姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱及其构建方法和用途与流程

1.本发明属于中药分析和检测技术领域。具体地，本发明涉及姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱及其构建方法和用途。


背景技术：

2.竹茹为禾本科植物青秆竹bambusa tuldoides munro、大头典竹sinocalamus beecheyanus(munro)mc clure var.pubescens p.f.li或淡竹phyllostachys nigra(lodd.)munro var.henonis(mitf.)stapf ex rendle的茎秆的干燥中间层。性微寒，味甘，归肺、胃经，具清热化痰、除烦止呕之功能，用于痰热咳嗽、胆火挟痰、烦热呕吐等疾病的治疗。《药品化义》曰：“竹茹轻可去实，凉能去热，苦能降下，专清痰，为宁神开郁佳品。”是临床不可缺少的常用中药。
3.文献报道竹茹具有抗氧化、抗硝化、抗衰老、抗菌、抗病毒及保护心脑血管、防治老年退行性疾病等生物学功效。主要含有生物碱、鞣质、皂苷、氨基酸、有机酸、还原糖和三萜等多种有机成分。
4.姜竹茹是竹茹经姜炙法制得的炮制加工品，其研究文献资料较少，现有的质量标准《中国药典》2020年版仅记载其来源、性状和检查的项目，未记载其含量测定项。因此，目前在竹茹功能活性成分或指标性化学组分与药材的功能主治尚不能一一对应的情况下，在建立特征图谱及含量测定方法时，尚没有合适的对照品或内标物作为参照物，也没有全面、准确地反映姜竹茹中相关物质含量的检测方法。
5.因此，有必要开发姜竹茹高效液相特征图谱及其构建方法、以及基于该特征图谱的姜竹茹中相关物质含量的全面、准确的检测方法。


技术实现要素：

6.本发明的第一目的在于提供一种姜竹茹高效液相特征图谱、其构建方法。该方法以对香豆酸为特征成分，通过高效液相色谱有效地构建了特征图谱，为更全面、更准确地实现姜竹茹中各成分的分析与含量检测提供了高效的保障。
7.本发明的上述第一目的是通过以下技术方案实现的：
8.一方面，本发明提供了一种构建姜竹茹高效液相特征图谱的方法，其包括：
9.(a)制得姜竹茹供试品溶液，并以对香豆酸作为对照品，制得对照品溶液；
10.(b)对所述姜竹茹供试品溶液和所述对照品溶液进行高效液相色谱检测；
11.其中，所述高效液相色谱检测的条件包括：
12.在280nm的波长下，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂，以乙腈为流动相a，以甲酸水溶液为流动相b，采用梯度洗脱的方式洗脱。
13.优选地，在步骤(a)中，制得姜竹茹供试品溶液的方法包括：使姜竹茹供试品溶解于甲醇水溶液中并定量，经超声提取、过滤后制得。
14.优选地，所述姜竹茹供试品溶液的浓度为5mg/ml～20mg/ml。在本发明中，所述姜
竹茹供试品溶液的浓度可以选择例如5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、12mg/ml、15mg/ml、18mg/ml、19mg/ml、20mg/ml、以及以上点值中任意两个组成的范围内的任意点值。
15.所述姜竹茹供试品可以为姜竹茹或姜竹茹配方颗粒。
16.优选地，所述对香豆酸对照品溶液的浓度为10μg/ml～1mg/ml。
17.优选地，所述超声提取在390w～520w的功率和30khz～50khz的频率下进行20min～40min。在本发明中，所述超声提取例如可以在390w、400w、410w、420w、430w、440w、450w、470w、490w、500w、510w、或520w的功率下，并在30khz、35khz、40khz、45khz、或50khz的频率下进行20min、25min、30min、35min、或40min。
18.优选地，所述甲醇水溶液的体积浓度为0％～100％。在本发明中，所述甲醇水溶液的体积浓度可以选择例如0％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％以及以上点值中任意两个组成的范围内的任意点值。在本发明中，当所述甲醇水溶液的体积浓度选择“0％”时，表示在这种情况下将姜竹茹供试品溶解于水中，以制得姜竹茹供试品溶液。
19.优选地，作为流动相b，所述甲酸水溶液的体积浓度为0.08％～0.15％，更优选为0.1％。
