专利名称：外加电场蛋白快速吸附仪的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种将蛋白吸附于硝酸纤维素膜的仪器。
通过免疫反应检测蛋白的方法从沉淀反应到以96孔聚苯乙烯塑料板为载体的酶联免疫分析(ELISA)是一个质的飞跃，但是，由于聚苯乙烯塑料板吸附能力有限，后者的应用范围仍然受到很多限制，主要是抗原纯度及表面活性剂对检测结果影响最大，尤其是表面活性剂更令人烦恼。后来出现的以硝酸纤维素膜为载体的斑点免疫分析方法，因硝酸纤维素膜对蛋白的吸附能力远大于聚苯乙烯塑料板，可以直接用混合蛋白抗原进行测试，但是，其效果仍然受到表面活性剂的严重影响。而且，ELISA方法和斑点免疫分析方法均较费时，仅抗原吸附时间便达到24小时至48小时，随后的免疫测试时间还需2小时以上。此后又出现了以负压吸引为基础的酶联免疫过滤分析(ELIFA)方法，该方法仍然很容易受表面活性剂的影响，且各孔过滤速度很难一致，稳定性较差，至今未被广泛应用。
本发明的目的在于克服上述表面活性剂的影响，提供一种蛋白吸附仪，它可将含有任何成份的蛋白高效地吸附于硝酸纤维素膜上，且吸附速度快，然后通过免疫反应检测各种蛋白，做到操作简便，测试快捷。
本发明的目的是通过下述技术方案来实现的外加电场蛋白快速吸附仪，具有盖板、机壳，其技术方案是它还具有设于机壳内的上缓冲液槽顶板及其底部硅胶片、上缓冲液槽底板及其顶部硅胶片、正负铂丝电极，用做下缓冲液槽的机壳内底端具有铂丝电极正极，铂丝电极正极由多个弯折段组成，上缓冲液槽底板设于机壳内能防止其与铂丝电极正极接触的支撑体上，硅胶片固定贴于该上缓冲液槽底板的顶部，二者上面的多个纵向小孔位置相对应，均按照国际统一的96孔微板标准排列，在二者位置相对应的每个小孔内均安装一个带有中心通孔的柱体，柱体具有设于硅胶片外表面的端面，上缓冲液槽顶板通过可拆卸的连接件固定于上缓冲液槽底板的上面，上缓冲液槽顶板底部固定贴有硅胶片，二者上面的多个纵向小孔位置相对应，均按照国际统一的96孔微板标准排列，铂丝电极负极由多个弯折段组成，它位于所述多个纵向小孔形成的区域内，任一纵向小孔至邻近电极弯折段的距离一致。
上述技术方案中，支撑体为设于机壳内底端两侧的凸台。设于上缓冲液槽顶板底部的硅胶片和设于上缓冲液槽底板顶部的硅胶片分别由上缓冲液槽底板上的对角设置的两个固定柱限位固定。上述可拆卸的连接件为分别穿过上缓冲液槽顶板与上缓冲液槽底板四个端角螺纹孔的四个螺栓。
本发明由于它还具有设于机壳内的上缓冲液槽顶板及其底部硅胶片、上缓冲液槽底板及其顶部硅胶片、正负铂丝电极。这样它通过电场的作用，可将多份含有任何成份的蛋白高效地吸附于硝酸纤维素膜上，然后通过免疫反应检测各种蛋白，完全克服了表面活性剂的影响，且吸附速度极快，仅需10分钟。可直接应用含表面活性剂的全细胞提取物进行测试，操作快捷，从蛋白吸附到免疫反应全过程仅需45-60分钟。本发明的仪器与现有技术比较所具有的有益效果如下表所示
<p>本发明下面将结合附图作进一步详述
图1为本发明的结构示意图。
图2为本发明中用做下缓冲液槽的机壳的结构示意图。
图3为上缓冲液槽底板及其顶部硅胶片的结构示意图。
图4为柱体的结构示意图。
图5为上缓冲液槽顶板及其底部硅胶片的结构示意图。
如图1、图2所示，本发明具有盖板1、机壳4、设于机壳内的上缓冲液槽顶板10及其底部硅胶片19、上缓冲液槽底板9及其顶部硅胶片15、正负铂丝电极12和7，用做下缓冲液槽的机壳4内底端具有铂丝电极正极12，铂丝电极正极12由多个弯折段组成，该电极具有接线柱2′。上缓冲液槽底板9设于机壳内能防止其与铂丝电极正极接触的支撑体11上，支撑体11为设于机壳4内底端两侧的凸台。如图3、图4所示，硅胶片15固定贴于该上缓冲液槽底板9的顶部，二者上面的多个纵向小孔14、13位置相对应，均按照国际统一的96孔微板标准排列，在二者位置相对应的每个小孔内均安装一个带有中心通孔的柱体17，柱体17具有设于硅胶片15外表面的端面16。