断技术领域，更具体地，涉及一种定量检测全段甲状旁腺激素的试剂盒及检测方法。


背景技术：

2.甲状旁腺激素(parathyroid hormone，pth)在甲状旁腺内合成，并分泌到血液中，是由甲状旁腺主细胞分泌的单链多肽类激素。pth的主要功能是升高血钙、降低血磷、以及维持骨代谢。pth分泌失调，会造成高钙血症、低钙血症的发生。而高钙血症可导致心律不齐、呼吸肌运动无力，急性肾损伤和肾性糖尿病性尿崩症等。低钙血症引起痉挛，惊厥，骨骼发育不良，精神异常。pth水平也可作为终末期肾脏疾病(esrd)患者的骨组织学替代物，能为持续临床管理提供至关重要的指导，尤其是对带有维生素d固醇的继发性甲状旁腺机能亢进症的治疗。因此临床上测定甲状旁腺激素对高钙血症和低钙血症及其原因鉴别上具有一定的价值，同时对甲状旁腺疾病，慢性肾功能不全继发性甲状旁腺功能亢进症，和骨软化症的诊断及血液透析的监测都有重要意义。
3.目前，检测甲状旁腺激素主要的方法有化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,clia)、胶体金免疫层析法以及酶联免疫吸附法等。
4.其中，化学发光免疫分析法检测灵敏度高，检测结果相对准确，但操作繁琐，需要在特定温度中进行，仪器设备构成复杂，对操作人员的能力要求较高。检测血液样本时，样本要求必须是血清或者血浆，不如直接检测全血方便。
5.胶体金免疫层析法虽然操作简单，收集样本便捷，但由于是通过胶体金颗粒的聚集显色，检测灵敏度不高，如果样本浓度过低，而显色不明显，容易出现假阴性结果，且胶体金免疫层析只能进行定性或半定量检测。
6.酶联免疫吸附法，该方法灵敏度相对胶体金免疫层析法高，但步骤繁琐，需要加样洗涤等重复步骤，测试时间长，且检测血液样本也需要是血清或者血浆，不能直接检测全血。


技术实现要素：

7.本技术实施例所要解决的技术问题是相关技术中检测血液中甲状旁腺激素的检测方法检测灵敏度低、检测时间长以及检测结果不准确的技术问题。
8.为了解决上述技术问题，本技术实施例提供一种定量检测全段甲状旁腺激素的试剂盒，采用了如下所述的技术方案：
9.pth检测卡、稀释液和芯片；
10.所述检测卡用于检测血液样本，包括检测试纸和卡壳，其中，所述检测试纸包括pvc底板，所述pvc底板上依次固定样品垫、第一结合垫、第二结合垫、包被膜以及吸水垫；所述卡壳用于放置所述检测试纸；所述包被膜上相互间隔平行设有检测线和质控线，所述检测线中设有链霉亲和素，所述质控线上设有鸡igy抗体；
11.所述稀释液为磷酸盐缓冲液，用于与所述血液样本进行混匀后加到所述检测卡上；
12.所述芯片预先配置有曲线数据，使得所述检测卡根据所述曲线数据读取血液样本的检测结果。
13.进一步的，所述样品垫采用如下方法制备：
14.将原始样片垫放入预配制的样品垫处理液进行浸润处理；
15.将浸润处理后的所述原始样品垫放置于晾架上进行干燥，获得所述样品垫。
16.进一步的，所述样品垫处理液采用如下方法配制：
17.按照预设配方将2％g/ml牛血清白蛋白和0.5％ml/ml表面活性剂溶解于0.2m所述稀释液中，得到所述样品垫处理液。
18.进一步的，所述第一结合垫采用如下方法制备：
19.使用荧光微球分别对第一人pth抗体和羊抗鸡igy进行标记，得到荧光微球-第一抗pth抗体复合物和荧光微球-羊抗鸡igy复合物；
20.将所述荧光微球-第一人pth抗体复合物和所述荧光微球-羊抗鸡igy复合物按照体积比1:1混合均匀，得到荧光微球抗体标记物；
21.将所述荧光微球抗体标记物，通过喷金划膜仪按照第一预设喷量喷到空白结合垫上，得到第一结合垫，并进行干燥。
