一种促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药及其制备方法，应用在认知 障碍疾病的治疗上。
【背景技术】
[0002] 认知功能障碍，是长期慢性脑组织缺血缺氧或者脑组织急性大面积缺血梗塞、关 键部位缺血梗塞后导致的神经系统学习、记忆、分析判断等认知能力减退、甚至丧失的一系 列临床表现的总称。任何情况的脑缺血缺氧影响到与认知功能密切相关的大脑区域，如大 脑皮层、海马、纹状体，都会发生认知功能障碍。由于脑组织富含对自由基敏感的多不饱和 脂肪酸，极易被氧化；而且神经细胞的氧自由基清除酶含量较低，故自由基清除能力相对较 弱。因此，神经细胞易受氧化应激损伤。自由基失衡引起组织脂质过氧化损伤是认知障碍 性疾病发病的重要因素之一。脑缺血等病理情况下氧自由基生产增多，自由基清除酶活性 降低，加重了缺血造成的神经组织损伤。
[0003] 在治疗脑血管病、神经退行性疾病中，最关键的问题在于疾病对神经的伤害是不 可逆的，神经系统难以完成自身修复，目前在临床上迄今尚缺乏有效地根治手段。
[0004] 而组织和细胞再生工程的发展为中枢神经系统创伤和疾病的治疗带来新的希望。 目前研究较多的神经再生技术包括：将胚胎干细胞或成体干细胞定向诱导分化为神经细 胞、将体细胞重编程为诱导性多潜能干细胞并进一步分化为神经细胞以及将成体细胞通过 谱系转换获得神经细胞等。但是这种组织再生技术面临着诸多不足。例如：一是神经细胞 的来源存在不安全性。这些由谱系转换诱导产生的神经细胞可能具有起始细胞的分子痕 迹，无法排除肿瘤或畸变的风险。二是无法保证体内诱导过程准确靶向。三是载体本身的 安全性值得考量。且这种组织再生技术还面临着诸多问题。例如，急性排斥反应、伦理学问 题、移植细胞功能建立等等。因此，诱导脑缺血损伤后内源性神经干细胞增殖分化以替代坏 死的神经元是其研究重点。
[0005] 另外，尽管世界各国在寻找改善认知障碍有效治疗药物的研究中投入了大量的人 力和物力，但成果却十分有限，目前治疗药物一般都使用乙酰胆碱前体物、卵磷脂、三氟拉 嗪和T588.乙酰胆碱前体物。其不仅疗效差，副作用也明显。临床通常还使用血管扩张类 药物，如长春胺等，然而只适合部分轻微患者，且副作用较大。
[0006] 而中医药在认知障碍的防治方面有着丰富的理论和实践经验，具有潜在的优势和 广阔的开发前景。因此提供一种能够治疗认知障碍的中药己成为当务之亟。
【发明内容】
[0007] 本发明提供一种促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药，其避免了现有治疗认知功 能障碍疾病中采用的神经再生技术所会面临的安全、伦理方面问题，克服了采用西药治疗 的疗效不佳、副作用明显的缺点，其能够方便有效地促进内源性神经干细胞增殖分化以替 代坏死的神经元，从而达到改善认知障碍的疗效。
[0008] 本发明的技术方案如下：
[0009]-种促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药，其特征在于：其主要由以下中药原料 按重量份数制备而成：鹿角霜15-45份、干金线莲6-15份、丹参6-15份、白术10-30份。
[0010] 中医学认为：认知障碍的发病是以肾虚髓减为内因，血瘀、毒邪等病理产物为害。 肾精亏虚，脏腑失养，瘀血内生，久滞不化，则化热化毒，进而损伤脑髓，元神受损，神机不 用。脑者，髓之海，诸髓皆属于脑，故上至脑，下至尾骶，皆精髓升降之道路也。而中医学的 "脑髓"当包括神经元、胶质细胞、神经干细胞、基质细胞、胞外基质等结构。故肝肾精血盛衰 是内源性神经干细胞增殖分化的物质基础。现代研究认为，脑缺血级联反应产生的一系列 神经生化毒素，如自由基、兴奋性氨基酸、粘附因子等，类似于中医的"毒"，成为损伤脑细胞 的主要毒性物质，这样炎症物质及毒性病理产物的释放，加重神经元的损害，加重脑缺血， 是患者发生认知障碍的重要因素。依据该理论依据，申请人认为瘀血化热、化毒损髓是认 知障碍的病理关键，创新提出补肾清解之法，选用鹿角霜、干金线莲、丹参、白术药物，在运 用活血化瘀药物的同时，又重视补肾清解，鹿角霜补肾填精为主药，臣药以干金线莲清热解 毒，丹参活血化瘀为佐药，使以白术健脾益气。
[0011] 本申请所使用的原料介绍：
[0012] 鹿角霜：为鹿科动物梅花鹿CervusnipponTemminck或马鹿C.elaphusL?等的角熬 制鹿角胶后剩余的骨渣。
[0013] 干金线莲：是兰科Orchidaceae开唇兰属Anoectochilus的多年生草本植物，另lj名 金线兰、金丝草、树草莲、金钱仔草、金线虎头蕉、金线入骨消等。
[0014] 丹参：为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根和根莖。
[0015] 白术：为菊科植物白术Atractylodesmacrocephala的根莖。
