一种细胞因子的样本制备装置及制备方法与流程

文档序号:31404838发布日期:2022-09-03 06:07阅读:357来源:国知局
一种细胞因子的样本制备装置及制备方法与流程
一种细胞因子的样本制备装置及制备方法
【技术领域】
1.本发明涉及细胞因子样本制备技术领域,特别涉及一种细胞因子的样本制备装置及制备方法。


背景技术:

2.流式细胞术(flow cytometery,fcm)是利用流式分析仪(flow cytometer)对血液、各种体液、骨髓、活检材料、动植物的单细胞悬液、石蜡包埋组织中的有形成分,包括细胞、血小板、细胞器、精子、微生物,以及人工合成微球等的多种生物和物理、生化特性进行计数和定量分析技术。
3.随着科学技术的进步和普及,流式分析仪逐渐走进了医学临床应用领域,而今流式分析仪技术对于人体细胞免疫功能的评估以及各种血液病及肿瘤的诊断和治疗有重要作用,其在艾滋病、白血病以及肿瘤等疾病的诊断、病情监测、预后判断以及用药时机评估中发挥了关键作用。
4.在进行流式分析检测之前,必须对待检测的样本进行必要的处理和制备,其中待测样本制备的质量直接影响到数据检测的有效性和准确性。
5.目前,流式分析仪的待测样本通常是在测量前由人工处理样本,其制备流程极为繁琐,大致如下:
6.待测样本首先加入流式管(样本反应容器),然后人工吸取磁珠(试剂b)加入流式管,手持流式管放到涡旋混匀仪器上混匀,放入暗箱进行第一次反应孵育,孵育完成后进行第一次磁分离吸除上清液;人工加入标记抗体(试剂a),手持流式管放到涡旋仪器上再次混匀,再放入暗箱进行第二次反应孵育,孵育完成后进行第二次磁分离吸除上清液,手工加入磁珠稀释液并进行混匀再次进行磁分离吸除上清液并加入磁珠稀释液进行混匀此时样本才算制作完成。
7.人工操作,从开盖取样,到进行磁分离吸取上清液等,样本暴露在空气中,操作者尤其是疾控中心操作者,经常接触高危易传染样本,特别在涡旋混匀时,液面震荡会导致样本飞溅,操作者具有极高的生物风险。
8.手工操作步骤繁琐、易出错,并且不同操作者对操作移液器和混匀涡旋混匀仪器使用习惯不一致,常常有导致流式检测结果不一致的风险。
9.综上所述,现有的人工制备样本方式存在操作者易感染、步骤繁琐、操作者习惯不一致导致结果偏差、处理样本较多时操作者易疲劳等缺陷,尤其中小医院或者机构操作者对手工制备样本缺乏操作经验或者不熟练,会造成流式检测结果不准确,所以现有的手工样本制备需要改进。


技术实现要素:

10.为了克服上述问题,本发明提出一种可有效解决上述问题的细胞因子的样本制备装置及制备方法。
11.本发明解决上述技术问题提供的一种技术方案是:提供一种细胞因子的样本制备装置及制备方法,包括待测样本自动进样器组件、待测样本传输组件、样本反应容器组件、细胞因子试剂组件、细胞因子试剂传输组件、稀释液组件、稀释液传输组件、样本混匀组件、磁分离针组件和磁分离磁铁组件;所述待测样本自动进样器组件设于前侧,所述样本反应容器组件位于待测样本自动进样器组件后侧,所述待测样本传输组件位于待测样本自动进样器组件和样本反应容器组件上方;所述细胞因子试剂组件位于样本反应容器组件一侧,所述细胞因子试剂传输组件位于细胞因子试剂组件和样本反应容器组件后方;所述稀释液组件位于样本反应容器组件一侧,所述稀释液传输组件位于稀释液组件一侧,样本混匀组件位于样本反应容器组件一侧;所述磁分离针组件设置于样本反应容器组件上方,磁分离磁铁组件设置于样本反应容器组件下方,用于磁分离。
12.优选地,所述磁分离针组件包括磁分离针及针驱动组件,所述磁分离针由针驱动组件带动上下移动;所述磁分离磁铁组件包括磁分离磁铁及磁铁驱动组件,所述磁分离磁铁在磁铁驱动组件的作用下旋转,使磁分离磁铁一角接触样本反应容器组件中的样本管底部,吸附目标磁性微球。
13.优选地,所述待测样本自动进样器组件上设置有条码扫描及待测样本容器有无识别位、待测样本吸取位和y向到位传感器,所述y向到位传感器设置于待测样本自动进样器组件内侧边缘,条码扫描及待测样本容器有无识别位设置于y向到位传感器左侧,待测样本吸取位设置于条码扫描及待测样本容器有无识别位左侧。
14.优选地,所述稀释液组件包括稀释液容器a和稀释液旋转门,稀释液容器a悬挂在稀释液旋转门上,稀释液旋转门位于样本反应容器组件一侧。
15.优选地,所述稀释液传输组件包括传输泵a和稀释液传输针,传输泵a和稀释液传输针位于样本反应容器组件后方。
16.优选地,所述样本反应容器组件包括样本反应容器托架机构和二维运动机构,所述样本反应容器托架机构设于二维运动机构上。
17.优选地,所述二维运动机构包括旋转驱动机构和水平驱动机构,所述样本反应容器托架机构设于旋转驱动机构上,所述旋转驱动机构设于水平驱动机构上。
18.优选地,所述细胞因子试剂组件设置有细胞因子试剂储存容器托架、齿条和运动机构,所述细胞因子试剂储存容器托架设于运动机构上,所述细胞因子试剂储存容器托架上设有水平排列的槽孔,所述槽孔中放置有细胞因子试剂盒;所述细胞因子试剂盒包括至少两个储存容器,外侧储存容器存放微球,储存容器底部有一对翅,储存容器下端连接齿轮,齿轮与齿条离合。
