一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于本发明属于药物质量测定方法技术领域，具体为一种相对校正因子计 算姜黄产品=种有效成分含量的方法。
【背景技术】
[0002] 中药具有多成分、多祀点、多层次、整体作用的特点，但目前对于其质量控制多W 药材中单一指标成分的含量为评价指标，难W准确、全面地反映其质量，更不能全面地反应 其功能与效果。姜黄为姜科植物姜黄化rcumalongaL.的干燥根茎，是一种药食两用的传 统药材，具有破血行气，通经止痛，临床上用于胸胁刺痛，胸搏屯、痛，痛经经闭，瘤瘤，风湿肩 臂疼痛，跌扑肿痛等。目前，对于姜黄药材及其产品成分含量的测定均W姜黄素作为单一指 标，难W全面地反映其整体质量及药效。
【发明内容】
[0003] 姜黄药材及产品中，主要成分除了姜黄素，还包括去甲氧基姜黄素和双去甲氧基 姜黄素，其在姜黄药材及姜黄产品中占据一定的份量，为了能更全面测定姜黄药材及产品 成分含量，对药材及产品功效进行更全面的把控，本发明提供一种利用相对校正因子计算 姜黄产品中姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素含量的方法，根据样品中姜黄素 含量既能计算出样品中去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素含量。本发明可用于对姜黄药 材、饮片、提取物及配方颗粒中有效成分含量的测定。
[0004] 本发明通过W下技术方案来实现：
[0005] -种相对校正因子计算姜黄产品=种有效成分含量的方法，所述相对校正因子的 计算公式为：
[000引fk/s= (Ck*As)/杞*Ak)
[0007]。：参照物质浓度；Ag:参照物质峰面积；Ck:对照组物质浓度；Ak:对照组物质峰
[0008]面积。
[0009] 一种相对校正因子计算姜黄产品=种有效成分含量的方法，主要包括W下步骤：
[0010] A.照品储备液制备：精确称取姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素，并将 其混合，加入试剂溶液制备成混合对照品储备液；
[0011] B.对照品溶液制备：精密量取上述储备液，并用试剂溶液稀释成不同浓度，稀释 后的溶液即为对照品混合溶液；
[0012] C.供试品溶液制备：取待测样品，用试剂溶液溶解过滤，所得滤液即为供试品溶 液；
[0013]化高效液相色谱测定：分别吸取上述对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色 谱仪，进行数据测定；
[0014]E.相对校正因子值确定：根据对照品溶液测得的姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去 甲氧基姜黄素峰面积，代入相对校正因子计算公式得到去甲氧基姜黄素对姜黄素的相对校 正因子值f去甲氧基姜黄素/姜黄素，双去甲氧基姜黄素对姜黄素的相对校正因子值f双 去甲氧基姜黄素/姜黄素；
[0015] F.姜黄素含量计算：根据对照品溶液的姜黄素峰面积得出其成分含量与峰面积 关系的线性回归方程，并将供试品溶液测得的姜黄素峰面积代入线性回归方程即得样品中 姜黄素成分的含量；
[0016]G.去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素含量计算：根据供试品中=种成分的峰面 积，及相对校正因子f去甲氧基姜黄素/姜黄素、f双去甲氧基姜黄素/姜黄素，样品中姜 黄素含量来计算样品中去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素含量。
[0017]作为本发明的一种优选，去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素的含量计算公式 为：
[0018]C去甲氧基姜黄素=(C姜黄素*A去甲氧基姜黄素*f去甲氧基姜黄素/姜黄素）/ A姜黄素
[0019]C双去甲氧基姜黄素=(C姜黄素*A双去甲氧基姜黄素*f双去甲氧基姜黄素/姜 黄素）/A姜黄素。
[0020] 作为本发明的一种优选，所述试剂溶液为甲醇、乙醇中的一种或两种。
