一种聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于高分子材料和生物医学工程领域，具体涉及一种聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡的制备方法。
【背景技术】
[0002]聚乳酸(PLA)是一种具有良好的生物相容性和可生物降解的聚合物，被包括美国FDA在内的多个国家监管机构批准可用于人体。它具有对人体无毒、无刺激、可控制生物降解、生物相容性较好，且原料易得等优点，因此聚乳酸及其共聚物已经成为一种备受关注的可生物降解的生物医用高分子材料。在生物医学方面，聚乳酸早期主要应用于手术缝合线、骨科内固定材料和体内填充材料等，近年来逐渐开始在组织工程支架、药物载体和基因载体等方面引起人们的注意。聚乳酸及其共聚物是一类典型的疏水性脂肪族高分子聚合物。通过分子结构设计可以获得性能精确可控的PLA基两亲性共聚物，其中典型的亲水链段包括聚丙烯酸类、聚乙二醇、聚多肽、壳聚糖、以及聚氨酯等。PLA基的两亲性共聚物可以通过多种方式自组装成高效的药物载体，而负载的药物分子，涵盖了质粒-DNA、羧基荧光素、疏水性的抗肿瘤药物、亲水性的药物或蛋白质、以及用于诊断/治疗的无机纳米粒子。
[0003]聚乳酸的原料乳酸是光学活性物质，有D型和L型两种光学异构体，因此由乳酸聚合得到的聚乳酸也分为D-聚乳酸(PDLA)、L-聚乳酸(PLLA)和D，L-聚乳酸(PDLLA)三种。目前常用的聚乳酸产品主要是PLLA和TOLLA两种。近年来的研究发现，纯PLLA和TOLA等比例共混后可形成具有3AI旋的三斜晶系的立构复合物，这种共晶的熔点比纯聚乳酸高出50°C。这一重要发现使得研究人员获得了一个改善聚乳酸树脂耐热性的有力手段，因而D-乳酸和TOLA又开始引起人们的关注。
[0004]纳米囊泡作为一类新型的纳米药物传递载体，具有独特的优点。相比于胶束，囊泡可以同时包裹疏水性及亲水性药物分子；囊泡特有的双层膜包裹亲水核的结构，与细胞的结构十分类似，使得其在模拟生物细胞方面发挥了较为重要的作用。这些特点使得囊泡在药物传递系统中的应用更为广泛。尽管相比于脂质体，囊泡更为稳定且不易发生药物的泄漏，但常规的纳米囊泡对酸等多种环境依然不稳定，目前的解决方法有对囊泡的双层膜进tx交联等。
[0005]在本发明中，我们利用聚乳酸的左旋和右旋分子链间隔排列形成的互补结构，使得纳米囊泡的双层膜内部可以形成比结晶更紧密堆积的立构复合物结构，使得分子间的范德华力更加强烈，从而有效增强了结构的稳定性。这种聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡由于立构复合物强烈的分子间相互作用，因而具有极佳的稳定性，同时磁性粒子被包裹在致密的聚乳酸双层膜结构中，不容易泄漏出来。这种磁性纳米囊泡可用作临床中磁共振成像的增强造影剂，也可装载药物或生物大分子，用作药物或基因治疗的可控制释放纳米载体。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡的制备方法。
[0007]本发明的目的是将聚乳酸立构复合物制备成为能够包载磁性纳米粒子的纳米囊泡，解决常规聚合物纳米囊泡稳定性不佳和负载纳米粒子容易泄露的缺陷。本发明采用了聚乙二醇为亲水链，立构复合聚乳酸为疏水链，制备了一系列聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡。
[0008]本发明提出的环境响应型星形共聚物的制备方法，具体步骤如下:
(1)取分子量为2000~5000的聚乙二醇单甲醚与L-丙交酯，按摩尔比为1: (7~17)的比例置于反应器中，加入催化剂辛酸亚锡，氩气保护，1050C ~130°C反应12~48小时，用溶剂A溶解产物，在沉淀剂B中沉淀2~3次，过滤，滤饼真空干燥，得到左旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物；
(2)取分子量为2000~5000的聚乙二醇单甲醚与D-丙交酯，按摩尔比为1: (7~17)的比例置于反应器中，加入催化剂辛酸亚锡，氩气保护，1050C ~130°C反应12~48小时，用溶剂A溶解产物，在沉淀剂B中沉淀2~3次，过滤，滤饼真空干燥，得到右旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物；
(3)将步骤⑴和(2)得到产物分别溶解于二氯甲烷中，配成5~15mg/mL的L-聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物溶液和D-聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物溶液，再将上述两溶液混合，剧烈搅拌3~6小时，得到聚乳酸立构复合物溶液；
(4)将磁性纳米粒子加入到步骤(3)得到的聚乳酸立构复合物溶液中，振荡，待磁性粒子分散均匀后，减压蒸馏除去有机溶剂，在器壁形成一层薄膜，然后再向容器中加入去离子水，轻摇后形成聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡。
[0009]本发明中，步骤(I)中所述溶剂A为二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺中任一种。
[0010]本发明中，步骤(I)中所述沉淀剂B为甲醇、乙醚、正己烷或石油醚中任一种。