19.优选地,所述样本混匀组件包括混匀旋转驱动机构、混匀顶起竖直驱动机构、混匀顶子、稀释液传输针以及稀释液针清洗装置,所述混匀旋转驱动机构设于混匀顶起竖直驱动机构上,所述混匀顶子设于混匀旋转驱动机构上,所述稀释液针清洗装置位于混匀顶子上方;所述稀释液针清洗装置套在所述稀释液传输针上,所述稀释液传输针固定在流式样本混匀组件的上;所述稀释液传输针、稀释液针清洗装置以及混匀顶子位于同一轴线上,所述稀释液针清洗装置和混匀顶子安装在同一根导轨上。
20.优选地,所述一种细胞因子的样本制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
21.步骤s1、将细胞因子试剂放置在细胞因子试剂组件的细胞因子试剂储存容器中;
22.步骤s2、在稀释液旋转门上的稀释液容器a中装载稀释液;
23.步骤s3、将装有待测样本的待测样本容器放置在待测样本自动进样器组件上;
24.步骤s4、将样本反应容器放置在样本反应容器组件上;
25.步骤s5、试剂b在细胞因子试剂储存容器中进行混匀;
26.步骤s6、将试剂a运动到试剂a吸取位或者将试剂b运动到试剂b吸取位;
27.步骤s7、样本反应容器组件将样本反应容器运动到细胞因子试剂针加样位;
28.步骤s8、通过细胞因子试剂传输组件中的摇臂旋转机构和摇臂升降机构将细胞因子试剂针运动到试剂b吸取位,然后将细胞因子试剂针运动到试剂b液面之下,并通过与之连接的传输泵获取试剂b为20-200ul;
29.步骤s9、通过细胞因子试剂传输组件中的摇臂旋转机构和摇臂升降机构将细胞因子试剂针运动到上述步骤s8中的细胞因子试剂针加样位,将细胞因子试剂针运动到待测样本反应容器底部,并通过与之连接的传输泵添加试剂b;
30.步骤s10、根据下一个所需传输的细胞因子试剂种类对细胞因子试剂针在试剂针清洗位进行必要的清洗;
31.步骤s11、样本反应容器组件将上述步骤s9中已加试剂b的样本反应容器运动至待测样本加入反应容器位;
32.步骤s12、待测样本自动进样器依次将待测样本运动至条码扫描及待测样本容器有无识别位、待测样本吸取位;待测样本是放置在开放的容器中,待测样本传输组件中的待测样本吸吐用样本针运动到待测样本液面下,待测样本传输组件通过与之相连的传输泵吸取待测样本0.5-2000ul;
33.步骤s13、通过待测样本吸吐用样本针在二维梁上运动到待测样本加入反应容器位,待测样本传输组件通过与之相连的传输泵将待测样本添加到样本反应容器中;
34.步骤s14、通过待测样本吸吐用样本针在二维梁上运动将样本针运行至样本针清洗位进行必要的清洗;
35.步骤s15、样本反应容器组件将已完成添加待测样本和试剂b的样本反应容器运动到反应容器混匀、加稀释液位,并通过样本混匀组件对该样本进行混匀;
36.步骤s16、等待试剂b进行反应所需要的孵育时间,孵育5-120分钟;
37.步骤s17、孵育结束后将样本反应容器转入磁分离磁铁组件进行磁吸附15-200s,微球被磁铁吸附后用磁分离针组件吸取上清液;
38.步骤s18、样本反应容器组件将已进行完磁分离的样本反应容器运动到细胞因子试剂针加样位;
39.步骤s19、通过细胞因子试剂传输组件中的摇臂旋转机构和摇臂升降机构将细胞因子试剂针运动到试剂a吸取位,然后将细胞因子试剂针运动到试剂a液面之下,并通过与之连接的传输泵获取试剂a为20-500ul;
40.步骤s20、通过细胞因子试剂传输组件中的摇臂旋转机构和摇臂升降机构将细胞因子试剂针运动到细胞因子试剂针加样位,将细胞因子试剂针运动到待测样本的容器底部,并通过与之连接的传输泵添加试剂a;
41.步骤s21、样本反应容器组件将已完成添加待测样本和试剂a的样本反应容器运动到反应容器混匀、加稀释液位,并通过样本混匀组件对该样本进行混匀;
42.步骤s22、等待试剂a进行反应所需要的孵育时间,孵育5-120分钟;
43.步骤s23、孵育结束后将样本反应容器转入磁分离磁铁组件进行磁吸附15-200s,微球被磁铁吸附后用磁分离针组件吸取上清液;
44.步骤s24、样本反应容器组件将上述已完成吸除上清液的样本反应容器运动到反应容器混匀、加稀释液位;
45.步骤s25、磁珠稀释液通过传输泵a吸取稀释液容器a中的稀释液,向已完成吸除上清液的样本反应容器中添加稀释液,并通过样本混匀组件对该样本进行混匀;
46.步骤s26、混匀结束后将样本反应容器转入磁分离磁铁组件进行磁吸附15-200s,微球被磁铁吸附后用磁分离针组件吸取上清液;
47.步骤s27、样本反应容器组件将上述已完成吸除上清液的样本反应容器运动到反应容器混匀、加稀释液位;
48.步骤s28、磁珠稀释液通过传输泵a吸取稀释液容器a中的稀释液,向已完成吸除上清液的样本反应容器中添加稀释液,并通过样本混匀组件对该样本进行混匀。