20.优选地，以所述流动相a和所述流动相b的体积分数计，所述梯度洗脱的程序包括：
21.0min～4min，以10％～12％流动相a-90％～88％流动相b洗脱；
22.4min～10min，以12％流动相a-88％流动相b洗脱；
23.10min～11min，以12％～12.5％流动相a-88％～87.5％流动相b洗脱；
24.11min～15min，以12.5％流动相a-87.5％流动相b洗脱；
25.15min～18min，以12.5％～14％流动相a-87.5％～86％流动相b洗脱。
26.其中，在0min～4min的洗脱时段内，所述流动相a的体积分数可以选择10％、11％、12％、以及以上点值中任意两个组成的范围内的任意点值；所述流动相b的体积分数则可以根据流动相a的体积分数对应地选择。
27.在15min～18min的洗脱时段内，所述流动相a的体积分数可以选择12.5％、13％、13.5％、14％、以及以上点值中任意两个组成的范围内的任意点值；所述流动相b的体积分数则可以根据流动相a的体积分数对应地选择。
28.优选地，所述流动相的流速为0.1ml/min～0.5ml/min，更优选为0.3ml/min。
29.优选地，所述色谱柱的柱温为35℃～45℃，更优选地为40℃。
30.优选地，所述姜竹茹供试品溶液和所述对照品溶液的进样量为1.8μl～2.2μl，更优选地为2μl。
31.在本发明的构建姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱的方法中，高效液相色谱的系统适用性实验应当使得满足：按对香豆酸峰计算，理论板数不低于3000。
32.另一方面，本发明提供了根据上述构建姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱的方法获得的姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱。
33.优选地，所述高效液相特征图谱包含2个特征峰，其中相对于特征峰2(s)的保留时间10.75
±
10％min，特征峰1的保留时间在3.00
±
10％min范围内。
34.本发明的第二目的在于提供一种鉴定姜竹茹或其提取物的方法，其包括：获得待
鉴定的供试品的高效液相色谱谱图，并且将所述供试品的高效液相色谱谱图与上述姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱对照。
35.本发明的第三目的在于提供一种检测姜竹茹或其提取物中有关物质含量的方法。
36.本发明的上述第三目的是通过以下技术方案实现的：
37.一种检测姜竹茹或其提取物中有关物质含量的方法，其包括：
38.(a)制得供试品溶液，并以对香豆酸作为对照品，制得对照品溶液；
39.(b)对所述供试品溶液和所述对照品溶液进行高效液相色谱检测；
40.其中，所述高效液相色谱检测的条件包括：
41.在308nm的波长下，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂，以乙腈为流动相a，以甲酸水溶液为流动相b，采用梯度洗脱的方式洗脱；其他条件同上述构建姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱的方法中所定义的。
42.优选地，所述对香豆酸的检测波长为308nm。
43.在本发明检测姜竹茹或其提取物中有关物质的方法中，高效液相色谱的系统适用性实验应当使得满足：按对香豆酸峰计算，理论板数不低于3000。
44.本发明至少具有如下有益效果：
45.(1)本发明所提供的姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱及其构建方法，以对香豆酸为特征成分，通过高效液相检测有效地构建了特征图谱，为更全面、更准确地鉴定姜竹茹或其提取物、实现对姜竹茹或其提取物中各成分的分析与含量检测提供了可靠的保障。
46.(2)本发明所提供的检测姜竹茹或其提取物中有关物质的方法，其具有准确度好、精密度高、专属性强、稳定性好的优势，符合中药质量标准研究的技术要求，为分析并测定姜竹茹或其提取物中各成分的准确含量提供了可靠的途径。
附图说明
47.以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：
48.图1是实施例1中波长筛选考察的hplc色谱图(280nm)；
49.图2是实施例1中波长筛选考察的hplc色谱图(308nm)；