如图1、图3、图5所示，上缓冲液槽顶板10通过可拆卸的连接件5固定于上缓冲液槽底板9的上面，可拆卸的连接件5为穿过上缓冲液槽顶板与上缓冲液槽底板四个端角螺纹孔5″、5′的四个螺栓。上缓冲液槽顶板10底部固定贴有硅胶片19，二者上面的多个纵向小孔接件5为穿过上8、18位置相对应，均按照国际统一的96孔微板标准排列，铂丝电极负极7由多个弯折段组成，它位于所述多个纵向小孔8形成的区域内，任一纵向小孔8至邻近电极弯折段的距离一致。铂丝电极负极7具有接线柱3′。上述设于上缓冲液槽顶板底部的硅胶片19和设于上缓冲液槽底板顶部的硅胶片15分别由上缓冲液槽底板上的对角设置的两个固定柱6′限位固定。此时两个固定柱6′分别插入两个硅胶片的孔6″及上缓冲液槽顶板上的孔6与其配合。接线柱2′和3′分别与盖板下面的导线连接柱2和3相插接。上述盖板、机壳、上缓冲液槽顶板、上缓冲液槽底板材质为有机玻璃，柱体材质为塑料。
本发明使用前，应先将各部件拆开，然后再安装使用，其方法是将上缓冲液槽底板顶部的硅胶片15贴于其顶部，使各个纵向小孔14、13对位好，在各小孔中插入柱体17。将一定量缓冲液倒入下缓冲液槽。再小心将上缓冲液槽底板9放入下缓冲液槽内，补充液体使其淹没柱体17顶部的小孔。小心将用缓冲液浸湿的硝酸纤维素膜贴于柱体顶部(即端面)，勿使气泡存留。将上缓冲液槽顶板底部的硅胶片15贴于上述硝酸纤维素膜表面，再放入上缓冲液槽顶板10并用螺栓5固定牢固。将缓冲液加入上缓冲液槽顶板的各纵向小孔8中，补充缓冲液使其淹没正负铂电极丝。将溶于样品缓冲液的蛋白质加入上缓冲液槽顶板各纵向小孔中，盖好盖板，接通电源，电流在200mA作用10分钟足够。取下硝酸纤维素膜，进行免疫测试。
权利要求
1.一种外加电场蛋白快速吸附仪，具有盖板、机壳，其特征在于它还具有设于机壳(4)内的上缓冲液槽顶板(10)及其底部硅胶片(19)、上缓冲液槽底板(9)及其顶部硅胶片(15)、正负铂丝电极(12)和(7)，用做下缓冲液槽的机壳(4)内底端具有铂丝电极正极(12)，铂丝电极正极(12)由多个弯折段组成，上缓冲液槽底板(9)设于机壳内能防止其与铂丝电极正极接触的支撑体(11)上，硅胶片(15)固定贴于该上缓冲液槽底板(9)的顶部，二者上面的多个纵向小孔(14、13)位置相对应，均按照国际统一的96孔微板标准排列，在二者位置相对应的每个小孔内均安装一个带有中心通孔的柱体(17)，柱体(17)具有设于硅胶片(15)外表面的端面(16)，上缓冲液槽顶板(10)通过可拆卸的连接件(5)固定于上缓冲液槽底板(9)的上面，上缓冲液槽顶板(10)底部固定贴有硅胶片(19)，二者上面的多个纵向小孔(8、18)位置相对应，均按照国际统一的96孔微板标准排列，铂丝电极负极(7)由多个弯折段组成，它位于所述多个纵向小孔(8)形成的区域内，任一纵向小孔(8)至邻近电极弯折段的距离一致。
2.根据权利要求1所述的吸附仪，其特征在于支撑体(11)为设于机壳(4)内底端两侧的凸台。
3.根据权利要求1所述的吸附仪，其特征在于设于上缓冲液槽顶板底部的硅胶片(19)和设于上缓冲液槽底板顶部的硅胶片(15)分别由上缓冲液槽底板上的对角设置的两个固定柱(6′)限位固定。
4.根据权利要求1所述的吸附仪，其特征在于上述可拆卸的连接件(5)为分别穿过上缓冲液槽顶板与上缓冲液槽底板四个端角螺纹孔(5″、5′)的四个螺栓。
全文摘要
一种外加电场蛋白快速吸附仪,具有盖板、机壳,其特点是它还具有设于机壳内的多孔上缓冲液槽顶板及其底部硅胶片、多孔上缓冲液槽底板及其顶部硅胶片、正负铂丝电极。它通过电场的作用,可将多份含有任何成份的蛋白高效地吸附于硝酸纤维素膜上,然后通过免疫反应检测各种蛋白,完全克服了表面活性剂的影响,且吸附速度极快,仅需10分钟。可直接应用含表面活性剂的全细胞提取物进行测试,操作快捷。
文档编号G01N33/53GK1247983SQ99119099
公开日2000年3月22日 申请日期1999年9月10日 优先权日1999年9月10日
发明者邹静 申请人:邹静