49.与现有技术相比,本发明的细胞因子的样本制备装置及制备方法可实现自动对待测样本进行混匀,自动从待测样本容器中获取待测样本,自动将待测样本添加到待测样本反应容器,并自动添加所需的多种流式试剂,自动对待测样本和各种抗体试剂的混合物进行混匀,保证在样本和试剂的反应过程的质量,完全避免任何人工干预,消除操作人员暴露于接触高危易传染的生物风险。操作人员只需要将待测样本容器放入待测样本容器架,将其放置在待测样本自动进样器组件上,按照设定的流程就可以获得制备好的待测样本,然后进行流式分析检测。
【附图说明】
50.图1为本发明细胞因子的样本制备装置的立体图;
51.图2为本发明细胞因子的样本制备装置的平面布局示意图;
52.图3为本发明细胞因子的样本制备装置的待测样本进样器组件平面图;
53.图4为本发明细胞因子的样本制备装置的待测样本传输组件示意图;
54.图5为本发明细胞因子的样本制备装置的样本反应容器组件示意图;
55.图6为本发明细胞因子的样本制备装置的细胞因子试剂传输组件示意图;
56.图7为本发明细胞因子的样本制备装置的细胞因子样本混匀组件示意图;
57.图8为本发明细胞因子的样本制备装置的细胞因子试剂混匀组件示意图;
58.图9为本发明细胞因子的样本制备装置的细胞因子磁分离针组件示意图;
59.图10为本发明细胞因子的样本制备装置的细胞因子磁分离磁铁组件示意图;
60.图11为本发明细胞因子的样本制备方法的两步孵育法流程图;
61.图12为本发明细胞因子的样本制备方法的一步孵育法流程图;
62.附图标注说明:
63.100—待测样本自动进样器组件;
64.110—待测样本容器架;
65.120—待测样本容器;
66.130—条码扫描及待测样本容器有无识别位;
67.140—待测样本吸取位;
68.150—y向到位传感器;
69.200—样本反应容器组件;
70.201—样本反应容器架水平运行轨迹;
71.202—样本反应容器架放取位;
72.203—样本反应容器架工作位;
73.204—样本反应容器架工作位旋转方向;
74.205—待测样本加入反应容器位;
75.206—细胞因子试剂针加样位;
76.207—反应容器混匀、加稀释液位;
77.208—样本反应容器;
78.209—磁分离位;
79.210—样本反应容器组件旋转机构;
80.220—样本反应容器组件水平机构;
81.230—样本反应容器托架机构;
82.240—样本反应容器架位置检测光耦;
83.250—样本反应容器架;
84.300—细胞因子试剂组件;
85.301—细胞因子试剂组件运动方向;
86.302—试剂b吸取位;
87.303—细胞因子试剂储存容器;
88.304—细胞因子试剂储存容器托架;
89.305—试剂a吸取位;
90.306—试剂盒;
91.307—试剂盒杯托;
92.308—试剂盒到位编码器;
93.309—试剂盒到位电机;
94.310—试剂盒纵向导轨;
95.311—试剂盒混匀齿条;
96.312—试剂组件固定板;
97.401—样本针清洗位
98.402—试剂针清洗位
99.500—细胞因子试剂传输组件;
100.501—试剂针旋转轨迹;
101.510—摇臂升降机构;
102.511—摇臂升降机构电机;
103.520—摇臂旋转机构;
104.521—摇臂旋转机构电机;
105.530—细胞因子试剂针;
106.600—样本混匀组件;
107.610—样本混匀旋转电机;
108.620—样本混匀升降电机;
109.630—样本混匀顶杆;
110.640—稀释液传输针;
111.650—稀释液针清洗装置;
112.700—待测样本传输组件;
113.710—待测样本传输前后电机;
114.720—待测样本吸取组件;
115.721—待测样本吸吐用样本针升降电机;
116.722—待测样本吸吐用样本针上下滑块座;
117.723—待测样本吸吐用样本针;
118.800—稀释液旋转门;
119.810—稀释液容器a;
120.900—传输泵;
121.910—传输泵a;
122.1010—磁分离针组件;
123.1011—磁分离针组件安装板;
124.1012—磁分离针安装件;
125.1013—磁分离针;
126.1014—磁分离针电机;
127.1020—磁分离磁铁组件;
128.1021—磁分离磁铁组件安装板;
129.1022—磁分离磁铁电机;
130.1023—磁分离磁铁固定件;
131.1024—磁分离磁铁。
【具体实施方式】
132.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施实例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明,并不用于限定本发明。
133.需要说明,本发明实施例中所有方向性指示(诸如上、下、左、右、前、后
……
)仅限于指定视图上的相对位置,而非绝对位置。
134.另外,在本发明中如涉及“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本发明的描述中,“多个”的含义是至少两个,例如两个,三个等,除非另有明确具体的限定。