22.进一步的，所述荧光微球的配方为固含量为1％的100μl荧光微球，所述第一人pth抗体的重量为60μg，所述羊抗鸡igy的重量为70μg。
23.进一步的，所述第一预设喷量为3.0μl/cm。
24.进一步的，所述第二结合垫采用如下方法制备：
25.分别配制生物素溶液和第二人pth抗体溶液；
26.将所述生物素溶液和所述第二人pth抗体溶液按照体积比1:10混合均匀，形成第二人pth抗体-生物素复合物；
27.将所述第二人pth抗体-生物素复合物，通过喷金划膜仪按照第二预设喷量喷到空白结合垫上，得到第二结合垫，并进行干燥。
28.进一步的，所述生物素溶液为10mg/ml n-羟基磺酸基琥珀生物素的无水dmso溶液，所述第二人pth抗体溶液为3mg/ml第二人pth抗体的硼酸盐缓冲溶液。
29.进一步的，所述第二预设喷量为2.0μl/cm。
30.进一步的，所述包被膜采用如下方法制备：
31.按照预设体积裁剪硝酸纤维素膜；
32.配制链霉亲和素工作包被液作为检测线包被工作液，配制鸡igy抗体工作包被液作为质控线包被工作液；
33.通过喷金划膜仪将检测线包被工作液和质控线包被工作液分别喷到裁剪后的所述硝酸纤维素膜上，形成检测线和质控线；
34.将划膜后的硝酸纤维素膜进行干燥，得到所述包被膜。
35.进一步的，所述检测线和所述质控线的距离为5
±
0.5mm；所述质控线与所述硝酸纤维素膜下缘的距离为10
±
0.5mm，所述检测线与所述硝酸纤维素膜上缘的距离为10
±
0.5mm。
36.进一步的，所述吸水垫采用如下方法制备：
37.准备h-1吸水纸，将所述吸水纸的大小裁剪成(23
±
1)mm
×
(300
±
10)mm，获得所述吸水垫。
38.进一步的，所述芯片采用如下方法配置曲线数据：
39.取不同浓度的pth校准品，分别加入至所述稀释液中，得到检测样品；
40.对所述检测样品进行检测，根据检测信号和对应的检测浓度生成所述检测样品的曲线数据；
41.根据所述曲线数据生成对应的id文件；
42.根据所述id文件通过编程器制备出芯片。
43.为了解决上述技术问题，本技术实施例还提供一种定量检测全段甲状旁腺激素的检测方法，使用如上所述的试剂盒，采用了如下所述的技术方案：
44.将所述芯片放置于荧光免疫分析仪中，读取芯片的曲线数据；
45.将100μl血液样本加到稀释液中混匀，得到混合溶液；
46.将所述混合溶液滴加至所述检测卡的加样孔中，静置15分钟；
47.将静置后的所述检测卡放置于所述荧光免疫分析仪中，根据所述曲线数据，读取所述血液样本的检测结果。
48.与现有技术相比，本技术实施例主要有以下有益效果：
49.本技术运用时间分辨荧光微球免疫层析来测量血液中甲状旁腺激素。本技术具有如下优势：
50.(1)荧光免疫层析的灵敏度相对于酶联免疫层析和胶体金免疫层析技术灵敏度较高，且不仅可以检测静脉血的血清，血浆，全血，还可以直接对末梢血进行检测，操作简单，方便快捷，15-20min便可拿到结果；
51.(2)本技术的检测试纸运用了时间分辨荧光技术，采用铕元素时间分辨荧光微球标记抗体，有利于降低本底荧光强度，提高分辨率和检测灵敏度；
52.(3)本技术的检测试纸运用生物素-亲和素系统，相对于单纯的抗原抗体结合更稳定，可克服传统双抗体夹心法由于包被的抗体结合能力不足产生的钩状效应，增大检测范围。
附图说明
53.为了更清楚地说明本技术中的方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作一个简单介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
54.图1是根据本技术实施例提供的一种定量检测全段甲状旁腺激素的试剂盒的检测试纸结构示意图；
