分离剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及具有特定的载体、和通过化学键合担载于该载体表面的特定的配体的 分离剂。
【背景技术】
[0002] 在医药、农药、生化学关联的产业领域中，分离?纯化作为生产对象的目标物质是 极其重要的课题，作为这样的分离技术，使用分离剂的方法是自古以来实行的方法。作为这 样的分离剂将作为分离对象的物质进行分离的原理，有利用分离剂与目标物质的亲和性的 原理、或利用分离剂与目标物质的光学活性的原理。
[0003] 作为上述分离剂，以往已知有：将全多孔性的硅胶（シy力^少）作为载体，根据 作为分离对象的目标物质，在其载体上担载各种配体而得的分离剂。
[0004] 作为使用全多孔性的硅胶作为载体而获得的分离剂，例如已知有担载光学活性聚 合物而得的分离剂。使用这样的光学活性聚合物担载于载体而得的分离剂时，可以进行光 学拆分。
[0005] 作为上述光学活性聚合物，有人报道了 ：将纤维素等的多糖进行了衍生物化的多 糖衍生物（例如，参见专利文献1)、光学活性的聚（甲基）丙烯酰胺（例如，参见专利文献 2)、光学活性的聚氨基酸（例如，参见专利文献3)、光学活性的聚酰胺（例如，参见专利文献 4 和 5) 〇
[0006] 另一方面，还已知有：光学活性的低分子化合物（例如，具有联萘结构或冠醚结构 的化合物）通过化学键合与载体结合而得的光学异构体的分离剂（例如，参见专利文献6)。
[0007] 另外，还有人报道了 ：将由具有交联结构的合成高分子构成的粒子作为载体，其载 体上担载作为配体的蛋白质或具有糖链的糖蛋白质的分离剂（例如，参见专利文献7)。
[0008] 另外，对于使核酸担载于载体而得的物质，例如已知有：在玻璃基板上经由壳聚糖 将DNA固定化的技术（例如，参见专利文献8)。
[0009] 并且，作为用于鉴定离子性高分子而使用的芯片，还已知：将DNA或RNA等担载于 玻璃之类的载体上的技术（例如，参见专利文献9)。
[0010] 作为用于担载配体而使用的载体，以往使用全孔性的硅胶。关于这一点，除了全孔 性的粒子之外，还已知：具有无孔性的核、其外面具有多孔性的壳的核壳型的粒子（例如， 参见专利文献10)。这样的核壳型粒子中，还已知：使纤维素三（4-氯-3-甲基苯基氨基甲 酸酯）通过物理性吸附担载于细孔径为l〇nm的核壳型粒子上而形成的光学异构体用分离 剂（例如，非专利文献1)。
[0011] 现有技术文献 专利文献 专利文献1:国际公开第2008/102920号； 专利文献2:国际公开第02/088204号； 专利文献3:日本特开平10-128089号公报； 专利文献4:日本特开平11-335306号公报； 专利文献5 :日本特开2009-91535号公报； 专利文献6 :日本特开2003-327675号公报； 专利文献7 :日本特开2012-18135号公报； 专利文献8 :日本特开2010-77022号公报； 专利文献9 :日本特开2003-284552号公报； 专利文献10:日本特开昭49-36396号公报； 专利文献11:日本特开平07-138301号公报； 专利文献12:国际公开第2012/050124号； 非专利文献 非专利文献 1 :J.Chromatogr.A1234，50-55 (2012); 非专利文献 2 :J.Chromatogr. 363，I73 (I986) 〇
【发明内容】
[0012] 发明所要解决的课题 本发明提供：使用核_壳型的粒子作为载体，通过化学键合使各种配体担载于该载体 上而获得的新型分离剂。
[0013] 用于解决课题的手段 本发明人发现：作为用于分离剂的载体，不使用以往所用的硅胶之类的全孔性的粒子、 而是使用由无孔性的核和多孔性的壳构成的核壳型的粒子，并在其上使各种配体担载而获 得的分离剂对于各种目标物质的分离是有用的。
[0014] 即，本发明提供一种分离剂，其特征在于：在具有载体和通过化学键合担载于载体 表面的配体的分离剂中，上述载体是由无孔性的核和多孔性的壳构成的核-壳型粒子，该 壳的细孔直径为9nm以上，该壳由聚烷氧基硅氧烷的水解物构成，上述配体为光学活性聚 合物、光学惰性的聚酯、蛋白质或核酸。
【具体实施方式】
[0015] <核壳型粒子> 本发明的分离剂中使用具有无孔性的核和位于其外面的多孔性的壳的核壳型粒子。而 且，该核壳型粒子的表面的细孔直径为9nm以上。