135.请参阅图1和图2,本发明的细胞因子的样本制备装置及制备方法,包括待测样本自动进样器组件100、待测样本传输组件700、样本反应容器组件200、细胞因子试剂组件
300、细胞因子试剂传输组件500、稀释液组件、稀释液传输组件以及样本混匀组件600、磁分离针组件1010、磁分离磁铁组件1020。
136.所述待测样本自动进样器组件100设于前侧,所述样本反应容器组件200位于待测样本自动进样器组件100后侧,所述待测样本传输组件700位于待测样本自动进样器组件100和样本反应容器组件200上方。
137.所述细胞因子试剂组件300位于样本反应容器组件200一侧,所述细胞因子试剂传输组件500位于细胞因子试剂组件300和样本反应容器组件200后方。所述待测样本传输组件700用于将待测样本自动进样器组件100中的待测样本添加到样本反应容器组件200中。所述细胞因子试剂传输组件500用于将细胞因子试剂组件300的细胞因子试剂a和试剂b添加到样本反应容器组件200中。所述稀释液组件位于样本反应容器组件200一侧,所述稀释液传输组件位于稀释液组件一侧,稀释液组件用于将稀释液组件中的稀释液添加到样本反应容器组件200中。所述样本混匀组件600位于样本反应容器组件200一侧,样本混匀组件600用于将细胞因子样本反应容器组件中已添的待侧样本和细胞因子试剂a,或者已添的待侧样本和细胞因子试剂b,以及稀释液混合均匀。所述磁分离针组件1010设置于样本反应容器组件200上方,磁分离磁铁组件1020设置于样本反应容器组件200下方,用于磁分离。
138.所述稀释液组件包括稀释液容器a 810和稀释液旋转门800,稀释液容器a 810悬挂在稀释液旋转门800上,稀释液旋转门800位于样本反应容器组件200一侧。
139.所述稀释液传输组件包括传输泵a910和稀释液传输针640,传输泵a910和稀释液传输针640位于样本反应容器组件200后方。
140.请参阅图3,所述待测样本自动进样器组件100上放置有待测样本容器架110,所述待测样本容器架110上放置有待测样本容器120,所述待测样本容器120中放置有待测样本。所述待测样本容器120为不封闭的采血管。
141.所述待测样本自动进样器组件100上放置一个或若干个待测样本容器架110,待测样本容器架110在待测样本自动进样器组件100上移动,从右侧进左侧出。所述待测样本容器架110上放置一个或若干待测样本容器120。所述待测样本自动进样器组件100先将待测样本容器架110往y方向运动,然后再沿x方向运动。y方向运动为沿y方向整架平移。在沿x方向运动过程中,为每次移动一个待测样本容器120的位置,便于待测样本传输组件700吸取待测样本。
142.所述待测样本自动进样器组件100上设置有条码扫描及待测样本容器有无识别位130、待测样本吸取位140和y向到位传感器150,所述y向到位传感器150设置于待测样本自动进样器组件100内侧边缘,条码扫描及待测样本容器有无识别位130设置于y向到位传感器150左侧,待测样本吸取位140设置于条码扫描及待测样本容器有无识别位130左侧。待测样本容器架110沿y向到内侧后,触发y向到位传感器150,待测样本容器架110沿x方向移动,每次沿x方向移动一个待测样本容器120的位置。每个待测样本容器120先移动到条码扫描及待测样本容器有无识别位130,进行试管有无及条码扫描检测。然后待测样本容器架110沿x方向移动一个待测样本容器120的位置,到达待测样本吸取位140,待测样本传输组件700将在该位置对待测样本容器120取样。每个待测样本容器120在待测样本容器架110的带动下,依次经过条码扫描及待测样本容器有无识别位130和待测样本吸取位140。所述待测样本自动进样器组件100左侧设置有待测样本容器架拨爪(图中未表示),待测样本容器架
110在待测样本自动进样器组件100沿x方向的运动到左侧,通过待测样本容器架拨爪(图中未表示)沿r向转动,带动待测样本容器架110离开x方向,每顶开一个待测样本容器架110后待测样本容器架拨爪(图中未表示)沿r反向复位。待测样本容器120从条码扫描及待测样本容器有无识别位130沿x方向移动一个待测样本容器120位置后,到达待测样本吸取位140。
143.请参阅图4,所述待测样本传输组件700包括二维梁,所述二维梁上设有待测样本吸取组件720和待测样本传输前后电机710,待测样本传输前后电机710通过同步轮和同步带驱动待测样本吸取组件720沿二维梁前后移动。所述待测样本吸取组件720用于吸取样本。
144.所述待测样本吸取组件720上滑动设置有待测样本吸吐用样本针上下滑块座722,所述待测样本吸吐用样本针上下滑块座722可在待测样本吸取组件720上上下滑动,所述待测样本吸吐用样本针上下滑块座722上固定有待测样本吸吐用样本针723,所述传输泵a 910一侧设置有传输泵900,所述待测样本吸吐用样本针723通过管路和传输泵900连接。所述待测样本吸取组件720上设置有待测样本吸吐用样本针升降电机721,待测样本吸吐用样本针升降电机721驱动待测样本吸吐用样本针上下滑块座722上下滑动。