50.图3是实施例2中供试品溶剂用量考察的hplc色谱图；
51.图4是实施例2中超声功率考察的hplc色谱图；
52.图5是实施例2中提取时间考察的hplc色谱图；
53.图6是实施例3中对香豆酸含量测定精密度考察的hplc色谱图；
54.图7是实施例3中对香豆酸含量测定重复性考察的hplc色谱图；
55.图8是实施例3中对香豆酸加样回收试验的hplc色谱图；
56.图9是实施例3中对香豆酸的标准曲线；
57.图10是实施例3中对香豆酸含量测定线性范围考察的hplc色谱图；
58.图11是实施例3中对香豆酸含量测定专属性考察的hplc色谱图；
59.图12是实施例3中供试品稳定性考察的hplc色谱图；
60.图13是实施例3中姜竹茹对香豆酸含量测定三倍洗脱时间考察的hplc图谱；
61.图14是实施例3中姜竹茹特征图谱精密度考察的hplc色谱图；
62.图15是实施例3中姜竹茹特征图谱重复性考察的hplc色谱图峰；
63.图16是实施例3中姜竹茹特征图谱稳定性考察的hplc色谱图峰。
具体实施方式
64.下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
65.本发明实施例中所采用的试剂与试药、仪器的信息如下所列。
66.试剂与试药：姜竹茹配方颗粒由北京康仁堂药业有限公司提供；对香豆酸(批号：2003，纯度≥98％)对照品购自上海诗丹德标准技术服务有限公司；甲醇(天津渤化化学试剂有限公司，20201208，分析纯)；乙腈(天津渤化化学试剂有限公司，20210220，色谱纯)；甲酸(上海市试剂一厂，2019-1-2，色谱纯)。
67.仪器：分析天平(赛多利斯，sqp quintix224-1cn，德国)；thermo vanquish型超高效液相色谱仪(配有dad检测器、控温型柱温箱、控温型自动进样器，美国)；高速台式离心机(sigma，1-14，德国)；超纯水仪(cascada，pall，美国)；超声波清洗仪(天津奥特赛恩斯，as20500bt，中国)。
68.实施例1
69.取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)适量，研细，取约0.5g，精密称定，精密加入70％甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声提取(功率390w，频率40khz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，获得供试品溶液。
70.取对香豆酸对照品适量，精密称定，加入70％甲醇水溶液制成10μg/ml的溶液，获得对照品溶液。
71.按照以下色谱条件，对所述供试品溶液和对照品溶液进行高效液相色谱检测：
72.以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为100mm，内径为2.1mm，粒径为1.7μm)；以乙腈为流动相a，以0.1％甲酸水溶液为流动相b，按以下表1中所列的程序进行梯度洗脱；流速为0.3ml/min；柱温为40℃；pda全波长扫描(210nm～400nm)。
73.表1梯度洗脱程序
74.时间(min)流动相a(％)流动相b(％)0～410
→
1290
→
884～10128810～1112
→
12.588
→
87.511～1512.587.515～1812.5
→
1487.5
→
86
75.由实验结果发现，在280nm的检测波长下，色谱图能体现最多的化合物信息(图1)；对香豆酸在308nm有较好吸收，其hplc图如图2所示。因此，将构建特征图谱的检测波长确定为280nm，将对香豆酸含量测定的检测波长确定为308nm。
76.实施例2
77.本实施例分别考察了供试品溶液的制备过程中溶剂用量、超声提取(包括提取溶剂、提取时间、提取功率)对结果的影响，具体如下：
78.供试品溶剂用量对结果的影响
79.取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照实施例1的方法，分别采用10ml、25ml、50ml、100ml的70％甲醇水溶液作为提取溶剂制备供试品溶液，并进行hplc测定，考察不同体积70％甲醇水溶液对供试品提取结果的影响。其中，以对香豆酸含量为评价指标。如表2中结果所示，采用10ml、25ml、50ml、100ml提取溶剂提取，对香豆酸含量rsd值均小于5％，以25ml的70％甲醇水溶液能够有效提取供试品，因此，提取溶剂可以选择25ml的70％甲醇水溶液。