[0021] 作为本发明的一种优选，所述供试品溶液的制备可W通过W下方式来实现：取待 测样品，加入甲醇溶解，称定质量，超声处理，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇 匀、过滤、取滤液、再用微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
[0022] 作为本发明的一种优选，所述超声处理的条件为：功率250W、频率40曲Z、时间 30min。
[0023] 作为本发明的一种优选，所述微孔滤膜的孔径大小为0. 45ym。
[0024] 作为本发明的一种优选，所述高效液相色谱测定为：色谱条件：色谱柱为 化romstar?规格为4. 6mmX250mm，5ym)，流动相为乙腊和4%冰醋酸的混合液，检测 波长为422皿，流速为1.OmL/min，柱溫为30°C，分别吸取上述对照品溶液及供试品溶液各 10y以注入高效液相色谱仪，进行数据测定。
[00巧]作为本发明的一种优选，所述乙腊和4%冰醋酸溶液的质量比为48 :52,所述高效 液相色谱柱的理论塔板数均大于4000。
[0026] 作为本发明的一种优选，一种相对校正因子计算姜黄产品=种有效成分含量的方 法，主要包括W下步骤：
[0027]A.储备液制备：精确称取姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素，并将其混 合，加入甲醇溶液制备成浓度分别为98. 88、44. 40、25. 92yg/mL的混合对照品储备液；
[002引B.照品溶液制备：精密量取上述储备液0. 3血、0. 6血、1. 2血、2. 5血，分别用甲醇 溶液稀释至5mU得不同浓度的对照品混合溶液；
[002引C.供试品溶液制备：取待测样品0. 2g，加入甲醇25mL溶解，称定质量，超声处理 (功率250W、频率40曲Z、时间30min)，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀、过 滤、取滤液、再用孔径大小为0. 45ym的微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；
[0030]化高效液相色谱测定：色谱条件：色谱柱为化romstar?(规格为 4. 6mmX250mm，5ym)，流动相为乙腊和4%冰醋酸的混合液（质量比为48 :52)，检测波长为 422皿，流速为1. 0血/min,柱溫为30°C，分别吸取上述对照品溶液及供试品溶液各10yL 注入高效液相色谱仪，进行数据测定；
[0031] E.相对校正因子值确定：根据对照品储备液及对照品溶液测得姜黄素、去甲氧基 姜黄素、双去甲氧基姜黄素峰面积，代入相对校正因子计算公式：fk/s= (Ck*Ag)/(C；*Ak)计 算出平均相对校正因子值f去甲氧基姜黄素/姜黄素及f双去甲氧基姜黄素/姜黄素；
[0032] F.姜黄素含量计算：根据对照品储备液及对照品溶液测得姜黄素色谱峰峰面积 得出姜黄素成分含量与峰面积关系的线性回归方程，并将供试品溶液测得的姜黄素峰面积 代入线性回归方程即得样品中姜黄素成分的含量，姜黄素的线性回归方程为：
[0033] Yi= 9159. 46X1-19. 16
[0034]Yi表示姜黄素色谱峰峰面积，X1表示姜黄素含量；
[0035] G.去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素含量计算：根据样品中=种成分的峰面 积，平均相对校正因子f去甲氧基姜黄素/姜黄素、f双去甲氧基姜黄素/姜黄素，样品中 姜黄素含量来计算样品中去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素含量。
[0036] 本发明中去甲氧基姜黄素对姜黄素的相对校正因子值f去甲氧基姜黄素/姜黄素 为不同去甲氧基姜黄素浓度下得到的相对校正因子的平均值，双去甲氧基姜黄素对姜黄素 的相对校正因子值f双去甲氧基姜黄素/姜黄素为不同双去甲氧基姜黄素浓度下得到的相 对校正因子的平均值，运样是为了能更精准的得到相对校正因子f的值，减少实验误差，而 实验次数及成分的浓度值可W根据具体实验需要进行设置。
[0037] 在本发明对照品溶液制备过程中，采用先制备出对照品储备液，再将储备液稀释 到所需浓度制备成对照品混合溶液，相比于一次性直接制备成所需浓度的对照品溶液，可 W减少使用天平称量的次数，降低样品的浪费，达到节约成本及提供工作效率的