145.工作时,待测样本吸取组件720在待测样本传输前后电机710的驱动下,使待测样本吸吐用样本针723运动到待测样本吸取位140的正上方。待测样本吸吐用样本针升降电机721驱动待测样本吸吐用样本针上下滑块座722向下运动,待测样本吸吐用样本针上下滑块座722带动待测样本吸吐用样本针723进入待测样本容器120容器中,待测样本吸吐用样本针723运行到待测样本容器120液面之下,连接待测样本吸吐用样本针723的传输泵900吸取待测样本容器120内的样本。待测样本吸吐用样本针723运行到上位后,在待测样本传输前后电机710的驱动下,使待测样本吸吐用样本针723运动到样本反应容器组件200的待测样本加入反应容器位205的正上方(如图2)。待测样本吸吐用样本针723在待测样本吸吐用样本针升降电机721驱动向下运动,连接待测样本吸吐用样本针723的传输泵900向待测样本加入反应容器位205上的流式样本反应容器208中传输待测样本。
146.请参阅图5,所述样本反应容器组件200包括样本反应容器托架机构230和二维运动机构,所述样本反应容器托架机构230设于二维运动机构上。所述二维运动机构包括旋转驱动机构210和水平驱动机构220,所述样本反应容器托架机构230设于旋转驱动机构210上,所述旋转驱动机构210设于水平驱动机构220上。
147.所述样本反应容器托架机构230上设置有样本反应容器结构,样本反应容器结构设置有样本反应容器架250,所述样本反应容器架250设置有若干环形排列的孔,所述的若干环形排列的孔可以插入样本反应容器208。
148.工作时,水平驱动机构220带动旋转驱动机构210左右移动。如图2所示,在样本反应容器架放取位202放入样本反应容器架250,沿着样本反应容器架水平运行轨迹201运行到样本反应容器架工作位203。
149.请参阅图2和图5,旋转驱动机构210带动设置于其上的样本反应容器架250沿样本反应容器架工作位旋转方向204做旋转运动。样本反应容器托架机构230上还设有样本反应容器架位置检测光耦240,用于检测样本反应容器架250的移动位置。
150.请参阅图2,样本反应容器架250在样本反应容器架工作位203时,设置有四个工作位:待测样本加入反应容器位205、细胞因子试剂针加样位206、磁分离位209以及反应容器
混匀、加稀释液位207,样本反应容器架250沿样本反应容器架工作位旋转方向204任意位置的待测样本反应容器208可以在四个工位之间进行切换。
151.请参阅图1和图2,所述细胞因子试剂组件300设置有细胞因子试剂储存容器托架304、齿条和运动机构,所述细胞因子试剂储存容器托架304设于运动机构上,所述细胞因子试剂储存容器托架304上设有水平排列的槽孔,所述槽孔中放置有细胞因子试剂试剂盒306。所述细胞因子试剂盒306最少有两个储存容器303,外侧储存容器303存放微球,其容器底部有一对翅,容器下端连接齿轮,齿轮与齿条离合。试剂盒306在运动机构作用下前后往复运动,齿条固定不动,齿轮做正反旋转运动,微球在容器底部翅的作用下,完成混匀。试剂盒306在运动机构的作用下,使每个试剂盒中的试剂有唯一的吸取试剂位。
152.所述细胞因子试剂组件300上设置有细胞因子试剂针吸取位,分别为试剂b吸取位302和试剂a吸取位305。所述运动机构采用直线往复机构,所述细胞因子试剂储存容器托架304按照图2中细胞因子试剂组件运动方向301进行往复运动,放置在任意排列的槽孔中的细胞因子试剂储存容器303可以运动到试剂b吸取位302或者试剂a吸取位305。细胞因子试剂储存容器303中的试剂a为一种抗体试剂,试剂b为一种编码微球试剂。
153.所述细胞因子试剂组件300上还设置有温度控制机构,用于对细胞因子试剂储存容器303中的试剂a和试剂b进行温度控制,以保证试剂长期活性。
154.请参阅图8,所述细胞因子试剂组件300包括试剂盒306、试剂盒杯托307、试剂盒到位编码器308、试剂盒到位电机309、试剂盒纵向导轨310、试剂盒混匀齿条311和试剂盒固定板312,所述试剂盒杯托307安装在试剂盒纵向导轨310上,导轨310安装在试剂盒固定板312上,试剂盒到位电机309及试剂盒到位编码器308安装在试剂盒固定板312上,试剂盒到位电机309可带动试剂盒杯托307沿试剂盒纵向导轨310纵向往复运动;所述试剂盒混匀齿条311安装在试剂盒固定板312上,试剂盒306安装在试剂盒杯托307上,试剂盒磁珠位带有混匀齿轮与试剂盒混匀齿条311啮合,当试剂盒到位电机309带动试剂盒杯托307沿试剂盒纵向导轨310纵向往复运动时试剂盒混匀齿条311带动试剂盒磁珠位旋转混匀。在取试剂时试剂盒到位电机309带动试剂盒306到位,试剂盒到位编码器308反馈保证试剂盒到位准确。
