样品浓缩装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种利用捕获柱的样品浓缩装置，可以用作例如对由分离LC(液相色谱仪)分离分馏的馏分进行浓缩处理的装置、或在LCMS (液相色谱仪质量分析装置)中对由LC分离并作为样品提供给MS的馏分进行浓缩处理的装置等。
【背景技术】
[0002]作为以单一成分将被合成的化合物提取出的方法，一般常用的有即便是在液相色谱仪中也采用分离液相色谱仪，进行分离分馏后再浓缩的方法。
[0003]虽然真空蒸发器也被用于浓缩，但从如果与除去柱一并使用即能够去除添加剂等来看，常用的还是利用捕获柱来进行浓缩(参见专利文献I。)。
[0004]将样品捕获至捕获柱的时候，一般地，由于如果样品浓度高、或者样品溶剂的溶剂强度较强的话，就难以捕获，因此为了更容易地进行捕获，将稀释了的样品向捕获柱送液。
[0005]稀释虽然也可以在调配样品时进行，但在稀释后的样品容量过大的情况下，处理将会变得困难，因而在线上进行稀释。在线上进行的稀释，作为实施例可以使用与如图1及图4所示的样品浓缩装置中的流路结构相同的流路。
[0006]图1是高压阀2被切换到将样品回路4插入包含样品推出部5及捕获柱8的主流路上的注入位置；图4是高压阀2被切换到将样品回路4插入包含注射泵3及取样针30的计量流路上的计量位置。
[0007]在这种样品浓缩装置中，高压阀2从空转状态(高压阀2是与注入位置相同的图1的状态)被切换为图4的样品计量状态，在自动取样器I中，通过注射泵3来吸引样品并导入至样品回路4中。其后，高压阀2被切换成图1的注入状态，利用自样品推出部5送液的流动相从样品回路4中推出样品回路4中的样品。并且，样品在主流路的三通接头7中通过与自补给部6送液的稀释液(通常为与流动相同样的构成)进行混合而被稀释，并被导入捕获至捕获柱8。
[0008]此时的稀释率通常为样品容量的数倍。补给部6最低要求在样品完全通过三通接头7为止的期间，补偿样品推出部5的流量的(稀释率-1)倍的流量。要求在样品完全通过三通接头7之后，样品推出部5进行送液直到样品完全固定在捕获柱8上为止。
[0009]因为不会在样品浓缩装置中进行分离或分析，所以通常空转时没有必要从样品推出部5对流动相进行送液，补给部6也没有必要送液。尤其，在将大量的样品用大量的流动相和大量的稀释液来进行浓缩的情况下，希望在刚要进行浓缩之前开始送液，且浓缩完毕后迅速停止。但是，实际上，如上述那样对送液动作进行控制并非易事。那是由于有下述的缘故。
[0010]这种样品浓缩装置所用的样品的一个例子是将被合成了的化合物利用分离系统分离的单一成分样品。作为一个例子，图3中示出利用分离系统产生的2成分峰值的分馏例子。在该例中，成分B (保持时间5.8分钟)的峰值与拖尾的成分A (保持时间5.7分钟)重叠。作为条件，如果假设流量为10mL/分钟、I个分馏用小瓶的最大分馏容量为1mL的话，则0.1分钟小瓶的容量将达到上限。于是可知，在该例中，分馏9由于达到了小瓶#1的最大分馏容量1mL而切换至分馏10，其后，在达到小瓶#2的最大分馏容量1mL之前，检测成分B的峰值的上升并切换至分馏11，在检测到成分B的峰值下降时切换至分馏12。
[0011]在图3的例子中，将作为单一成分的分馏9、10、12作为样品注入利用捕获柱的浓缩系统中进行浓缩。
[0012]在一般的液相色谱仪分析系统中，样品的注入及分析处理是用被称为批处理表(有时也称为顺序表、或样品组)的表来程序化的。批处理表的I行与I个分析相对应，各行包含有样品小瓶的位置、样品容量、及其他的分析条件。
[0013]其他的分析条件包含有分析初始参数集、对自动取样器I的动作进行定制的注入预处理程序(通常被称为预处理程序。在非定制的情况下，标准预处理动作被程序化于内部)、时间程序(有时也称为事件或事件程序。)等，通常，其他的分析条件存放在被称为装置方法的参数集中。(预处理程序独立于装置方法，有时也由批处理表来指定)
[0014]批处理表中的I行的处理是按样品小瓶的位置、样品容量、及向其他分析条件的装置的下载(下载)、预处理程序的执行(预处理执行)、时间程序的执行及色谱的记录开始(分析执行)的顺序来进行的。