[0011]本发明中，步骤(4)中所述纳米磁性粒子为直径为5~15纳米的四氧化三铁、锰铁氧体、钴铁氧体、镍铁氧体或锰锌铁氧体中任一种。
[0012]本发明的优点在于:聚乳酸立构复合物纳米囊泡由于立构复合物强烈的分子间相互作用，因而具有极佳的稳定性，同时磁性粒子被包裹在致密的聚乳酸膜结构中，不容易泄漏出来。这种磁性纳米囊泡可用作临床中磁共振成像的增强造影剂，也可装载药物或生物大分子，用作药物或基因治疗的可控制释放纳米载体。
【附图说明】
[0013]图1:为实施例1制备的聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物的结构式与1H NMR谱图； 图2:为实施例1制备的不含磁性粒子的聚乳酸立构复合物纳米囊泡的TEM照片；
图3:为实施例2制备的聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡的TEM照片。
【具体实施方式】
[0014]以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明。应理解，这些实施例是用于说明本发明而不限于限制本发明的范围。实施例中采用的实施条件可以根据具体厂家的条件做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。
[0015]实施例1: 取分子量为2000的聚乙二醇单甲醚0.2 g、L-丙交酯0.1 g与辛酸亚锡0.1 mg放入反应瓶，氩气保护，110°C反应12小时，二氯甲烷溶解，乙醚沉淀2~3次，过滤，滤饼真空干燥，得到左旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物；取分子量为2000的聚乙二醇单甲醚0.2 g、D-丙交酯0.1 g与辛酸亚锡0.2 mg放入反应瓶，氩气保护，105°C反应12小时，二氯甲烷溶解，乙醚沉淀2~3次，过滤，滤饼真空干燥，得到右旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物；将产物分别溶解于二氯甲烷中，配成10 mg/mL的L-聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物溶液和D-聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物溶液。再将上述两溶液混合，剧烈搅拌3小时，得到聚乳酸立构复合物溶液；减压蒸馏除去有机溶剂，在器壁形成一层薄膜，然后再向容器中加入去离子水，轻摇后形成不含磁性粒子的聚乳酸立构复合物纳米囊泡。
[0016]采用凝胶色谱仪测定左旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物的数均分子量为2930g/mol，右旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物的数均分子量为2890g/mol ;采用动态光散射技术测定聚乳酸立构复合物纳米囊泡在水溶液中的平均直径为185纳米，采用透射电子显微镜(TEM)测定聚乳酸立构复合物纳米囊泡的直径为150纳米。
[0017]实施例2:
取分子量为2000的聚乙二醇单甲醚0.2 g、L-丙交酯0.1 g与辛酸亚锡0.1 mg放入反应瓶，氩气保护，110°C反应12小时，二氯甲烷溶解，乙醚沉淀2~3次，过滤，滤饼真空干燥，得到左旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物；取分子量为2000的聚乙二醇单甲醚0.2 g、D-丙交酯0.1 g与辛酸亚锡0.2 mg放入反应瓶，氩气保护，105°C反应12小时，二氯甲烷溶解，乙醚沉淀2~3次，过滤，滤饼真空干燥，得到右旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物；将产物分别溶解于二氯甲烷中，配成10 mg/mL的L-聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物溶液和D-聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物溶液。再将上述两溶液混合，剧烈搅拌3小时，得到聚乳酸立构复合物溶液；将40 mg直径10纳米的锰锌铁氧体加入到上述聚乳酸立构复合物溶液中，振荡，待磁性颗粒分散均匀后，减压蒸馏除去有机溶剂，在器壁形成一层薄膜，然后再向容器中加入去离子水，轻摇后形成聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡。
[0018]采用凝胶色谱仪测定左旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物的数均分子量为2930g/mol，右旋聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物的数均分子量为2890g/mol ;采用动态光散射技术测定聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡在水溶液中的平均直径为200纳米，采用透射电子显微镜(??Μ)测定聚乳酸立构复合物磁性纳米囊泡的直径为170纳米。
[0019]实施例3:
取分子量为5000的聚乙二醇单甲醚0.25 g、L-丙交酯0.12 g与辛酸亚