155.请参阅图6,所述细胞因子试剂传输组件500设有细胞因子试剂针530、摇臂升降机构510和摇臂旋转机构520,摇臂升降机构510和摇臂旋转机构520,形成一个上下及水平方向的三维运动机构,细胞因子试剂针530通过管路和传输泵900连接。所述摇臂旋转机构520和摇臂升降机构510设置在细胞因子试剂传输组件500的机架上,所述所述细胞因子试剂传输组件500还包括摇臂升降机构电机511和摇臂旋转机构电机521,摇臂升降机构电机511驱动摇臂升降机构510升降,摇臂旋转机构电机521驱动摇臂旋转机构520旋转。所述细胞因子试剂针530设于摇臂旋转机构520上,所述细胞因子试剂针530可以同时升降和旋转运动。
156.请参阅图2,工作时,所述细胞因子试剂针530可以沿试剂针旋转轨迹501运动,细胞因子试剂针530先从试剂针清洗位402(初始位置)旋转到试剂b吸取位302或者试剂a吸取位305,然后向下运动,细胞因子试剂针530进入细胞因子试剂储存容器303中,进行液面检测,细胞因子试剂针530下探到液面以下,通过传输泵900负压吸取细胞因子试剂a或者试剂b。细胞因子试剂针530向上运动,然后旋转运动到细胞因子试剂针加样位206,细胞因子试剂针530向下运动,试剂针接近待测样本反应容器208底部,通过传输泵900传输细胞因子试剂a或者试剂b到待测样本反应容器208中。细胞因子试剂针530向上运动,然后旋转运动到
试剂针清洗位402,细胞因子试剂针530向下运动,进入清洗池清洗、干燥。细胞因子试剂针530向上运动,恢复到初始位置。在待测样本加入反应容器位205位置加完待测样本、细胞因子试剂针加样位206加完细胞因子试剂b,然后旋转到反应容器混匀、加稀释液位207。
157.请参阅图7,所述样本混匀组件600包括混匀旋转驱动机构610、混匀顶起竖直驱动机构620、混匀顶子630、稀释液传输针640以及稀释液针清洗装置650,所述混匀旋转驱动机构610设于混匀顶起竖直驱动机构620上,所述混匀顶子630设于混匀旋转驱动机构610上,所述稀释液针清洗装置650位于混匀顶子630上方,并且有弹簧向下拉住稀释液针清洗装置650。所述稀释液针清洗装置650套在所述稀释液传输针640上,所述稀释液传输针640固定在流式样本混匀组件600的框架上。所述稀释液传输针640、稀释液针清洗装置650以及混匀顶子630位于同一轴线上,所述稀释液针清洗装置650和混匀顶子630安装在同一根导轨上,可以沿同一根导轨上下运动。
158.请参阅图2和图7,工作时,所述混匀顶子630将顶出位于反应容器混匀、加稀释液位207位置上的样本反应容器208,同时稀释液针清洗装置650夹住样本反应容器208的上口,待测样本反应容器208被顶出样本反应容器架250,样本反应容器208被夹紧在稀释液针清洗装置650和混匀顶子630之间,混匀旋转驱动机构610带动样本反应容器208进行旋转混匀待测样本和细胞因子试剂b。完成混匀后,混匀顶子630向下运动,混匀顶子630和稀释液针清洗装置650夹住样本反应容器208回退到样本反应容器架250。依次完成加待测样本、细胞因子试剂b及混匀后,装有待测样本和细胞因子试剂b混合物的样本反应容器208静止在样本反应容器架250上孵育。
159.所述磁分离针组件1010包括磁分离针1013及针驱动组件,所述磁分离针1013由针驱动组件带动上下移动;所述磁分离磁铁组件1020包括磁分离磁铁1024及磁铁驱动组件,所述磁分离磁铁1024在磁铁驱动组件的作用下旋转,使磁分离磁铁1024一角接触样本反应容器组件200中的样本管底部,吸附目标磁性微球。所述磁铁分离针1013接触液面,磁分离针1013下降的过程中吸取样本管中的液体,直到针接触样本管管底,针吸干所有液体,所述磁分离针1013在针驱动组件作用下上移出样本管。所述磁分离磁铁1024在磁铁驱动组件的作用下,绕固定轴旋转,使磁分离磁铁1024旋转回默认的初始位置(磁铁与样本管平行位置)。
160.请参阅图9,所述磁分离针组件1010包括磁分离针组件安装板1011、磁分离针安装件1012、磁分离针1013和磁分离针电机1014,形成一个竖直方向的一维运动机构。所述磁分离针安装件1012安装在磁分离针组件安装板1011竖直导轨滑块上;所述磁分离针1013安装在磁分离针安装件1012上,所述磁分离针1013可由磁分离针电机1014带动上下移动,进行磁分离针下探吸液动作。
161.请参阅图10,所述磁分离磁铁组件1020包括磁分离磁铁组件安装板1021、磁分离磁铁电机1022、磁分离磁铁固定件1023和磁分离磁铁1024,形成一个垂直平面的一维旋转运动机构。所述磁分离磁铁电机1022安装在磁分离磁铁组件安装板1021上;所述磁分离磁铁固定件1023安装在磁分离磁铁电机1022上;所述磁分离磁铁1024安装在磁分离磁铁固定件1023上。磁分离时通过磁分离磁铁电机1022带动磁分离磁铁固定件1023旋转上移实现磁分离磁铁1024与试管接触磁分离,磁分离完成时通过磁分离磁铁电机1022带动磁分离磁铁固定件1023旋转下移实现磁分离磁铁1024与试管远离的动作。磁分离时先由磁分离磁铁电