55.图2是根据本技术实施例提供的一种定量检测全段甲状旁腺激素的试剂盒的检测卡结构示意图；
56.图3是本技术的检测原理结构示意图；
57.图4是本技术试剂盒和对照试剂盒的检测结果比较曲线图。
具体实施方式
58.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本技术技术领域的技术人员通常理解的含义相同；本文中在申请的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本技术；本技术的说明书和权利要求书及上述附图说明中的术语“包括”和“具有”以及它们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。本技术的说明书和权利要求书或上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别不同对象，而不是用于描述特定顺序。
59.在本文中提及“实施例”意味着，结合实施例描述的特定特征、结构或特性可以包含在本技术的至少一个实施例中。在说明书中的各个位置出现该短语并不一定均是指相同的实施例，也不是与其它实施例互斥的独立的或备选的实施例。本领域技术人员显式地和隐式地理解的是，本文所描述的实施例可以与其它实施例相结合。
60.为了使本技术领域的人员更好地理解本技术方案，下面将结合附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
61.本技术实施例提供一种定量检测全段甲状旁腺激素的试剂盒，该试剂盒包括pth(parathyroid hormone，甲状旁腺激素)检测卡、稀释液和芯片，检测卡用于检测血液样本，包括检测试纸和卡壳，其中，检测试纸包括pvc底板，pvc底板上依次固定样品垫、第一结合垫、第二结合垫、包被膜以及吸水垫；卡壳用于放置检测试纸；包被膜上相互间隔平行设有检测线和质控线，检测线中设有链霉亲和素，质控线上设有鸡igy抗体；稀释液为磷酸盐缓冲液，用于与血液样本进行混匀后加到检测卡上；芯片用于预先配置曲线信息，使得检测卡根据曲线信息读取血液样本的检测结果。
62.在本实施例中，pth检测卡为试剂盒的核心元件，检测卡的结构示意图参见图1至图2所示，图1为检测试纸的结构示意图，图2为检测试纸和卡壳组装完成的检测卡的结构示意图。如图所示，检测试纸包括pvc底板8，pvc底板8上依次固定样品垫1、第一结合垫2、第二结合垫3、包被膜4以及吸水垫5。
63.其中，样品垫1左侧与pvc底板左侧8对齐，样品垫右2侧覆盖第一结合垫2上1～2mm，第一结合垫2右侧覆盖第二结合垫3上1～2mm。第二结合垫3和吸水垫5分别在包被膜4的两端，其中第二结合垫3右侧覆盖在包被膜4上1～2mm，吸水垫5左侧覆盖在包被膜4上2～3mm。
64.如图2所示，检测卡还包括加样孔23、读数区22和手持区21，其中加样孔23位于样品垫1区域，读数区22位于包被膜4区域，手持区21位于吸水垫5端。
65.在本实施例中，稀释液的配方如下：
66.将proclin300(液体生物防腐剂)与0.01m ph7.4 pbs缓冲液(磷酸盐缓冲溶液)按照1：2000的体积比混合均匀，并分装到合适体积的离心管中。
67.在本实例中的一些可选的实现方式中，样品垫1采用如下方法制备：
68.将原始样片垫放入预配制的样品垫处理液进行浸润处理；
69.将浸润处理后的原始样品垫放置于晾架上进行干燥，获得样品垫。
70.在本实施例中，样品垫处理液采用如下方法配制：
71.按照预设配方将2％g/ml牛血清白蛋白(bsa)和0.5％ml/ml表面活性剂(tween)溶解于0.2m稀释液中，得到样品垫处理液，其中，0.2m稀释液具体为0.2m磷酸盐(ph7.4)缓冲