80.表2溶剂体积考察结果
81.溶剂体积/ml含量/％100.288250.294500.3001000.293rsd/％1.67
82.提取溶剂对结果的影响
83.取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照实施例1中供试品制备方法与色谱条件，分别采用纯水、30％甲醇水溶液、50％甲醇水溶液、70％甲醇水溶液、100％甲醇水溶液作为提取溶剂制备供试品溶液，考察以纯水、30％甲醇水溶液、50％甲醇水溶液、70％甲醇水溶液、100％甲醇水溶液作为提取溶剂对供试品提取结果的影响，以对香豆酸含量为评价指标。如表3和图3中结果所示，不同浓度甲醇对提取效果影响显著，其中以70％甲醇水溶液作为提取溶剂较佳。
84.表3提取溶剂浓度考察结果
85.提取溶剂含量/％纯水0.02030％甲醇水溶液0.02050％甲醇水溶液0.02070％甲醇水溶液0.021100％甲醇水溶液0.020rsd/％2.02
86.提取功率对结果的影响
87.取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照实施例1中的供试品制备方法与色谱条件，分别采用50％、75％、100％额定功率(520w，40khz)制备供试品，考察50％、75％、100％额定功率(520w，40khz)对供试品提取结果的影响，选取对香豆酸含量为评价指标，如表4和图4中结果所示，不同超声功率对对香豆酸提取效果影响显著，以75％额定功率作为超声功率较佳。
88.表4超声功率考察结果
89.超声功率含量/％50％额定功率0.28375％额定功率0.294
100％额定功率0.293rsd/％2.02
90.提取时间对结果的影响
91.取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照实施例1的方法，分别超声提取10min、20min、30min、40min制备供试品溶液，考察不同超声提取时间对供试品提取结果的影响，选取对香豆酸含量为评价指标。如表5和图5中结果所示，10min、20min、30min、40min三个提取时间，对香豆酸含量rsd值均小于5％，无显著性差异。
92.表5提取时间考察结果
93.提取时间/min含量/％100.291200.294300.294400.287rsd/％1.20
94.实施例3
95.本实施例考察了本发明的方法和仪器的精密度、重复性、准确度、线性与范围、专属性、稳定性、特征图谱精密度、特征图谱重复性以及特征图谱稳定性，具体如下：
96.对照品溶液的制备：取对香豆酸对照品适量，精密称定，加入甲醇制成10μg/ml的溶液，获得对照品溶液。
97.供试品溶液的制备：取供试品适量，研细，取约0.5g，精密称定，精密加入70％甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率390w，频率40khz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，获得供试品溶液。
98.参照《中国药典》2020年版四部通则0512的规范，色谱条件与系统适用性试验：
99.以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为100mm，内径为2.1mm，粒径为1.7μm)，以乙腈为流动相a，以0.1％甲酸水溶液为流动相b，按表1中所列的程序进行梯度洗脱；流速为0.3ml/min；柱温为40℃；含量测定检测波长为308nm，特征图谱检测波长为280nm。理论板数按对香豆酸峰计算应不低于3000。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl，注入高效液相色谱仪进行检测。
100.精密度考察
101.取对香豆酸对照品，采用以上色谱方法，重复进样6针，计算对香豆酸峰面积相对标准偏差，如图6和表6中结果所示，对香豆酸6针进样峰面积rsd值为0.47％，表明仪器精密度良好，符合药品质量标准分析方法验证指导原则(《中国药典》2020年版四部通则9101)要求。图6中a、b、c、d、e、f分别表示对香豆酸对照品第1次进样至第6次进样的图谱。
102.表6对香豆酸含量测定精密度考察结果
103.编号对香豆酸峰面积(mau*s)精密度15220300精密度25235117精密度35236315精密度45202904
