小肝细胞癌和潜伏于肝硬化的肝细胞癌诊断用组合物的制作方法
【技术领域】
[0001 ]本发明设及小肝细胞癌和潜伏于肝硬化的肝细胞癌诊断用组合物。
【背景技术】
[0002] 肝癌，尤其肝细胞癌化CC)是最常见的恶性肿瘤，在中国和韩国，分别为第二大和 第Ξ大常见癌死亡原因，在世界上，是第六大常见癌，癌患者中是第Ξ大死亡原因，HCC是重 要的疾病化^Serag 皿，Mason AC.N Engl J Med. 1999;340(10) :745-750;Kaczynski J, Oden A.N Engl J Med.1999；341(6):451-452；Wands JR.N Engl J Med.2004；351(15): 1567-1570;El-Serag H,Rudolph K.Gastroenterology.2007;132:2557-25766-9)。
[0003] 用于HCC诊断的临床上有用的标志物包括AFP、Lens culinaris agglutinin-reactive AFP(甲胎蛋白异质体，AFP-L3%)和作为DCP而熟知的由维生素 Κ缺乏或括抗剂-山秀导的蛋白质（protein induced by vitamine Κ absence or antagonist Π ,ΡΙΥΚΑ-II)。运些当中，已知血清AFP作为检测患有HCC的患者的肿瘤标志物最为广泛使用，并且具 有预先了解预后的能力（Stefaniuk P,Cianciara J,Wie;rcinska-Drapalo A.World J Gastroenterol.2010;16(4):418-424)。
[0004] 然而，AFP水平具有针对HCC的药物敏感度和特异性（Stefani址P，Cianciara J， Wiercinska-Drapalo A.World J Gastroenterol.2010;16(4):418-424;Bruix J,Sherman M,Llovet JM,Beaugrand M,Lencioni R,Burroughs AK,等.J Hepatol.2001;35:421-430)。并不是所有肥C均分泌AFP。此外，AFP会在具有无 HCC的慢性肝病的患者中上升。针对 肥C的DCP测定具有48-62%的敏感度和81-98%的特异性，但其敏感度在初期肥別寸仅为15-30% (Xiebman HAJurie BC,Tong MJ,Blanchard RA,Lo KJ,Lee SD,等.N Engl J Med.1984;310(22):1427-1431;Weitz IC，Liebman HA.Hepatology.1993;18:990-997; Bruix J,化 erman M.Hepatology.2005;42:1208-1236;Ma;rre;ro JA,Feng Z,Wang Y, Nguyen MH'Befeler AS,Roberts LR,等.Gastroenterology.2009;137(1):110-118)。
[0005] 任何原因的LC均可能导致HCC从而被视作癌前病变(Premali即ant condition)。 事实上，大部分患有HCC的患者会具有潜在的（underlying)肝硬化化im YS等.J Korean Med Sci.2003:18:833-841;Fattovich G,等Gastroenterology.2004;127:S35-850;Jang JW.Korean J 胎patol.2009;S40-49)。
[0006] 针对该高危组的主要课题是，为了能够根治性的治疗而进行HCC的早期诊断。作为 监测物，对于像AFP和DCP-样的现有血清标志物的价值，众说纷运，为了定义它们的有效 性，需要更多的实验（Marrero JA,等Gastroenterology. 2009; 137(1): 110-118)。
[0007] 因此，需要用于初期诊断，并且用于满足遭受肥C发生风险的高危患者的新的生物 标志物。
