一种用于检测盐酸伐地那非口崩片溶出曲线的方法与流程

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一种盐酸伐地那非口崩片的溶出曲线测定方法。


背景技术：

2.目前国内的合成和工艺水平，针对仿制药质量一致性评价工作，杂质控制已经游刃有余，但是要做到体内生物等效还是有一定难度。因此，需要建立科学合理的固体制剂溶出曲线测定方法，客观的反映口服固体制剂的质量，为药品批间质量的一致性、工艺变更前后药品质量的一致性提供保证，对于药物在体内行为的预测也有一定的实际意义。
3.盐酸伐地那非为5型磷酸二酯酶(pde5)抑制剂，其抑制作用远远高于对其他磷酸二酯酶(pde)的作用，可用于治疗治疗男性阴茎勃起功能障碍(ed)，另有文献报道，伐地那非还具有治疗慢性前列腺炎、肺动脉高压等作用。盐酸伐地那非的溶解度呈ph依赖性，随着ph的增加而急剧下降，在水、ph1.0及ph4.5中溶解度较高，在中性条件下溶解度降低。
4.现有技术中，测定盐酸伐地那非口崩片溶出曲线方法在美国橙皮书有收载，以ph1.0盐酸溶液为溶出介质，但伐地那非在该介质中溶解性极好，该方法无法区分不同处方工艺、工艺变更前后及批间样品之间的溶出行为差异。
5.中国专利申请cn103372014a公开了一种盐酸伐地那非口服固体制剂，专利描述了溶出测定方法，为uv法测定，波长为245nm。但空白辅料在该波长下有吸收，专属性欠佳。