精密度55222761精密度65275818峰面积rsd/％0.47
104.重复性考察
105.参照本实施例的前述方法分别制备6份供试品溶液，并采用本实施例前述色谱条件进样，分析供试品中对香豆酸含量rsd值，以考察本发明方法的重复性。如图7和表7中结果所示，6份供试品溶液中对香豆酸含量rsd值为1.78％，表明本发明的方法重复性良好，符合药品质量标准分析方法验证指导原则(《中国药典》2020年版四部通则9101)要求。图7中a、b、c、d、e、f分别表示姜竹茹第1次至第6次制备供试品所测得的图谱。
106.表7对香豆酸含量测定重复性试验结果
107.批号对香豆酸含量/％重复11.77重复21.78重复31.80重复41.78重复51.79重复61.76rsd/％1.78
108.定量计算方法依据《中国药典》2020年版四部通则0512高效液相色谱法中有关规定进行计算，即测量对照品溶液和供试品溶液中待测物质的峰面积，按以下等式计算含量：
109.含量(c
x
)＝cr×ax
/ar110.等式中，a
x
为供试品的峰面积；c
x
为供试品的浓度；ar为对照品的峰面积；cr为对照品的浓度。
111.准确度考察
112.准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率(％)表示。
113.取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)样品，按对照品量与所取供试品中待测定成分量之比为在0.5:1、1:1、1.5:1分别加入对照品进行加样(n＝9)，制备供试品溶液，并按照本实施例前述的色谱条件进行高效液相色谱分析，分析结果取平均值。如图8和表8中结果所示，加样回收试验中，对香豆酸的平均回收率为96.6％，rsd为1.18％，符合药品质量标准分析方法验证指导原则(《中国药典》2020年版四部通则9101)要求。图8中a、b、c、d、分别表示1.5:1加入对照品、1:1加入对照品、0.5:1加入对照品依据犬尿奎啉酸对照品图谱。
114.表8对香豆酸加样回收试验结果
[0115][0116]
线性与范围考察
[0117]
取对香豆酸对照品适量，精密称定，加入甲醇制成507.5μg/ml的标准溶液。吸取标准溶液，分别稀释至浓度为混合标准溶液浓度的1％、10％、25％、50％、75％、100％的对香豆酸标准溶液，并按照本实施例前述的色谱条件进行高效液相色谱分析。如图9和图10中结果所示，以浓度为横坐标x，峰面积为纵坐标y，拟合对香豆酸标准曲线为：y＝10615x+11132(n＝6)，r2＝0.9995。结果表明，对香豆酸在10.15ng～1015ng范围内线性关系良好。图10中a、b、c、d、e、f分别表示浓度为母液浓度的100％、75％、50％、25％、10％、1％的犬尿奎啉酸对照品溶液图谱。
[0118]
专属性考察
[0119]
取配方颗粒辅料适量，按照本实施例前述的方法制备辅料供试品溶液。取姜竹茹供试品溶液、对香豆酸标准品溶液和辅料溶液，按照本实施例前述的色谱条件进行高效液相色谱分析。如图11中结果所示，对香豆酸在缺阴性位置处无干扰峰，表明含量测定专属性良好。图11中a、b、c分别表示辅料图谱、对香豆酸对照品图谱及姜竹茹配方颗粒供试品图谱。
[0120]
稳定性考察
[0121]
取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照本实施例中前述的方法制备供试品溶液，并按照本实施例前述的色谱条件进行高效液相色谱分析。在0h、3h、6h、9h、12h、15h、18h、21h、24h分别进样测定，将峰面积作为指标，考察样品在24h内的稳定性。如图12(a至j分别对应上述0h～24h内各进样时间点的进样结果)和表9中结果所示，对于对香豆酸含量测定，供试品24h内峰面积rsd为0.30％，表明稳定性良好。
[0122]
表9供试品的稳定性考察结果
[0123]
时间(h)对香豆酸峰面积mau*s0227537322915362294869228748
1222851715229399182278632122810524228166rsd/％0.30
[0124]
三倍洗脱时间考察
[0125]
取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照本实施例中前述的方法与色谱条件制备供试品溶液并进行高效液相色谱检测。将色谱梯度延长至60min，考察姜竹茹对香豆酸含量测定三倍洗脱时间图谱。结果如图13中所示，经三倍洗脱，20min之后基本无色谱峰，因此将洗脱时间确定为20min。图13为60min洗脱得到的供试品图谱。