[000引作为相关专利，韩国专利公开号第1020090098490号公开了一种肝癌诊断用组合 物，其特征在于，包含特异性检测肝癌早期诊断用蛋白质性标志物的存在与否和其量、样式 或全部两者的物质，所述肝癌早期诊断用蛋白质性标志物的特征是选自由下述多肤组成的 组中的一种或两种W上组合：E化N2_HUMAN化R脂俊相关2同源异构体HER lipid raft associated 2 isoform 1);NCBI GI :6005721 );NDUS3_HUMAN(NADH脱氨酶（泛酿）Fe-S蛋白 3(NADH dehy化ogenase(ubiquinone)Fe-S protein 3),30kDa(NADH-辅酶Q还原酶（NADH-coen巧me Q reductase) );NCBI GI :4758788) ;PSB9_HUMAN(蛋白酶体阴亚单位同源异构体 2原蛋白（proteasome beta 9 subunit isoform 2 proprotein) ;NCBI GI :23110932); WT_HUMAN(SET易位蛋白（SET translocation)(髓细胞性白血病相关(myeloid leukemia-associated)) ;NCBI GI: 145843637 );SSRDJ1UMAN(信号序列受体 δ (si 即 al sequence receptor，del ta);NCBI 01:5454090) ;TGM2_HUMAN (谷氨酷胺转氨酶2亚型a (transglutaminase 2 isoform a) ;NCBI 01:39777597) ;UGPA_HUMAN(UTP-葡萄糖-1-憐酸 尿巧酷转移酶化TP-glucose-1-phosphate uridylyltransferase) ;NCBI GI: 2136353)。
【发明内容】
[0009] 技术课题
[0010] 本发明是为了解决上述问题并根据上述必要性而提出的，本发明的目的在于，提 供一种用于满足初期诊断和满足遭受HCC发生风险的高危患者的新型诊断用组合物。
[0011] 解决课题的方法
[0012] 为了实现上述目的，本发明提供包含对LGIG化TA犯VKSACYLR(序列号1)的肤具有 特异性的抗体的小肝细胞癌化CC)诊断用组合物。
[0013] 在本发明的一个实施方式中，上述组合物优选进一步包含AFP(甲胎蛋白（alpha fetoprotein))或其抗体、DCP(脱-丫-簇基凝血酶原（des- 丫 -carbo巧prot虹ombin))蛋白 质或其抗体、或者它们的组合，但不限于此。
[0014] 此外，本发明提供包含对LGIG化TA犯VKSACYLR(序列号1)的肤具有特异性的抗体 的、潜伏于肝硬化的肝细胞癌化CC)的初期检测用组合物。
[0015] 在本发明的一个实施方式中，上述组合物优选进一步包含AFP或其抗体、DCP蛋白 质或其抗体、或者它们的组合，但不限于此。
[0016] W下，对本发明进行说明。
[0017]在本发明中，本发明人等1)评价了HCC中肥CR-1的临床用途，并且比较了AFP和DCP 监测物与肥CR-1的表达;2)证明了小HCC的诊断中肥CR-1的有用性;3)最后调查了 HCCR-1对 潜伏于肝硬化的HCC的初期检测是否有用。
[0018] W下，对本发明进行详细说明。
[0019] 正常、CH、LC和HCC中血清AFP、DCP和肥CR-1的确定
[0020] 从图1可知，HCC患者的血清AFP、DCP和HCCR-1的中间（范围）水平与LC患者的血清 的AFP、DCP和HCCR-1的中间（范围）水平相比明显增加(P<. 0001)。尤其，对于HCCR-1的血清 水平而言，LC组比CH组明显增加(P<.0001)(图1，〇。而对于AFP(图1，A)和DCP(图1，B)的血 清水平而言，CH组与LC组相比没有明显差异。CH组和LC组的AFP的中间（范围）水平分别为 3.7(0.5-1，082)和3.8(0.75-969)11邑/1^。= 0.3121)(图1，4)。邸组和1(：组的0〔口的中间（范 围）水平分别为 16.5(2-206)和 17(1.12-4，320)mAU/mL(P = 0.9938)(图1，B)。该结果显示 出，在HCC患者中，血清HCCR-1水平与CH和LC等非恶性慢性肝病相比明显更高（图1，C)。此 夕h对于血清HCCR-1水平而言，与CH相比，LC明显更增加（图1，C)。因此显示出，随着肝病的 发展，血清肥CR-1水平逐渐增加。
[0021] 使用目前推荐的临界的AFP、DCP和HCCR-1的临床结果
[0022] 本发明人等使用目前推荐的临界比较了AFP(11、20和200ng/mL)、DCP(40mAU/mL) 和肥CR-1 (lOng/mL)的临床结果。
[0023] *本发明人等使用了针对基于现有论文的AFP的其他Ξ个临界(临界)值(Gup化S， Bent S,Kohlwes J.Ann Intern Med .2003；139:46-50；Trevisani F,D'Intino PE, Morselli-Labate AM,Mazzella G,Accogli E,Caraceni P等.J Hepatol.2001;34(4): 570-575)。当使用目前临界值时，在llng/mL临界，对