液。
72.将浸润处理后的原始样品垫放置于晾架上进行干燥的步骤如下：
73.将样品垫处理液浸润原始样品垫，置于洁净干燥平整的晾架上，在温度18～26℃、相对湿度≤30％条件下干燥过夜16～24h，干燥后裁剪为(23
±
1)mm
×
(300
±
10)mm大小，与干燥剂一起放入密封袋中备用。
74.在本实施例中，第一结合垫偶联时间分辨荧光微球标记的第一人pth抗体和时间分辨荧光微球标记的羊抗鸡igy，第一结合垫2采用如下方法制备：
75.使用荧光微球分别对第一人pth抗体和羊抗鸡igy进行标记，得到荧光微球-第一抗pth抗体复合物和荧光微球-羊抗鸡igy复合物；
76.将荧光微球-第一人pth抗体复合物和荧光微球-羊抗鸡igy复合物按照体积比1:1混合均匀，得到荧光微球抗体标记物；
77.将荧光微球抗体标记物，通过喷金划膜仪按照第一预设喷量喷到空白结合垫上，得到第一结合垫，并进行干燥。
78.其中，荧光微球具体采用时间分辨荧光微球，使用荧光微球对第一人pth抗体进行标记的步骤如下：
79.(1)取一干净的离心管，加入2ml 2-吗啉乙磺酸(mes)标记缓冲液，取固含量为1％的时间分辨荧光微球100μl和标记活化液100μl加入2ml mes标记缓冲液中，混匀，反应30min。
80.(2)待反应完成后，对上述离心管进行离心，其中，离心转速为10000rpm。
81.(3)离心结束后，取出上述离心管，吸取出上清，并留取沉淀，在沉淀中加入1ml mes缓冲液，进行1min超声。
82.(4)超声完成后，往上述离心管中加入60μg第一人pth抗体，进行30min旋转反应，反应完成后，往离心管中加入100μl标记封闭液，进行1min超声，再进行1h旋转反应。
83.(5)待旋转反应完成后，对上述离心管进行离心30min，其中，离心转速为10000rpm；
84.(6)离心结束后，取出上述离心管，吸取出上清，并留取沉淀，在沉淀中加入1ml标记保存液，进行2min超声。
85.(7)超声后，在离心管上贴好标签，于2～8℃保存。
86.在本实施例中，使用荧光微球对羊抗鸡igy进行标记的步骤如下：
87.(1)取一干净的离心管，加入2ml 2-吗啉乙磺酸(mes)标记缓冲液，取固含量为1％的时间分辨荧光微球100μl和标记活化液100μl加入2ml mes标记缓冲液中，混匀，反应30min。
88.(2)待反应完成后，对上述离心管进行离心，其中，离心转速为10000rpm。
89.(3)离心结束后，取出上述离心管，吸取出上清，并留取沉淀，在沉淀中加入1ml mes缓冲液，进行1min超声。
90.(4)超声完成后，往上述离心管中加入70μg羊抗鸡igy，进行30min旋转反应，反应完成后，往离心管中加入100μl标记封闭液，进行1min超声，再进行1h旋转反应。
91.(5)待旋转反应完成后，对上述离心管进行离心30min，其中，离心转速为10000rpm；
92.(6)离心结束后，取出上述离心管，吸取出上清，并留取沉淀，在沉淀中加入1ml标记保存液，进行2min超声。
93.(7)超声后，在离心管上贴好标签，于2～8℃保存。
94.在本实施例中，标记活化液为20mg/ml的edc纯化水溶液；标记封闭液为100mg/ml的牛血清白蛋白纯化水溶液；标记保存液配方如下：1g bsa，2g蔗糖，0.5g酪蛋白钠盐，3g海藻糖，0.05ml proclin 300，100ml 0.02m ph8.0tris(氨基丁三醇)溶液。
95.在本实施例的一些可选的实现方式中，将荧光微球抗体标记物，通过喷金划膜仪按照第一预设喷量喷到空白结合垫上，得到第一结合垫，并进行干燥的步骤如下：