[0126]
特征图谱精密度考察
[0127]
取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照本实施例中前述的方法和色谱条件制备供试品溶液并进行高效液相色谱检测，重复进样6针，以对香豆酸为s峰，计算其他特征峰与s峰相对保留时间及相对峰面积rsd值，结果参见图14和表10、表11。结果显示，特征峰相对保留时间与相对峰面积rsd均小于2％，表明精密度良好。图14中a、b、c、d、e、f、g分别表示姜竹茹配方颗粒供试品第1次至第6次进样得到的供试品图谱。
[0128]
表10姜竹茹特征图谱精密度考察结果(相对保留时间)
[0129]
色谱峰编号12(s)精密度10.4921.00精密度20.4921.00精密度30.4931.00精密度40.4891.00精密度50.4941.00精密度60.4921.00rsd/％0.300.00
[0130]
表11姜竹茹特征图谱精密度考察结果(相对峰面积)
[0131]
色谱峰编号12(s)精密度10.2921.00精密度20.2921.00精密度30.2941.00精密度40.2931.00精密度50.2931.00精密度60.2941.00rsd/％0.300.00
[0132]
特征图谱重复性考察
[0133]
取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照本实施例中前述的方法与色谱条件制备供试品溶液6份并进行液相色谱检测。以对香豆酸为s峰，计算其他特征峰与s峰相对保留时间及相对峰面积rsd值，结果参见图15和表12、表13。结果显示，特征峰相对保留时间与相
对峰面积rsd均小于2％，表明特征图谱重复性良好。图15中a、b、c、d、e、f、g分别表示制备第1份供试品至第6份供试品测得的图谱。
[0134]
表12姜竹茹特征图谱重现性考察结果(相对保留时间)
[0135]
色谱峰编号12(s)重现性10.4941.00重现性20.4931.00重现性30.4971.00重现性40.4961.00重现性50.5071.00重现性60.4971.00rsd/％1.000.00
[0136]
表13姜竹茹特征图谱精密度考察结果(相对峰面积)
[0137]
色谱峰编号12(s)重现性10.761.00重现性20.761.00重现性30.751.00重现性40.751.00重现性50.751.00重现性60.751.00rsd/％0.30.0
[0138]
特征图谱稳定性考察
[0139]
特征图谱稳定性考察：取姜竹茹配方颗粒(批号：20012711)，按照本实施例中前述的方法与色谱条件制备供试品溶液并进行高效液相色谱检测。分别在0h、3h、6h、9h、12h、15h、18h、21h、24h时进样测定，记录识别峰保留时间与峰面积。以对香豆酸为s峰，计算其他特征峰与s峰相对保留时间及相对峰面积rsd值，结果参见图16和表14、表15。结果显示，特征峰相对保留时间与相对峰面积rsd均小于2％，表明供试品的特征图谱在24h内稳定性良好。图16中a、b、c、d、e、f、g、h、i、j分别对应上述0h至24h内各进样时间点的进样结果。
[0140]
表14姜竹茹特征图谱稳定性考察结果(相对保留时间)
[0141]
色谱峰编号12(s)0h0.5011.003h0.5001.006h0.5011.009h0.5011.0012h0.5021.0015h0.4991.0018h0.4981.0021h0.4971.0024h0.4901.00
rsd/％0.70.0
[0142]
表22姜竹茹特征图谱稳定性试验结果(相对峰面积)
[0143]
色谱峰编号12(s)0h0.4371.003h0.4351.006h0.4321.009h0.4351.0012h0.4341.0015h0.4321.0018h0.4361.0021h0.4371.0024h0.4361.00rsd/％0.50.0
[0144]
以上所述，仅是本发明的几个示例性实施例，并非对本发明做任何形式的限制。虽然本发明以较佳的实施例揭示如上，然而并非用以限制本发明。任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案的范围内，利用上述揭示的技术内容做出些许的变动或修饰均等同于等效实施案例，均属于本发明技术方案范围内。