[0016] 传统中医在改善认知障碍的中成药用药一般是以活血化瘀为治疗原则，而本申请 则是以补肾清解为主要原则，因而有别于市面上的现有的中成药，能取得更佳的疗效。诸 药配合，攻补兼施，标本同治，共奏补益脾肾、益智健脑、清热解毒、活血通脉之功，具有提高 抗氧化酶活性的功能，通过抗氧化作用可以改善慢性脑缺血诱导的认知障碍。本申请的中 药促进神经干细胞增殖有以下特点：1.它促进的是内源性神经干细胞增殖分化，无需体外 移植神经干细胞；2.内源性神经干细胞存活率升高；3.中医药促进内源性神经干细胞增殖 的机理在于直接影响体内的微环境，促进相关细胞因子、基因的表达，比如提高抗氧化酶活 性，提高氧自由基清除酶含量等从而间接作用于体内的成体干细胞促进其增殖分化。本中 药配方配伍合理科学，原材料药源丰富，服用方便，疗效明显，易于推广使用。
[0017]其中鹿角霜18份、干金线莲6份、丹参10份、白术15份，该配方为优选方案，其效 果治疗认知障碍疾病的功效更为显著。
[0018] 所述的促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药的制备方法，其步骤如下，
[0019] ①预处理：按所述重量份数分别称取干金线莲、丹参、鹿角霜、白术，将干金线莲、 丹参和白术放入与其总重量比为1:8-12的预冷的水中浸泡25-35min，将鹿角霜加入与其 重量比为1:8-12的预冷的水中浸泡25-35min后以武火煮沸改文火煎煮25-35min;
[0020] ②煎煮：将步骤①获得的两部分药材及水进行混合，以武火煮沸后改文火继续煎 煮10-20min，将药液倒出；
[0021] ③二次煎煮：向步骤②取出药液后的药材中加入与其总重量比为1:8-12的预冷 水后，再以文火煎煮10_20min;
[0022] ④制备成品：将步骤②和步骤③两次获得的药液混合制备成药剂。
[0023] 所述水为蒸馏水。
[0024] 步骤④中制备成药剂为制成代煎中药袋剂或浓缩成膏状或制成颗粒剂或制成软 胶囊剂。
[0025] 步骤①中干金线莲、丹参和白术浸泡用预冷的水为500ml，浸泡时间为30min;鹿 角霜浸泡用预冷的水为500ml，浸泡时间为30min;文火煎煮时间为30min。
[0026] 步骤②中煎煮时间为15min。
[0027] 步骤③中加入的预冷水为500ml，煎煮时间为15min。
[0028] 与现有技术相比，本发明申请具有以下优点：
[0029] 1)本中药复方依据补肾清解、活血通脉的治法建立，由鹿角霜、干金线莲、丹参、白 术四味中药组成，在运用活血化瘀药物的同时，又重视补肾清解，诸药配合，攻补兼施，标本 同治，共奏补益脾肾、益智健脑、清热解毒、活血通脉之功，具有提高抗氧化酶活性的功能， 通过抗氧化作用可以改善慢性脑缺血诱导的认知障碍；
[0030] 2)针对目前治疗认知障碍疾病所使用的组织再生工程技术的不足，本发明技术可 直接促进神经干细胞自身增殖，减少干细胞体外诱导分化的风险；
[0031] 3)克服了现有治疗认知功能障碍疾病所主要使用的西药疗效不佳，副作用大的缺 占.
[0032] 4)有别于传统中医改善认知障碍的用药原则，以补肾清解为主要，兼顾活血化瘀， 疗效佳。
【附图说明】
[0033] 图1是本发明所述的促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药对C17. 2神经干细胞形 态影响实验中各组细胞在40倍镜下的形态图；
[0034] 图2是MTT法检测药物干预对C17. 2神经干细胞增殖能力的影响实验中经药物干 预后各组细胞24h的存活率图表；
[0035] 图3是Brdu标记测药物干预对C17. 2神经干细胞增殖能力的影响实验中各组细 胞图；
[0036] 图4是本发明所述的促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药对认知障碍大鼠海马 区CAT、GSH-Px蛋白表达的影响实验中各组大鼠海马区CAT、GSH-PX蛋白表达电泳图；
[0037] 图5是本发明所述的促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药对认知障碍大鼠海马 区CAT、GSH-Px基因表达的影响实验中各组大鼠海马区CAT、GSH-PlmRNA表达电泳图。
【具体实施方式】
[0038] 下面结合实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
[0039] 实施例1
[0040] 一种促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药，其主要由以下中药原料按重量份数制 备而成：鹿角霜15份、干金线莲6份、丹参10份、白术10份。
[0041] 该促进神经干细胞增殖的养脑通脉中药的制备方法，其步骤如下：
[0042] ①预处理：按所述重量份数分别称取干金线莲、丹参、鹿角霜、白术，将干金线莲、 丹参和白术放入与其总重量比为1:8的预冷的水浸泡35min，将鹿角霜加入与其重量比为 1:12的预冷的水浸泡25min后以武火煮沸改文