96.依照生产批量计算需求量，将玻璃纤维8964裁剪为大小为(10
±
0.5)mm
×
(300
±
10)mm的空白结合垫；
97.将荧光微球抗体标记物上样到喷金划膜仪中，按照3.0μl/cm的喷量，将其喷到空白结合垫上，得到第一结合垫；
98.将第一结合垫放置于温度为(37
±
2)℃，湿度≤30％环境中干燥16～24h，并放入适量干燥剂，密封于自封袋中，贴好标签。
99.在一些可选的实现方式中，第二结合垫偶联生物素标记第二人pth抗体，第二结合垫3采用如下方法制备：
100.分别配制生物素溶液和第二人pth抗体溶液；
101.将生物素溶液和第二人pth抗体溶液按照体积比1:10混合均匀，形成第二人pth抗体-生物素复合物；
102.将第二人pth抗体-生物素复合物，通过喷金划膜仪按照第二预设喷量喷到空白结合垫上，得到第二结合垫，并进行干燥。
103.在本实施例中，配制生物素溶液具体为配制10mg/ml n-羟基磺酸基琥珀生物素(sulfo-nhs-biotin)的无水dmso(二甲基亚砜)溶液，配制第二人pth抗体溶液具体为3mg/ml第二人pth抗体的硼酸盐缓冲溶液，其中，硼酸盐缓冲溶液为0.1mol/l，ph8.0的硼酸盐缓冲溶液。
104.在本实施例中，将生物素溶液和第二人pth抗体溶液按照体积比1:10混合均匀，形成第二人pth抗体-生物素复合物的步骤如下：
105.步骤a，按照1:10的比例混匀10mg/ml n-羟基磺酸基琥珀生物素的无水dmso溶液和3mg/ml第二人pth抗体的硼酸盐缓冲溶液，并在37℃温箱中避光温育30min。
106.步骤b，每20μg n-羟基磺酸基琥珀生物素加入3μl 1mol/l的氯化铵，并在室温孵育10min。
107.步骤c，将上述溶液用pbs(phosphate buffered saline，磷酸缓冲盐溶液)充分透析，以除去未结合的生物素。
108.步骤d，将上述去除未结合生物素的溶液过1ml分子筛柱，加入0.2ml硼酸盐缓冲液，轻轻吹打，洗去多余溶液，生物素较大，留存在分子筛柱中，将滤芯倒转放置离心管中，5000＊g离心20min。
109.步骤e，离心后，往离心管中加入终浓度为1g/l的叠氮钠及1.0g/l bsa，得到结合产物第二人pth抗体-生物素复合物，将结合产物置4℃，避光保存。
110.在本实施例中，将第二人pth抗体-生物素复合物，通过喷金划膜仪按照第二预设
喷量喷到空白结合垫上，得到第二结合垫，并进行干燥的步骤具体如下：
111.依照生产批量计算需求量，将玻璃纤维8964裁剪为大小为(10
±
0.5)mm
×
(300
±
10)mm的空白结合垫；
112.将第二人pth抗体-生物素复合物上样到喷金划膜仪中，按照2.0μl/cm的喷量，将其喷到空白结合垫上，得到第二结合垫；
113.将第二结合垫放置于温度为(37
±
2)℃，湿度≤30％环境中干燥16～24h，并放入适量干燥剂，密封于自封袋中，贴好标签。
114.在一些可选的实现方式中，包被膜4上包被有检测线6和质控线7，检测线6和质控线7平行排列，其中，检测线6即t线，包被有链霉亲和素，质控线7即c线，包被有鸡igy抗体。
115.在本实施例中，包被膜4采用如下方法制备：
116.按照预设体积裁剪硝酸纤维素膜；
117.配制链霉亲和素工作包被液作为检测线包被工作液，配制鸡igy抗体工作包被液作为质控线包被工作液；
118.通过喷金划膜仪将检测线包被工作液和质控线包被工作液分别喷到裁剪后的硝酸纤维素膜上，形成检测线和质控线；
119.将划膜后的硝酸纤维素膜进行干燥，得到包被膜。