[0016] 通过使核壳型粒子的细孔直径为9nm以上，比表面积大，可以大量导入配体，因此 可以期待寄予目标物质的良好分离。通常，细孔直径为l〇〇nm以下。
[0017] 核壳粒子的细孔直径可以通过水银压入法进行测定。
[0018] 水银压入法是，施加压力使水银浸入开孔部，使用压力值和对应的浸入水银体积， 由Washburn式算出假定为圆柱状的细孔的直径的方法，可以适用对于陶瓷成形体而规定 的JISR1655。
[0019] 在此，本发明中所述的无孔性是指，将通过BET法测定的核粒子的表面的比表面 积（m2/g)设为A，将能够根据由核粒子的粒径求出的表面积（由粒子半径r算出、4JIr2)算 出的每单位重量的表面积（m2/g)设为B时，（A-B)/BX100为不足20。
[0020] 而本发明中所述的的多孔性是指，通过BET法测定的其表面的比表面积为10mm2/ g以上。
[0021] 核壳型粒子的核和壳的厚度之比通常为1 :9~9 :1。从确保目标物质的良好分离 特性的角度考虑，该比优选为4 :1~2 :1。关于该比，如后所述，可以通过调整核壳粒子的 壳层的厚度来调制。
[0022] 在此，核的厚度是指核的直径。
[0023] 构成核壳型粒子的核的材料为无机物质，作为其具体例子，可以在选自玻璃、钛和 锆之类的金属或其金属氧化物、以及膨润土或云母等粘土矿物所代表的物质中优选举出无 孔性的粒子。
[0024] 形成上述核的材料的粒子，其粒径优选为0. 1 以上、更优选为0. 5 以上、特 别优选为1 以上。另一方面，形成上述核的材料的粒子，优选使用其粒径为200 以下 的粒子、更优选使用其粒径为100 以下的粒子，特别优选使用其粒径为50 以下的粒 子。
[0025] 核壳型粒子的粒径通常使用0. 2 以上且1000 以下。需要说明的是，本发 明中所说的核壳型粒子的粒径是指，通过基于离心沉淀法的平均粒径的测定方法测定的粒 径。
[0026] 作为构成核壳型粒子的壳的材料，是将通过部分水解烷氧基硅烷而获得的聚烷氧 基硅氧烷进一步水解而得到的材料。从可以容易制备核壳型粒子的角度考虑，优选为这样 的材料。
[0027] 作为上述烷氧基硅烷，优选为四烷氧基硅烷，其中，优选使用四甲氧基硅烷、四乙 氧基硅烷、四丙氧基硅烷、四丁氧基硅烷，更优选使用四乙氧基硅烷。
[0028] 在制作上述核壳型粒子时可以参见日本特开昭49-36396号公报。具体而言，首 先，对烷氧基硅烷进彳丁部分水解生成聚烷氧基硅氧烷。然后，使如此得到的聚烷氧基硅氧烷 溶解于醚、丙酮、二氯甲烷之类的溶剂中，调制聚烷氧基硅氧烷的溶液。使该溶液涂布于上 述形成核的粒子上、或使上述核粒子浸入该溶液中，之后通过去除溶剂，由此使聚烷氧基硅 氧烷以壳的形式层合于核粒子的表面。而且，之后对于已层合的聚烷氧基硅氧烷，在水的存 在下进行缩聚（水解）。由此，可以获得核壳型粒子。
[0029] 构成核壳型粒子的壳的厚度可以在0. 1~100 范围内适当调整，作为该方法， 可以举出：调整形成壳的烷氧基硅烷的粘度，例如，在增厚壳的厚度时，可以举出：将烷氧 基硅烷的粘度降低。
[0030] 另外，作为壳的比表面积和细孔直径的调整方法，可以举出：将壳进行层合，调整 进行缩聚时使用的水溶液的pH，例如，增大比表面积和细孔直径时，使pH增加。
[0031] 在此，壳的厚度是指，从核壳型粒子的直径中减去核的直径，将该值用2除而得到 的值。
[0032] 上述核壳型粒子可以使用作为市售品被销售的"核壳型硅胶"。在这样的市售品 中，作为目录值具有上述范围的细孔直径或比表面积、粒径。另外，在这样的市售的核壳型 硅胶中，可以使用核由玻璃构成、壳由硅胶（聚烷氧基硅氧烷的水解物）构成的物质。
[0033] 用作本发明的分离剂的载体的核壳型粒子，可以进行表面处理。作为表面处理的 方法，可以举出：使用3_氨基丙基三乙氧基硅烷等的具有氨基的硅烷偶联剂的方法。
[0034] 通过这样的表面处理而导入的氨基，可以作为后述的与配体进行化学键合时的反 应基团进行利用。
[0035] < 配体 > 本发明中所述的"配体"是指，担载于成为载体的核壳型粒子上的物质，对于作为分离 对象的目标物质是指，显示物理性的亲和性或可以不对称识别的物质。
[0036] 1.光学活性聚合物 作为可在本发明的分离剂中使用的配体，可