机1022带动磁分离磁铁1024上移接触磁分离样本管,磁分离15-200s后,磁分离针电机1014带动磁分离针1013下移进入磁分离样本管中吸出上清液。之后磁分离针电机1014带动磁分离针1013上移移出样本管,磁分离磁铁电机1022带动磁分离磁铁固定件1023旋转下移实现磁分离磁铁1024与试管远离的动作。从而完成一次磁分离清洗动作,之后将样本管转移至样本混匀组件600下补稀释液。
162.请参阅图2,磁分离完成后装有待测样本和细胞因子试剂b混合物的样本反应容器208,运行到细胞因子试剂针加样位206,通过细胞因子试剂针530加入细胞因子试剂a然后按照上述混匀。完成混匀后装有待测样本、细胞因子试剂a和试剂b的样本反应容器208回退到流式样本反应容器架250上孵育。
163.孵育完成后将样本反应容器208转入磁分离磁铁组件1020中进行磁分离进行微球磁吸附,微球磁吸附后用磁分离针组件1010中进行吸上清。
164.上述磁分离完成后的样本反应容器208,运行到反应容器混匀、加稀释液位207,通过稀释液针清洗装置650加入稀释液并进行混匀。
165.混匀完成后将样本反应容器208转入磁分离磁铁组件1020中进行微球磁吸附,微球磁吸附后用磁分离针组件1010中进行吸上清。
166.上述磁分离完成后的样本反应容器208,运行到反应容器混匀、加稀释液位207,通过650加入稀释液并进行混匀。等待所有样本反应容器208完成稀释液的加入和混匀后,样本反应容器架250沿着样本反应容器架水平运行轨迹201回退到样本反应容器架取放位202。
167.本发明的细胞因子的样本制备装置,可以自动从待测样本容器中获取待测样本,自动将待测样本添加到待测样本反应容器,并自动添加所需的多种细胞因子试剂,自动对待测样本和各种抗体试剂的混合物进行混匀,保证在样本和试剂的反应及孵育过程的质量,避免任何人工干预,消除操作人员暴露于接触高危易传染的生物风险之中。
168.本发明试剂磁珠采用直线往复的混匀方式,占用空间小,混匀效果均一。本发明试剂到位采用电机与编码器配合,到位精度高,重复性好。本发明试管磁分离及针吸废液动作互不干涉,具有速度快、可靠性高、可实现试管管内磁分离的优点。
169.所述细胞因子试剂储存容器303设置有一个或两个以上竖直排列的试剂容器,试剂容器中装有细胞因子试剂a和试剂b。
170.本发明还包括用于清洗细胞因子试剂传输针的清洗池,所述清洗池位于细胞因子试剂传输组件500旁边。
171.所述稀释液传输组件设置有稀释液加样针、稀释液加样运动机构和加样针清洗装置,进一步的,所述稀释液加样针设于稀释液加样运动机构上。
172.本发明重点所要解决的是在为流式分析提供一种全自动的细胞因子待测样本制备装置,自动从待测样本容器中获取待测样本,自动将待测样本添加到待测样本反应容器,并自动添加所需的多种试剂,自动对待测样本和各种抗体试剂的混合物进行混匀,保证在样本和试剂的反应及孵育过程的质量,完全避免任何人工干预,消除操作人员暴露于接触高危易传染的生物风险之中。采用本发明替代手工,加样精度高、一致性好,用户只需要添加待测样本、待测样本容器、试剂a和b,采用本发明的细胞因子样本制备装置会按照设定的流程及方法自动完成操作全部的样本制备。
173.本发明的细胞因子的样本制备方法,可分为两步孵育法和一步孵育法。其中两步孵育法的基本流程包括:准备校准品/样品—捕获微球混匀—吸取微球到试管中—吸取样本到试管中—轻轻混匀—避光孵育—磁分离—吸除上清—吸取标记抗体到试管中—轻轻混匀—温室避光孵育—磁分离—吸除上清—吸取磁珠稀释液到试管中—轻轻混匀—磁分离—吸除上清—吸取磁珠稀释液到试管中—轻轻混匀—上机测试。
174.一步孵育法的基本流程包括:准备校准品/样品—捕获微球混匀—吸取微球到试管中—吸取样本到试管中—吸取标记抗体到试管中—温室避光孵育—磁分离—吸除上清—吸取磁珠稀释液到试管中—轻轻混匀—磁分离—吸除上清—吸取磁珠稀释液到试管中—轻轻混匀—上机测试。
175.具体地,本发明的细胞因子的样本制备方法,采用本发明的细胞因子的样本制备装置,包括如下步骤:
176.步骤s1、将细胞因子试剂放置在细胞因子试剂组件300的细胞因子试剂储存容器303中;
177.步骤s2、在稀释液旋转门800上的稀释液容器a810中装载稀释液;
178.步骤s3、将装有待测样本的待测样本容器120放置在待测样本自动进样器组件100上;
179.步骤s4、将样本反应容器208放置在样本反应容器组件200上;
180.步骤s5、试剂b在细胞因子试剂储存容器303中进行混匀;
181.步骤s6、将试剂a运动到试剂a吸取位305或者将试剂b运动到试剂b吸取位302;
182.步骤s7、样本反应容器组件200将样本反应容器208运动到细胞因子试剂针加样位206;