120.作为一种具体的实现方式，将硝酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane，简称nc膜)裁剪成25mm
×
(300
±
5)mm，备用；配制5.0μg/ml链霉亲和素作为t线包被工作液，1.0mg/ml鸡igy抗体包被稀释液溶液作为c线包被工作液；使用喷金划膜仪按照2μl/cm的喷量分别将t、c线包被工作液喷到nc包被膜上，其中c线和t线的距离为(5
±
0.5)mm，c线与硝酸纤维素膜下缘的距离为(10
±
0.5)mm，t线与硝酸纤维素膜上缘的距离为(10
±
0.5)mm；划膜完成后，将nc膜放置在温度(37
±
2)℃、湿度≤30％电热鼓风干燥箱中干燥(16～24)h；然后密封于自封袋中，放入适量干燥剂，贴好标签。
121.在本实施例中，吸水垫5采用如下方法制备：
122.准备h-1吸水纸，将吸水纸的大小裁剪成(23
±
1)mm
×
(300
±
10)mm，获得吸水垫。
123.在一些可选的实现方式中，卡壳包括卡壳上盖和卡壳下盖，检测卡的组装方法如下：
124.使用切条机将检测试纸切成预设宽度的试纸条；
125.将试纸条嵌入卡壳下盖，将卡壳上盖盖于所述卡壳下盖上，得到检测卡。
126.作为一种具体的实现方式，检测卡的组装步骤具体如下：
127.步骤a，结合垫黏贴：揭开硝酸纤维素膜结合垫结合处的保护膜，将第一结合垫2粘贴于上，再如图1所示粘贴上第二结合垫3，第二结合垫覆盖在包被膜4上1-2mm。
128.步骤b，样品垫黏贴：将样品垫1覆盖粘贴在第一结合垫2的上方约1-2mm。
129.步骤c，试纸条切条：将检测试纸用切条机切成(3.85
±
0.05)mm宽的试纸条；将每一试纸条装入卡壳下盖中，装好后，盖上卡壳上盖，置于压壳机上，调整压壳机高度为3.5mm，使卡壳上下盖紧密结合，组装成检测卡。将每一检测卡装入铝箔袋中，每袋加入干燥剂，密封备用。
130.其中，卡壳上盖和卡壳下盖可以喷印项目及批号信息。
131.在本实施例中，芯片采用如下方法制备：
132.取不同浓度的pth校准品，分别加入至稀释液中，得到检测样品；
133.对检测样品进行检测，根据检测信号和对应的检测浓度生成检测样品的曲线数据；
134.根据曲线数据生成对应的id文件；
135.根据id文件通过编程器制备出芯片。
136.具体的，(1)准备曲线数据：取不同浓度的pth校准品，分别为10、65、250、1000和2000pg/ml，分别加入到稀释液中；在干式荧光免疫实验管理工具上依次选择检测信号测试-重复性测试，点击新建重置页面，然后点击测试即可进行测试操作，将每一浓度的样本重复检测3次，计算测试得出t/c值的均值。将配制浓度与相对应的t/c均值作为曲线数据。
137.(2)录入芯片数据：在干式荧光免疫实验管理工具上，选择项目参数，使用新建或编辑进行相关参数的设置，编辑完成确认无误后点击保存，项目参数设置完毕。选择测试实验，点击新建，选择项目pth，填写实验编号，完成新建实验。选择曲线生成，在左侧实验列表中选择上一步新建的实验；将第一步准备的曲线数据填入表格中，数据填入后依次点击自动选中-自动排序-保存；保存完成后选择反应值变换为取对数、小数位数为4，选择浓度变换为取对数、小数位数为2，选择拟合算法为mmf model四参数增长曲线拟合，确认无误后，点击拟合；拟合后会在右边拟合结果处显示r值以及曲线，确定拟合结果准确后完成曲线制备。
138.(3)生成id文件：在干式荧光免疫实验管理工具上，选择生成id文件，在左侧项目列表中选择本次新建的项目，在基本参数区、子项参数区以及曲线数据处会自动显示上述步骤所设置完成的各项参数；审核各项参数确保无误后，在基本参数区依次设定生产年、生产月以及批次，设定完成后会在条形码处自动生成条形码，确认条形码是否准确；确认无误后点击生成id文件，弹出数据转移界面，点击确认，完成芯片数据配置。