技术实现要素：

6.为了解决上述问题，本发明提供了一种盐酸伐地那非口崩片溶出曲线的测定方法，以科学客观的评价盐酸伐地那非口崩片的质量，不仅可以用于一致性评价工作，也可区分不同原料理化性质(粒径)、不同处方和不同工艺制备的样品的质量差异。
7.本发明中，“转篮法”是指将固体制剂的一定量分别置于溶出度仪的转篮中,在37.0
±
0.5℃恒温下，在规定的转速、溶剂中依法操作，在规定的时间内测定其溶出的量。
8.本发明中，“磷酸盐缓冲液”为中性缓冲液，可以用等浓度的nah2po4和na2hpo4或者等浓度的kh2po4和k2hpo4溶液混合制备。
9.本发明中，“hplc法”为高效液相色谱法(high performance liquid chromatography)，又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。该方法以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
10.本发明中，当描述物质的比例时，75:25与3:1具有相同的含义。
11.一方面，本发明提供了一种用于检测盐酸伐地那非口崩片溶出曲线的方法。
12.所述的方法采用转篮法进行溶出操作；
13.优选地，所述的转篮法的转速为50转每分钟；
14.所述的转篮法中溶出介质为ph7.0-7.4的磷酸盐缓冲液；优选地，为ph7.0或ph7.2或ph7.4的磷酸盐缓冲液；进一步优选为ph7.2的磷酸盐缓冲液。
15.所述的方法中的检测方法为hplc法。
16.优选地，所述的hplc法按以下步骤操作：
17.步骤1、配制流动相：a相[0.2％三乙胺溶液]-b相(乙腈)混合而成；
[0018]
步骤2、分别吸取20μl对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行测定。
[0019]
优选地，所述的0.2％三乙胺溶液ph为2.3-2.8。
[0020]
进一步优选地，所述的0.2％三乙胺溶液ph为2.3-2.4、2.4-2.5、2.5-2.6、2.6-2.7、2.7-2.8、2.3-2.5、2.4-2.7或2.5-2.8。
[0021]
进一步优选地，所述的0.2％三乙胺溶液ph为2.5。
[0022]
所述步骤1中流动相a相的配制方法：量取2ml三乙胺，加水1000ml，混匀，用磷酸调ph为2.3-2.8，优选为2.5。
[0023]
优选地，所述的流动相a相及b相比例为5:1-5:4，进一步优选为3:1-3:2，更进一步为3:1。
[0024]
优选地，在所述步骤2中选用c18色谱柱：长150mm，内径3mm，填充物粒径3.5μm；检测器为uv检测器；检测波长：242nm。
[0025]
优选地，在所述的步骤2中，柱温为25-40℃；
[0026]
进一步优选地，所述的柱温为30℃。
[0027]
优选地，在所述的步骤2中，流动相流速为0.3-0.8ml/min；
[0028]
进一步优选地，所述的流动相流速为0.5ml/min。
[0029]
最终确定的溶出测定方法简便快捷，专属性强，在各介质中主成分保留时间一致，出峰早且峰形好，准确度高。该检测方法的各项验证结果均符合相关法规和指导原则的要求，实际检测效果良好。
[0030]
优选地，所述的方法中包括以下步骤：
[0031]
1)溶出介质的配制：配制ph7.0-ph7.4范围内的磷酸盐缓冲液，超声溶解并脱气；
[0032]
2)对照品溶液的制备：取伐地那非对照品，以溶出介质稀释至每1ml含伐地那非11μg；
[0033]
3)供试品溶液的制备：取盐酸伐地那非口崩片，加900ml步骤1)中的所述溶出介质中，按照溶出度测定法，以转速为50转/分钟进行溶出试验，于5、10、15、30、45、60分钟时，分别取溶出液5ml，溶出液经微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；
[0034]
4)测定：采用高效液相色谱法测定溶出量，分别取对照品溶液及供试品溶液注入高效液相色谱仪，采用外标法计算溶出量；
[0035]
5)评估：采用相似因子法，利用参比制剂和仿制制剂在5、10、15、30、45、60分钟时的平均溶出量数据，计算相似因子f2，所述相似因子f2用于比较仿制制剂溶出曲线与参比制剂溶出曲线的相似性。
[0036]
另一方面，本发明提供了前述方法在制备盐酸伐地那非口崩片中的应用。
[0037]
所述的应用为质控。
[0038]
所述的质控可以是室内质控或室间质控。
[0039]
所述质控可以是批间质控。
[0040]
本发明中，“室内质控”是指同一生产区间检测和控制常规工作的精密度，并检测其准确度的改变，以提高常规工作中批间和日间标本检测的一致性。
[0041]
本发明中，“室间质控”是指对不同生产区间进行检测和控制，保证产品制备方法的稳定。
[0042]
本发明中，“批间质控”是指比较每批制备品之间重复性的质量控制方法。
[0043]
本发明有益效果：
[0044]
本发明中的溶出方法具有科学、耐用及可重现等特点，解决了盐酸伐地那非口崩片快速溶出、无法进行相似性评价的难题；检测方法简便快捷，专属性强，保证了测定结果的准确度。不仅可以用于仿制药与原研药的质量一致性评价工作，适度区分仿制制剂与参比制剂的质量优劣及工艺差异；也可以为药品批间质量的一致性提供保证，进而保证药品的质量，达到质量与疗效的一致性。
附图说明
[0045]
图1为原研样品的溶出曲线。
[0046]
图2为自制样品与原研样品溶曲对比。
具体实施方式
[0047]
下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，下述实施例不用于限制本发明，仅用于说明本发明。以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0048]
实施例1一种用于检测盐酸伐地那非口崩片(原研)溶出曲线的方法按照以下操作进行：
[0049]
1)溶出介质的配制：配制ph7.0-ph7.4范围内的磷酸盐缓冲液，超声溶解并脱气；
[0050]
2)对照品溶液的制备：取伐地那非对照品(纯度：99.7％，批号：510169-202001，来源：中检院)，以溶出介质稀释至每1ml含伐地那非11μg；
[0051]
3)供试品溶液的制备：取盐酸伐地那非口崩片，加900ml步骤1)中的所述溶出介质中，按照溶出度测定法，转篮法以转速为50转/分钟进行溶出试验，于5、10、15、30、45、60分钟时，分别取溶出液5ml，溶出液经微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；
[0052]
4)测定：采用hplc法测定溶出量，分别取对照品溶液及供试品溶液注入高效液相色谱仪，采用外标法计算溶出量；
[0053]
5)评估：采用相似因子法，利用参比制剂和仿制制剂在5、10、15、30、45、60分钟时的平均溶出量数据，计算相似因子f2，所述相似因子f2用于比较仿制制剂溶出曲线与参比制剂溶出曲线的相似性。
[0054]
hplc法，按以下步骤操作：
[0055]
步骤1、配制流动相：a相[0.2％三乙胺溶液(磷酸调ph为2.5)]-b相(乙腈)混合而成。
[0056]
流动相a相的配制方法：量取2ml三乙胺，加水1000ml，混匀，用磷酸调ph为2.5。
[0057]
流动相a相及b相比例为75:25。
[0058]
步骤2、分别吸取20μl对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行测定。伐地那非保留时间为3.6分钟。
[0059]
选用c18色谱柱(agilent eclipse xdb)：长150mm，内径3mm，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，填充物粒径3.5μm；
[0060]
检测器为uv检测器；
[0061]
检测波长：242nm；
[0062]
柱温为30℃；
[0063]
流速为0.5ml/min。
[0064]
采用本法对同一批原研样品进行溶出曲线测定，6片样品(规格：10mg，批号：bxgep22，来源：bayer)间的变异系数均符合要求，说明本法的均一性良好，适用于该片剂溶出曲线的测定，具体的测定结果累计溶出度如下，溶出曲线见附图1。
[0065][0066][0067]
实施例2盐酸伐地那非口崩片原研样品与自制样品的检测对比
[0068]
参照实施例1的方法，对不同原料理化性质(粒径分布)的三批自制样品及原研样品进行溶出曲线测定，不同原料理化性质制备的三批样品之间溶出行为的差异明显，说明本法具有较强的区分效力，适用于该片剂溶出曲线的测定，具体的测定结果累计溶出度如下表，溶出曲线见附图2。
[0069][0070]
对比例
[0071]
参照实施例1的方法设置对比例，对原研样品进行检测，对比例设置如下：
[0072]
对比例与实施例1的区别结果1溶出方法为桨法操作在各介质中溶出迅速，无区分力2转篮法每分钟75转溶出较快，不适用于溶出行为相似性的比较3转篮法每分钟100转溶出较快，不适用于溶出行为相似性的比较4溶出介质为水5min基本完全溶出，无区分力5溶出介质为ph1.0盐酸溶液5min基本完全溶出，无区分力6溶出介质为ph4.5醋酸盐缓冲液5min基本完全溶出，无区分力7溶出介质为ph6.8磷酸盐缓冲液15min溶出≥85％，无区分力