[0015]作为图3中的例子的程序方法，有以下的(a)?(d)4种。
[0016](a)将分馏9、10、12移至I个小瓶并作为I个样品，以I行.I注入进行程序化。
[0017]这里，“注入”是指在预处理程序中将I个样品导入样品回路4之后，将高压阀2切换至注入位置，并将样品回路4与主流路连接。多数情况下，在切换高压阀2的同时，还输出用于进行时间程序或色谱的记录开始的事件信号(电信号、通信指令、软件命令)，但有时也在切换高压阀2的前后输出事件信号。
[0018]在这种情况下，在装置方法中，由预处理程序进行I个样品的“注入”处理，由时间程序对样品推出部5及补给部6进行控制，并直到样品固定至捕获柱8为止。这里，在将样品导入至样品回路4后，在切换高压阀2之前，由时间程序输出用于利用样品推出部5及补给部6开始流动相及稀释液的送液的事件信号，并等待送液稳定下来后进行高压阀2的切换。
[0019](b)将分馏9、10、12以3行.2加载、I注入进行程序化。
[0020]这里，“加载”是指在预处理程序中将样品导入样品回路4之后，不切换高压阀2。在此例的情况下，因为I行I加载，所以“加载”后，由预处理程序输出事件信号，并开始运行时间程序，但由于样品推出部5及补给部6不需要动作，因而时间程序立即结束。另外，由于时间程序立即结束，因而即便是不切换高压阀2就无法输出事件信号的自动取样器1，利用“注入”处理也可以进行与“加载”相当的处理，但这里的详细说明予以省略。
[0021]实际上，准备并组合到第N-1行为止的样品推出用装置方法和第N行的注入用装置方法。在此例的情况下，在分馏9、10的样品推出用装置方法中，由预处理程序进行I个样品的“加载”，在分馏12的注入用装置方法中，由预处理程序进行I个样品的“注入”，直到将样品固定至捕获柱8为止。注入用装置方法的处理内容与(a)的装置方法的处理内容相同。此时，分馏9、10的样品与分馏12的样品一起被送至捕获柱8。
[0022](c)将容量固定的分馏9和容量不定的分馏10以I行.2加载进行程序化，将容量不定的分馏12以I行.I注入进行程序化。
[0023]实际上，准备并组合I行.Ν加载(N = I?，N-1分馏固定容量，I分馏不定容量)的样品推出用装置方法及I行.I注入的注入用装置方法。在此例的情况下，在分馏9、10的样品推出用装置方法中，由预处理程序进行固定容量I个样品、不定容量I个样品(容量在批处理表中指定)的“加载”，在分馏12的注入用装置方法中，由预处理程序进行不定容量I个样品(容量在批处理表中指定)的“注入”，直到将样品固定至捕获柱8为止。注入用装置方法的处理内容与(a)的装置方法的处理内容相同。
[0024](d)将分馏9、10、12以I行.2加载、I注入进行程序化，通过包含在该装置方法中的自动取样器的预处理程序，对分馏9、10、12的容量作个别地定制并进行“加载”及“注入”。
[0025]在此方法中，装置方法由预处理程序对分馏9、10各自的样品进行“加载”，对分馏12的样品进行“注入”，直到固定至捕获柱8为止。导入样品回路4后的处理内容与(a)的装置方法的处理内容相同。
[0026](a)?(d)中的任一种情形都需要补给部6将实际的样品注入量的数倍量的稀释液进行送液。
[0027]这里，被导入样品回路4、并被注入主流路中的“实际的样品注入量”，在不需要进行特殊的预处理情况下，是总样品容量，在进行添加剂的混合等预处理的情况下，是将添加剂的容量加上总样品容量的容量，事先确定较难。为此，通常替代“实际的样品注入量”，根据样品回路4的容量和向主流路的注入次数或、最大分馏容量和最大分馏小瓶数来定义“最大样品注入量”。
[0028]液相色谱仪分析的主要目的是分离分析，样品的保持时间不依赖于样品容量，依赖于样品容量的仅仅是决定样品的洗脱范围的拖尾因子。为此，液相色谱仪分析中的分析时间在使用特定样品的情况下，不依赖于样品容量，可以视为一定。
[0029]另外，分离分析中的拖尾因子是被定义成胃(|.(15/2€的指标，意味着拖尾因子越大则拖尾就越大。这里，WaΜ是峰值高度的5%的高度上的峰值宽度、f是W α(ι52中从峰值的上升侧到峰值顶点的位置为止的距离。
[0030]液相色谱仪分析装置的装置控制