183.步骤s8、通过细胞因子试剂传输组件500中的摇臂旋转机构520和摇臂升降机构510将细胞因子试剂针530运动到试剂b吸取位302,然后将细胞因子试剂针530运动到试剂b液面之下,并通过与之连接的传输泵900获取试剂b为20-200ul;
184.步骤s9、通过细胞因子试剂传输组件500中的摇臂旋转机构520和摇臂升降机构510将细胞因子试剂针530运动到上述步骤s8中的细胞因子试剂针加样位206,将细胞因子试剂针530运动到待测样本反应容器208底部,并通过与之连接的传输泵900添加试剂b;
185.步骤s10、根据下一个所需传输的细胞因子试剂种类对细胞因子试剂针530在试剂针清洗位402进行必要的清洗;
186.步骤s11、样本反应容器组件200将上述步骤s9中已加试剂b的样本反应容器208运动至待测样本加入反应容器位205;
187.步骤s12、待测样本自动进样器100依次将待测样本运动至条码扫描及待测样本容器有无识别位130、待测样本吸取位140;待测样本是放置在开放的容器中,待测样本传输组件700中的待测样本吸吐用样本针723运动到待测样本液面下,待测样本传输组件700通过与之相连的传输泵900吸取待测样本0.5-2000ul;
188.步骤s13、通过待测样本吸吐用样本针723在二维梁上运动到待测样本加入反应容器位205,待测样本传输组件700通过与之相连的传输泵900将待测样本添加到样本反应容器208中;
189.步骤s14、通过待测样本吸吐用样本针723在二维梁上运动将样本针运行至样本针
清洗位401进行必要的清洗;
190.步骤s15、样本反应容器组件200将已完成添加待测样本和试剂b的样本反应容器208运动到反应容器混匀、加稀释液位207,并通过样本混匀组件600对该样本进行混匀;
191.步骤s16、等待试剂b进行反应所需要的孵育时间,孵育5-120分钟;
192.步骤s17、孵育结束后将样本反应容器208转入磁分离磁铁组件1020进行磁吸附15-200s,微球被磁铁吸附后用磁分离针组件1010吸取上清液;
193.步骤s18、样本反应容器组件200将已进行完磁分离的样本反应容器208运动到细胞因子试剂针加样位206;
194.步骤s19、通过细胞因子试剂传输组件500中的摇臂旋转机构520和摇臂升降机构510将细胞因子试剂针530运动到试剂a吸取位305,然后将细胞因子试剂针530运动到试剂a液面之下,并通过与之连接的传输泵900获取试剂a为20-500ul;
195.步骤s20、通过细胞因子试剂传输组件500中的摇臂旋转机构520和摇臂升降机构510将细胞因子试剂针530运动到细胞因子试剂针加样位206,将细胞因子试剂针530运动到待测样本的容器208底部,并通过与之连接的传输泵900添加试剂a;
196.步骤s21、样本反应容器组件200将已完成添加待测样本和试剂a的样本反应容器208运动到反应容器混匀、加稀释液位207,并通过样本混匀组件600对该样本进行混匀;
197.步骤s22、等待试剂a进行反应所需要的孵育时间,孵育5-120分钟;
198.步骤s23、孵育结束后将样本反应容器208转入磁分离磁铁组件1020进行磁吸附15-200s,微球被磁铁吸附后用磁分离针组件1010吸取上清液;
199.步骤s24、样本反应容器组件200将上述已完成吸除上清液的样本反应容器208运动到反应容器混匀、加稀释液位207;
200.步骤s25、磁珠稀释液通过传输泵a910吸取稀释液容器a 810中的稀释液,向已完成吸除上清液的样本反应容器208中添加稀释液,并通过样本混匀组件600对该样本进行混匀;
201.步骤s26、混匀结束后将样本反应容器208转入磁分离磁铁组件1020进行磁吸附15-200s,微球被磁铁吸附后用磁分离针组件1010吸取上清液;
202.步骤s27、样本反应容器组件200将上述已完成吸除上清液的样本反应容器208运动到反应容器混匀、加稀释液位207;
203.步骤s28、磁珠稀释液通过传输泵a910吸取稀释液容器a 810中的稀释液,向已完成吸除上清液的样本反应容器208中添加稀释液,并通过样本混匀组件600对该样本进行混匀。
204.与现有技术相比,本发明的细胞因子的样本制备装置及制备方法可实现自动对待测样本进行混匀,自动从待测样本容器中获取待测样本,自动将待测样本添加到待测样本反应容器,并自动添加所需的多种流式试剂,自动对待测样本和各种抗体试剂的混合物进行混匀,保证在样本和试剂的反应过程的质量,完全避免任何人工干预,消除操作人员暴露于接触高危易传染的生物风险。操作人员只需要将待测样本容器放入待测样本容器架,将其放置在待测样本自动进样器组件上,按照设定的流程就可以获得制备好的待测样本,然后进行流式分析检测。
205.以上所述仅为本发明的较佳实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是在本
发明的构思之内所作的任何修改,等同替换和改进等均应包含在本发明的专利保护范围内。
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