139.(4)烧纸芯片：返回桌面，选中干式荧光免疫实验管理工具，点击鼠标右键，选择打开文件位置。双击item文件夹。在item文件中找到最新生成的与条码数据相对应的hex文件。将上述芯片数据文件于编程器中烧出2-3个芯片，在已开权限的蓝勃单通道荧光分析仪读取芯片数据，验证数据是否已成功写入以及确定以下信息是否有误。数据及参数确认无误后，即可大批量烧制芯片。
140.在本实施例中，试剂盒的组装方法为：按照产品规格，分装稀释液，将对应数目的检测卡和芯片放入试剂盒，完成组装。
141.本技术还提供一种定量检测全段甲状旁腺激素的检测方法，该检测方法包括如下步骤：
142.步骤s10，将芯片放置于荧光免疫分析仪中，读取芯片的曲线数据。
143.步骤s20，将100μl血液样本加到稀释液中混匀，得到混合溶液。
144.步骤s30，将混合溶液滴加至检测卡的加样孔中，静置15分钟。
145.步骤s40，将静置后的检测卡放置于荧光免疫分析仪中，根据曲线数据，读取血液样本的检测结果。
146.其中，血液样本与稀释液的体积比为1：3。
147.参见图3所示，本技术的检测原理具体如下：
148.血液样本滴加到样品垫1上后，由于毛细作用，液体从样品垫1依次向吸水垫5移动
(即血液样本由左向右移动)。血液样本中的人pth抗原1首先与第一结合垫2中时间分辨荧光微球标记第一人pth抗体33结合，形成抗原抗体复合物，继续向右移动，与第二结合垫3上的生物素标记第二人pth抗体34结合，形成抗体1-抗原-抗体2夹心复合物，由于该夹心复合物中结合了生物素38，可与包被膜4上包被的链霉亲和素35稳定结合，从而被固定在包被膜4上，通过检测其荧光信号值便可反映出血液样本中pth含量。另一方面，在第一结合垫2上荧光微球标记羊抗鸡igy32也同样本溶液一起向右移动，与包被膜上包被的鸡igy抗体36结合，该信号值作为本技术的质控线。
149.本实施例通过对本技术试剂盒与对照试剂盒的检测结果进行比较，具体如下：
150.1)选取北京华科泰生物技术有限公司的甲状旁腺激素检测试剂盒作为对照试剂盒，对相同30例样本进行检测。由于对照试剂的检测范围为【10-1000】pg/ml，因此需对高值样本进行稀释检测，再将检测结果乘以相应的稀释倍数即可；
151.2)对于30例样本检测结果，以华科泰的检测值为y轴，以本技术试剂盒的检测值为x轴，绘制散点图，结果如图4所示，并进行相关性分析，发现符合率较好，整体符合率r值可达0.9975以上。可见，本技术的试剂盒与已注册上市的华科泰检测试剂盒有较好的相关性，能较为准确地从健康人群中筛查出患病个体。
152.显然，以上所描述的实施例仅仅是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例，附图中给出了本技术的较佳实施例，但并不限制本技术的专利范围。本技术可以以许多不同的形式来实现，相反地，提供这些实施例的目的是使对本技术的公开内容的理解更加透彻全面。尽管参照前述实施例对本技术进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来而言，其依然可以对前述各具体实施方式所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等效替换。凡是利用本技术说明书及附图内容所做的等效结构，直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理在本技术专利保护范围之内。